黑水缬草提取物对老年痴呆大鼠脑内神经元中β-APP、Aβ_(1-40)和Caspase-3表达的影响

目的:探讨黑水缬草提取物对老年痴呆模型大鼠大脑皮质神经元和海马神经元中β-APP、Aβ1-40和Caspase-3表达的影响。方法:利用多因素造成大鼠老年痴呆病理复合模型,采用免疫组化法观察老年痴呆大鼠大脑皮质神经元和海马神经元中β-APP、Aβ1-40和Caspase-3蛋白表达变化。结果:黑水缬草各给药组和中药对照组显示出一定的疗效(P<0.05),其中以50%乙醇树脂洗脱高剂量效果尤为显著(P<0.05或P<0.01)。结论:黑水缬草50%乙醇树脂洗脱物能有效抑制神经元细胞内β-APP和Aβ1-40阳性细胞过表达,阻止其聚集脑内形成老年斑和神经纤维缠结,并能有效抑制Caspase-3的活化而减少神经元细胞的凋亡。

大鼠弥散性轴索损伤后β-APP的表达

目的观察大鼠DAI损伤后β-APP表达和Gless神经纤维轴索染色在诊断DAI损伤及判断损伤时间的价值。方法按Marmarou法复制大鼠DAI损伤模型,脑组织常规取材后进行β-APP及Gless氏神经纤维轴索染色观察。结果β-APP及Gless氏染色法在大鼠DAI损伤后0.5h即可见神经轴索断裂、扭曲变形、增粗膨大,12h以后可见到轴索收缩球。二种方法均显示DAI损伤的病理形态学变化,伤后12h明显,1d达到高峰,3d后开始修复,10d后基本恢复正常。β-APP表达强度在实验组不同时间存在着明显的差异,即3h呈明显阳性表达,1d达到高峰,3d后逐渐减弱,10d基本恢复正常。结论β-APP免疫组织化学染色法及Gless氏神经纤维轴索染色法,对DAI的早期诊断具有重要应用价值,并能从病理形态学上反映DAI损伤的时序性。β-APP表达强度变化是推断早期DAI损伤时间的重要参考指标。

补阳还五汤对AD大鼠海马区β-APP mRNA、IL-1β mRNA、IL-6mRNA、TNF-α mRNA表达影响的研究

目的:采用分子杂交技术观察补阳还五汤对Aβ1-40所致老年痴呆(AD)大鼠海马区β-APP mRNA、IL-1βmRNA、IL-6 mRNA及TNF-αmRNA表达的影响,进一步探讨该组方治疗AD的机制,为其临床应用提供实验依据。方法:70只Wistar雄性大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、补阳还五汤组、补气组、活血组和脑复康组,每10只。采用注射Aβ1-40的方法制备AD模型,分子杂交技术检测大鼠海马区β-APP mRNA、IL-1βmRNA、IL-6 mRNA、TNF-αmRNA的表达。结果与结论:补阳还五汤能够明显降低AD大鼠海马区β-APP mRNA、IL-1βmRNA、IL-6mRNA和TNF-αmRNA的表达,从而改善大脑记忆障碍,达到防治AD的作用。

补肾益髓方及其拆方对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠脑和脊髓中β-APP和MAP-2表达的影响

