牛α辅肌动蛋白(α-Actinin)1基因遗传变异与产犊数性状的相关性

为了探讨辅肌动蛋白1(α-actinin1)基因对母牛产犊数的影响,以鲁西单胎牛,鲁西双胎牛,南阳牛,晋南牛,荷斯坦牛,三河牛和延边牛为研究对象,以α-actinin1为影响产犊数的候选基因,分别扩增418bp和505bp2个片段,采用直接测序,RFLP-RsaⅠ和RFLP-ApaⅠ方法检测α-actinin1基因的多态性,并将其与产犊数性状进行了关联分析.在内含子15第227nt处的碱基发生G→A突变,和内含子10第3124nt处发生A→G突变,使其产生酶切多态.对2个酶切多态位点进行基因型分型,χ2检验表明:在G227A位点,除了鲁西单胎牛外,其他群体都已达到Hardy-Weinberg平衡;在A3124G位点,除了鲁西双胎牛外,其余群体都已经达到Hardy-Weinberg平衡.SAS9.0的最小二乘拟和一般线性模型分析结果表明:A3124G位点的AG基因型的产犊数的最小二乘均数极显著(P<0.01)高于基因型AA;而单倍型组合G-G的产犊数的最小二乘均数显著高(P<0.01)于其它3种单倍型组合.α-actinin1基因有可能作为产犊数性状的候选分子的遗传标记.

六味地黄汤对阿霉素肾病小鼠尿蛋白及肾小球p-p38 MAPK、α-actinin-4、synaptopodin的影响

目的探讨六味地黄汤对阿霉素肾病(adriamycin nephropaghy,ADRN)小鼠尿蛋白的干预作用及可能机制。方法30只SPF级雄性C57BL/6小鼠随机选取5只为空白组,余下小鼠以单次尾静脉注射阿霉素(0.01 g·kg^(-1))复制ADRN模型,2周后将造模成功的小鼠随机分为模型组、贝那普利组及低、中、高剂量六味地黄汤组,每组5只。空白组、模型组予等体积注射用水灌胃,贝那普利组予0.0013 g·kg^(-1)贝那普利灌胃,低、中、高剂量六味地黄汤组分别予9.75、19.5、39 g·kg^(-1)六味地黄汤灌胃,每日1次,连续8周。自动生化仪检测小鼠24 h尿蛋白定量、血清白蛋白、血清肌酐、血清钾;HE染色法、电镜观察小鼠肾脏病理改变及足突形态;免疫组织化学法、Western bolt检测小鼠肾脏磷酸化p38 MAPK(phosphorylated p38 MAPK,p-p38 MAPK)、α-辅肌动蛋白-4(α-actinin-4)、突触孔蛋白(synaptopodin)的表达;RT-PCR检测小鼠肾脏α-actinin-4、synaptopodin mRNA表达。结果与空白组比较,模型组小鼠体质量、24 h尿量、血清白蛋白降低,24 h尿蛋白定量升高(P<0.05);肾小球系膜细胞增生,部分系膜区扩大、肾小管蛋白管型,间质可见炎性细胞浸润,足突广泛融合;α-actinin-4蛋白及mRNA、p-p38 MAPK蛋白表达升高(P<0.05),synaptopodin蛋白及mRNA表达降低(P<0.05)。与模型组比较,各干预组病理改变及足突融合均得到不同程度改善,贝那普利组及中、高剂量六味地黄汤组24 h尿蛋白定量减少,高剂量六味地黄汤组p-p38 MAPK蛋白表达降低(P<0.05),低、中、高剂量六味地黄汤组synaptopodin蛋白及mRNA表达均升高(P<0.05)。贝那普利组及低、中、高剂量六味地黄汤组组间比较,各指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论六味地黄汤可能通过抑制p38 MAPK通路活化和上调α-actinin-4、synaptopodin蛋白及mRNA表达,改善肾脏病理及足突融合,减轻足细胞损伤,减少ADRN小鼠尿蛋白。

