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莪术二酮对凝血酶诱导的人血小板整合素αⅡbβ3活化的抑制作用
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作者 程紫薇 史寒冰 +2 位作者 刘沁华 夏泉 吴鸿飞 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期2038-2041,共4页
目的研究莪术二酮对凝血酶诱导的人血小板整合素αⅡbβ3活化的抑制作用。方法健康志愿者全血制备成洗涤血小板,分别以终浓度100、150、200μmol/L莪术二酮与洗涤血小板共孵育,凝血酶作为诱导剂,以不加莪术二酮的血小板同步处理为对照组... 目的研究莪术二酮对凝血酶诱导的人血小板整合素αⅡbβ3活化的抑制作用。方法健康志愿者全血制备成洗涤血小板,分别以终浓度100、150、200μmol/L莪术二酮与洗涤血小板共孵育,凝血酶作为诱导剂,以不加莪术二酮的血小板同步处理为对照组,采用血小板聚集实验检测凝血酶的最佳浓度和血小板的聚集功能,流式细胞术检测血小板的活化(P-选择素)和整合素αⅡbβ3活化(PAC-1)情况,Western blot法检测Integrinβ3相关蛋白表达。结果与对照组比较,莪术二酮可抑制凝血酶诱导的血小板聚集、P-选择素的表达、PAC-1的结合能力以及Talin 1、p-Src、p-Integrinβ3蛋白表达(P<0.05),但莪术二酮的作用弱于阳性药替罗非班(P<0.05)。结论莪术二酮可以通过降低Talin 1和p-Src蛋白表达,从而抑制整合素αⅡbβ3活化,进而抑制凝血酶诱导的血小板活化发挥抗血小板的作用。 展开更多
关键词 莪术二酮 血小板 活化和聚集 整合素αⅱbβ3
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血小板膜糖蛋白αⅡbA477P(A446P)突变对αⅡbβ3复合物表达的影响(英文)
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作者 袁小瑜 陈方平 +4 位作者 夏昆 付敢 蹇在伏 解勤之 王光平 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期712-717,共6页
目的:探讨血小板膜糖蛋白αⅡbA477P(A446P)突变对αⅡbβ3蛋白表达的影响。方法:用重叠延伸PCR法对正常的αⅡb-pcDNA3.1+质粒载体进行体外定点诱变,构建了αⅡbA477P突变质粒载体;经体外真核细胞COS-7细胞转染试验后,从转录水平、蛋... 目的:探讨血小板膜糖蛋白αⅡbA477P(A446P)突变对αⅡbβ3蛋白表达的影响。方法:用重叠延伸PCR法对正常的αⅡb-pcDNA3.1+质粒载体进行体外定点诱变,构建了αⅡbA477P突变质粒载体;经体外真核细胞COS-7细胞转染试验后,从转录水平、蛋白质水平和膜表面复合物水平检测突变体在真核细胞内的表达。结果:突变的αⅡbA477P(A446P)基因在真核细胞内有转录,Western印迹显示细胞内有αⅡb蛋白的表达,但突变αⅡbA477P(A446P)β3复合物在细胞膜表面的表达量仅为正常αⅡbβ3复合物的12.95%。结论:αⅡbA477P(A446P)显著降低了αⅡbβ3复合物在细胞膜表面的表达,其机制可能是该位点的突变干扰了αⅡb和β3正常结合或者影响了αⅡb蛋白的正常构型。 展开更多
关键词 血小板无力症 整联蛋白αⅱbβ3 β-螺旋 突变 表达
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整合素αⅡbβ3缺陷对血小板由内到外信号传导的影响
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作者 唐雪元 陈方平 +4 位作者 蹇在伏 王光平 解勤之 赵谢兰 刘巍 《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第3期207-210,共4页