目的观察补肾益髓(BSYS)方及其拆方补肾(BS)和化痰活血(HTHX)方对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠脑和脊髓中β-淀粉样前体蛋白(β-APP)和微管相关蛋白-2(MAP-2)的作用。方法 56只雌性C57BL/6小鼠随机分为正常对照组(NC)、模型组(MO)、醋酸泼尼松组(PA)、梓醇组(CA)、补肾益髓组(BSYS)、补肾组(BS)和化痰活血组(HTHX),每组8只。对照药给予PA(6 mg/kg),CA(40 mg/kg);BSYS、BS和HTHX组分别以3.02 g,1.44 g和1.57 g生药/kg给药。NC及MO组以等量蒸馏水代替。每日1次,连续灌胃40 d。小鼠发病第25日(急性期)和第40日(缓解期)取脑和脊髓,采用免疫荧光(IF)法检测β-APP表达,免疫组化(IHC)法检测MAP-2的表达。结果发病第25日和第40日,MO组小鼠脑β-APP表达较NC组显著上调(P<0.001),而MAP-2表达则较NC组明显下调(P<0.01或P<0.001),与MO组比较,各治疗组(PA、CA、BSYS、BS和HTHX组)均可明显下调β-APP蛋白表达(P<0.05或P<0.01),上调MAP-2表达(P<0.05或P<0.01)。其中发病第25日小鼠脑β-APP表达PA组效果优于CA、BS及HTHX组(P<0.05)。各组小鼠脊髓内β-APP、MAP-2表达变化趋势与脑相似。结论 BSYS方及其拆方均能减轻轴突损伤及促进其修复,尤以BSYS全方更为显著。

养寿丹对AD模型大鼠脑内β-APP蛋白表达的影响

大鼠腹腔注射D-半乳糖,并同时注射鹅膏蕈胺酸(IBO)于双侧脑Meynert基底核建立AD动物模型,石杉碱甲作阳性药物对照组,用免疫组织化学染色法检测脑内β-APP蛋白的表达水平.手术阳性对照组、中药大剂量组和中药小剂量组大鼠脑内β-APP表达水平均低于AD模型组(P<0.05).中药剂量越大,β-APP蛋白表达越低.实验结果证明养寿丹可以降低脑内β-APP表达水平.

中药益神启窍方对弥漫性轴突损伤合并局灶性脑挫伤大鼠脑β-APP表达的影响

目的观察中药益神启窍方对弥漫性轴突损伤合并局灶性脑挫伤大鼠β-APP表达的影响及可能机制。方法采用弥漫性轴突损伤合并局灶性脑挫伤动物模型造模,取雄性SD大鼠36只,随机分为4组,正常组7只、假手术组7只、模型组12只、中药组12只,后2组再随机分为创伤后6h、12h、24h3组,每组4只。造模前1周中药组每天灌胃益神启窍方中药配方颗粒,模型组只灌胃等剂量的生理盐水,分别用HE染色和β-APP免疫组化染色,观察造模后6h、12h、24h大鼠脑组织病理学改变和β-APP的表达。结果假手术组与正常组β-APP表达差异无统计学意义(P>0.05);中药组6h、12h、24hβ-APP表达均低于模型组、有显著性差异(P<0.05),但仍高于假手术组,有显著性差异(P<0.05)。HE染色正常组、假手术组无异常;模型组可见脑实质水肿,血管扩张淤血,蛛网膜下腔出血,部分神经元肿胀和少量核固缩,中药组见脑实质水肿程度、血管扩张淤血轻微,见少量的蛛网膜下腔出血,部分神经元轻微肿胀和少量核固缩。结论中药益神启窍方能够降低损伤脑组织中β-APP的表达,这可能与其具有脑保护作用有关。

开心散对快速老化痴呆小鼠SAMP8炎症因子及β-APP影响随机平行对照研究

[目的]观察开心散对快速老化痴呆小鼠SAMP8炎症因子及β-APP影响。[方法]使用随机平行对照方法,将40只SAMP8小鼠按随机数字标法分为4组,10只/组,模型对照组、开心散组(高、低剂量组)、艾地苯醌组。正常对照组10只SAMR1小鼠。采用ELISA双抗体夹心法测定干预后脑组织及血清TNF-α、IL-8和β-APP含量。[结果]与正常对照组比较,模型组小鼠脑组织TNF-α、IL-8和β-APP含量明显升高(P<0.01),血清TNF-α、IL-8和β-APP浓度明显降低(P<0.01);与模型组比较,开心散低剂量组、开心散高剂量组小鼠脑组织TNF-α、IL-8和β-APP含量明显降低(P<0.01),血清TNF-α、IL-8和β-APP浓度明显升高(P<0.01)。[结论]开心散可减少脑组织的β-APP含量,降低炎症因子TNF-α、IL-8水平。