急性心肌缺血大鼠心肌α辅肌动蛋白含量变化及其与心功能的关系

目的观察大鼠心肌缺血及再灌注过程中心肌细胞骨架蛋白α辅肌动蛋白(α-actinin)含量的变化及其与心功能的关系。方法 Wistar大鼠随机分为假手术组(sham),缺血30min组(I30min),缺血1h组(I1h),缺血1h再灌注2h组(IR),每组各8只。通过结扎大鼠冠状动脉左前降支建立急性心肌缺血及再灌注模型,记录左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP)、左室内压上升最大速度(+dp/dtmax)、左室内压下降最大速度(-dp/dtmax)。采用免疫组化方法检测各组心肌中α-actinin含量和分布。ELISA法定量检测各组心肌组织磷酸肌醇3激酶(PI3K)和磷脂酶C(PLC)含量。急性分离大鼠心肌细胞,并用PI3K抑制剂(LY-29400)和PLC抑制剂(U-73122)处理细胞,观察其对心肌细胞收缩舒张能力及对α-actinin含量的影响。结果 (1)随缺血时间延长,大鼠LVSP、+dp/dtmax、-dp/dtmax下降,LVEDP升高;再灌注后LVSP、+dp/dtmax、-dp/dtmax回升,LVEDP回落,但不能恢复到缺血前水平。(2)免疫组化染色观察到随缺血时间延长,α-actinin出现点状、片状缺失,含量下降。(3)急性缺血过程中PI3K和PLC含量逐渐增加(P<0.05)。(4)应用LY-294002及U-73122后单个心肌细胞收缩幅度较缺血组明显增加(P<0.05)。(5)应用LY-294002及U-73122后心肌细胞α-actinin免疫荧光强度较缺血组增加(P<0.001)。结论心肌缺血时心肌细胞骨架蛋白α-actinin的含量减少可能与缺血后PI3K和PLC含量增加有关,并且α-actinin结构与含量变化可能是导致心肌功能障碍的原因之一。

新型抗冻剂海藻糖对低温保存皮肤组织α-辅肌动蛋白表达的实验研究

目的比较海藻糖与传统低温保护剂对皮肤组织α-辅肌动蛋白(α-actinin)低温保存后表达的影响,进一步揭示海藻糖的低温抗冻机制。方法实验共进行6次,每次取自愿捐献烧伤患者整形术后所余大腿部刃厚皮片5块,根据冻存时添加保存液不同,将皮片随机分为5组,每组各1块。T/D组:添加0.5mol/L海藻糖/DMSO,完全浸没皮片;D/P组:DMSO/丙二醇;D/K组:DMSO/无血清角质细胞培养基;DMEM组:DMEM;置于-196℃液氮中储存14d后复温进行实验;对照组:刃厚皮片不作任何处理。对各组皮片进行免疫组织化学染色观察,RT-PCR方法检测皮片α-actinin基因水平,皮肤内琥珀酸脱氢酶(succinate dehydrogenase,SDH)定量测定法检测皮肤活力。结果对照组、T/D组、D/P组、D/K组及DMEM组吸光度(A)值分别为27.50±7.92、18.40±5.81、13.10±5.11、11.50±4.54及5.30±2.14。对照组与T/D组比较差异无统计学意义(P>0.05),与其他组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR检测对照组、T/D组、D/P组、D/K组及DMEM组α-actinin基因表达A值分别为0.816±0.134、0.723±0.245、0.564±0.265、0.245±0.071及0.148±0.048。对照组与T/D、D/P组比较,差异无统计学意义(P>0.05);与D/K、DMEM组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。对照组、T/D组、D/P组、D/K组及DMEM组SDH活性值分别为18.2±3.7、12.3±3.6、10.2±2.4、7.3±2.1及5.7±1.5。对照组与T/D组比较差异无统计学意义(P>0.05),与其他组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论海藻糖对低温保存皮肤组织α-actinin的保护作用在其抗冻机制中发挥了重要作用。

