人类α型叶酸受体基因的克隆及其真核表达载体的构建

目的 探讨如何以人类α型叶酸受体 (FOLR - 1)基因为基础构建核酸疫苗。方法 应用RT -PCR技术 ,从人类卵巢癌细胞系———SKOV3细胞中扩增FOLR - 1基因 ,插入克隆载体 pGEM -TEasy ,经DNA自动测序仪测序证实后 ,以亚克隆法构建于真核表达载体 pcDNA3.1(+) ,并使用限制性内切酶酶切鉴定。结果 从卵巢癌细胞系SKOV3中成功扩增出FOLR - 1基因 ,并克隆入 pcDNA3.1(+)载体。结论 成功构FOLR - 1的重组克隆及真核表达载体 ,为今后利用FOLR - 1进行卵巢上皮性肿瘤的免疫及导向治疗研究打下了基础。

肾细胞癌患者血液循环肿瘤细胞测定及临床意义

目的:采用α-FR的配体探针PCR定量检测肾细胞癌(RCC)患者外周血循环肿瘤细胞(CTCs),并阐释该法测定RCC患者外周血CTCs的初步临床意义。方法:体外ACHN掺血回收实验评估α-FR的配体探针PCR技术检测外周血CTCs的有效性。将2017年2月-2019年10月在我院就诊的50例健康对照者、35例肾脏良性病变者及45例初诊RCC患者纳入本临床试验;RCC患者分为术前、术后两组。采集入组者外周静脉血4 mL(RCC患者于术前1 d、术后7 d采血2次),用上述方法定量检测CTCs。结果:ACHN掺血回收实验提示本方法的检测值同掺入已知数量肿瘤细胞具有很高的相关性(r=0.99),RCC术前组外周血CTCs水平显著高于健康对照组和肾脏良性病变组(P<0.01,P<0.01),并且RCC患者CTCs水平同肿瘤的TNM分期、临床分期显著相关(P<0.01),根治性肾切除术和保留肾单位手术对于T1、T2期不伴转移RCC患者术后外周血CTCs水平的影响无差异(P=0.320)。结论:采用α-FR的配体探针PCR能有效检测RCC患者外周血CTCs,本方法定量检测CTCs可弥补肾癌TNM分期的不足,可能在评估RCC患者治疗效果和监测肿瘤进展方面具有一定的价值。

经尿道激光切除术联合甘露聚糖肽治疗浅表性膀胱癌的效果

目的探讨经尿道1.9μm激光切除术联合甘露聚糖肽治疗浅表性膀胱癌的效果及对血清α型叶酸受体(α-FR)和可溶性B7-H4(s B7-H4)水平的影响。方法选取2013年1月至2015年6月间陕西省咸阳市第一人民医院收治的86例浅表性膀胱癌患者,采用随机数字表法分为观察组和对照组,每组43例。对照组患者经尿道1.9μm激光切除术,观察组患者在对照组基础上采用甘露聚糖肽治疗,比较两组患者术后复发率、不良反应发生情况、T淋巴细胞亚群含量、α-FR及s B7-H4水平。结果术后随访,对照组患者失访3例,观察组患者失访2例。术后6个月,两组患者复发率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。术后1年和2年,观察组患者复发率均低于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。术后当天(灌注治疗前),两组患者CD4^+、CD8^+和CD4^+/CD8^+比较,差异无统计学意义(P>0.05)。术后3个月,两组患者CD4^+和CD4^+/CD8^+比较,差异均有统计学意义(均P<0.05),CD8^+无统计学意义。观察组患者并发症发生率为14.6%,与对照组的15.0%比较,差异无统计学意义(P>0.05)。术前,两组患者血清α-FR和s B7-H4水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。术后1周和术后3个月,两组患者均较术前降低,且观察组患者术后血清α-FR和s B7-H4水平均低于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论经尿道1.9μm激光切除术联合甘露聚糖肽治疗浅表性膀胱癌,可有效降低术后复发率及血清α-FR和s B7-H4水平,提高机体免疫力,有安全、有效及并发症少等特点。