2型糖尿病周围神经病变与胰岛β细胞功能的相关性研究

目的探讨2型糖尿病周围神经病变与胰岛β细胞功能的相关性。方法选取2020年1月至12月广西医科大学第二附属医院收治的298例2型糖尿病患者为研究对象,根据是否合并周围神经病变将其分为周围神经病变组(n=178)和无周围神经病变组(n=120)。采用二两馒头餐后30min净增C肽与葡萄糖比值(ΔC肽30/ΔG30)和30min净增胰岛素与葡萄糖比值(Δ胰岛素30/ΔG30)评估早期阶段胰岛分泌功能;采用二两馒头餐后120min血糖曲线下面积(area under the curve,AUC)校正后的C肽和胰岛素AUC(C肽_(AUC)/G_(AUC)、胰岛素_(AUC)/G_(AUC))评估总的β细胞分泌功能。多因素Logistic回归分析探讨2型糖尿病并发周围神经病变的危险因素。结果周围神经病变组患者的餐后60min C肽、120min C肽、ΔC肽30/ΔG30、C肽_(AUC)/G_(AUC)均显著低于无周围神经病变组(P<0.05)。ΔC肽30/ΔG30和C肽_(AUC)/G_(AUC)与高密度脂蛋白胆固醇、空腹血糖、餐后2h血糖、糖化血红蛋白均呈负相关,与体质量指数、尿酸均呈正相关(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,空腹血糖升高、C肽_(AUC)/G_(AUC)降低均是糖尿病患者发生周围神经病变的独立危险因素(P<0.05)。结论2型糖尿病患者胰岛β细胞功能下降是糖尿病周围神经病变发病的独立危险因素,应积极保护胰岛β细胞功能以延缓周围神经病变的发生。

基线胰岛β细胞功能与短期胰岛素治疗后2型糖尿病疾病缓解的关系

目的分析基线胰岛β细胞功能与短期胰岛素治疗后2型糖尿病疾病缓解的关系。方法选取2021年1月至2023年12月于浙江省丽水市人民医院建档并行短期胰岛素治疗的2型糖尿病患者150例,收集基线临床指标、胰岛素抵抗稳态模型(homeostasis model assessment of insulin resistance,HOMA-IR)、胰岛β细胞功能指数(homeostasis model assessment-β,HOMA-β)、胰岛素分泌敏感性指数-2(insulin secretion sensitivity index-2,ISSI-2)以及修正的胰岛β细胞功能指数(modifiedβ-cell function index,MBCI),按照停药后观察期内的糖尿病缓解情况分为缓解组(52例)与未缓解组(93例)。比较缓解组与未缓解组临床资料,采用多因素二元Logistic回归模型分析基线β细胞功能与短期胰岛素治疗后2型糖尿病疾病缓解的关系。结果将不符合要求的5例患者剔除后最终纳入研究患者145例。未缓解组年龄中位数50.09岁,缓解组40.83岁,基线空腹血糖水平(6.4±1.4)mmol/L、HbA1c水平(6.9±0.8)%比缓解组的(5.3±1.2)mmol/L、(6.1±0.5)%更高,HOMA-β中位数37.80、ISSI-2中位数149.24以及MBCI中位数22.94较缓解组(50.14、278.21、32.80)低,病程较缓解组长,差异有统计学意义(t/Z=-10.301、-4.974、-6.884、27.037、30.702、13.914、-4.803,P<0.05)。多因素分析结果发现,HOMA-β、ISSI-2以及MBCI均为疾病缓解的保护因素(OR=0.903、0.871、0.857,P<0.05)。结论基线胰岛β细胞功能是短期胰岛素治疗后2型糖尿病疾病缓解的主要病理生理学因素,基线胰岛β细胞功能越好疾病得到缓解的可能性也越大。