辛伐他汀对慢性心力衰竭兔α-辅肌动蛋白2的影响

目的观察辛伐他汀对慢性心力衰竭(CHF)兔α-辅肌动蛋白2(α-actinin2)表达的影响。方法雄性大耳白兔45只,随机分为正常对照组、CHF模型组和辛伐他汀治疗组。CHF模型组及辛伐他汀治疗组注射盐酸阿霉素2 mg·kg-1,每周1次,连续10周,建立慢性心力衰竭模型;正常对照组给予相同容量的生理盐水。辛伐他汀治疗组在首次注射盐酸阿霉素时给予辛伐他汀,剂量为1.5 mg·kg-1·d-1,持续至第12周;CHF模型组和正常对照组给予相同容积的生理盐水灌胃12周。心脏彩色超声测量兔左心室结构和功能。处死动物留取左心室室壁观察心肌细胞结构的变化,免疫组织化学染色后检测α-actinin2表达水平。结果与正常对照组比较,辛伐他汀治疗组、CHF模型组的左心室收缩末期内径(LVESD)、左心室舒张末期内径(LVEDD)明显增大,左心室射血分数(LVEF)明显下降,差异均有统计学意义(P<0.05);与CHF模型组比较,辛伐他汀治疗组LVESD、LVEDD减小,LVEF升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与正常对照组比较,辛伐他汀治疗组、CHF模型组α-actinin2表达明显减少(P<0.05),辛伐他汀治疗组与CHF模型组相比表达明显增多(P<0.05)。结论辛伐他汀可明显改善CHF兔左心室重塑,提高其心功能,其机制可能与增加α-actinin2表达有关。

纽蛋白在神经干细胞定向分化为神经元过程中的表达及其与辅肌动蛋白的关系

目的探讨纽蛋白(vinculin)在新生大鼠大脑皮层神经干细胞定向分化神经元过程中的表达变化及其与辅肌动蛋白(α-actinin)的关系。方法将神经干细胞分离、培养、分化及鉴定后,采用免疫组化技术对新生大鼠皮层神经干细胞向神经元定向分化过程中,纽蛋白的时空表达进行研究,并采用免疫荧光双标技术及共聚焦激光扫描显微术对神经元定向分化过程中,纽蛋白与辅肌动蛋白关系进行探讨,利用图像分析技术对不同时段分化的神经元中vinculin平均积分光密度进行定量测定。结果在神经干细胞定向分化为神经元的过程中,vinculin由核周淡染分布逐渐至在胞体与突起中密集均匀分布,随着突起伸展而不断地延伸。图像分析结果表示,随神经元的分化成熟,vinculin的表达量呈逐渐增加趋势。在共聚焦激光扫描显微镜下观察免疫荧光双标vinculin/α-actinin在分化早期胞体和突起内均有分布,可见核周和突起两者融合两蛋白共存。近成熟期,随突起生长,两蛋白渐伸入突起,直至末端共存。结论本研究揭示大脑皮质神经干细胞定向分化为神经元过程中,vinculin表达变化与神经元发育成熟呈正相关,并且vinculin与α-actinin共存。

