超高效液相色谱-质谱法同时测定大麻植物中Δ9-四氢大麻酚和Δ9-四氢大麻酚酸A

10mg样品粉末用5mL甲醇超声萃取,离心后,上清液在Waters ACQUTIY UPLC BEH C18色谱柱(2.1mm×50mm,1.7μm)上分离,以含0.1%(体积分数)甲酸的甲醇和水(体积比为87∶13)为流动相进行等度洗脱,流量为0.2mL·min-1。利用光电二极管阵列检测器在波长220nm处对Δ9-四氢大麻酚(Δ9-THC)和Δ9-四氢大麻酚酸A(Δ9-THCA-A)进行定性和定量分析,并采用质谱检测器QDa进行确证。Δ9-THC和Δ9-THCA-A的质量浓度分别在0.50~20.0mg·L-1和2.0~40.0 mg·L-1内与其峰面积呈线性关系,检出限(3S/N)分别为0.10,1.0mg·L-1。加标回收率在81.5%~97.9%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)在0.77%~4.1%之间。采用该方法对20个大麻植物样品进行分析,由Δ9-THC和Δ9-THCA-A的测定值计算得总Δ9-THC含量略高于标准方法测定结果。

气相色谱-质谱法同时分析运动营养品中的大麻酚、大麻二酚和Δ9-四氢大麻酚

目的：建立气相色谱-质谱法同时分析运动营养品中大麻酚、大麻二酚和Δ9-四氢大麻酚的检测方法。方法：样品采用液液萃取,提取液经过正相固相萃取柱（Silica）纯化,洗脱液氮气吹干,N-甲基-N-（三甲基硅烷）三氟乙酰胺衍生化后,采用HP-1MS柱（17 m×0.2 mm i.d.×0.11 mm）色谱分离,程序升温,质谱检测,D3-Δ9-四氢大麻酚为内标。结果：大麻酚、大麻二酚和Δ9-四氢大麻酚的衍生化产物实现基线分离,三个定性特征离子的峰度比计算结果可以满足世界反兴奋剂机构（WADA）要求。该方法的检测限为1μg/kg,定量限为2μg/kg,在添加的高、中、低三种浓度的相对回收率分布在94%~119%之间。结论：该方法满足常规检测要求,样品前处理简单、快速、可靠。

超高效液相色谱-串联质谱法分析测定食用植物油中痕量Δ9-四氢大麻酚

以电喷雾离子源(ESI)为电离源,在负离子采集模式下建立食用植物油中Δ9四氢大麻酚(Δ9-THC)超高效液相色谱-质谱/质谱(UPLC-MS/MS)检测方法。实验以甲醇为提取剂,经中性氧化铝固相萃取柱净化、WatersACQUITYTM UPLC BEH-C18(2.1mm×100mm,1.7μm)色谱柱分离后以UPLC-MS/MS多反应监测模式进行分析。方法检出限和定量限分别为0.15μg/kg和0.45μg/kg。实验以Δ9-氘代四氢大麻酚(Δ9-THC-D3)为内标物,采用内标法定量。3个添加水平,平均回收率为68.0%～110.0%,相对标准偏差为8.8%～18.1%。本方法能够满足食用植物油中Δ9-四氢大麻酚痕量检测的要求。

微波预处理火麻籽对其毛油δ~9-四氢大麻酚含量及品质的影响

在火麻籽油的提取过程中,火麻籽中的毒性成分δ~9-四氢大麻酚易随油脂溶出,降低火麻籽油的品质。采用滚筒式微波翻炒设备对火麻籽进行热处理,旨在降低火麻籽油中的δ~9-四氢大麻酚含量,并对微波处理前后的火麻籽饼残油率及火麻籽毛油品质进行了分析。结果表明:在微波功率1 000 W、微波时间15 min的条件下,火麻籽毛油中的δ~9-四氢大麻酚含量由122.63 mg/kg降至57.33 mg/kg,氧化诱导时间由2.28 h升至3.02 h,生育酚含量由708.38 mg/kg升至716.88mg/kg,火麻籽饼残油率由14.36%降至9.98%。火麻籽毛油的酸值和过氧化值略有增加,脂肪酸组成及含量无显著变化。

凝胶渗透色谱-高效液相色谱法测定火麻仁油中Δ9-四氢大麻酚含量

目的建立使用凝胶渗透色谱(GPC)净化,高效液相色谱(HPLC)分析测定火麻仁油中Δ^(9)-四氢大麻酚(Δ^(9)-THC)的检测方法。方法样品经环已烷和乙酸乙酯溶解,经GPC净化分离,再以Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱(150 mm×4.6 mm, 3μm)分离,以乙腈-水流动相洗脱,二级管阵列检测器分析,外标法定量。结果该方法在0~500μg/L浓度内,线性相关系数(r)>0.999,方法检测限(LOD)为0.05 mg/kg,定量限(LOQ)为0.17 mg/kg。加标回收率在84.6%~101.8%之间,相对标准偏差为3.2%~4.7%(n=6)。在实际样品检测中,10种不同品牌的火麻仁油中Δ^(9)-THC含量在0.40~5.82 mg/kg之间。结论该方法稳定性好,灵敏度高,适用于火麻仁油样品中Δ9-THC的检测分析。