β-APP和NF-L在评估弥漫性轴索损伤大鼠损伤程度中的价值

目的利用自制装置建立轻、中、重度的弥漫性轴索损伤(diffuse axonal injury,DAI)大鼠模型,观察不同时间点β-淀粉样前体蛋白(β-amyloid precursor protein,β-APP)及神经丝蛋白轻链多肽(neurofilament light polypeptide,NF-L)的变化与恢复期的学习记忆能力的相关性。方法健康成年SD大鼠100只,随机分为正常对照组和A、B、C(轻、中、重型致伤)DAI组。伤后6、24、72 h及1、2周取脑组织切片行β-APP免疫组织化学染色;24 h时脑组织切片行HE染色和NF-L免疫组织化学染色;2周时行水迷宫测试。将损伤后24 h各组脑组织切片感兴趣区内测定的β-APP和NF-L累积光密度(IOD)值与损伤后恢复期大鼠的学习记忆能力做相关性分析。结果伤后24 h取脑组织肉眼观察致伤组大脑表面、蛛网膜下腔、脑室等区域未见出血,光镜下可见A、B、C组大鼠的胼胝体区神经束疏松、紊乱,血管淤滞,空泡形成,神经元肿胀变性,细胞核显示不清,突触结构模糊等经典DAI病理特征,NF-L免疫组化鉴定实验组均有典型中线部位轴索损伤改变。实验组伤后6、24、72 h及1、2周与对照组相比各时间点胼胝体β-APP均有升高(P<0.05),组内各时间点呈动态变化,于伤后24 h最高。伤后24 h,实验组NF-L免疫组化染色大脑水管水平脑干轴突和神经元胞体阳性染色较正常组增强,半定量分析A、B、C3组间差异有统计学意义(P<0.05)。水迷宫测试与正常对照组比较,A组大鼠学习记忆功能无明显下降;B、C两组下降明显(P<0.05)。损伤后24 h,A、B、C 3组脑组织切片感兴趣区内测定的β-APP和NF-L累积光密度(IOD)值与损伤后恢复期大鼠的学习记忆能力呈负相关(r分别为-0.937、-0.939)。结论β-APP和NF-L不仅可以反映DAI动物模型轴索损伤的程度,还可以早期预测损伤后大鼠的学习记忆恢复能力,可能成为DAI损伤的特异性分子探针。

海风藤对β-APP基因表达的影响

目的:研究海风藤对人类神经母细胞瘤细胞淀粉样前体蛋白(β-APP)基因表达的影响。方法:用细胞培养和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)观察海风藤对β-APPmRNA的影响。结果:海风藤选择性抑制β-APP基因表达。结论:β-APP与Alzheimer病(AD)的发病关系密切,海风藤选择性抑制β-APP基因达,为其防治AD提供了更加可靠的实验依据。

大鼠脑弥漫性损伤早期β-APP变化的研究

观察 β APP在弥漫性脑损伤动物模型中的变化规律。应用免疫组织化学方法和图像分析技术 ,对大鼠弥漫性脑损伤早期不同损伤时间大脑皮层、丘脑和桥脑部位神经元内 β APP的变化进行研究。结果发现 ,β APP在弥漫性脑损伤早期 ( 30min～ 1h)即有增加 ,增加趋势呈波动性 ;不同部位的变化规律不同。作为反应蛋白 β