糖尿病大鼠肾脏α-辅肌动蛋白-4表达变化及作用机制

目的:动态观察肾小球足细胞骨架蛋白α-辅肌动蛋白-4(α-actinin-4)在糖尿病大鼠模型肾组织中表达的变化,探讨α-actinin-4与蛋白尿发生的关系及导致其出现变化的可能机制。方法:将SD大鼠随机分为两组:对照组及糖尿病组,腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制作糖尿病大鼠模型,分别于2、4、6、8周末检测每组大鼠24h尿蛋白定量并处死大鼠留取肾标本。电镜观察足细胞超微结构的变化;应用酶免法检测肾组织糖基化终产物(AGEs)的含量;应用免疫组化及Western-blot检测α-actinin-4蛋白的表达;RT-PCR检测α-actinin-4mRNA表达量的变化。结果:6周糖尿病组大鼠24h尿蛋白明显高于对照组(P<0.01),增高持续到8周(P<0.01);透射电镜显示8周糖尿病组大鼠足突出现节段性融合;从4周时糖尿病组大鼠肾组织AGEs含量明显升高(P<0.05),并持续到8周(P<0.01);与对照组相比,从4周时糖尿病组大鼠肾组织α-actinin-4蛋白表达明显降低(P<0.05),并持续到8周(P<0.05);与对照组相比,从2周时糖尿病组大鼠肾组织α-actinin-4mRNA表达明显降低(P<0.05),并持续到8周(P<0.01)。结论:α-actinin-4表达降低参与了糖尿病大鼠蛋白尿的发生,而AGEs可能是导致α-actinin-4表达下调的原因之一。

儿童原发性肾病综合征α-辅肌动蛋白4mRNA表达的临床意义

目的探讨在儿童原发性肾病综合征中α-辅肌动蛋白4(α-actinin-4)mRNA表达及其意义。方法经肾活检获取34例原发性肾病综合征患儿(病例组)的肾组织,其中局灶节段硬化性肾小球肾炎(FSGS)21例、微小病变(MCNS)6例、系膜增生性肾小球肾炎(MsPGN)7例;另外,12例对照组标本取自肾肿瘤切除术后肿瘤周边的正常组织。通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR)的方法检测每份肾组织中α-actinin-4 mRNA表达,同时分析FSGS患儿中mRNA表达与24 h尿蛋白、内生肌酐清除率(Ccr)的相关性。结果 FSGS组α-actinin-4 mRNA表达明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而MCNS组和MsPGN组α-actinin-4 mRNA表达与正常对照组的差异均无统计学意义(P>0.05)。在FSGS组中,表现为肾炎型肾病(伴发镜下血尿)患儿的α-actinin-4 mRNA表达明显高于表现为单纯性肾病的患儿,差异有统计学意义(P<0.05);FSGS患儿α-actinin-4mRNA表达量与24 h尿蛋白及Ccr无相关性(P>0.05)。结论在儿童原发性肾病综合征中,α-actinin-4 mRNA表达量增高可能是促进肾小球足细胞骨架修复的因素之一;该骨架分子的mRNA表达变化与病程及病理类型相关。

α-辅肌动蛋白4及其与肾脏疾病关系的研究进展

α-辅肌动蛋白4是由ACTN4基因编码的辅肌动蛋白家族成员之一,广泛表达于各种组织或器官,在肾脏中其主要表达于肾小球足细胞。α-辅肌动蛋白4与去氧肾上腺素、足突蛋白和CD2相关蛋白等的相互作用共同维系肾小球足细胞正常结构及功能。多种肾脏疾病存在ACTN4基因突变及α-辅肌动蛋白4表达、分布异常。本文主要就α-辅肌动蛋白4对肾脏疾病的影响以及在治疗中的应用研究进展做一综述。

人骨骼肌α辅肌动蛋白（α－actinin）的提取及其抗血清的制备和鉴定

本文提取人骨骼肌α辅肌动蛋白（α－ａｃｔｉｎｉｎ）是综合了文献报导有关提取兔肌α－ａｃｔｉｎｉｎ的和提取鸡胗α－ａｃｔｉｎｉｎ的方法，稍加修改而确定的。用Ｈａｓｓｅｌｂａｃｈ－Ｓｃｈｎｅｉｄｅｒ缓冲液提取骨骼肌中的肌球蛋白后，将残余物经硼酸－缓冲液提取、匀浆及高速离心去掉肌动蛋白和肌原纤维的其它成份，上清加硫酸铵至３０％，３５％饱合度所得的沉淀用２２０ｍｍｏｌ／ＬＴｒｉｓ－乙酸溶解、透析、离心后经ＤＥ－５２柱层析可得电泳纯。α－ａｃｔｉｎｉｎ。将人骨骼肌α－ａｃｔｉｎｉｎ纯化制品免疫了三只大耳白纯种家兔，两个多月后，三只兔子都产生免抗人骨骼肌α－ａｃｔｉｎｉｎ的特异抗血清，用双向免疫扩散法和酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）测定，产生的抗体效价较高，用双扩散法测定效价为１：３２，用ＥＬＩＳＡ测定，用比率法判断结果，效价最高者为１：１００，０００左右，经免疫电镜观察结果证实，上述抗血清可以满足进一步实验要求。