目的 :探讨整合素αⅡbβ3缺陷对血小板由内到外信号传导的影响。方法 :采用DNA序列分析、流式细胞术、RT PCR和Westernblotting等检测细胞中转染cDNA的存在、表达及细胞结合PAC 1、纤维蛋白原 (fibrinogen ,Fb)的能力。结果 :血小板无... 目的 :探讨整合素αⅡbβ3缺陷对血小板由内到外信号传导的影响。方法 :采用DNA序列分析、流式细胞术、RT PCR和Westernblotting等检测细胞中转染cDNA的存在、表达及细胞结合PAC 1、纤维蛋白原 (fibrinogen ,Fb)的能力。结果 :血小板无力症 (GT)患者整合素αⅡbβ3明显低下 ,且血小板在ADP激活后不能结合PAC 1,转染β3和αⅡb(突变αⅡbR995A 或正常αⅡb)cDNA的CHO细胞株分别表达αⅡbR995A β3和αⅡbβ3,并且突变株中国仓鼠卵巢细胞(Chinesehamsterovary ,CHO)细胞αⅡb基因 30外显子上第 30 77和 30 78位碱基由CG突变为GC ,导致第 995位精氨酸被替换为丙氨酸 ;在未活化的情况下 ,αⅡbβ3CHO细胞几乎不结合PAC 1,但能结合Fb ,而αⅡbR995Aβ3CHO细胞能结合PAC 1,且Fb明显增加。结论 :αⅡbR995A 突变能诱导血小板内到外信号传导 ,使αⅡbR995Aβ3表现为激活型受体 ;而GT患者却因整合素αⅡbβ3缺陷使αⅡbβ3介导的血小板由内到外信号传导受阻 ,使该GT患者表现出血小板聚集异常。 展开更多
关键词 整合素αⅱbβ3 血小板无力症 信号传递 实验研究 抗血小板治疗
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αⅡbβ3同源模拟和环形RGD药物小分子设计 被引量:2
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作者 罗明艳 陈梅宗 李任植 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期297-301,共5页
血小板表面的整合蛋白α_(Ⅱb)β_3对血栓的形成具有很重要的调控作用,α_(Ⅱb)β_3与纤维蛋白原上的RGD特征序列结合,促进血小板凝集进而形成血栓。这样可以在理论上设计一个环形RGD小分子(RGD-c)与α_(Ⅱb)β_3蛋白结合,阻断其与纤维... 血小板表面的整合蛋白α_(Ⅱb)β_3对血栓的形成具有很重要的调控作用,α_(Ⅱb)β_3与纤维蛋白原上的RGD特征序列结合,促进血小板凝集进而形成血栓。这样可以在理论上设计一个环形RGD小分子(RGD-c)与α_(Ⅱb)β_3蛋白结合,阻断其与纤维蛋白原的结合位点,进而阻断血栓形成。以糖蛋白α_vβ_3(pdb代码1jv2)作为模板,利用modeller8v2软件进行同源模拟得到α_(Ⅱb)β_3三维模型。而小分子则以RGD序列为主,两边各加一个氨基酸X、Y,X和Y之间用一个二硫键相连,通过改变X和Y,重复优化过程则可得到不同的小分子模型,将其与α_(Ⅱb)β_3进行分子对接,可以找出比较理想的XY组合。 展开更多
关键词 αⅱbβ3 同源模拟 对接 RGD-C MM
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CHO细胞模型中整合素β3胞浆段尾部NITY基序对αⅡbβ3介导的细胞功能的影响 被引量:1
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作者 杨纪春 施小凤 +4 位作者 黄建松 龙章彪 肖兵 阮铮 奚晓东 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期768-773,共6页
目的:探讨整合素β3胞浆段尾部NITY基序对αⅡbβ3介导的细胞功能的影响。方法:利用中国仓鼠卵巢(CHO)细胞模型建立共表达人类野生型整合素αⅡb和野生型β3或突变型β3ΔNITY(β3胞浆段缺失NITY基序)稳转的细胞株,通过细胞在固相化纤... 目的:探讨整合素β3胞浆段尾部NITY基序对αⅡbβ3介导的细胞功能的影响。方法:利用中国仓鼠卵巢(CHO)细胞模型建立共表达人类野生型整合素αⅡb和野生型β3或突变型β3ΔNITY(β3胞浆段缺失NITY基序)稳转的细胞株,通过细胞在固相化纤维蛋白原上的黏附及伸展试验检测各稳转细胞株的黏附及伸展功能,通过免疫共沉淀方法检测蛋白相互作用。结果:成功建立了CHO-αⅡbβ3和CHO-αⅡbβ3ΔNITY细胞株,稳定表达野生型整合素αⅡbβ3的CHO细胞具有在固相化纤维蛋白原上的黏附和伸展能力,与CHO-αⅡbβ3细胞株相比,CHO-αⅡbβ3ΔNITY细胞株的黏附能力减弱,但是黏附后的伸展能力无明显改变。免疫共沉淀结果显示,kindlin-2能够结合野生型整合素β3,但与突变型整合素β3结合的量显著减少。结论:整合素β3胞浆段缺失NITY基序引起细胞黏附功能受损,这种缺失突变导致整合素β3与kindlin-2蛋白的结合受到抑制,从而部分抑制了整合素β3的信号转导。 展开更多
关键词 整合素β3 CHO细胞模型 β3胞浆NITY基序 αⅱbβ3介导的细胞功能
