铁死亡诱导剂RAS合成致死分子3抑制病理性瘢痕成纤维细胞的纤维化

背景:病理性瘢痕主要表现为异常的细胞外基质积累和过度的成纤维细胞增殖,成纤维细胞过度增殖就会产生大量以胶原纤维为主的细胞外基质。因此深入探讨成纤维细胞纤维化在病理性瘢痕形成中的作用,将为揭示病理性瘢痕的机制和生物学治疗提供新思路。目的:探讨铁死亡诱导剂RAS合成致死分子3(RAS-selective lethal small molecule 3,RSL3)对人病理性瘢痕成纤维细胞纤维化的影响。方法:收集10例宁夏医科大学总医院烧伤整形美容科提供的病理性瘢痕组织和同一个体正常皮肤组织,提取人病理性瘢痕成纤维细胞和人正常皮肤成纤维细胞用于后续实验;苏木精-伊红染色观察病理性瘢痕组织和正常皮肤组织的形态;倒置显微镜观察病理性瘢痕成纤维细胞和正常皮肤成纤维细胞的外观形态;免疫荧光实验验证所提取的细胞是否为成纤维细胞;用不同浓度的RSL3(1,3,5,7,9,11,13μmol/L)干预细胞,CCK-8法检测RSL3作用于成纤维细胞的半数抑制浓度(IC_(50));设置对照组(不做处理)和RSL3干预组(用7μmol/L的RSL3干预细胞24 h),qRT-PCR和Western blot检测谷胱甘肽过氧化物酶4、Ⅰ型胶原蛋白、Ⅲ型胶原蛋白和α-平滑肌肌动蛋白的mRNA和蛋白的表达;检测细胞丙二醛浓度;划痕试验检测细胞划痕后24 h剩余划痕面积,并计算剩余划痕面积百分比。结果与结论:①与正常皮肤组相比,病理性瘢痕组的谷胱甘肽过氧化物酶4高表达(mRNA:t=3.252,P<0.01;蛋白:t=5.075,P<0.01);②与正常皮肤成纤维细胞组相比,病理性瘢痕成纤维细胞组的谷胱甘肽过氧化物酶4高表达(mRNA:t=10.32,P<0.01;蛋白:t=26.22,P<0.01);③与对照组相比,RSL3干预组谷胱甘肽过氧化物酶4表达减少(mRNA:t=2.798,P<0.05;蛋白:t=4.643,P<0.01),丙二醛浓度上升(t=2.917,P<0.05),Ⅰ型胶原蛋白(mRNA:t=15.84,P<0.01;蛋白:t=4.610,P<0.01)、Ⅲ型胶原蛋白(mRNA:t=28.86,P<0.01;蛋白:t=7.713,P<0.01)和α-平滑肌肌动蛋白(mRNA:t=2.671,P<0.05;蛋白:t=7.417,P<0.01)的表达减少,迁移能力减弱(t=14.06,P<0.01);④提示RSL3通过抑制谷胱甘肽过氧化物酶4的表达,进而抑制病理性瘢痕成纤维细胞的纤维化和迁移能力。

血清肿瘤坏死因子-α、胃蛋白酶原Ⅰ、胃蛋白酶原Ⅱ、肿瘤标志物联合检测对胃癌的诊断价值分析

目的:探讨血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)、胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原72-4(CA72-4)联合检测对胃癌的诊断价值。方法:选取2020年3月—2023年3月中山大学附属第六医院收治的胃癌患者80例作为研究组,慢性萎缩性胃炎患者40例作为对照组。比较不同组别、胃癌病情进展者血清TNF-α、PGⅠ、PGⅡ、CEA、CA72-4水平。采用受试者工作特征曲线(ROC)分析各血清指标水平对胃癌的诊断价值。结果:研究组血清TNF-α、PGⅡ、CEA、CA72-4水平高于对照组,PGⅠ水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。进展期胃癌患者血清TNF-α、PGⅡ、CEA、CA72-4水平高于早期胃癌患者,PGⅠ水平低于早期胃癌患者,差异有统计学意义(P<0.05)。以研究组80例患者为阳性样本,以对照组40例患者为阴性样本,五项联合诊断胃癌的ROC曲线下面积大于单项诊断,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:胃癌患者血清TNF-α、PGⅡ、CEA、CA72-4呈高表达,而PGⅠ呈低表达,且与胃癌进展密切相关,联合检测其水平有助于提高胃癌诊断价值。

