β2-受体激动剂类药物多残留间接竞争ELISA检测方法的建立

【目的】建立β2-受体激动剂类药物多残留间接竞争ELISA检测方法,为动物食源性β2-受体激动剂类药物残留的快速检测提供技术支持。【方法】以沙丁胺醇多克隆抗体为基础,优化间接竞争ELISA的检测条件,建立一种快速检测猪尿中沙丁胺醇、卡布特罗、西布特罗、克伦特罗、溴布特罗、马布特罗、克伦潘特、可尔特罗、吡布特罗、马喷特罗、比托特罗与妥布特罗等12种β2-受体激动剂类药物的间接竞争ELISA检测方法。【结果】建立的β2-受体激动剂类药物间接竞争ELISA检测方法的最佳反应条件为:37℃,抗原以1∶10000倍包被1 h,抗体以1∶40000稀释作用40 min,酶标抗体以1∶20000稀释作用40 min。采用建立的间接竞争ELISA最佳反应条件对猪尿中的β2-受体激动剂类药物残留进行检测,结果表明12种β2-受体激动剂类药物在0.1~20μg/L范围内线性关系良好,相关系数均大于0.952;检出限为0.15μg/L,定量限为0.5μg/L;在0.5与1.0μg/L的添加浓度下,回收率为68.4%~114.2%,批内、批间RSD分别为0.4%~10.1%和0.4%~12.5%。【结论】所建立的β2-受体激动剂类药物残留ELISA检测方法操作简单、快速,灵敏度高,适用于猪尿中β2-受体激动剂药物的筛选与检测。

通过式固相萃取柱结合QuEChERS前处理技术-液相色谱串联质谱法快速测定熟肉食品中4种β2-受体激动剂残留

目的建立通过式固相萃取柱结合前处理技术-液相色谱串联质谱法快速测定熟肉制品中克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、特布他林4种常见β2-受体激动剂类兽药残留的分析方法。方法熟肉制品采用5%三氯乙酸酸解,NaCl盐析乙腈萃取,正己烷除脂后经通过式固相萃取柱和QuEChERS净化,超高效液相色谱-串联质谱于电喷雾正离子源(ESI+)和多反应监测扫描模式下进行测定,基质匹配标准曲线外标法定量。结果4种目标化合物阴性加标水平在2、5、10mg/kg下,回收率在77.2%~104.7%之间,相对标准偏差在2.9%~9.6%之间。4种目标化合物的检出限在0.2~0.6mg/kg之间,定量限在0.6~2.0mg/kg之间。对30件熟肉样品进行目标化合物的检测,未检测到β2-受体激动剂类兽药残留。结论该方法操作简便、快速,灵敏度和准确度高,包含种类较宽,具有一定的拓展性,适用熟肉制品相关残留的日常监测。

QuEChERS-HPLC-MS/MS法检测液态乳中9种β2-受体激动剂残留量

建立了QuEChERS-液相色谱串联质谱法同时检测液态乳中9种β2-受体激动剂药物残留量方法。样品以乙腈、EDTAMcllvaine缓冲液和三氯乙酸为提取试剂、NaCl为吸水剂,PSA为吸附剂进行净化。用Shim-packXR-ODS（3.0mmi.d×75mm）色谱柱分离,以乙腈溶液和0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,电喷雾正离子模式（ESI＋）电离,多反应监测（MRM）模式检测。结果表明,样品经QuEChERS处理后,9种β2-受体激动剂在1.0-200μg/kg范围内具有良好的线性关系,相关系数（r^2）大于0.991,检出限（LOD）范围为0.03-0.13μg/kg,定量限（LOQ）范围在0.1-0.4μg/kg之间。回收率介于78.2%-96.0%之间,相对标准偏（RSD）均低于13.7%之间。