大麻中3种酚类成分测定专用固相萃取柱的设计与应用

大麻中的主要成分大麻二酚(CBD)、大麻酚(CBN)和Δ9-四氢大麻酚(Δ9-THC)的含量决定了其性质和应用。在液相色谱分析中,由于大麻提取液中含有较多杂质,需要净化。该文基于大麻中CBD、CBN和Δ9-THC的结构特征及样品基质组成,根据中性氧化铝、硅酸镁和石墨化炭黑的不同表面特征,考察了这3种吸附剂对大麻提取液中叶绿素、多糖、高级脂肪酸酯及重金属离子的去除率和对3种大麻酚的回收率,确定了3种吸附剂的用量分别为1.80 g、0.15 g、0.05 g混合装填成的2 g/6 mL小柱为3种大麻酚类化合物测定的专用固相萃取柱。该小柱对大麻乙酸乙酯-甲醇提取液样品中CBD、CBN和Δ9-THC的回收率分别为98.9%,95.7%和99.2%,对叶黄素、叶绿素a和叶绿素b的去除率分别为96.3%、99.2%和95.5%,对总糖的去除率为98.5%,对脂肪酸甘油酯的去除率为96.9%,对重金属离子的平均去除率为85.4%。优化了色谱分析条件,采用Eclipse Plus C18色谱柱(50 mm×2.1 mm,1.8μm),在1%乙酸水溶液-乙腈(30∶70,v/v)流动相条件下等度洗脱,流速为0.5 mL/min,柱温为30℃,检测波长为210 nm,进样量为1μL,在10 min内可完成样品分析。方法学考察表明,在0.5~50 mg/L范围内,CBD、CBN和Δ9-THC的液相色谱峰面积与其质量浓度呈良好的线性关系,相关系数(R2)分别为0.9983、0.9995和0.9981,检出限分别为0.45μg/L、0.53μg/L和0.38μg/L,加标回收率为90.3%~97.0%、93.7%~95.6%、90.8%~96.1%,相对标准偏差(RSD)分别为2.2%~6.1%、4.1%~8.0%、2.4%~4.8%。研究结果表明,该文以中性氧化铝、硅酸镁和石墨化炭黑制作的复合型大麻酚类成分测定专用固相萃取柱在大麻植物中3种酚类化合物的测定中具有净化杂质、防止色谱柱污染的功能。由于大麻不同部位的化学成分存在差异,在后续的研究中,还要进一步考察小柱对其他杂质的去除情况,使得制备的固相萃取小柱更具有普适性。

基于超高效液相色谱-质谱联用技术对大麻植物中3种成分及化学表型分析

建立了超高效液相色谱-质谱联用(UPLC/PDA-QDa)同时对大麻植物中Δ9-四氢大麻酚(Δ9-THC)、大麻酚(CBN)和大麻二酚(CBD)进行定性与定量分析的方法。缴获的大麻植物用甲醇超声萃取,采用甲醇(含0.1%甲酸)和超纯水为流动相,等度洗脱,流速为0.2 m L/min,经Waters UPLC BEH C_(18)柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm)分离,利用光电二极管阵列检测器(PDA)在220 nm波长下检测,并通过质谱检测器(QDa)对目标洗脱峰进行追踪确证。在0.5~20μg/m L浓度范围内,3种大麻酚类化合物的质量浓度与峰面积呈良好的线性关系,R≥0.999;低、中、高添加水平的平均回收率为82%~102%,相对标准偏差(RSD)在0.4%~4.1%之间。本方法稳定、简便、灵敏,能够满足检测需求。根据Δ9-THC、(Δ9-THC+CBN)/CBD、Δ9-THC/CBD或CBN/CBD表型指数,区分不同产地大麻的化学表型,为大麻植物的检测分析和质量控制提供了有效手段。

火麻油中五种大麻素的HPLC同时检测

火麻油中含有大麻二酚酸(CBDA)、大麻二酚(CBD)、大麻酚(CBN)、Δ9-四氢大麻酚(THC)、四氢大麻酚酸(THCA)等多种大麻素。本文充分考虑其基质的特点,研究火麻油中5种大麻素提取的样品的快捷制备方法,通过优化色谱条件,实现待测组分与基质中杂质峰的有效分离,建立火麻油中五种大麻素的HPLC同时检测方法,并采用精密度实验、重复性实验以及加标回收率实验等对方法加以验证。结果表明,五种大麻素在0.5~50μg/mL范围内有良好的线性关系,定量限(LOQ,S/N=10)均在0.33~0.80 mg/kg之间,回收率在77.1%~103.3%,相对标准偏差RSD≤4.7%。通过对国内4个产地的实际火麻油样品进行检测,发现其中均含有少量的大麻素,其中THC含量均少于0.3%,但是部分产品的THC含量比欧盟国家规定的上限高,存在一定的安全风险。本文所发展的方法为相关检测方法标准的建立奠定了方法学基础。

