乙型肝炎病毒S基因变异株的研究

目的 对７份ＨＢｓＡｇ诊断试剂检测结果不一致的样品进行确证并分析其原因。方法采用套式 ＰＣＲ法对７份样品进行ＤＮＡ扩增，并将阳性产物克隆到ｐＧＥＭ－Ｔｅａｓｙ载体上，然后进行测序并对其序列进行分析。 结果 ７份样品中６份为ＨＢＶ ＤＮＡ阳性，其中５份与Ａｂｏｏｔｔ和Ｏｒｔｈｒｏ ＨＢｓＡｇ试剂无反应或反应较弱，而且其ａ决定 簇的氨基酸均在１３４位发生改变，由Ｆ变为 Ａ；１份与 Ａｂｂｏｔｔ和Ｏｒｔｈｒｏ ＨＢｓＡｇ试剂反应较强，其ａ决定簇的氨基酸也 在１３４位发生改变，但由Ｆ变为Ｓ。结论 国内外首次报道ＨＢｓＡｇ ａ决定簇１３４位由 Ｆ变为 Ａ后，其抗原性明显降 低，不易被ＨＢｓＡｇ试剂检出；而１３４位由对变为 Ｓ后，其抗原性无明显改变。

乙型肝炎病毒突变株对疫苗接种效果的影响

近年来在许多国家和地区发现乙型肝炎病毒突变株 ,且其发生率不断增加。研究表明 ,这种突变株可不被筛检试验检出和疫苗诱生的抗体所中和 ,对公共卫生可产生重大影响 ,因而需要加强流行病学监测 。

4例乙肝表面抗原阴性乙肝病毒DNA阳性标本结果分析

目的探讨4例乙肝病毒HBV-DNA阳性标本乙肝表面抗原(HbsAg)阴性的原因。方法 4例Hb-sAg阴性HBV-DNA阳性标本和1例HbsAg阳性HBV-DNA阳性标本,碱裂解法提取乙肝病毒基因组,采用巢式PCR扩增s基因全长片段,T-A克隆后测序,根据s基因序列推导氨基酸序列,分析乙肝表面抗原α决定簇区域的氨基酸变异情况。结果与参考株比较,5例血清中HBV-DNA s基因均出现不同位点碱基突变,导致乙肝表面抗原α决定簇区域的氨基酸突变主要为:1号标本R122K、I126A、S143T;2号标本R122K、I126N、Q129N;3号标本R122K、I126S、T131N、M133T;4号标本R122K、I126S、T131N、M133T及5号标本的R122K。结论乙肝表面抗原α决定簇区域126位氨基酸突变可能会影响HbsAg的检测结果。

江浙沪地区乙肝病毒B、C基因型S基因突变及选择压力分析

目的系统分析江浙沪三地的乙肝病毒B、C基因型S基因突变和选择压力情况,以期为乙型肝炎的防治提供理论依据。方法采用NCBI数据库提供的乙肝病毒序列,分为B、C基因型两组,分析突变情况,同时采用Datamonkey进行选择压力分析和Bioedit进行氨基酸置换熵值分析。结果S基因226个氨基酸位点突变分析中,产生突变有位点122个,位点突变率C基因型(45.58%)高于B基因型(30.09%)(χ~2=11.523,P=0.001);总突变率C基因型(1.36%)高于B基因型(0.80%)(χ~2=46.642,P=0.000);α决定簇突变率C基因型(2.40%)高于B基因型(0.96%)(χ~2=20.524,P=0.000)。B基因型α决定簇突变率高于总突变率(χ~2=0.735,P=0.391);C基因型α决定簇突变率高于总突变率(χ~2=44.467,P=0.000)。B基因型氨基酸突变最多的位点为200、213、161和21位点,C基因型氨基酸突变最多的位点为126、68、3、53和194位点。两个基因型dN/dS均值均小于1。B基因型没有发现正向选择位点,发现8个负向选择位点。C基因型发现7个正向选择位点,17个负向选择位点。B基因型仅发现一个易突变位点(200位),C基因型也仅发现一个易突变位点(126位),大多数氨基酸位点熵值<0.4。结论江浙沪地区S基因突变率水平较低,其中C基因型位点突变率、α决定簇突变率和总突变率高于B基因型,α决定簇突变率高于总突变率。C基因型经历外界环境免疫选择压力和自身进化压力双重影响,自身进化压力强于外界环境免疫选择压力;而B基因型主要遭受自身进化压力。尤其要格外关注C基因型的进化进程。