联用吸入型糖皮质激素和长效β2-受体激动剂在COPD缓解期治疗中的疗效观察

目的 观察缓解期慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者吸入糖皮质激素和长效β2-受体激动剂（ICS／LABA）后对临床症状和肺功能的影响程度。方法 按照随机、对照、单盲的设计，将120例稳定期COPD患者分为两组，观察组给予舒利迭^TM（SAL／FP，50μg，2次／d）与对照组给予施立稳^TM（FP，50μg，2次/d）吸入治疗3个月，观察治疗前后测定肺功能第1秒用力呼吸气量占预计值的百分比、用力肺活量，并记录临床症状评分。结果 观察组COPD患者吸入SAL／FP治疗后，临床症状积分和肺功能指标差异有统计学意义（P〈0．01），与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论 联合应用吸入型糖皮质激素和长效β2-受体激动剂用于缓解期COPD患者的治疗及预防，对缓解症状和改善肺功能均能收到良好效果，且较单用长效β2-受体激动剂疗效好（P〈0．05）。

糖皮质激素与长效β2-受体激动剂吸入治疗小儿哮喘的预后效果观察

目的探讨糖皮质激素与长效β2-受体激动剂吸入治疗小儿哮喘预后效果。方法选择我院100例2017年12月至2018年12月小儿哮喘患儿。随机分组,对照组采取糖皮质激素治疗,联合用药组则采取糖皮质激素+长效β2-受体激动剂治疗。比较两组疾病疗效;炎症吸收时间、肺功能改善时间;治疗前后患儿炎性因子、免疫和肺功能;不良反应。结果联合用药组疾病疗效、炎症吸收时间、肺功能改善时间、炎性因子、免疫和肺功能相比较对照组更好,P <0.05。联合用药组和对照组不良反应相似,P> 0.05。结论糖皮质激素+长效β2-受体激动剂治疗小儿哮喘效果好。

β2-受体激动剂治疗新生儿湿肺症的临床安全性探讨

新生儿湿肺症，即新生儿暂时性呼吸急促（Transient Tachypnea of the Newborn，rrrN）是足月儿或近足月儿吸窘迫最常见的原因之一，主要与出生时肺部液体量以及离子转运减少，导致出生时肺部液体较多所致。近年来重症湿肺明显增多，且部分病例呼吸困难较严重、持续时间较长，

哈萨克族慢性阻塞性肺疾病患者联合吸入β2-受体激动剂和糖皮质激素的疗效及依从性观察

目的观察联合吸入β2-受体激动剂和糖皮质激素在哈萨克族慢性阻塞性肺疾病患者中的疗效和β2-受体激动剂和糖皮质激素依从性。方法2005年8月-2007年6月以来，我科门诊及住院的稳定期哈萨克族慢性阻塞性肺疾病患者15例，给予联合吸入沙丁胺醇气雾剂200μg，3次／d和丙酸倍氯米松气雾剂500μg，3次／d，观察治疗一周后的血气变化，并与同期21例稳定期汉族慢性阻塞性肺疾病患者进行比较。结果两组患者在年龄分布和性别构成上无显著差异，经联合吸入疗法治疗一周后，两组患者的pH、PaO2和PaCO2值均有显著改善（P〈0．05）。结论联合吸入β2-受体激动剂和糖皮质激素在哈萨克族慢性阻塞性肺疾病患者中有较好的疗效，且依从性好。

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定清咽类保健食品中14种β2-受体激动剂非法添加物

目的建立超高效液相色谱-串联质谱法同时测定清咽类保健食品中非法添加的14种β2-受体激动剂含量的分析方法。方法样品经乙酸钠-甲醇混合溶液提取,用氢氧化钠溶液调节pH值,待测物由二氯甲烷-乙酸乙酯混合溶剂液液萃取,经阳离子固相萃取小柱富集、净化后,采用C18色谱柱分离,以乙腈和0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,采用正离子多反应离子检测模式对14种β2-受体激动剂的含量进行检测,内标法定量。结果 14种β2-受体激动剂在0.5~20ng/mL(1.0~40μg/kg)范围内线性关系良好,相关系数均大于0.99。各待测物方法定量限为1.0μg/kg。加标回收率为75.9%~110.9%,相对标准偏差为1.9%~9.7%。结论该方法准确、灵敏,适用于清咽类保健食品中14种β2-受体激动剂的测定。