热量限制对db/db小鼠胰岛β细胞退分化的影响

目的 研究热量限制(CR)在改善db/db小鼠胰岛β细胞退分化中的作用。方法 选取3周龄的db/db小鼠,随机分为自由进食(db-FD)组和CR(db-CR)组,相同周龄的雄性C57BL/6J小鼠作为正常对照(C-FD)组。C-FD和db-FD组自由进食,db-CR组每日进食量为C-FD组的60%。饮食干预6 w,每周测小鼠体质量、空腹血糖。干预结束后,检测糖耐量、胰岛素耐量、空腹胰岛素水平、胰腺胰岛素含量;免疫组化检测胰岛结构和形态;胰岛RNA-seq分析寻找热量限制后表达改变的胰岛β细胞功能相关基因;免疫荧光染色检测胰岛β细胞特异转录因子和退分化相关蛋白的表达。结果 饮食干预期间db-CR组体质量(2~6 w)和空腹血糖(4~6 w)较db-FD组明显减轻(P<0.05)。干预结束时,与db-FD组相比,db-CR组糖耐量和胰岛素耐量明显改善,胰腺胰岛素含量明显提高(P<0.05),胰岛结构完整,胰岛素淡染区减少。RNA-seq分析和免疫荧光染色显示,db-CR组胰岛β细胞特异转录因子[胰腺十二指肠同源蛋白(Pdx)1,NK6同源框1(Nkx6.1)]表达升高,退分化相关因子乙醛脱氢酶家族1成员(Aldh1)A3表达减少,叉头盒(FOX)O1表达升高。结论 CR可通过减少β细胞退分化改善db/db小鼠胰岛β细胞功能。

METTL3在同型半胱氨酸诱导小鼠胰岛β细胞自噬中的作用

背景:高同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)血症与胰岛β细胞功能密切相关,但其具体分子机制尚不完全明确。目的:探讨METTL3在Hcy诱导小鼠胰岛β细胞自噬中的作用。方法:取第3,4代小鼠胰岛β细胞进行实验。①细胞模型建立和分组:对照组细胞不加入Hcy,Hcy组细胞加入浓度为100µmol/L Hcy干预48h;②按Lipofectamine^(TM) 2000说明书将过表达质粒Ad-METTL3及si-METTL3转染小鼠胰岛β细胞,设计3种不同干扰片段,PCR验证、筛选出干扰效率最好的干扰片段;③转染后实验分组:对照组、Hcy组、Ad-NC(阴性对照)+Hcy组、Ad-METTL3+Hcy组、si-NC(阴性对照)+Hcy组和si-METTL3+Hcy组;④采用qRT-PCR及Western blot检测细胞中METTL3及细胞自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、p62的表达;ELISA法测定胰岛素水平来评价胰岛β细胞胰岛素分泌能力;分别过表达和干扰METTL3后检测细胞自噬相关蛋白及胰岛素水平。结果与结论:①与对照组相比,Hcy组自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ的表达水平升高(P<0.05),而p62表达明显降低(P<0.05),胰岛素分泌能力明显下降(P<0.05);②与对照组相比,Hcy组中METTL3蛋白及mRNA水平表达均降低(P<0.05);③胰岛β细胞中沉默METTL3后,Hcy进一步上调了细胞中LC3Ⅱ/Ⅰ的表达(P<0.05),而p62表达显著下降(P<0.05),细胞中胰岛素水平增加(P<0.05);过表达METTL3后,Hcy则使LC3Ⅱ/Ⅰ表达显著降低且p62表达则增高(P<0.05);④结论:METTL3参与了Hcy诱导的胰岛β细胞自噬调控,对胰岛素的分泌发挥着调控作用。

人诱导多能干细胞来源功能性胰岛β细胞的体外定向分化方法的建立

1型糖尿病是由胰岛β细胞功能受损、胰岛素分泌不足所致,目前,主要通过外源性胰岛素补充来治疗,但外源性胰岛素无法精准调控血糖,严重低血糖可危及生命。胰岛移植是一种替代疗法,但面临器官供体不足和异种来源胰岛β细胞存在人畜共患病交叉感染风险的问题。因此,获得足量且安全的胰岛β细胞是1型糖尿病细胞治疗面临的难题。本研究旨在通过人诱导多能干细胞(human induced pluripotent stem cells,hiPSCs)在体外向胰岛β细胞分化,提供一种潜在的1型糖尿病治疗新策略。为实现这一目标,我们采用了结合2D和3D培养系统的分化策略,模拟胰岛β细胞的体内发育环境,并使用多种生长因子调节在胰腺发育和β细胞分化中发挥重要作用的关键信号包括Notch信号通路(Notch signaling pathway)、Wnt信号通路(Wnt signaling pathway)、TGF-β/Smad信号通路(TGF-β/Smad signaling pathway)等,在体外将hiPSC定向诱导分化至胰岛β细胞。结果显示,在2D、3D结合的培养条件下,分化过程中定型内胚层细胞,胰腺祖细胞,胰腺内分泌细胞及胰岛β细胞阶段的特异性基因的表达显著提高(P<0.05),并在胰岛素含量及葡萄糖刺激后表现出显著增强的胰岛素分泌能力(P<0.05)。总之,本研究成功建立了一种从hiPSC到功能性胰岛β细胞的分化策略,为1型糖尿病提供了一种新的细胞治疗途径。这种方法不仅为研究胰岛β细胞的发育生物学提供了新的工具,也为临床应用提供了一种潜在的胰岛β细胞来源,有望解决现有治疗方法的局限性。

