番茄碱对棉铃虫的毒性作用机理初探

采取荧光光谱法分析了番茄碱及虫体内钙调蛋白的图谱,从钙调蛋白的角度探讨了番茄碱的作用机理.结果显示:(1)番茄碱对棉铃虫具有毒性,随浓度的增加及饲喂时间的延长,对棉铃虫的杀伤力增强;(2)番茄碱对虫体内钙调蛋白的影响较大,随番茄碱浓度的增加,钙调蛋白的含量逐渐降低;(3)钙离子的加入增强了钙调蛋白的刚性,荧光图谱出现了红移(由350 nm移至416.58 nm);(4)番茄碱的加入破坏了钙调蛋白-钙离子复合物的刚性,荧光图谱出现了蓝移(416.58 nm移至377.65 nm).以上可以说明,番茄碱可能作为钙调蛋白的拮抗剂,拮抗钙调蛋白被钙离子激活的位点,影响其与靶酶的结合而发挥作用.此项的研究为探讨番茄碱的杀虫机理提供了科学依据.

番茄是烟青虫的寄主植物吗?

长期以来,国内有关文献一直将番茄列为烟青虫Helicoverpaassulta的寄主植物,但田间调查结果往往与此矛盾,本研究的目的是阐明番茄是否为烟青虫的寄主植物。室内试验表明,虽然烟青虫成虫在盆栽番茄植株上产卵较多,但无论是用番茄离体嫩叶还是用盆栽植株饲养,初孵幼虫绝大部分在1龄死亡,平均存活时间很短,不会对番茄造成有经济意义的危害;即使用番茄青果饲养的3龄幼虫也不能活到6龄。根据人工饲料饲养结果估测,番茄苷对初孵幼虫的致死中浓度LC50为0·0744%,叶和青果中报道的番茄苷含量已接近或超过此水平,这是幼虫不能存活的主要原因之一。田间调查也表明,烟青虫并不危害番茄。因此,番茄不是烟青虫的寄主植物。文献中的记载很可能是将棉铃虫误判为烟青虫。

番茄成熟过程中番茄碱含量的变化及其抑菌作用

番茄果实粗提液经溶血测定表明 ,番茄青果中含有大量番茄碱 ,其含量随果实成熟变红逐渐降低。番茄碱对青霉、交链孢、灰霉和黑曲霉具有一定抑菌作用 ,但对根霉无抑制作用。番茄碱在中性或偏碱环境中 。

番茄红素对兔动脉粥样硬化形成和氧化损伤的影响

目的观察番茄红素对兔实验性动脉粥样硬化形成和氧化损伤的影响。方法采用高胆固醇喂饲模型;将21只新西兰家兔随机分为3组:对照组、高脂组和番茄红素组,分别给予普通饲料和高胆固醇饮食喂养,番茄红素组另加用番茄红素;于实验开始前1天和开始后第4、8、10周末取空腹血,测定血清超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量。第10周末,测定血清一氧化氮合酶活性及一氧化氮含量。实验结束后,观察主动脉血管病理变化。结果与高脂组相比,番茄红素组主动脉脂质斑块面积减少;血超氧化物歧化酶活性明显增加;血清丙二醛含量减少,一氧化氮含量增加。结论研究结果提示,番茄红素具有较好的抗动脉粥样硬化作用,抗氧化损伤及保护血管内皮功能可能是番茄红素产生抗动脉粥样硬化作用的重要机制之一。

番茄植株中生物碱类对菜青虫(Pieris rapae L.)活性组分的分离和提纯

为寻找和开发不污染环境、不伤害天敌而对菜青虫有活性的行为物质,本研究对番茄植株中的生物碱类进行提取、分离和部分纯化,得到了极性和非极性生物碱类以及番茄苷(tomatine)纯品,与标样对照薄层试验吻合。将提取物对5龄菜青虫进行试验表明:生物碱类及其中的番茄苷对菜青虫有明显拒食作用;番茄苷对菜青虫有抑制生长发育的作用。