两种低温保护剂对皮肤储存后α-辅肌动蛋白表达及活力的影响

目的比较两种不同低温保护剂对皮肤组织α-辅肌动蛋白(α-actinin)低温保存后表达的影响,为寻求皮肤组织低温保护剂的最佳配方提供实验依据。方法新鲜成人皮肤组织分为3组,新鲜对照组和海藻糖-二甲基亚砜(T-D)组、二甲基亚砜-丙二醇(D-P)低温保护剂保存组,-196℃液氮冻存7d、14d复温,免疫组织化学染色对各组间皮肤进行比较。同时对各组皮片进行氧耗量测定。结果0.5mol/L海藻糖-二甲基亚砜能够很好保护皮肤组织,α-actinin的表达量与新鲜皮肤组相似。结论海藻糖与二甲基亚砜联合应用对皮肤组织α-actinin的保护作用优于传统组。

低温储存对皮肤组织α辅肌动蛋白和纽蛋白表达的影响

目的:观察α辅肌动蛋白和纽蛋白在不同温度保存皮肤组织中的分布,以探讨其与皮肤冷冻损伤的关系。方法:用α-actinin、vinculin抗体对5种保存条件下的皮肤组织作免疫组化染色,用图像分析仪测定表皮组织中的含量,并用HE染色观察皮肤的组织结构变化。结果:与新鲜皮片组相比,-196℃H抗冻液中保存皮肤组织结构保存较好,α-actinin、vinculin含量变化不明显,而4℃、-20℃、-80℃保存皮肤组织结构破坏明显,含量亦明显下降。结论:皮肤低温保存冷冻损伤与黏附分子α-actinin、vinculin破坏有关。

不同浓度α辅肌动蛋白对体外环境下肌动蛋白聚合-解离平衡的影响

目的构建肌动蛋白的体外聚合-解离反应体系,探讨α辅肌动蛋白浓度对该平衡体系的影响。方法采用改良的Sobieszek-Bremel法和Katalin Pinter法,从人骨骼肌中分别提取α辅肌动蛋白和G肌动蛋白,构建G肌动蛋白/F肌动蛋白/交联态肌动蛋白的聚合-解离反应体系,施加不同浓度的α辅肌动蛋白,并采用SDS-PAGE电泳与荧光显影法检测反应缓冲液中三种肌动蛋白含量的变化。结果本方法可制备高纯度的α辅肌动蛋白与G肌动蛋白;当α辅肌动蛋白浓度处于0～0.40g/L时,交联态肌动蛋白含量随着前者浓度升高而增多,而当前者浓度处于0.40～0.70g/L时,交联态肌动蛋白含量进入平台期;在该反应体系内,F肌动蛋白/G肌动蛋白浓度比值处于0.45～0.59区间。结论在一定范围条件下,适当增加α辅肌动蛋白可以促进F肌动蛋白交联反应,但F肌动蛋白/G肌动蛋白比值基本维持不变。