1,8-桉叶油素对2型糖尿病胰岛β细胞铁死亡的干预作用及机制

目的 研究1,8-桉叶油素对2型糖尿病胰岛β细胞铁死亡的干预作用及机制。方法 使用高糖作用于小鼠胰岛β细胞以建立细胞铁死亡模型,考察低、高剂量1,8-桉叶油素(0.25、0.5μmol/L)对胰岛β细胞中Fe2+水平的影响,并考察1,8-桉叶油素(0.5μmol/L)联合铁死亡诱导剂Erastin(20μmol/L)和抑制剂Ferrostatin-1(20μmol/L)后对胰岛β细胞中谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、环氧合酶2(COX2)蛋白表达的影响。采用高脂高糖饲料饲养联合腹腔注射链脲佐菌素构建2型糖尿病小鼠模型,考察低、高剂量1,8-桉叶油素(50、200 mg/kg)对模型小鼠胰腺组织病理形态、铁含量以及GPX4、COX2蛋白表达的影响。结果 细胞实验结果显示,与模型组比较,经1,8-桉叶油素干预后,胰岛β细胞中Fe2+水平显著降低(P<0.05);GPX4蛋白表达水平显著升高(P<0.05),COX2蛋白表达水平显著降低(P<0.05),且联合Ferrostatin-1后上述两种蛋白表达趋势相同,而联合Erastin后差异无统计学意义。动物实验结果显示,与模型组比较,经1,8-桉叶油素干预后,小鼠胰岛结构恢复完整,形态有所改善;胰腺组织中铁含量和COX2蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),GPX4蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论 1,8-桉叶油素对2型糖尿病胰岛β细胞损伤具有明显的改善作用,其作用机制可能与降低细胞内铁沉积以及调控铁死亡相关蛋白有关。

轻断食对2型糖尿病模型大鼠胰岛素抵抗及胰岛β细胞功能的作用及其机制研究

目的探讨轻断食对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗以及胰岛β细胞AMPK-mTOR-ULK1自噬信号通路的影响及其可能的机制。方法46只雄性Wistar大鼠中随机选取6只作为正常对照组(给予普通饲料饲养4 w),其余40只大鼠建立2型糖尿病模型(给予高脂饲料饲养,每5天腹腔注射1次STZ 25 mg/kg体重,共4 w)。40只2型糖尿病大鼠模型建立成功后,根据干预的不同分为模型组、模型+轻断食组、模型+运动干预组、模型+药物干预组、模型+运动+轻断食组。所有干预组大鼠同时每5天腹腔注射1次小剂量STZ 25 mg/kg体重,正常对照组同时每5天腹腔注射1次生理盐水0.5 mL/100 g体重。干预结束行简易糖耐量试验(OGTT),检测各组大鼠空腹血糖、空腹血清胰岛素水平,计算出胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛β细胞功能指数(HOMA-β),评价干预效果。Western-blot法检测干预前、后大鼠胰腺组织中AMPK-mTOR-ULK1信号通路及自噬相关蛋白腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、磷酸化-AMPK(p-AMPK)、哺乳动物类雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化-mTOR(p-mTOR)、UNC-51样激酶1(ULK1)、微管相关蛋白轻链3(LC3)、卷曲螺旋状Myosin样Bcl-2相互作用蛋白-1(Beclin-1)的表达水平。结果与模型组大鼠比较,模型+轻断食组、模型+运动+轻断食组大鼠的空腹血糖、空腹胰岛素及服糖后2 h血糖水平、HOMA-IR水平显著降低(P均<0.05);大鼠胰腺组织Beclin-1、p-AMPK、ULK1表达均显著降低,p-mTOR表达明显升高(P<0.05)。与模型组大鼠比较,模型+运动+轻断食组的HOMA-β水平显著升高(P<0.05),大鼠胰腺组织中的LC3表达显著降低(P<0.05)。结论轻断食干预对2型糖尿病大鼠具有改善胰岛素抵抗、提升胰岛β细胞功能的作用,并影响细胞自噬AMPK-mTOR-ULK1信号通路。