番茄碱对乙酰胆碱酯酶活性影响的研究

通过电化学方法分析了番茄碱对乙酰胆碱酯酶活性的影响。结果表明:(1)乙酰胆碱酯酶经盐析、凝胶过滤层析分离纯化,酶比活力达到685.3 U/mg,提纯倍数达到229.5倍;(2)低浓度(1 mmol/L)番茄碱对乙酰胆碱酯酶有明显的激活作用,阳极化扫描的氧化峰电流由1.4μA升至2.8μA;高浓度(10 mmol/L)番茄碱对乙酰胆碱酯酶有明显的抑制作用,阳极化扫描的氧化峰电流由1.4μA降至0.5μA。说明采用循环伏安法、线形扫描电化学手段,对碘化胆碱的电化学行为可分析番茄碱对乙酰胆碱酯酶的活性影响,此项研究为探讨番茄碱的作用机理奠定基础,为研制性能优良的生物传感器提供理论依据。

番茄碱对人红细胞膜Na^+-K^+-ATPase活性影响的研究

以低渗法从新鲜健康人红细胞中制得膜Na+-K+-ATPase,研究了番茄碱 tomatine 对人红细胞膜Na+-K+-ATPase活性的影响.实验结果表明,反应体系中的tomatine浓度低于1mmol/L时,对不依赖钙调蛋白 CaM 激活的Na+-K+-ATPase 称之为基本酶活 影响不大,浓度达1mmol/L时,该酶活性仍保持在95%左右;而在此浓度范围内,tomatine对依赖CaM的Na+-K+-ATPase有明显的抑制作用;其IC50值为0.16mmol/L.说明tomatine对膜酶Na+-K+-ATPase活性的影响可能是通过阻断CaM激活的途径而起作用,从而为进一步研究番茄碱的作用机制奠定了基础.

高效液相色谱法测定番茄及其制品中番茄甙的含量

建立了固相萃取-高效液相色谱(HPLC)测定番茄及番茄制品中番茄甙的方法。样品中的番茄甙经过甲醇提取,PCX固相萃取法净化,乙酰化后,采用高效液相色谱法进行测定。以乙腈和水(90:10)为流动相,经过C18色谱柱分离,紫外检测器检测。结果表明:番茄甙的检出限为0.5mg/kg,方法回收率为90.5%～93.5%,相对标准差为1.7%～3.2%。该方法准确、灵敏、适用于番茄及番茄制品中番茄甙的测定。

番茄碱的研究现状及应用前景

番茄碱具有多种生物活性,能够保护番茄植株在生长过程中免受细菌、真菌、病毒和某些昆虫的侵害,本文对番茄碱的生物活性、药理作用、提取分离方法和应用进行了综述。

番茄碱对人红细胞膜Ca^（2＋）－Mg^（2＋）ATPase活性影响的初步研究

本文研究了番茄碱（ｔｏｍａｔｉｎｅ）对人红细胞膜Ｃａ~２＋－Ｍｇ~２＋ＡＴＰａｓｅ活性的影响。实验结果表明，反应体系中ｔｏｍａｔｉｎｅ的浓度低于１ｍｍｏｌ／Ｌ时，对不依赖钙调蛋白（ＣａＭ）激活的Ｃａ~２＋－Ｍｇ２＋ＡＴＰａｓｅ（称之基本活性）影响不大，浓度达１ｍｍｏｌ／Ｌ时，该酶活性仍保持在９６％左右；而在此浓度范围内，ｔｏｍａｔｉｎｅ对依赖于ＣａＭ激活的Ｃａ~２＋Ｍｇ~２＋ＡＴＰａｓｅｅ有明显的抑制作用；其ＩＣ５０值为０．

大孔吸附树脂分离纯化青番茄中的番茄苷

目的研究探讨大孔吸附树脂分离纯化青番茄中番茄苷的工艺。方法采用HPLC-MS/MS检测青番茄中的番茄苷,以番茄苷浓度为指标,考察大孔吸附树脂分离纯化番茄苷的工艺。结果 HPD-100A大孔吸附树脂最佳工艺条件为:柱体积510mL,上样体积为6BV,先用蒸馏水洗脱,再用95%乙醇洗脱,洗脱体积共为6BV。番茄苷粗品经上述工艺纯化后,含量达到26.48%。结论 HPD-100A大孔吸附树脂对番茄苷有较好的吸附分离性能,是分离纯化番茄苷的最佳大孔吸附树脂。