高通量测序分析高血压伴或不伴牙周炎大鼠牙龈mRNA差异

目的基于高通量测序(next generation sequencing,NGS)技术分析高血压大鼠伴或不伴牙周炎状态下牙龈组织中的差异mRNA,旨在为高血压伴牙周炎的防治提供实验基础。方法获得动物实验伦理委员会批准,通过给予含8%(w/w)NaCl的高盐饲料建立高血压大鼠模型,使用3-0的无菌丝线结扎大鼠下颌第一磨牙建立牙周炎大鼠模型,分为正常对照组(N组)、高血压组(H组)和高血压伴牙周炎组(PH组),测量血压、心率、牙槽骨吸收量和牙槽骨中破骨细胞数量;取3组牙龈组织进行NGS,分析组间差异基因表达;H组和PH组间所有差异基因行基因功能(gene ontology,GO)富集分析,行京都基因与基因百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析,行蛋白相互作用网络(protein-protein interaction,PPI)筛选关键基因;免疫组织化学验证关键通路中的关键基因在各组的表达,酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)分析关键基因在各组全身循环中的表达。结果实验终点(第11周)时,H组和PH组的血压均高于N组(P<0.001),但PH组的血压与H组比较无统计学意义,3组心率无统计学差异。Micro-CT显示PH组下颌第一磨牙的釉牙骨质界(cemento-enamel junction,CEJ)到牙槽骨嵴顶(alveolar bone crest,ABC)距离较N组和H组增加,牙槽骨中破骨细胞数量多于N组和H组(均P<0.0167)。3组的共同差异基因为0个,H组和PH组牙龈组织共235个差异基因,相较于H组,在PH组有P-选择素(P-selectin,SELP)、角蛋白16(keratin 16,KRT16)和S100钙结合蛋白A9(S100 calcium binding protein A9,S100A9)等137个上调基因,以及FK506结合蛋白5(FK506 binding protein 5,FKBP5)、介体复合体亚基22(mediator complex subunit 22,MED22)和含锌指和BTB域16(zinc finger and BTB domain containing 16,ZBTB16)等98个下调基因。H组和PH组差异基因的GO分析结果提示,主要富集的生物学过程(biological processes,BP)为白细胞迁移,主要的细胞成分(cellular component,CC)为胶原三聚体复合物,主要的分子功能(molecular functions,MF)为细胞外基质结构的构建;H组和PH组差异基因的KEGG信号通路主要富集于细胞因子之间受体相互作用、白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)信号通路中。通过PPI分析筛选出4个作用于高血压状态下牙周炎的关键基因,包括白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、Ⅰ型胶原α1(collagen type I alpha 1,COL1α1)、趋化因子配体1(chemokine ligand 1,CXCL1)。与N组和H组比较,IL-1β和TNF-α在PH组牙龈组织及全身血清中的表达均上调(P<0.0167)。结论高血压伴牙周炎或不伴牙周炎时的差异mRNA为IL-1β和MMP-9以及差异信号通路为IL-17和TNF-α信号通路,为今后进一步研究高血压伴牙周炎的分子调控机制提供了实验基础。