二甲双胍对消化道恶性肿瘤合并糖耐量异常患者胰岛β细胞功能的影响

目的分析二甲双胍对恶性消化道肿瘤合并糖耐量异常患者胰岛β细胞功能的影响。方法选取2019年6月至2023年6月在联勤保障部队第908医院就诊的120例恶性消化道肿瘤合并糖耐量异常患者作为研究对象,按照随机数字表法将其分为二甲双胍治疗组及治疗对照组,各60例,另选取同期在联勤保障部队第908医院体检的60例健康人群作为健康组。比较3组空腹血糖(GLU0)、空腹乳酸(LA0)、稳态模式评估法胰岛素分泌指数(HOMA-β)、糖负荷30 min后胰岛素增量和血糖增量(ΔINS30/ΔGLU30)比值、糖负荷30 min后乳酸(LA30)、糖负荷30 min后乳酸增量和血糖增量(ΔLA30/ΔGLU30)比值、血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)水平。结果治疗对照组GLU0、LA0、TNF-α、IL-6水平及ΔLA30/ΔGLU30比值高于健康组和二甲双胍治疗组,差异均有统计学意义(P<0.05)。二甲双胍治疗组HOMA-β、ΔINS30/ΔGLU30比值低于健康组,而高于治疗对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论二甲双胍可有效减轻炎症反应,改善恶性消化道肿瘤合并糖耐量异常患者胰岛β细胞功能不全和糖代谢障碍。

β细胞营养因子及核因子κB在多囊卵巢综合征患者治疗中的表达及对妊娠结局的预测价值

目的探讨多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)患者β细胞营养因子(Betatrophin)和核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)的表达及对妊娠结局的预测价值。方法选取PCOS患者110例作为研究对象,另选同期进行健康体检的健康育龄女性40例作为对照组,比较2组相关血清指标,观察PCOS患者治疗前后相关血清指标变化及排卵率和妊娠率,分析影响妊娠的危险因素,评估联合检测Betatrophin与NF-κB对患者治疗后妊娠结局的预测价值。结果治疗前PCOS患者血清空腹血糖(fasting blood-glucose,FBG)、空腹胰岛素水平(fasting insulin,FINS)、胰岛素抵抗指数(homeostasis model assessment of insulin resistance,HOMA-IR)、胰岛β细胞功能指数(homeostatic model assessmentβcell function,HOMA-β)、促黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、LH/促卵泡生成素(follicle stimulating hormone,FSH)、抗缪勒管激素(anti-mullerian hormone,AMH)、NF-κB、Betatrophin水平均高于对照组(P<0.05);治疗后上述指标均下降,随访1年,PCOS患者的排卵率为77.27%,妊娠率为61.82%。多因素Logistic回归分析显示HOMA-IR、HOMA-β、LH/FSH、AMH、Betatrophin、NF-κB是影响妊娠成功的危险因素,治疗后Betatrophin与HOMA-IR、HOMA-β、LH/FSH、AMH呈正相关(P<0.05);NF-κB与FBG、HOMA-IR、LH/FSH、AMH呈正相关(P<0.05)。ROC曲线显示,Betatrophin、NF-κB联合检测预测PCOS妊娠结局的AUC为0.978(0.961~0.998),敏感度为86.75%,特异度为90.12%。结论Betatrophin、NF-κB水平在PCOS患者中升高,治疗后显著降低,两者血清水平与HOMA-IR、LH/FSH、AMH等呈正相关,联合检测Betatrophin、NF-κB对PCOS妊娠结局有一定预测价值。

胰岛β细胞去分化与2型糖尿病

最新的流行病学数据显示,截止2018年,我国糖尿病患病率已上升至12.4%,在非传染性疾病中仅次于心血管疾病和肿瘤,是严重威胁我国人民健康的常见病、多发病[1],其中绝大多数为2型糖尿病(type 2 diabetes,T2D)。胰岛β细胞数量减少与胰岛素分泌功能障碍是T2D的病理生理学基础之一。以往认为,β细胞减少与细胞凋亡相关,近十年的研究发现β细胞去分化是T2D进程中β细胞衰竭的主要原因。本文就β细胞去分化的特征、原因和机制等最新研究进展做一综述,为更深入地了解T2D的发病机制和干预方法提供参考。