β2-受体激动剂及糖皮质激素雾化吸入治疗儿科支气管哮喘合并肺炎的疗效观察

目的:评价β2-受体激动剂及糖皮质激素雾化吸入治疗儿科支气管哮喘合并肺炎的疗效。方法:选取支气管哮喘合并肺炎患儿122例,将其分为观察组(n=62)与对照组(n=60),对照组单用糖皮质激素吸入治疗,观察组给予β2-受体激动剂联合糖皮质激素治疗,对两组患儿的临床疗效进行比较。结果:在治疗总有效率方面,观察组与对照组比较明显提高,差异有显著性(P<0.05);两组治疗后患儿FEV1与FEV1%较治疗前均显著升高,其中观察组升高程度更显著(P<0.05)。在复发率方面,观察组较对照组显著降低(P<0.05)。结论:β2-受体激动剂及糖皮质激素雾化吸入治疗儿科支气管哮喘合并肺炎疗效显著,能够改善临床症状,减少复发率。

穴位按摩与β2-受体激动剂治疗支气管哮喘的疗效

目的观察穴位按摩联合β2-受体激动剂治疗支气管哮喘临床疗效。方法将60例支气管哮喘患者随机分成治疗组30例,对照组30例。其中治疗组予穴位按摩联合β2-受体激动剂治疗,对照组予β2-受体激动剂治疗。疗程为2周。观察患者肺功能、症状、体征的变化。结果治疗组总有效率96.6%,对照组总有效率73.3%,治疗后治疗组肺功能改善水平优于对照组(P<0.05)。结论穴位按摩能在患者哮喘发作时成为一种药物治疗以外无痛苦、无创、低成本、易接受、易学易会的辅助措施,能有效治疗支气管哮喘。

长效β2-受体激动剂与吸入型糖皮质激素联合治疗哮喘

目的:探讨长效β2-受体激动剂与吸入型糖皮质激素联合治疗哮喘的效果。方法:选取2016年9月-2017年9月我院收治的哮喘患者76例,随机分为两组,对照组应用吸入型糖皮质激素治疗,研究组应用长效β2-受体激动剂与吸入型糖皮质激素联合治疗。对比两组患者的疗效及FEV1的测定结果。结果:研究组疗效优于对照组(P<0.05);两组患者治疗前FEV1结果无明显差异(P>0.05)治疗后研究组的FEV1的测定结果优于对照组(P<0.05)。结论:哮喘的治疗过程当中,长效β2-受体激动剂与吸入型糖皮质激素联合治疗效果理想,临床上应推广应用。

探讨糖皮质激素与长效β2-受体激动剂吸入治疗小儿哮喘的临床情况

探讨对小儿哮喘患儿应用长效β2-受体激动剂与糖皮质激素治疗的效果。方法:于2018年9月到2020年7月开展研究,将该阶段在本医院接受治疗的小儿哮喘患儿纳入到研究中,共68例,结合随机抽签结果将所有观察对象均分成样本量相同的对照组和实验组,均接受糖皮质激素吸入治疗,后者增加长效β2-受体激动剂吸入治疗。对比两组患儿的肺功能、治疗效果及不良反应。结果:比照治疗前,两组治疗后的肺功能指标均增加,且增加幅度比照,提示实验组均更高;两组的治疗总有效率进行对比,提示实验组更高;两组的不良反应总发生率进行对比,提示实验组更低;均存在很大差异(P﹤0.05)。结论:对小儿哮喘患儿应用长效β2-受体激动剂与糖皮质激素联合治疗具有积极作用,能够缓解患儿的临床症状,使患儿的肺功能改善,且安全性高,值得广泛应用。