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293T细胞模型中整合素β3胞浆尾段不同氨基酸基序对αⅡbβ3介导的细胞功能的影响
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作者 李东亚 毛建华 +7 位作者 张威 陈欣洁 肖兵 阮铮 王韵 蒋国雄 施小凤 奚晓东 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期227-232,共6页
目的:建立含有Calpain切割相关的β3胞浆尾段突变体的293T细胞模型,研究β3胞浆尾段不同氨基酸基序对αⅡbβ3介导的细胞功能的影响。方法:利用293T细胞模型建立共表达人类野生型整合素αⅡb和野生型β3或突变型β3(β3ΔNITY(β3胞浆... 目的:建立含有Calpain切割相关的β3胞浆尾段突变体的293T细胞模型,研究β3胞浆尾段不同氨基酸基序对αⅡbβ3介导的细胞功能的影响。方法:利用293T细胞模型建立共表达人类野生型整合素αⅡb和野生型β3或突变型β3(β3ΔNITY(β3胞浆段截去NITY基序)、β3Δ754(β3胞浆段截去羧基末端最后8个氨基酸TNITYRGT)、β3Δ759(β3胞浆段截去羧基末端最后3个氨基酸RGT)的稳转细胞株,通过细胞在固相化纤维蛋白原上的黏附及伸展试验检测各稳转细胞株的黏附及伸展功能。结果:成功建立了293T-αⅡbβ3ΔNITY、293T-αⅡbβ3Δ754、293T-αⅡbβ3Δ759、293T-αⅡbβ3细胞株,稳定表达野生型整合素β3全长的293T--αⅡbβ3细胞株较293T细胞具有良好的在固相化纤维蛋白原上的黏附和伸展能力,可以作为血小板的替代模型,而293T-αⅡbβ3ΔNITY稳转细胞株的黏附和伸展能力稍低于293T-αⅡbβ3稳转细胞株,但293T-αⅡbβ3Δ754细胞、293T-αⅡbβ3Δ759细胞株的黏附和伸展能力均明显受损。结论:对整合素β3介导的细胞伸展功能,RGT基序至关重要,而NITY并非必不可少,同时所建β3胞浆尾段不同突变体的293T细胞株也为进一步的质谱分析数据库比对奠定了基础。 展开更多
关键词 整合素αⅱbβ3 293T细胞 整合素β3胞浆尾端 伸展 粘附 细胞功能
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G蛋白与整合素αⅡbβ3的双向信号转导 被引量:2
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作者 杨纪春 施小凤 奚晓东 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期251-256,共6页
整合素是一类细胞表面受体家族分子,通过双向信号转导参与细胞与细胞外基质、细胞与细胞的粘附以及细胞的迁移.整合素αⅡbβ3(GPⅡb-Ⅲa)特异表达于巨核/血小板系,并且是其含量最多的膜糖蛋白,介导血小板的粘附、伸展、聚集等.G蛋白在... 整合素是一类细胞表面受体家族分子,通过双向信号转导参与细胞与细胞外基质、细胞与细胞的粘附以及细胞的迁移.整合素αⅡbβ3(GPⅡb-Ⅲa)特异表达于巨核/血小板系,并且是其含量最多的膜糖蛋白,介导血小板的粘附、伸展、聚集等.G蛋白在整合素αⅡbβ3双向信号转导中发挥重要作用,其中较受关注的是:异源三聚体G蛋白和小G蛋白Rap1参与整合素αⅡbβ3的内向外信号转导;小G蛋白(Rho A、Rac等)和Gα13参与整合素αⅡbβ3的外向内信号转导.在蛋白质结构与功能关系的层面,本文总结了G蛋白的结构、分类、功能以及近年来G蛋白在整合素αⅡbβ3双向信号转导中作用的研究进展. 展开更多
关键词 G蛋白 整合素αⅱβ3双向信号
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绿色荧光蛋白(GFP)融合于人整合蛋白α_(Ⅱb)C端不影响α_(Ⅱb) β_3复合物在CHO细胞正常表达 被引量:1
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作者 付斌 傅敢 +3 位作者 陈方平 刘巍 黄细莲 肖广芬 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2005年第2期182-187,共6页