Circ_ZFYVE1对胰岛β细胞周期和自噬的影响

目的:观察Circ_ZFYVE1(cZFYVE1)对小鼠胰岛β细胞(MIN6)周期和自噬的影响。方法:Sanger测序分析验证cZFYVE1的环化位点;MIN6细胞分为正常组(NC,含葡萄糖浓度5.5 mmol/L)、高糖1组(HG1,含葡萄糖浓度15 mmol/L)和高糖2组(HG2,含葡萄糖浓度25 mmol/L)进行培养48 h,qRT-PCR法检测NC组、HG1组和HG2组cZFYVE1表达水平;慢病毒转染实验构建空载体组(sh-NC)、稳定过表达cZFYVE1组(circ-ZFYVE1)和稳定敲低cZFYVE1组(si-cZFYVE1)。qRT-PCR法检测转染后各组MIN6细胞中cZFYVE1基因的表达量;流式细胞术检测各组细胞周期百分率;透射电子显微镜观察各组细胞自噬小体和细胞器的变化;免疫荧光法检测各组细胞自噬相关蛋白Beclin-1荧光强度;Western Blot法检测各组细胞周期调节蛋白Cyclin D1以及自噬相关蛋白Beclin-1、P62和LC3-Ⅱ的表达水平。结果:Sanger测序证实cZFYVE1存在环化剪接位点。qRT-PCR结果显示,与NC组相比,HG1组和HG2组cZFYVE1表达水平降低,HG2组cZFYVE1水平较HG1组表达降低(P<0.01)。与sh-NC组比较,circ-ZFYVE1组cZFYVE1表达升高,si-cZFYVE1组cZFYVE1表达降低(P<0.01)。流式细胞术结果显示,与sh-NC组比较,circ-ZFYVE1组G1期细胞百分率降低,S期细胞百分率升高,G2期细胞百分率升高,si-cZFYVE1组G1期细胞百分率升高,S期细胞百分率降低,G2期细胞百分率降低(P<0.01)。透射电镜结果显示,与sh-NC组比较,si-cZFYVE1组自噬体减少。免疫荧光结果显示,与sh-NC组比较,circ-ZFYVE1组自噬相关蛋白Beclin-1免疫荧光强度升高,si-cZFYVE1组Beclin-1免疫荧光强度降低(P<0.01)。Western blot结果显示,与sh-NC组比较,circ-ZFYVE1组细胞周期调节蛋白Cyclin D1表达水平升高,自噬相关蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ表达水平升高,P62表达水平降低,si-cZFYVE1组Cyclin D1蛋白表达水平降低,Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白表达水平降低,P62蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论:Circ_ZFYVE1可能促进MIN6胰岛β细胞自噬并影响细胞周期。

血液灌流联合序贯血液透析滤过对糖尿病肾病患者胰岛β细胞功能、营养状态及炎症反应的影响

目的探讨血液灌流联合序贯血液透析滤过对糖尿病肾病(DN)患者胰岛β细胞功能、营养状况及炎症反应的影响。方法选择2020年2月至2023年2月南阳市中心医院收治的100例DN患者为研究对象,按照随机数字表法将患者分为对照组和观察组,每组50例。对照组患者采用序贯血液透析滤过治疗,观察组患者采用序贯血液透析滤过联合血液灌流治疗。分别于治疗前、治疗6个月后,测量2组患者的体质量和身高,计算体质量指数(BMI);应用皮脂厚度计测量肱三头肌皮皱厚度(TSF);采用主观综合性营养评分(SCA)评估患者营养状况;抽取2组患者空腹静脉血,采用放射免疫分析法测定空腹胰岛素(FINS)、空腹血糖(FPG)水平,计算稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和稳态模型胰岛素分泌指数(HOMA-β);应用全自动生化分析仪测定血胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平;酶联免疫吸附法测定血清C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平。结果治疗前,对照组与观察组患者的HOMA-β、FINS、HOMA-IR比较差异无统计学意义(P>0.05)。2组患者治疗后的FINS、HOMA-IR显著低于治疗前,HOMA-β显著高于治疗前(P<0.05)。治疗后,观察组患者的FINS、HOMA-IR显著低于对照组,HOMA-β显著高于对照组(P<0.05)。治疗前,对照组与观察组患者的BMI、TSF、SGA比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,2组患者的BMI、TSF、SGA显著高于治疗前,且观察组患者的BMI、TSF、SGA显著高于对照组(P<0.05)。治疗前,对照组与观察组患者的TC、TG、LDL-C、HDL-C水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。2组患者治疗后的TC、TG、LDL-C水平显著低于治疗前,HDL-C水平显著高于治疗前(P<0.05)。治疗后,观察组患者的TC、TG、LDL-C水平显著低于对照组,HDL-C水平显著高于对照组(P<0.05)。治疗前,对照组与观察组患者的血清CRP、TNF-α、IL-6水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,2组患者的血清CRP、TNF-α、IL-6水平显著低于治疗前,且观察组患者的血清CRP、TNF-α、IL-6水平显著低于对照组(P<0.05)。结论序贯血液透析滤过联合血液灌流可显著改善DN患者胰岛β细胞功能、营养状况和脂代谢水平,抑制炎症反应。