糖皮质激素与β2-受体激动剂小剂量吸入在哮喘治疗中的疗效观察

目的探讨对哮喘患者除利用糖皮质激素治疗外附加β2-受体激动剂小剂量吸入治疗后,分析此方案的疗效情况。方法从2018年3月至2020年3月来本院治疗的哮喘患者中挑选出符合愿意参加且自身病情合适的患者128例,按照随机分配原则平均分为两组,每组64例,对照组患者接受糖皮质激素治疗,研究组除利用糖皮质激素治疗外附加β2-受体激动剂小剂量吸入治疗,比较两组患者的治疗总有效率、哮喘症状及肺功能改善情况、用药安全性。结果研究组患者的治疗总有效率(96.88%)显著高于对照组(78.13%),两组比较差异变化较大(P<0.05);研究组患者哮喘症状0~1分的人数占比比对照组人数多,两组比较差异变化较大(P<0.05);治疗前两组患者的各肺功能指标比较无统计学差异(P>0.05),治疗后研究组患者各肺功能指标比对照组对应指标更好(P<0.05);研究组患者发生各类不良反应事件的概率均比对照组下降很多,两组比较差异变化较大(P<0.05)。结论糖皮质激素与β2-受体激动剂小剂量吸入联合应用可有效缓解哮喘症状,改善患者的肺功能,疗效安全显著,值得应用,为治疗哮喘疾病提供了更多的治疗方案。

COPD患者应用长效β2-受体激动剂与长效抗胆碱能药物治疗的价值

研究和探讨在COPD治疗过程中选取予长效β2-受体激动剂联合长效抗胆碱能药物治疗的价值。方法:根据患者就诊先后顺序从2015年2月至2016年2月来我院治疗的COPD患者中选取100例作为研究对象并通过双盲对照的原则将其分为试验组和对照组,入组患者均接受常规药物方案治疗,而试验组在常规药物基础上加用长效β2-受体激动剂,长效抗胆碱能药物治疗,比较两组疗效差异。结果:研究数据显示,和对照组相比试验组患者的治疗总有效率更占优势,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:COPD患者治疗时加用长效β2-受体激动剂,长效抗胆碱能药物,有利于增加治疗总有效率,效果明显,值得推广。

糖皮质激素联合长效β2-受体激动剂在慢性阻塞性肺疾病中的应用

目的:对糖皮质激素联合β2-受体激动剂在慢性阻塞性肺疾病中的应用进行分析和探讨。方法以我院收治的90例慢性阻塞性肺疾病患者为研究对象,采用随机分配的原则,将所有患者分成对照组和实验组,每个组别各45例。对照组患者在临床上单独采用长效β2-受体激动剂进行治疗,实验组患者则联合糖皮质激素和长效β2-受体激动剂进行治疗,对两组患者的临床疗效进行观察和比较。结果实验组患者的临床总有效率明显高于对照组,差异存在统计学意义,P<0.05。结论采用糖皮质激素联合长效β2-受体激动剂对慢性阻塞性肺疾病进行治疗,效果显著,值得推广和普及。

改进的高效液相色谱-串联质谱方法同时测定动物性食品中4种β_2-受体激动剂残留

建立了同时测定动物性食品中克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺和特布他林4种β2-受体激动剂残留的高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）的分析方法。样品采用质量分数为5%的三氯乙酸振荡提取,用HLB与ProElut PXC固相萃取柱串联净化,采用HPLC-MS/MS在多反应监测（MRM）模式下检测,内标法定量。结果表明：克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺和特布他林的检出限（S/N=3）分别为0.05、0.05、0.05和0.2μg/kg,定量限（S/N=10）分别为0.25、0.25、0.1和0.5μg/kg。空白基质加标水平为2.5、5、10μg/kg时,4种β2-受体激动剂的平均回收率为90.3%~120.5%,相对标准偏差为1.60%~9.33%。该方法采用酸解法提取样品,较酶解法耗时短,速度快,灵敏度高,回收率、重现性好,可有效用于动物性食品中4种β2-受体激动剂残留的快速检测。