本研究选择αⅡb作为靶蛋白观察绿色荧光蛋白(GFP)标记对αⅡbβ,复合物生物合成过程和表达的影响。 从人αⅡb表达载体p3.1-2b中经PCR扩增的αⅡb基因全长cDNA,插入表达载体pEGFP-N1中构建αⅡbGFP融合蛋 白表达载体,测序正确后利用脂... 本研究选择αⅡb作为靶蛋白观察绿色荧光蛋白(GFP)标记对αⅡbβ,复合物生物合成过程和表达的影响。 从人αⅡb表达载体p3.1-2b中经PCR扩增的αⅡb基因全长cDNA,插入表达载体pEGFP-N1中构建αⅡbGFP融合蛋 白表达载体,测序正确后利用脂质体将重组质粒与表达人整合蛋白β3亚基的真核表达质粒p3.1-3a共转染CHO 细胞,对转染后细胞用Western blot方法鉴定αⅡbGFP基因在CHO细胞中的表达并用激光共聚焦显微镜确定融合 蛋白的细胞内定位。结果表明:经限制性内切酶酶切图谱分析和DNA序列测定证实目的基因已插入重组质粒, Western blot证明转基因CHO细胞有人αⅡbGFP基因的表达,融合蛋白细胞内定位研究显示αⅡbGFP可以由内质网 转运至高尔基体。结论:成功构建了人αⅡbGFP融合蛋白真核表达载体;GFP融合于αⅡbC端不影响αⅡbβ3复合物 在CHO细胞的正常表达。 展开更多
关键词 绿色荧光蛋白 整合蛋白αⅱb αⅱbβ3复合物 CHO细胞 血小板无力症
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整合素αⅡbβ3在血小板中作用的研究现状 被引量:1
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作者 朱奕霖 彭婕 施小凤 《国际输血及血液学杂志》 CAS 2023年第1期26-33,共8页
近年,心脑血管血栓性疾病的发生率逐年增高,而引起血栓性疾病的首要原因是病理性血栓的形成。血小板在止血和血栓形成中发挥重要作用。整合素αⅡbβ3是血小板表面表达最丰富的受体,且是血小板活化聚集的终末通路。整合素αⅡbβ3拮抗剂... 近年,心脑血管血栓性疾病的发生率逐年增高,而引起血栓性疾病的首要原因是病理性血栓的形成。血小板在止血和血栓形成中发挥重要作用。整合素αⅡbβ3是血小板表面表达最丰富的受体,且是血小板活化聚集的终末通路。整合素αⅡbβ3拮抗剂,如阿昔单抗、依替巴肽及替罗非班,具有抑制血栓形成作用,但其在抗血栓的同时可导致严重出血,因此如何在抗血栓的同时降低出血发生率是相关研究热点。整合素αⅡbβ3可介导血小板双向信号转导,因此研发新型拮抗剂,选择性地阻断细胞外向细胞内信号转导而不影响细胞内向细胞外信号转导,可发挥抗血栓作用而不导致出血,是新的抗血栓策略。笔者拟重点对整合素αⅡbβ3及其在血小板相关信号通路中的作用,以及各种靶向整合素αⅡbβ3的抗血栓药物进行介绍,为临床抗血栓治疗提供新思路。 展开更多
关键词 血小板 整合素类 血栓形成 止血 整合素αⅱbβ3 拮抗剂
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整合素α_(Ⅱb)β_3信号转导通路相关蛋白的研究进展 被引量:2
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作者 李益婷 徐杨 +3 位作者 蔡镇西 张佳丽 刘佳 奚晓东 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期1311-1314,共4页
血小板整合素αⅡbβ3与配体间的相互作用在血栓形成过程中起重要作用,各种激动剂与血小板上相应的受体结合后,启动整合素αⅡbβ3内向外信号转导通路,导致整合素αⅡbβ3活化,与其配体结合进一步启动外向内信号转导。双向信号转导过程... 血小板整合素αⅡbβ3与配体间的相互作用在血栓形成过程中起重要作用,各种激动剂与血小板上相应的受体结合后,启动整合素αⅡbβ3内向外信号转导通路,导致整合素αⅡbβ3活化,与其配体结合进一步启动外向内信号转导。双向信号转导过程中涉及多种蛋白,talin、kindlin和Src是目前研究较多的蛋白,其中talin和kindlin是整合素αⅡbβ3内向外信号转导过程中的重要蛋白,Src则是外向内信号转导的重要蛋白。文章就talin、kindlin和Src研究进展进行综述。 展开更多
关键词 整合素αⅱbβ3 信号转导 TALIN kindlin SRC
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表面等离激元共振生物传感器研究整合素蛋白α_(Ⅱb) β_3与RGD多肽的特异结合 被引量:1
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作者 路英杰 张帆 隋森芳 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第5期796-800,共5页