α-葡萄糖苷酶低表达对胰岛β细胞形态、增殖能力、炎症及氧化应激反应的影响

目的观察α-葡萄糖苷酶(GAA)低表达对胰岛β细胞形态、增殖能力、炎症反应及氧化应激反应的影响,以探讨GAA在糖尿病发病机制中的潜在作用。方法分别用siRNA1、2、3、4序列干扰胰岛素瘤胰岛β细胞(βTC6细胞)中GAA的表达,结果siRNA4序列的干扰效果最好,将其作为后续实验的干扰序列。将βTC6细胞随机分为siRNA组、阴性对照组(NC组)、空白对照组(Con组)。siRNA组转染siRNA4序列,以降低GAA的表达;阴性对照组转染siRNANC序列;Con组不进行任何处理。在细胞培养24、48、72和96 h,用CCK8法观察各组细胞增殖能力;培养48 h,使用倒置显微镜观察各组细胞数目及形态,采用Western blotting法检测细胞中炎症因子IL-6和IL-1β蛋白,免疫荧光法检测细胞中活性氧(ROS)。结果与Con组和NC组相比,siRNA组在显微镜下细胞数目增加,细胞间隙变小,培养24、48、72、96 h的细胞OD值均升高,培养48 h的细胞IL-6、ROS降低(P均<0.01)。Con组与NC组上述指标比较,P均>0.05。结论GAA低表达可使胰岛β细胞形态改变,增殖能力提高,炎症反应及氧化应激反应减弱;GAA可能通过使胰岛β细胞形态改变、增强炎症反应及氧化应激反应而参与糖尿病的发病过程。

大柴胡汤加减结合常规西药治疗2型糖尿病的疗效及对临床症状积分、胰岛β细胞功能指标的影响

目的 探讨大柴胡汤加减结合常规西药治疗2型糖尿病的疗效及对临床症状积分、胰岛β细胞功能指标的影响。方法 选择2022年9月—2023年9月辽阳市中心医院收治的98例2型糖尿病患者为研究对象,以随机数表法分为两组,各49例。对照组用常规西药治疗,观察组用大柴胡汤加减结合常规西药治疗,比较两组的疗效及临床症状积分、胰岛β细胞功能指标。结果 观察组有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组治疗12周的临床症状积分低于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05);观察组治疗4周、治疗12周胰岛β细胞功能指数高于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05)。不良反应发生率组间比较,差异无统计学意义(χ^(2)=0.178,P=0.674)。结论 大柴胡汤加减结合常规西药治疗2型糖尿病的疗效较高,可降低临床症状积分,改善胰岛β细胞功能指标,且具有较高的安全性。

大柴胡汤加减方治疗2型糖尿病肝胃郁热证对胰岛β细胞功能的影响分析

目的观察在2型糖尿病肝胃郁热证中应用大柴胡汤加减方治疗对患者血糖水平和胰岛β细胞功能的影响。方法选取2022年1月至2023年1月期间宿迁市中医院收治的72例2型糖尿病肝胃郁热证患者,依据随机数字表法分为常规组和试验组,各36例。常规组开展常规短期胰岛素强化治疗,试验组在常规治疗基础上予以大柴胡汤加减方治疗,两组患者均以14 d为1个治疗周期,均开展2个周期的治疗。比较两组患者治疗后临床疗效,治疗前后中医证候积分、血糖水平、胰岛β细胞功能,以及治疗期间低血糖发生情况。结果试验组患者临床疗效优于常规组,治疗总有效率高于常规组(均P<0.05);与治疗前比,治疗后两组患者中医证候积分、餐后2h血糖、空腹血糖、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)均降低,且试验组均低于常规组(均P<0.05);与治疗前比,治疗后两组患者胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)水平均升高,且试验组高于常规组(均P<0.05);试验组患者低血糖发生率低于常规组(P<0.05)。结论在常规胰岛素强化治疗的基础上联合大柴胡汤加减方治疗肝胃郁热证2型糖尿病能够改善患者胰岛功能,降低患者血糖水平,改善患者临床症状,提高治疗效果,且能够预防低血糖的发生。

