温莪术对单侧输尿管梗阻大鼠TGF-β_1、α-SMA、COLⅠ表达的影响

目的:观察温莪术对肾间质纤维化大鼠肾脏的保护作用及对TGF-β1、α-SMA、COLⅠ表达的影响,探讨温莪术肾脏保护作用的机制。方法:取SPF级雄性3个月龄SD大鼠,采用UUO模型,随机分为4组:假手术组(SO组),模型组(M组),莪术组(E组),氯沙坦组(L组)。于术后第7、14、21天时各组随机处死6只大鼠,取左侧肾组织,免疫组织化学法(IHC)检测肾组织中TGF-β1、α-SMA、COLⅠ的表达情况。结果:各时相点模型组、莪术组、氯沙坦组大鼠的肾脏TGF-β1、α-SMA、COLⅠ表达均明显增多,而且模型组三者的表达高于莪术组、氯沙坦组(P<0.05),莪术组与氯沙坦组比较无明显差异。结论:温莪术可以延缓肾间质纤维化的进展,其作用机制是通过抑制TGF-β1表达,下调α-SMA的表达,抑制成纤维细胞活性和COLΙ的合成,抑制EMT和ECM的积聚。

结核分枝杆菌Rv3194c蛋白的表达、纯化及活性鉴定

【目的】Rv3194c基因编码的是结核分枝杆菌的PDZ信号蛋白,本研究对其是否具有黏附素特性进行了探索。【方法】对Rv3194c进行原核表达,然后Rv3194c蛋白分别与透明质酸、硫酸软骨素、Ι型胶原蛋白在不同温度(37、38、39、40°C)的缓冲液中孵育过夜,然后用Western blot和ELISA分析其上清液中组分含量的变化。【结果】Western blot鉴定结果表明,His-Rv3194c蛋白以可溶形式表达,蛋白质的分子质量大小为35 k Da。Western blot表明,39°C实验组的上清中His-Rv3194c蛋白含量(***P<0.001)显著小于其它实验组(37、38、40°C);ELISA表明,39°C实验组的上清中透明质酸(HA)、硫酸软骨素(CS)、Ι型胶原蛋白(CollagenΙ)的含量(***P<0.001)极显著小于其它实验组(37、38、40°C)。【结论】首次证实了Rv3194c蛋白具有黏附素特性,可成为研发新型抗结核药物的靶点蛋白。