宫颈组织α辅肌动蛋白4表达与HPV载量及病变程度的相关性

目的探讨α辅肌动蛋白4(ACTN4)在宫颈上皮内瘤变及宫颈癌组织中的表达,及其与高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染的相关性。方法选取2014年6月至2015年2月期间就诊于山西医科大学第二临床医院妇科门诊,经宫颈活检及手术切除的宫颈组织病理标本120例,其中CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ、早期宫颈鳞癌(Ia-IIa期)患者各30例,同时选择同期阴道镜门诊检查并且病理诊断正常的30例患者作为对照组:采用免疫组化法检测ACTN4在不同宫颈组织中的表达情况,同时采用HC-Ⅱ法检测各组高危型人乳头瘤病毒的感染情况及病毒负荷载量,分析ACTN4表达与HR-HPV感染、病毒负荷载量的相关性。结果 1.HC-ⅡHPV DNA检测法结果显示:150例标本中HR-HPV阳性98例,阴性52例,阳性低负荷量49例,阳性中负荷量36例,阳性高负荷量13例,并且从正常组、CINⅠ组、CINⅡ组、CINⅢ组到宫颈鳞癌患者组,随着宫颈病变加重,HR-HPV感染率逐渐增加(P=0.000)。2.免疫组化法结果显示:ACTN4在正常组、CINⅠ组、CINⅡ组、CINⅢ组、宫颈鳞癌患者组中阳性表达率分别为0%、33.3%、46.7%、56.7%、73.3%。随着宫颈病变程度的加重,ACTN4蛋白的阳性表达率逐渐上升,差异具有统计学意义(P<0.05)。经过Spearman秩相关分析显示出HR-HPV病毒负荷载量与ACTN4的表达具有相关性(r=0.523,P=0.000)。结论随着宫颈病变程度加重,ACTN4与HR-HPV病毒负荷载量表达率均逐渐升高,且表现出相关性,可作为反映宫颈病变程度及生物学行为的指标,对临床诊断有参考价值。

机械力加载IGF-I转染PDL细胞对α辅肌动蛋白影响的研究

目的:观察IGF-I转染对应力作用下牙周膜成纤维细胞α辅肌动蛋白m RNA表达水平的影响。方法:应用外源性IGF-I转染人牙周膜成纤维细胞,使用四点弯曲加力装置对转染组和为转染组细胞加力,RT-PCR检测不同加力时间点各组细胞的α辅肌动蛋白基因表达变化。结果:在机械力刺激下IGF-I转染组细胞和未转染组细胞的α辅肌动蛋白m RNA表达量随着加力时间延长明显上调,且转染组和未转染组差异有统计学意义。结论:IGF-I转染对机械力加载状态下人牙周膜成纤维细胞的α辅肌动蛋白有较强的调控作用。

α辅肌动蛋白的结构和功能

α辅肌动蛋白是近年来在细胞骨架与细胞运动研究中的热点蛋白 .目前发现有α辅肌动蛋白 1、2、3和 4四种类型 ,呈细胞或组织特异性分布 .这四种蛋白的共同结构特征是在细胞内均为反向平行的二聚体 ,并具有N末端肌动蛋白结合结构域 (ABD)、血影蛋白样中央重复结构域和C末端“EF手”结构域 .作为细胞骨架中一种重要的肌动蛋白交联蛋白 ,α辅肌动蛋白通过与其相关蛋白包括整合素 (integrins)、钙粘素 (cadherin)以及细胞信号传导通路中的信号分子等的协同作用 ,在稳定细胞粘附、调节细胞形状及细胞运动中发挥着重要作用 .因此 ,肿瘤的发生、发展和恶化与α辅肌动蛋白的结构、功能密切相关 .本文结合本实验室的研究工作 ,综述了α辅肌动蛋白家族成员的结构、功能及其与肿瘤发生的相关性 .