不同储存条件对大麻化学稳定性的影响

为探讨光照和温度对大麻植物中大麻酚类稳定性的影响,该研究将大麻植物检材以固体粉末和甲醇提取溶液的形式分别在室温(22±2)℃见光、室温(22±2)℃避光、4℃避光、-20℃避光条件下储存20 d后,采用超高效液相(UPLC-PDA)检测分析样本中Δ9-四氢大麻酚(Δ9-THC)、大麻二酚(CBD)和大麻酚(CBN)的含量变化情况。结果表明:3种大麻酚类在不同化学表型大麻中的含量变化趋势相同,固体粉末样本的Δ9-THC、CBD含量在室温光照条件下显著下降,CBN含量基本不变;甲醇提取样本中Δ9-THC、CBN和CBD含量在室温光照条件下均显著下降。避光条件下的室温(22±2)℃及低温(4℃、-20℃)可稳定保存两种形式的大麻样本。大麻中的精神活性成分Δ9-THC的降解满足一级反应动力学规律,光照是影响Δ9-THC降解的重要因素,如果在室温避光条件下储存,大麻或其甲醇提取物可稳定保存,可以更好地指导司法实践活动中短期内大麻检材的取证、运送、保存及鉴定。

RP-HPLC法同时测定火麻仁油中3种大麻酚类成分的含量

目的:建立RP-HPLC法同时测定火麻仁油中大麻二酚、大麻酚和Δ9-四氢大麻酚的含量。方法:采用KromasilC18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.1%醋酸水溶液(73∶27),流速1.0mL.min-1,检测波长220nm,柱温35℃。结果:大麻二酚、大麻酚和Δ9-四氢大麻酚浓度分别在0.125～1.25μg·mL-1(r=0.9996),0.735～7.35μg·mL-1(r=0.9997),3.75～37.5μg·mL-1(r=0.9997)范围内与峰面积呈良好线性关系;平均回收率(n=9)分别为97.2%,98.0%,96.1%。结论:本法准确、快速,灵敏度高,可用于火麻仁油质量控制。

硅胶柱层析-RP-HPLC法同时测定火麻仁中3种大麻酚类化合物的含量

目的:建立同时测定火麻仁中大麻二酚、大麻酚、Δ9-四氢大麻酚含量的方法。方法:采用硅胶柱层析-反相高效液相色谱(RP-HPLC)法。以氯仿-石油醚(4∶1)混合溶剂为淋洗剂,将火麻仁甲醇提取物用硅胶柱层析法纯化处理后,进入HPLC系统进行分析。色谱柱为AgilentZORBAXEclipseXDB-C18(150mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(68∶32),流速为1.0mL·min-1,检测波长为220nm,柱温为30℃。结果:经硅胶柱纯化后,3种大麻酚类物质均能顺利检出。大麻二酚、大麻酚和Δ9-四氢大麻酚的进样量分别在0.02～0.50μg(r=0.9997)、0.01～0.25μg(r=0.9995)和0.01～0.25μg(r=0.9995)范围内与各自峰面积积分值呈良好线性关系;平均加样回收率分别为99.2%、97.6%、97.3%,RSD分别为2.26%、1.93%、2.19%(n均为6)。结论:本法简便、准确、分离度和重复性好,适用于火麻仁的质量控制。

新型靶向化合物——植物大麻素的生物合成途径及研究进展

植物大麻素是具有生物活性的一系列萜类化合物的总称,被认为是大麻的专有成分。具有主要药理活性的植物大麻素为Δ^(9)-四氢大麻酚(Δ^(9)-tetrahydrocannabinol,Δ^(9)-THC)和大麻二酚(Cannabidiol,CBD),均以内源性大麻素受体为靶点,通过激活内源性大麻素系统而参与人体许多生理病理过程,具有广泛的治疗潜力。目前,Δ^(9)-THC、CBD及其类似物或组合制剂,已用于治疗癫痫、癌症化疗患者的呕吐、多发性硬化症痉挛和缓解神经性疼痛以及晚期癌症患者的疼痛。随着对Δ^(9)-THC和CBD应用价值的深度发掘和药用标准化制剂需求量增加,Δ^(9)-THC和CBD在制药工业中实现规模化生产迫在眉睫。通过综述近年来植物大麻素的药理学研究进展,植物大麻素生物合成途径和关键酶的作用机制以及制药工业中植物大麻素的生产策略,旨在探索利用合成生物学技术解决植物大麻素药源问题的潜力,为合成大麻素的微生物工程研发提供理论基础,促进药用大麻素的规模化生产。