番茄碱的分离纯化和抑菌活性的研究

目的研究番茄碱的分离纯化工艺及其对大肠杆菌的抑菌活性。方法采用乙醇提取青番茄中的番茄苷,水解后得番茄碱,经HPD-100A大孔吸附树脂分离纯化,采用高效液相-质谱/质谱(HPLC-MS/MS)检测番茄碱含量;采用琼脂扩散滤纸片法研究番茄碱对大肠杆菌的抑制活性,确定番茄碱的最低抑菌浓度,考察不同pH值、温度、作用时间对抑菌活性的影响。结果番茄碱粗品经上述工艺纯化后,含量达到39.05%;番茄碱的最低抑菌浓度为113.2mg/mL,在pH为7、作用时间为12h、温度为90℃条件下抑菌活性最好。结论 HPD-100A大孔吸附树脂对番茄碱具有较好的分离效果,一定浓度下的番茄碱可抑制大肠杆菌生长。

番茄碱对棉铃虫毒性分析

本文主要研究了番茄碱对棉铃虫的毒性作用.实验结果表明:(1)用不同浓度的番茄碱(tom a-tine)浸泡的棉花叶饲喂棉铃虫时,随浓度的增加及时间的延长,对棉铃虫的杀伤力增强.结果显示:饲喂第三天时,1mmol/L的浓度引起48%死亡,2mmol/L时60%死亡,4mmol/L时76%死亡,其IC50为1.78mmol/L.(2)用紫外光谱分析测得虫体内钙调蛋白的含量,结果显示:tom atine对其体内钙调蛋白的影响较大,随tom atine浓度的增加,钙调蛋白的含量逐渐降低.(3)紫外光谱图谱显示:番茄碱与钙调蛋白形成了一种新的物质(其特征吸收峰在190nm^220nm).说明tom atine对棉铃虫的杀伤作用与钙调蛋白有关,此项研究为进一步探讨tom atine的作用分子机制提供了科学参数.

番茄碱的高效液相色谱分析

本文以新疆优势资源里格尔87-5番茄品种为原料,通过乙醇提取,中性Al2O3柱层析法纯化番茄碱粗品,确定了HPLC分析番茄碱的色谱条件:色谱柱型:Zorbax-NH2(4·6mm×150mm),流动相:0·01mol/LNa2HPO4∶乙腈=30∶70,柱温:35℃,流速:1·0mL/min检测波长:205nm。

番茄碱的抑菌活性研究

用滤纸片法测定不同浓度、不同pH值番茄碱溶液对鱼害粘球菌、荧光假单胞茵、嗜水气单胞茵和水霉的抑菌活性，结果显示，pH6．5－7．0番茄碱溶液对鱼害粘球菌的抑菌活性较强，质量浓度对其影响不明显；pH6．5～7．7条件下不同浓度番茄碱溶液对荧光假单胞菌的抑菌活性均弱；pH7．0番茄碱溶液对嗜水气单胞菌的抑菌活性较强，质量浓度对其影响较小；pH6．5～7．0番茄碱溶液对水霉的抑菌活性很强，与质量浓度呈正相关性，说明番茄碱是一种很好的抵抗水产养殖中水霉菌的天然活性物质。

番茄碱的高效液相色谱分析

以新疆优势资源里格尔87-5番茄品种为原料,通过乙醇提取,中性Al2O3柱层析法纯化番茄碱粗品,确定了HPLC分析番茄碱的色谱条件:色谱柱型为Zorbax-NH2(4.6mm×150mm),流动相:浓度0.01mol/L的Na2HPO4与乙腈体积比为30∶70,柱温为35℃,流速为1.0mL/min,检测波长为205nm。

番茄不同成熟时期品质变化及可利用性研究

加工番茄在机械采收过程中混有约10%~20%的未成熟果,由于未达到番茄酱等加工所要求的成熟度而被废弃,造成资源浪费。为了将这部分资源合理利用,作者对其品质特性进行系统性研究。选取IVF3535、8210、金番11、331共4个加工番茄品种,分别探究其在青熟期、变色期、坚熟期和完熟期等阶段成熟过程中与风味、营养相关的品质变化。结果表明,在成熟过程中,4种加工番茄干物质呈先降低后升高趋势,可溶性固形物与可溶性糖无明显变化,其中品种IVF3535的干物质、可溶性固形物和可溶性糖质量分数均优于其他3个品种。番茄红素、六氢番茄红素、八氢番茄红素和β-胡萝卜素的积累量显著上升,变色期时已有一定积累,而可滴定酸、番茄碱明显下降,且变色期后番茄碱质量分数与完熟期无显著性差异(P>0.05),因而处于变色期及变色期之后阶段的废弃番茄可挑选出再利用。该研究可为番茄加工产业对未成熟番茄的高效利用提供参考。