中国汉族男性军人α-辅肌动蛋白3(ACTN3)基因多态性研究

目的研究中国汉族男性军人α-辅肌动蛋白3(ACTN3)基因遗传多态性及其与速度素质的相关性。方法113名无训练史的汉族健康男性军人进行18周短跑训练,测试训练后的百米成绩。用荧光定量PCR法分析ACTN3基因的多态性。分析百米成绩与基因多态性之间的关系。结果ACTN3基因C1747G多态位点分布频率符合Hardy-Weinberg平衡。ACTN3基因杂合子C/T基因型频率为43%,纯合子C/C基因型频率为40%,T/T基因型频率为17%,CT、CC基因型显著性多于TT基因型(P<0.05),C1747G多态位点C等位基因频率为62%,高于T等位基因频率(38%),但其多态性分布特征与欧洲白种男性比较无显著性差异(P>0.05)。ACTN3基因型为T/T的汉族男性军人100m速度为12.98±0.65s,明显快于基因型为C/C和C/T者(分别为13.45±0.78s、13.50±0.86s),差异有显著性意义(P<0.05)。结论ACTN3基因多态性可作为预测个体速度素质的基因标记。

荧光能量转移法及电镜方法研究α-辅肌动蛋白同脂膜的相互作用

为了研究α－辅肌动蛋白同脂膜的相互作用，用荧光能量转移法研究了α－辅肌动蛋白同含有不同脂成分的脂质体的结合能力，证明α－辅肌动蛋白能够同含有负电荷脂的脂膜结合，并且结合能力在一定程度上随脂双层中负电荷脂所占的比例的增加而增大。电镜实验结果又证明，在带有负电荷脂的脂质体、肌动蛋白丝和α－辅肌动蛋白的孵育体系中，能形成肌动蛋白丝的一端锚定在脂质体外膜表面的结构，这一结果支持了α－辅肌动蛋白在生理条件下可作为一种膜连接蛋白。

pH值及Na^+诱导α^-辅肌动蛋白构象变化

用ＦＴＩＲ研究了不同浓度ＮａＣｌ溶液中α－辅肌动蛋白二级结构的变化。实验结果发现，在不同ＮａＣｌ浓度下，α－辅肌动蛋白至少具有三种不同的构象：低盐（３０－９０ｍｍｏｌ／ＬＮａＣｌ），中盐（１５０ｍｍｏｌ／Ｌ－２５０ｍｍｏｌ／ＬＮａＣｌ）与高盐（３００－５００ｍｍｏｌ／ＬＮａＣｌ）构象。在低盐溶液中，α－辅肌动蛋白含有较高比例的α－螺旋结构（３３－３４％），随着溶液中钠盐浓度的升高部分α－螺旋结构转变为β－转角或β－折叠结构。此外还研究了ｐＨ诱导α－辅肌动蛋白构象的变化，定量分析结果表明在ｐＨ７．０和中盐条件下（α－辅肌动蛋白交联Ｆ－ａｃｔｉｎ成束的活性最高），α－辅肌动蛋白β－转角结构含量最高，而α－螺旋结构含量较低。由此可见，β－转角结构在α－辅肌动蛋白交联肌动蛋白成束中可能具有重要的功能。

α-辅肌动蛋白与棕榈酸和甘油二脂的相互作用

为了探讨α－ 辅肌动蛋白与甘油二酯（ＤＧ）／ 棕榈油酸（ＰＡ） 的作用机制，利用荧光能量转移、酶切及ＦＴＩＲ 等方法研究了α－ 辅肌动蛋白与ＤＧ／ＰＡ 的作用特性及其构象变化。结果表明，α－ 辅肌动蛋白与外源ＰＡ 有较弱的结合， 且它们的结合具有较强的协同性； 高浓度的ＤＧ 对α－ 辅肌动蛋白与ＰＡ 的结合有一定促进作用。此外，与ＰＡ 结合后α－ 辅肌动蛋白酶切图谱发生了较大变化，其中央区两端的酶切位点受到较强的保护；ＤＧ 可以进一步延长α－ 辅肌动蛋白酶切的保护作用。ＦＴＩＲ 研究表明与ＰＡ 和ＤＧ／ＰＡ 脂质体结合后，α－ 辅肌动蛋白二级结构发生较大变化：结合ＰＡ 后，α－ 辅肌动蛋白部分α－ 螺旋结构转变为β－ 折叠结构；而ＤＧ 可进一步诱导β－