整合素蛋白αⅡbβ3 是血小板上的一种钙依赖性膜受体 ,其胞外结构域可与含有RGD序列的肽链特异结合 .通过将含有NTA DOGS的磷脂单分子层膜转移到 5 0nm厚的金膜上 ,制备了一种含有NTA头部的表面等离激元共振 (SPR)传感器敏感膜 .设计... 整合素蛋白αⅡbβ3 是血小板上的一种钙依赖性膜受体 ,其胞外结构域可与含有RGD序列的肽链特异结合 .通过将含有NTA DOGS的磷脂单分子层膜转移到 5 0nm厚的金膜上 ,制备了一种含有NTA头部的表面等离激元共振 (SPR)传感器敏感膜 .设计并合成了含有 6个组氨酸和RGD基团的His tagged短肽P1,并利用SPR生物传感器 ,对整合素蛋白与含有RGD配基的支撑平面膜的特异相互作用以及Ca2 + 、Mn2 + 对该相互作用的影响进行了研究 .结果表明 ,NTA敏感膜能很好地将P1锚定在支撑平面膜表面 ,并能够保证P1维持一个有效的定向 .将Ca2 + 从低结合位点去除或加入Mn2 + 都能够增加整合素蛋白的配基结合活性 .二价阳离子对整合素蛋白配基结合能力的调节作用 。 展开更多
关键词 表面等离激元共振生物传感器 整合素蛋白 αⅱbβ3 RGD多肽 特异结合
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人幼稚巨核细胞膜整合素αⅡbβ3功能的研究 被引量:2
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作者 谢桂岚 李志祥 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期268-269,共2页
关键词 人幼稚巨核细胞 整合素αⅱbβ3 血小板膜功能 单克隆抗体 流式细胞仪 免疫电镜
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Anti-human platelet tetraspanin (CD9) monoclonal antibodies induce platelet integrin αⅡbβ3 activation in a Fc receptor-independent fashion 被引量:1
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作者 武怀珠 李家增 +5 位作者 彭林 刘汉芝 武文杰 周玉玲 侯庆明 孔德洪 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2001年第1期14-18,共5页
characterize the activation of platelet integrin αⅡbβ3 induced by two anti human platelet tetraspanin monoclonal antibodies (mAbs), HI117 and SJ9A4, and investigate their potential mechanism of action Method... characterize the activation of platelet integrin αⅡbβ3 induced by two anti human platelet tetraspanin monoclonal antibodies (mAbs), HI117 and SJ9A4, and investigate their potential mechanism of action Methods Using 125 I labeled human fibrinogen (Fg), specific Fg binding to human platelets induced by HI117 and SJ9A4 was measured Results HI117 and SJ9A4 (10?μg/ml and 20?μg/ml) induced specific Fg binding to human platelets, suggesting that the two mAbs evoked activation of platelet integrin αⅡbβ3 Further study indicated that HI117 and SJ9A4 induced integrin αⅡbβ3 activation independent of platelet Fc receptors, and that HI117 and SJ9A4 induced integrin αⅡbβ3 activation was inhibited by pretreatment of platelets with sphingosine, aspirin, apyrase, and/or