Eicosapentaenoic acid代谢产物促进胰岛α细胞转分化为胰岛β细胞的作用研究

目的 探讨eicosapentaenoic acid(EPA)代谢产物促进胰岛α细胞向β细胞转分化的作用。方法 雄性C57BL/6J小鼠连续5 d腹腔注射60 mg/kg链脲佐霉素(streptozocin, STZ)构建1型糖尿病(T1DM)小鼠模型,2周后随机分为模型组、97%EPA饮食干预组、75%鱼油(50%EPA+25%DHA)饮食干预组,每周检测随机血糖;模型到期后,通过免疫荧光染色观察小鼠胰腺中胰岛β细胞再生情况。提取tdTomato荧光蛋白特意标记α细胞的小鼠(GCGicre小鼠与Rosa26tdTomato小鼠杂交获得)胰岛,加入1 mmol·L^(-1)STZ诱导β细胞凋亡,添加EPA代谢产物,培养48 h后,利用荧光染色观察胰岛素和tdTomato荧光的表达。在小鼠胰岛α细胞系αTC1培养基中添加EPA代谢产物,48 h后,利用荧光染色观察胰岛素和胰高血糖素的表达。结果 EPA和鱼油饮食干预均可明显降低T1DM小鼠的血糖水平,改善葡萄糖稳态,且胰腺中出现胰岛素和胰高血糖素共定位细胞;EPA代谢产物引起已发生β细胞凋亡的小鼠胰岛中发生tdTomato荧光蛋白和胰岛素共定位;EPA代谢产物可促进胰岛αTC1细胞系细胞分泌胰岛素。结论 EPA及其代谢产物可通过促进胰岛α细胞转分化为β细胞,进而增加胰岛素的分泌,缓解T1DM小鼠的高血糖症状。

2型糖尿病患者胰岛β细胞功能与甲襞微循环状态的关系

目的探讨2型糖尿病(T2DM)甲襞微循环特征及其与胰岛β细胞功能的相关性。方法选择126例T2DM患者,采集患者空腹静脉血,采用己糖激酶终点法检测空腹血糖(FPG),电化学发光免疫分析法检测空腹胰岛素(FINS)和空腹C肽(FCP),根据FPG、FINS、FCP计算胰岛β细胞功能指数(HOMA2-%B)。根据HOMA2-%B中位数将患者分为高HOMA2-%B组和低HOMA2-%B组。使用甲襞毛细血管镜(NFC)采集毛细血管图像,检测毛细血管密度和毛细血管直径,观察甲襞毛细血管异常情况并对其进行评分。采用Spearman相关分析HOMA指数与甲襞微循环指标的相关性,采用多因素线性回归分析HOMA2-%B的影响因素。结果与高HOMA2-%B组相比,低HOMA2-%B组毛细血管密度增加,分支毛细血管减少(P均<0.05),两组毛细血管直径及NFC评分比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。T2DM患者分支毛细血管与HOMA2-%B呈正相关(r=0.206,P<0.05),毛细血管密度、奇异毛细血管与HOMA2-%B呈负相关(r分别为-0.252,-0.234,P<0.01)。分支毛细血管形态减少、毛细血管密度增加与T2DM患者HOMA2-%B降低有关(P均<0.05)。结论T2DM患者甲襞微循环与胰岛β细胞功能存在相关性,其中分支毛细血管形态减少与密度增加提示胰岛β细胞功能可能进一步下降。

补肾健脾方联合短期胰岛素强化治疗对胰岛β细胞去分化的影响

【目的】观察补肾健脾方联合短期胰岛素强化治疗对脾肾两虚型2型糖尿病患者胰岛β细胞去分化的影响。【方法】将70例脾肾两虚型2型糖尿病患者随机分为对照组和观察组,每组各35例。对照组给予胰岛素强化治疗,观察组在对照组的基础上给予补肾健脾方治疗,疗程为2周。观察2组患者治疗前后中医证候积分、血糖水平、血清高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、胰岛素原/胰岛素比值(PI/I)的变化情况。【结果】(1)脱落情况方面:治疗过程中,对照组脱落1例,观察组脱落2例,最终对照组34例、观察组33例患者纳入疗效统计。(2)中医证候积分方面:治疗后,2组患者的中医证候积分均较治疗前明显降低(P<0.05),且观察组的降低幅度明显优于对照组(P<0.05)。(3)血糖水平方面:治疗后,2组患者的空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2hPG)水平均较治疗前明显降低(P<0.05),且观察组的降低幅度均明显优于对照组(P<0.05)。(4)HMGB1水平方面:治疗后,2组患者的HMGB1水平均较治疗前明显降低(P<0.05),且观察组的降低幅度明显优于对照组(P<0.05)。(5)炎症因子水平方面:治疗后,2组患者血清IL-1β、TNF-α水平均较治疗前明显降低(P<0.05),且观察组的降低幅度均明显优于对照组(P<0.05)。(6)PI/I值方面:治疗后,2组患者的PI/I值均较治疗前明显降低(P<0.05),且观察组的降低幅度明显优于对照组(P<0.05)。【结论】补肾健脾方联合短期胰岛素强化治疗可有效改善脾肾两虚型2型糖尿病患者的胰岛功能,其机制可能与解除高糖毒性、降低炎症因子水平,从而抑制胰岛β细胞去分化有关。