针刀干预对膝骨关节炎兔滑膜纤维化的影响

目的:探讨针刀干预对膝骨关节炎(KOA)兔滑膜纤维化的影响。方法:新西兰兔随机分为空白组、模型组、针刀组和电针组,各8只。采用改良Videman左后肢伸直位固定法制动4周,制备模型。空白、模型组不干预,针刀、电针组各干预3周。测量被动活动范围(PROM);天狼猩红染色观察滑膜胶原沉积的情况;Western Blot法检测膝关节滑膜组织TGF-β1、α-SMA与COL-Ⅰ蛋白表达情况。结果:与模型组比较,针刀、电针组PROM明显增大,差异具有统计学意义(P<0.01),针刀组大于电针组,差异具有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,针刀、电针组滑膜组织胶原沉积减轻。模型组TGF-β1、α-SMA与COL-Ⅰ蛋白表达显著高于正常组,差异具有统计学意义(P<0.01);针刀、电针组可明显抑制TGF-β1、α-SMA与COL-Ⅰ的表达,差异具有统计学意义(P<0.01);与电针组比较,针刀组TGF-β1、α-SMA与COL-Ⅰ蛋白表达明显较低,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:针刀通过调控TGF-β1的表达,从而下调α-SMA和COL-Ⅰ的表达,减轻滑膜纤维化达到治疗KOA的目的。

白术内酯Ⅰ对心肾综合征大鼠心肾功能的影响及机制

目的探讨白术内酯Ⅰ是否通过抗纤维化起到同步保护心肾综合征大鼠心肾功能作用。方法取50只大鼠,采用永久冠脉结扎联合3/4肾切的方法建立心肾综合征模型。肾切术后1周,对存活的42只大鼠行心脏超声检查,剔除左心室射血分数(LVEF)>60%的大鼠5只,将剩余37只大鼠随机分为模型组(10只)、白术内酯Ⅰ低剂量组(9只)、白术内酯Ⅰ中剂量组(9只)、白术内酯Ⅰ高剂量组(9只)。模型组给予生理盐水腹腔注射,白术内酯Ⅰ低、中、高剂量组分别给予0.3 mg/kg、1 mg/kg、3 mg/kg白术内酯Ⅰ腹腔注射,均1次/d。连续注射2周后进行心脏超声检查,检测24 h尿蛋白及血肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)、血脑钠肽(BNP)水平,计算心、肾质量指数,HE和马松染色观察心、肾组织病理形态,免疫荧光染色观察心、肾组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)、胶原蛋白Ⅰ、平滑肌肌动蛋白(α-SMA)阳性表达情况。结果白术内酯Ⅰ各组大鼠每搏量(SV)、心排血量(CO)、LVEF、左心室短轴缩短率(LVFS)、左心室前壁收缩末期厚度(LVAWs)、左心室前壁舒张末期厚度(LVAWd)均明显高于模型组(P均<0.05),白术内酯Ⅰ各组间各超声指标比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。白术内酯Ⅰ各组大鼠24 h尿蛋白及血SCr、BUN水平均明显低于模型组(P均<0.05),白术内酯Ⅰ中、高剂量组大鼠血BNP水平均明显低于模型组和白术内酯Ⅰ低剂量组(P均<0.05)。白术内酯Ⅰ高剂量组大鼠心脏质量指数、左心室质量指数和白术内酯Ⅰ各组大鼠左肾质量指数均明显低于模型组(P均<0.05),白术内酯Ⅰ各组间各指标比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。HE染色显示白术内酯Ⅰ各组大鼠心脏、肾脏非梗死区组织炎症细胞浸润较轻;马松染色显示白术内酯Ⅰ各组大鼠心脏和肾脏非梗死区胶原面积均明显低于模型组(P均<0.05),且白术内酯Ⅰ高剂量组均明显低于白术内酯Ⅰ低中剂量组(P均<0.05)。白术内酯Ⅰ各组心脏和肾脏非梗死区TGF-β1、胶原蛋白Ⅰ、α-SMA荧光强度均明显低于模型组(P均<0.05),且呈剂量依赖性降低趋势。结论白术内酯Ⅰ可保护心肾综合征大鼠心肾功能,机制可能与抑制TGF-β1的表达以及胶原蛋白Ⅰ、α-SMA形成,抗心脏、肾脏组织纤维化有关。