PGI 2 Conclusions Anti platelet tetraspanin (CD9) mAbs, HI117 and SJ9A4, can induce platelet integrin αⅡbβ3 activation independent of Fc receptors Three signaling pathways, namely thromboxane, secreted ADP, and cAMP pathways, may be involved in the process, with protein kinase C activation presumably being the common step of the three pathways 展开更多
关键词 platelets integrin αⅱbβ3 TETRASPANIN monoclonal antibodies
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一例GPⅡb基因突变导致血小板无力症的诊断 被引量:1
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作者 王静 李怀远 +1 位作者 郁婷婷 傅启华 《检验医学》 CAS 北大核心 2010年第12期925-928,共4页
目的对1例血小板无力症(GT)患者进行实验诊断,分析引起血小板膜糖蛋白(GP)缺陷的突变基因。方法通过对先证者凝血常规、血小板计数、血小板聚集功能、出血时间、GPⅡb/Ⅲa(CD41/CD61)含量等项目的检测和血涂片中血小板形态及分布的观察... 目的对1例血小板无力症(GT)患者进行实验诊断,分析引起血小板膜糖蛋白(GP)缺陷的突变基因。方法通过对先证者凝血常规、血小板计数、血小板聚集功能、出血时间、GPⅡb/Ⅲa(CD41/CD61)含量等项目的检测和血涂片中血小板形态及分布的观察,进行临床表型诊断。通过聚合酶链反应(PCR)扩增结合测序的方法,分析先证者GPⅡb/Ⅲa基因的所有外显子区及其侧翼序列,家系成员仅在相应突变区域进行PCR扩增和测序。同时以100名健康人作为对照进行分析,以排除基因多态性。结果先证者凝血常规检测和血小板计数正常,但出血时间延长,血小板聚集功能异常;表现为对多种生理性诱聚剂反应低下,但对瑞斯托霉素反应正常,血块退缩不良;流式细胞术检测CD41、CD61含量显著降低;血涂片中血小板散在,无聚集现象。经测序,发现先证者GPⅡb基因23号外显子存在18183A>C杂合变异,导致GPⅡb蛋白Q778P替换。与100名健康对照者测序比较,排除基因多态性,证实其为基因突变。结论 GPⅡb基因的Q778P杂合突变是导致该先证者患GT的原因之一。 展开更多
关键词 血小板膜糖蛋白 整合素αⅱbβ3 基因突变 血小板无力症
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一种新的整合素α_(Ⅱb)Pro126His突变导致的遗传性血小板无力症 被引量:3
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作者 沈卫章 李淑梅 +3 位作者 姜玉珍 王学锋 丁秋兰 王鸿利 《诊断学理论与实践》 2005年第6期451-454,461,共5页
目的:对1例遗传性血小板无力症(GT)先证者及其家系成员进行表型和基因诊断,并探讨其分子发病机制。方法:通过血小板计数、血涂片观察血小板、出血时间测定、凝血象检查和血小板聚集试验进行表型诊断;流式细胞术检测血小板表面α_(Ⅱb)和... 目的:对1例遗传性血小板无力症(GT)先证者及其家系成员进行表型和基因诊断,并探讨其分子发病机制。方法:通过血小板计数、血涂片观察血小板、出血时间测定、凝血象检查和血小板聚集试验进行表型诊断;流式细胞术检测血小板表面α_(Ⅱb)和β_3的含量;PCR法扩增先证者基因组DNAα_(Ⅱb)和β_3的所有外显子及其侧翼序列;PCR产物采用末端标记双脱氧法进行直接基因测序,对发现的突变位点采用AS-PCR法扩增先证者及其家系成员和正常人相对应的片段。结果:先证者血小板计数正常、血涂片血小板分散不聚集,出血时间明显延长,凝血象正常,对ADP、凝血酶、肾上腺素、胶原、花生四烯酸等多种诱聚剂反应低下,而对瑞斯托霉素的反应基本正常;先证者血小板表面未检测到α_(Ⅱb),β_3阳性血小板仅占8%,平均荧光强度明显减弱;先证者在α_(Ⅱb)基因外显子4存在C470A纯合突变,导致α_(Ⅱb)氨基酸序列Pro126His(P126H)替换。父母为近亲婚配,均为该位点的杂合突变。AS-PCR排除了该突变为基因多态性的可能。结论:整合素α_(Ⅱb)基因外显子4C470A(P126H)纯合错义突变是导致该患者GT的分子机制,是国际上首次报道的一种新的整合素α_(Ⅱb)基因错义突变。 展开更多