高糖高脂环境下抑制自噬对矢车菊素-3-O-葡萄糖苷保护胰岛β细胞损伤的影响

目的:探究高糖高脂(HGHF)环境下矢车菊素-3-O-葡萄糖苷(C3G)对胰岛β细胞损伤的影响及作用机制。方法:采用含10、20、30、40、50μmoL/L C3G的培养液处理胰岛β细胞24h,以未经处理的胰岛β细胞作为对照组,CCK-8法检测各处理组细胞活力;使用含25mmoL/L葡萄糖与0.5mmoL/L棕榈酸的培养液建立HGHF环境,并添加含10、20、30、40、50μmoL/L C3G处理胰岛β细胞24h,以未经处理的胰岛β细胞作为对照组,25mmoL/L葡萄糖与0.5mmoL/L棕榈酸诱导的胰岛β细胞作为HGHF组,CCK-8法检测各处理组细胞活力。实验分为对照组、HGHF组、HGHF+C3G组、HGHF+C3G+3-MA组,进行相应处理后,CCK-8法检测各组细胞活力,DCFH-DA荧光探针检测各组细胞活性氧(ROS)水平,比色法检测各组细胞丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)水平,ELISA法测定各组细胞胰岛素分泌情况,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测各组细胞中自噬相关基因5(Atg5)、微管相关蛋白轻链3(LC3)、Beclin-1的mRNA表达水平,蛋白质免疫印记(Western blot)测定各组细胞中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1及Bcl-2关联X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、活化型半胱天冬酶-3(Cleaved Caspase-3)的蛋白表达水平。结果:与对照组比较,不同浓度(10、20、30、40、50μmoL/L)C3G组胰岛β细胞活力升高(P<0.05),HGHF组胰岛β细胞活力下降(P<0.05);与HGHF组比较,在HGHF环境下加入20、30、40、50μmoL/L C3G能够显著提高胰岛β细胞活力(P<0.05)。与HGHF组比较,HGHF+C3G组细胞活力升高(P<0.05),ROS含量和MDA含量下降(P<0.05),SOD活性和GSH-Px含量上升(P<0.05),胰岛素分泌水平增加(P<0.05),Atg5、LC3、Beclin-1的mRNA相对表达量上调(P<0.05),LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值和Beclin-1蛋白相对表达量上调(P<0.05),Bax、Cleaved Caspase-3的蛋白相对表达量下调且Bcl-2蛋白相对表达量上调(P<0.05)。而在HGHF环境下添加C3G处理的同时使用自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)作用,C3G对HGHF环境下胰岛β细胞的保护作用消失。结论:C3G对HGHF环境下的胰岛β细胞起到保护作用,其能够提高细胞活力,抑制氧化应激损伤,该作用可能与促进自噬相关。

参芪降糖颗粒联合达格列净对T2DM患者糖代谢指标及胰岛β细胞功能的影响

目的观察参芪降糖颗粒联合达格列净对2型糖尿病(T2DM)患者糖代谢指标及胰岛β细胞功能的影响。方法依据随机数字表法将2022年3月至2023年5月期间于乐平市人民医院接受治疗的82例T2DM患者分为两组,各41例。对照组给予达格列净治疗,在此基础上观察组给予参芪降糖颗粒治疗,连续治疗8周。比较两组糖代谢指标、胰岛β细胞功能、血脂指标、不良反应。结果两组治疗后糖化血红蛋白、空腹血糖、餐后2 h血糖均降低,且观察组改善更佳(P<0.05);两组治疗后空腹胰岛素水平,胰岛素抵抗指数降低,胰岛β细胞功能指数提高,且观察组改善更佳(P<0.05);两组治疗期间未见严重不良反应。结论参芪降糖颗粒联合达格列净治疗可调节T2DM患者糖代谢及血脂指标,改善胰岛β细胞功能,更有效控制血糖水平。