头穴丛刺抑制海马β-APP表达改善阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆能力研究

目的:探讨头穴丛刺对阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆能力及海马区β-APP表达的影响。方法:将SPF级雄性Wistar大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组和头穴丛刺组,每组12只。模型组、头穴丛刺组采用双侧海马内注射Aβ1-42诱导AD模型。造模成功后第7天开始干预,头穴丛刺组选取百会穴及百会穴左侧旁开1 mm处、百会穴右侧旁开1 mm进行针刺干预,1次/d,留针30 min,连续干预14 d。应用Morris水迷宫于治疗前、治疗后进行大鼠行为学测试;干预后,采用免疫组化法检测大鼠海马区β-APP蛋白表达;干预后,采用实时荧光定量PCR法检测大鼠海马区β-APP mRNA表达。结果:治疗前和干预14 d后,与假手术组比较,模型组大鼠潜伏期均显著延长(P<0.01),穿台次数均显著减少(P<0.01);干预14 d后,与模型组比较,头穴丛刺组大鼠潜伏期明显缩短(P<0.01),穿台次数明显增加(P<0.01)。与假手术组比较,模型组大鼠海马区β-APP蛋白表达和mRNA表达均显著升高(P<0.01);与模型组比较,头穴丛刺组大鼠海马区β-APP蛋白表达和mRNA表达均明显降低(P<0.01)。结论:头穴丛刺针刺法能有效改善AD大鼠学习记忆能力,其机制可能与调控海马区β-APP蛋白表达有关。

Alzheimer病铝中毒大鼠模型海马结构中β-APP和GFAP研究

目的 通过用氯化铝灌胃建立的Alzheimer病 (AD)动物模型 ,探讨AD发病中星形胶质细胞增生和 β -淀粉样蛋白前体 (β -APP)的表达及可能的联系。 方法 应用免疫组化方法观察AD动物模型中海马各区胶质原纤维酸性蛋白 (GFAP)和 β-APP表达情况。 结果 (1)GFAP免疫组化标记可见动物模型海马各区星形胶质细胞明显增生 (P <0 .0 1) ,且增生细胞在CA2和CA3区最明显。 (2 ) β -APP免疫组化标记见动物模型海马各区内 β -APP阳性细胞明显增多 (P <0 .0 1) ,以CA2和CA3区最为明显。结论 星形胶质细胞增生在AD发病早期即起作用 ,与 β-APP过表达有密切关系。

大鼠脑挫伤后脑组织β-APP表达与损伤时间的关系

目的观察大鼠实验性脑挫伤后不同时间内脑组织β淀粉样前体蛋白(β-APP)表达的变化,探讨β-APP与脑损伤经过时间的关系。方法参照Feeney’s法建立大鼠脑挫伤模型,在伤后1h,4h,12h,48h,72h,7d,14d,运用免疫组化SABC法和Westernblot法检测β-APP的表达,以非损伤组做对照。结果β-APP出现于损伤后1h,4h开始增加至12h达到高峰,随后阳性反应细胞逐渐减少,7d后仍有少量表达但仍高于对照组,14d后表达基本恢复至接近对照组水平,各实验组与对照组比较有统计学意义(P<0.05)。结论β-APP在脑挫伤后随时间的变化,其表达呈现先逐渐增加后又减少的一定规律性变化。

黄连解毒汤对APP/PS1双转基因AD小鼠海马区病理形态学及脑内β-APP基因mRNA的影响

目的:探讨黄连解毒汤(HLJDD)对APP/PS1双转基因阿尔茨海默病(AD)模型小鼠海马CA1区的病理形态学及脑内β-淀粉样前体蛋白(β-APP)基因mRNA的影响。方法:选用3月龄的APP/PS1双转基因AD小鼠模型50只,随机分为对照组、安理申组、HLJDD大剂量组、HLJDD中剂量组、HLJDD小剂量组各10只,分别给予安理申或不同剂量HLJDD灌胃治疗6个月,对照组不予治疗,记录并比较各组死亡率;分别于6月龄和10月龄时采用HE染色观察各组海马CA1区神经细胞形态,采用改良甲醇刚果红染色观察各组老年斑形成情况;于末次灌胃治疗后,通过实时荧光定量PCR检测各组脑内β-APPmRNA水平。结果:各组小鼠死亡率差异无统计学意义;10月龄HLJDD各剂量组海马CA1区神经损伤情况较对照组明显减轻,老年斑数量少于对照组(P<0.05);HLJDD各剂量组β-APPmRNA水平低于对照组(P<0.05),其中以中剂量组水平降低最明显(P<0.01)。结论:HLJDD能保护海马神经细胞。