关键词 血小板无力症 整合素αⅱbβ3 流式细胞术 突变 核酸测序
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血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体与子痫前期 被引量:1
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作者 程淑清 黄亚绢 《国际妇产科学杂志》 CAS 2010年第1期27-30,共4页
糖蛋白Ⅱb/Ⅲa(glycoproteinⅡb/Ⅲa,GPⅡb/Ⅲa)受体是血小板膜上最丰富的一种蛋白,在血小板聚集、血栓形成过程中起关键性调节作用。子痫前期是一种病因不明伴有多系统功能障碍的病理妊娠,表现为高血压、蛋白尿、高凝血、高纤溶倾向,... 糖蛋白Ⅱb/Ⅲa(glycoproteinⅡb/Ⅲa,GPⅡb/Ⅲa)受体是血小板膜上最丰富的一种蛋白,在血小板聚集、血栓形成过程中起关键性调节作用。子痫前期是一种病因不明伴有多系统功能障碍的病理妊娠,表现为高血压、蛋白尿、高凝血、高纤溶倾向,是围产期孕产妇死亡的主要原因,又是产妇远期并发心脑血管疾病的高危因素。GPⅡb/Ⅲa受体在子痫前期发病过程中起"承前启后"的调节作用,有可能为子痫前期的病因探索、临床治疗提供新的突破。 展开更多
关键词 糖蛋白b/Ⅲa 整合素αⅱbβ3 子痫前期 血栓形成
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血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa基因多态性与血小板输注疗效的关系 被引量:8
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作者 顾萍 王静 +2 位作者 张帆 姚如恩 傅启华 《检验医学》 CAS 2013年第9期770-774,共5页
目的通过对98例患者血小板膜糖蛋白(GP)Ⅱb/Ⅲa基因多态性及血小板抗体的检测,探讨其与血小板输注疗效的关系。方法采用聚合酶链反应(PCR)扩增结合测序的方法检测患者GPⅡb/Ⅲa基因中5个外显子的9个多态性位点,采用固相凝集法检测患者... 目的通过对98例患者血小板膜糖蛋白(GP)Ⅱb/Ⅲa基因多态性及血小板抗体的检测,探讨其与血小板输注疗效的关系。方法采用聚合酶链反应(PCR)扩增结合测序的方法检测患者GPⅡb/Ⅲa基因中5个外显子的9个多态性位点,采用固相凝集法检测患者血小板抗体。结果 98例患者中只检测到GPⅡb基因的第26外显子存在T18809G变异,导致Ile843Ser多态性,产生HPA-3aa/ab/bb血型的3种基因型。此3种基因型均与血小板抗体产生相关,造成血小板输注无效。98例患者的血小板抗体阳性率为52.0%,1 468袋血小板输注总有效率为77.8%,其中65袋配合性血小板输注的有效率为83.1%。3种基因型之间均无明显差异。结论血小板特异性及相关性抗体的存在是造成血小板输注无效的主要免疫性因素,GPⅡb基因上的HPA-3多态性与血小板输注无效有关。 展开更多
关键词 血小板抗原 血小板膜糖蛋白 整合素αⅱbβ3 血小板输注无效 基因多态性
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利用显性阴性模型对整合素αIIbβ3介导的信号转导的初步研究 被引量:1
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作者 吕媛婧 苏晓瑜 +1 位作者 阮铮 奚晓东 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第4期1026-1031,共6页
本研究目的是明确整合素β3亚单位胞浆段序列在整合素αIIbβ3介导的信号转导中的重要作用,并进一步了解在无αIIb亚单位存在的条件下其对信号转导及特异性的影响程度。运用由IL-2R胞外段和跨膜段(Tac)与整合素β3胞浆段组成的融合蛋白(... 本研究目的是明确整合素β3亚单位胞浆段序列在整合素αIIbβ3介导的信号转导中的重要作用,并进一步了解在无αIIb亚单位存在的条件下其对信号转导及特异性的影响程度。运用由IL-2R胞外段和跨膜段(Tac)与整合素β3胞浆段组成的融合蛋白(Tac/β3),使其在表达GPIbIX、整合素αIIbβ3的CHO细胞株(IbIX/IIbIIIa-CHO细胞株)中稳定表达(即得到IbIX/IIbIIIa-CHO/Tac-762细胞),并进行多项试验,包括在固相纤维蛋白原的伸展、稳定黏附试验、细胞纤维蛋白凝块回缩功能试验以及游离纤维蛋白原结合试验(分别代表了外向内及内向外信号转导事件)。结果表明,在稳定表达有Tac/β3的IbIX/IIbIIIa-CHO/Tac-762细胞中αIIbβ3介导的双向信号转导严重受到抑制。结论:Tac/β3可以在IbIX/IIbIIIa-CHO/Tac-762细胞中发挥显著有效的显性阴性作用,并且证实整合素β3亚单位胞浆段的单独存在即可影响由αIIbβ3介导的双向信号转导。 展开更多