酶解及有机溶剂提取对绵羊血浆和尿样中两种β_2-受体激动剂含量测定的影响

采用酶解与有机溶剂提取对绵羊血浆和尿液进行前处理,超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)测定两种样品中莱克多巴胺和沙丁胺醇含量,考察了酶解、有机溶剂提取对两种β2-受体激动剂含量测定的影响。结果表明,绵羊血浆中莱克多巴胺轭合率大于95%,沙丁胺醇轭合率约为40%,添加β-葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶进行酶解可有效解离血浆中轭合的莱克多巴胺和沙丁胺醇,测得的含量显著提高;不经酶解处理血浆中莱克多巴胺、沙丁胺醇检测结果的相对偏差均大于40%,重复性差;绵羊尿液中莱克多巴胺轭合率约为57%,沙丁胺醇轭合率低于1%,酶解后尿液中莱克多巴胺检测结果显著提高,对于沙丁胺醇含量测定无显著影响;血浆样品基质复杂程度低于尿液样品,血浆样品目标化合物的基质抑制效应小于尿液样品;有机溶剂提取对血浆和尿液中莱克多巴胺和沙丁胺醇含量检测结果影响不显著,提取过程存在目标化合物损失的可能性,通过内标校正,可消除提取损失对检测结果的影响。

液相色谱-三级质谱法分析尿液中β_2-受体激动剂及β-受体阻断剂多组分残留

建立了SPE柱净化结合液相色谱-三级质谱测定尿液中12种β2-受体激动剂和4种β-受体阻断剂的方法。尿液样品经冷冻离心,加入β-葡萄糖苷酸酶酶解后,以高氯酸沉淀蛋白,经HLB和MCX固相萃取柱净化。在Waters AtlantisT3色谱柱上以甲醇和含0.1%甲酸流动相进行梯度洗脱分离,采用ESI源正离子模式进行三级子离子监测,外标法定量。16种化合物的线性范围在0.005～0.160mg/kg之间,相关系数(r)大于0.995;各化合物检出限均低于0.2μg/kg。以0.005,0.01和0.02mg/L为添加水平的空白尿液的加标回收率在41.2%～88.2%之间;相对标准偏差在2.7%～19.2%之间。本方法准确可靠,灵敏度高,可用于尿液中β2-受体激动剂和β-受体阻断剂残留的定性与定量检测。

高效液相色谱-离子阱质谱法测定尿液中β_2-受体激动剂及β-受体阻断剂

建立了尿液中23种β2-受体激动剂及5种β-受体阻断剂的高效液相色谱-离子阱质谱(HPLC-IT-MS)测定方法。尿液样品采用冷冻高速离心沉淀蛋白,上清液过ExtrelutTM硅藻土柱,用乙酸乙酯洗脱后,洗脱液经旋转蒸发仪浓缩并复溶待测。HPLC分离采用AtlantisT3-150mm色谱柱,以甲醇和含0.1%甲酸的水溶液为流动相梯度洗脱,IT-MS采用电喷雾离子源在多反应离子监测模式下测定。定量分析选择9种经过氘代同位素标记的β2-受体激动剂为内标。各化合物的线性范围为0.005～0.16mg/L,尿液中的检出限均能达到0.2μg/L。空白尿液样品中不同加标水平的回收率为57.1%～127.1%,相对标准偏差为1.1%～31.1%。该方法简便快速,灵敏度高,适用于人或动物尿液中23种β2-受体激动剂及5种β-受体阻断剂的定性和定量分析。

液质联用仪测定动物源性食品中11种β_2-受体激动剂的研究

建立了同时检测11种β2-受体激动剂物质（包括沙丁胺醇、特布它林、塞曼特罗、塞布特罗、莱克多巴胺、克仑特罗、溴布特罗、苯氧丙酚胺、马布特罗、马贲特罗、溴代克仑特罗）在猪肉及猪肝脏中残留量的液相色谱-串联质谱（HPLC／MS-MS）方法。将样品粉碎后，用pH5．2的乙酸钠缓冲液提取，经β-盐酸葡萄糖醛苷酶-芳基硫酸酯酶水解，以高氯酸调节pH值，离心沉淀蛋白，分离得上清液用V（异丙醇）：V（乙酸乙酯）=6；4的溶液萃取，再过阳离子交换柱净化，吹干后用高效液相色谱-串联质谱法测定，同时使用同位素内标（clenbuterol-D9、salbutamol-D3）进行定量分析。目标化合物的回收率在89．4％～110．5％，RSD为1．1％～2．8％，方法的最低检出限为0．25μg·kg^-1，能满足食品安全法规的需要。