弥漫性轴索损伤患者血清MBP及β-APP水平的变化及临床意义

目的研究弥漫性轴索损伤(DAI)患者血清髓鞘碱性蛋白(MBP)、β淀粉样前体蛋白(β-APP)水平的变化规律,探讨其作为血清学诊断指标的可行性。方法选取我院神经外科2010年1月至2015年12月收治的格拉斯哥昏迷评分(GCS)均≤8分的40例DAI患者,依疾病分型分为轻度组、中度组、重度组,另选10例健康体检者作为对照组,检测患者伤后2~6 h、3 d、5 d、7 d、14 d的血清MBP、β-APP水平。结果 DAI不同分型患者血清MBP、β-APP水平均在伤后3 d达到最高值,轻度组、中度组、中度组的MBP水平分别为(90.16±25.78)ng/m L、(110.71±40.37)ng/m L、(130.64±60.96)ng/m L,β-APP水平分别为(12.25±3.51)ng/m L、(13.58±5.24)ng/m L、(23.09±10.90)ng/m L,随后则开始下降,差异有统计学意义(P<0.05)。不同时间DAI患者的血清MBP、β-APP水平均明显高于对照组(除轻度组5 d、7 d、14 d外),差异均具有统计学意义(P<0.05),且重度组患者不同时间血清MBP、β-APP水平高于中度组,而中度组高于轻度组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 DAI患者的血清MBP、β-APP水平明显升高,并随着疾病分型和病程发展有着明显的变化规律。MBP、β-APP水平能够体现出DAI的严重程度和病程转归,其具有作为DAI血清学诊断指标的潜力,且具有重要的临床研究和推广价值。

慢性铝暴露对小鼠认知能力影响及与β-APP关系

目的探讨慢性铝暴露对小鼠认知能力的影响及与脑组织β-淀粉样前体蛋白(β-APP)、β-淀粉样蛋白(β-AP)表达的关系。方法动物模型高、中、低剂量组每日用AlCl3含量120、12、1.2 mg/kg饲料进行喂养,对照组喂饲正常饲料,染毒9个月后用Morris水迷宫实验、跳台实验、避暗实验进行行为学测试,取脑,观察小鼠组织学变化,用蛋白质印迹(western-blot)法检测小鼠脑组织中β-APP和β-AP蛋白的表达。结果对照组小鼠跳台实验潜伏期与错误次数为(205.00±30.09)s和(0.29±0.49)次,铝暴露中、高剂量组跳台实验潜伏期与错误次数分别为(159.63±59.61)、(103.02±41.86)s和(1.63±1.06)、(2.00±1.63)次,与对照组比较,潜伏期明显缩短,错误次数明显增加(P<0.05);与对照组避暗实验潜伏期(265.57±15.05)s比较,铝暴露中、高剂量组小鼠避暗潜伏期〔(126.71±25.73)、(45.57±33.13)s〕明显缩短(P<0.05);与对照组比较,铝暴露中、高剂量组β-APP、β-AP蛋白表达量均明显增多(P<0.05,P<0.01)。结论慢性铝暴露可导致小鼠β-APP和β-AP的表达上调,这可能是铝致小鼠认知功能障碍的重要机制之一。