关键词 显性阴性 整合素 αⅱbβ3 信号转导
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整合素β3亚基不同片段在酵母双杂交系统中的表达及对报告基因激活作用的检测 被引量:1
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作者 杨建波 姚佳 杨洁 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期584-589,共6页
目的:为建立用于筛选人血小板整合素蛋白αⅡbβ3拮抗剂的高通量药物筛选模型,对其β3亚基不同片段在酵母双杂交系统中的表达及对报告基因的激活作用进行初步研究。方法:通过PCR扩增得到6个不同长度的整合素β3亚基基因片段,包括片段A1(... 目的:为建立用于筛选人血小板整合素蛋白αⅡbβ3拮抗剂的高通量药物筛选模型,对其β3亚基不同片段在酵母双杂交系统中的表达及对报告基因的激活作用进行初步研究。方法:通过PCR扩增得到6个不同长度的整合素β3亚基基因片段,包括片段A1(55E-199Q)、A2(235K-385S)、A3(4Ⅰ-454T)、A4(4Ⅰ-77S)、A5(4Ⅰ-147S)和A6(4Ⅰ-284S),分别克隆到酵母双杂交诱饵载体pAS2-1中,然后将重组质粒导入酵母双杂交菌株Y190中,检测其表达产物在酵母细胞中对报告基因的激活作用。结果:6个片段对酵母均无毒性作用,片段A1、A2、A3、A5、A6不能激活报告基因HIS3和LacZ的表达,而片段A4和一个A3的缺失突变体可以激活报告基因的表达,β3亚基N末端存在一个转录激活区。结论:在建立模型时可以使用A1、A2、A3片段,但转录激活是否是β3亚基的生理功能仍有待进一步研究确证。 展开更多
关键词 整合素αⅱbβ3 酵母双杂交 转录激活
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RWR通过与血小板表面整合素α_(Ⅱb)β_3受体作用对血栓形成的影响 被引量:2
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作者 赵海霞 杨涛 杨利军 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2013年第8期1126-1129,1133,共5页
目的探讨含RGD(Arg-Gly-Asp)序列的RWR小肽通过与血小板表面整合素αⅡbβ(3GPⅡb/Ⅲ)a结合,对血小板聚集抑制率、血栓重量、血管组织结构的影响。方法取10名无心脑血管疾病的健康志愿者的全血,分离富含血小板的血浆(platelet-rich plas... 目的探讨含RGD(Arg-Gly-Asp)序列的RWR小肽通过与血小板表面整合素αⅡbβ(3GPⅡb/Ⅲ)a结合,对血小板聚集抑制率、血栓重量、血管组织结构的影响。方法取10名无心脑血管疾病的健康志愿者的全血,分离富含血小板的血浆(platelet-rich plasma,PRP),采用血小板聚集仪检测不同剂量(6.25、12.5、25、50、100、200μmol/L)RWR对二磷酸腺苷二钠(ADPNa2)诱导的血小板聚集抑制率的影响;分别用0.3、0.6、1.2mg/kgRWR作用家兔及0.6、1.2、2.4 mg/kg RWR作用大鼠,建立兔动静脉旁路循环血栓模型和大鼠三氯化铁血栓模型,观察血栓重量的变化和血管组织结构的变化。结果随着RWR剂量增加,血小板最大聚集率降低,血小板聚集抑制率增加,RWR对血小板聚集抑制率的半数有效抑制浓度(IC50)为16.0μmol/L。随着RWR剂量的增加,血栓重量减少,血栓形成的抑制率增加,血管腔堵塞程度减弱,血管腔内孔隙增加。结论 RWR小肽通过与血小板表面整合素αⅡbβ(3GPⅡb/Ⅲ)a受体结合,抑制血小板聚集和抗血栓。 展开更多
关键词 RGD序列 RWR 整合素αⅱbβ3 血栓
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