高效液相色谱-串联质谱法同时测定番茄中的番茄苷与番茄碱

利用高效液相色谱-串联质谱法,建立番茄中番茄苷和番茄碱2种主要生物碱的同时检测方法。样品经匀浆提取后,利用C18固相萃取柱净化,以5 mmol/L乙酸铵(含0.05%甲酸)-乙腈为流动相,Agilent Proshell 120 ECC18进行分离,三重四极杆检测器,多反应监测模式进行检测。结果表明,番茄苷在50~1000 ng/mL范围内线性良好,相关系数为0.9991。番茄碱在5~100 ng/mL范围内线性良好,相关系数为0.9994。对番茄苷和番茄碱进行3个水平的添加回收实验,结果表明添加回收率在85.6%~105%之间,相对标准偏差在1.0%~6.8%之间。所建方法简单、快速、灵敏度高、重复性好,可用于番茄中番茄苷与番茄碱的快速、定量检测。实际样品检测结果表明,番茄中番茄苷的含量明显高于番茄碱。

排风藤茎叶果中番茄碱的含量测定

目的:采用RP-HPLC法测定排风藤茎叶果中番茄碱的含量.方法:建立RP-HPLC法测定排风藤茎、叶、果中番茄碱含量的方法.色谱柱为YMC-Pack ODS-AA(150mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(90∶10,v.v-1),流速为1mL.min-1,柱温为30℃,紫外检测波长为203nm.线性范围:0.10～0.60mg.mL-1(相关系数r=0.999 7).结果:测得排风藤茎叶果中番茄碱的含量分别为1.104mg.g-1、0.494mg.g-1、1.030mg.g-1;RSD分别为2.60%、2.40%、2.80%;平均回收率为97.6%,RSD为2.93%(n=9).结论:该方法快速、简便、准确度高,可为开发利用三峡库区民间中草药排风藤提供研究基础.

番茄碱通过AMPK/COX-2通路调控食管癌细胞凋亡的机制研究

目的探究番茄碱通过单磷酸腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/环氧合酶-2(COX-2)通路抑制食管癌凋亡的机制研究。方法将人食管癌EC9706细胞随机分为对照组、低剂量实验组、中剂量实验组、高剂量实验组、高剂量+抑制药组;对照组细胞不做处理,低、中、高剂量实验组细胞分别给予1.0、2.0和4.0μmol·L^(-1)的番茄碱处理细胞48 h,高剂量+抑制药组使用4.0μmol·L^(-1)番茄碱和10μmol·L^(-1)AMPK抑制药Dorsomorphin共同处理细胞48 h。用细胞计数试剂盒8(CCK8)法检测细胞存活率;用流式细胞术和TUNEL法检测细胞凋亡情况;用蛋白质印迹(Western blot)法检测细胞相关蛋白表达情况。结果对照组,低、中、高剂量实验组及高剂量+抑制药组细胞TUNEL阳性细胞率分别为(3.73±0.60)%、(12.48±1.05)%、(17.03±1.29)%、(33.04±2.25)%和(13.99±1.12)%,Ki67蛋白表达水平分别为0.98±0.09、0.79±0.07、0.59±0.09、0.33±0.03和0.71±0.07,胱天蛋白酶(Cl-caspase-3)蛋白表达水平分别为0.30±0.04、0.59±0.05、0.75±0.07、1.00±0.06和0.54±0.05,p-AMPK蛋白表达水平分别为0.28±0.05、0.56±0.06、0.73±0.04、1.09±0.10和0.69±0.04;COX-2蛋白表达水平分别为1.13±0.08、0.74±0.07、0.57±0.07、0.39±0.04和0.72±0.07。低、中、高剂量实验组上述指标与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);高剂量+抑制药组上述指标与高剂量实验组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论番茄碱可通过激活AMPK/COX-2信号通路抑制食管癌细胞增殖、诱导凋亡。