白藜芦醇抑制海马β-APP表达改善大鼠学习记忆

目的探讨白藜芦醇(resvertrol,Res)对阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)大鼠学习记忆及β-淀粉样前体蛋白(β-APP)表达的影响。方法采用去卵巢合并D-半乳糖(100 mg/kg)注射制备AD大鼠模型,60只雌性Wistar大鼠随机分为模型组、白藜芦醇低、中、高剂量组(20、40、80 mg/kg)、戊酸雌二醇组(0.8 mg/kg)及假手术组(蒸馏水),连续灌胃12周,利用Morris水迷宫检测大鼠空间记忆能力;Western blot检测大鼠海马中β-APP表达。结果随着训练天数增加,各组大鼠逃避潜伏期逐渐缩短,与模型组比较,白藜芦醇80 mg/kg组、戊酸雌二醇组大鼠逃避潜伏期[分别为(16.49±4.18)、(17.05±2.71)s]明显缩短,穿越平台次数[分别为(3.90±0.97)、(3.44±0.63)次]明显增加(P<0.05),白藜芦醇各组大鼠在目标象限内停留时间延长(P<0.05);白藜芦醇20、40、80 mg/kg组大鼠海马β-APP蛋白表达水平[分别为(0.57±0.054)、(2.63±0.50)、(0.28±0.043)]较模型组(0.27±0.057)明显下降(P<0.05)。结论白藜芦醇可以改善AD大鼠的空间记忆能力,其机制可能与抑制海马β-APP的表达有关。

铝对小鼠认知能力及β-APP基因表达的影响

[目的]探讨铝暴露对小鼠认知功能及脑组织β-淀粉样前体蛋白(β-APP)基因表达的影响。[方法]动物模型高、中、低剂量组每日用AlCl3含量分别是120、12、1.2mg/kg的饲料进行喂养,对照组每日正常饲养。染毒3个月后用跳台试验、避暗试验和水迷宫试验检测小鼠的认知功能。小鼠脑组织中β-APP mRNA的表达用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测。[结果]与对照组相比,高、中剂量组跳台试验潜伏期明显缩短(P<0.05),错误次数增多(P<0.05);避暗试验高剂量组潜伏期较对照组明显缩短(P<0.05),错误次数明显增多(P<0.05);水迷宫试验低、中、高剂量组随着染铝浓度的增加潜伏期明显延长(P<0.05),高、中剂量组穿越平台的次数与对照组相比明显减少(P<0.05)。高、中剂量组β-APP mRNA的表达量明显增高(P<0.05)。铝暴露剂量与跳台试验潜伏期(rs=-0.725,P<0.05)、避暗试验潜伏期(rs=-0.765,P<0.01)、Morris水迷宫试验潜伏期(rs=0.097,P<0.05)、跳台试验错误次数(rs=0.565,P<0.01)、避暗试验错误次数(rs=0.509,P<0.05)之间均存在剂量-效应关系。铝暴露与β-APP mRNA的表达量呈明显的正相关(rs=0.743,P<0.05)。[结论]铝暴露可导致小鼠认知功能障碍及β-APP的过度表达,这可能是铝致小鼠认知功能障碍的重要机制之一。

雷公藤多甙对EAE大鼠脊髓β-APP和IL-17表达的影响

目的观察雷公藤多甙对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠脊髓中β-APP和IL-17表达的影响。方法将30只大鼠随机分为空白对照组(CON组)、模型组(EAE组)、治疗组(TWP组),建模后分别行神经功能评分,大鼠脊髓组织行HE染色,免疫组化检测脊髓中β-APP和IL-17表达水平。结果与EAE组比较,TWP组大鼠发病率下降,平均神经功能评分降低,炎性细胞浸润减少,在神经功能评分和病理学改变方面差异明显(P<0.05);免疫组化示TWP组较EAE组β-APP和IL-17表达水平降低(P<0.05)。结论雷公藤多甙对EAE大鼠有一定保护作用,可能与抑制β-APP、IL-17表达有关。

颅脑损伤后β-APP及其产物在脑组织中的变化及临床意义

β-APP是一种跨膜蛋白,广泛存在于中枢神经系统内,它具有神经营养、促进突起生长和突触发生的作用。β-APP是脑损伤后的一种快反应性蛋白,它在脑损伤后的表达增强与伤情、预后及颅内病理生理变化密切相关,检测其含量能早期判断脑损伤程度,预测预后,指导临床治疗。