α-Ga_(2)O_(3)基SBD场板结构与电流台阶的关联研究

作为典型的超宽禁带半导体,氧化镓(Ga_(2)O_(3))逐渐以新型功率器件优选材料的身份成为研究热点。近年来它的亚稳态α相因具有相对最宽的带隙,且与蓝宝石、氮化镓相似的六角晶格而受到关注。研究了α-Ga_(2)O_(3)基肖特基二极管器件,在TCAD仿真结果中发现反向偏置的I-V特性中出现了电流台阶。通过调节可能影响电流台阶的主要因素:漂移区厚度、掺杂浓度和场板结构,发现击穿特性中的电流台阶随着漂移区厚度的增加而变长,但对掺杂浓度变化的依赖性较弱,解释了漂移区在反偏电场作用下的耗尽过程是电流台阶的产生机制。采用分段场板结构可以优化漂移区的电场分布并提高器件击穿电压,器件击穿的最大电场强度超过10 MV/cm。对电流台阶机制的分析结果有助于抑制器件泄漏电流,提高耐压范围。

吗替麦考酚酯减轻四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化

目的:肝纤维化是由慢性肝病导致的严重病理后果,并最终发展为肝硬化。吗替麦考酚酯(mycophenolate mofetil,MMF)是器官移植术后常用的免疫抑制剂,与肝纤维化的关系尚不明确。本研究旨在探讨MMF对小鼠肝纤维化的影响及其机制。方法:选用雄性8周龄C57BL/6小鼠24只,将其随机分为空白对照组、MMF组、四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl_(4))组、CCl_(4)+MMF组(每组均n=6)。小鼠处死后,取血清检测丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)及天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST);肝组织行Masson染色评估纤维化程度,采用免疫组织化学染色评估I型胶原蛋白(collagen I,COL1)表达水平;然后采用蛋白质印迹法检测转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)和α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin,α-SMA)的蛋白质表达水平;最后利用real-time PCR检测TGF-β1、α-SMA及COL1的mRNA相对表达量。结果:与CCl_(4)组相比,CCl_(4)+MMF组小鼠的ALT与AST均下降(均P<0.05),肝纤维化程度明显减轻,肝组织中COL1的沉积明显减少(P<0.01)。与CCl_(4)组相比,CCl_(4)+MMF组小鼠肝组织中TGF-β1与α-SMA的蛋白质表达水平均明显降低(均P<0.05);TGF-β1、α-SMA及COL1的mRNA相对表达水平均明显降低(均P<0.05)。结论:MMF能减轻CCl_(4)诱导的小鼠肝纤维化程度,其机制可能与抑制TGF-β1的基因表达及蛋白质合成有关,本研究有望为肝纤维化的治疗提供新方向。

甘精胰岛素联合诺和龙对2型糖尿病患者胰岛功能及TNF-α,IL-6的影响

目的 研究甘精胰岛素联合诺和龙对于高血糖状态的初发2型糖尿病患者胰岛功能、TNF-α及IL-6的作用.方法 选取初发2型糖尿病高血糖状态患者120例,随机平均分为观察组和对照组,每组60例.两组患者均给予糖尿病饮食控制、运动训练和健康知识讲座等基本治疗.对照组在此基础上予以诺和灵30R治疗;观察组在此基础上予以甘精胰岛素联合诺和龙治疗.治疗3个月后复查患者TNF-α、IL-6、胰岛素水平和低血糖事件发生率.结果 观察组患者空腹胰岛素水平显著低于对照组(P<0.05),而餐后2h胰岛素水平显著高于对照组(P<0.05),差异具有统计学意义.观察组患者TNF-α,IL-6水平均显著低于对照组(P<0.05),差异具有统计学意义.低血糖事件发生率观察组显著低于对照组(P<0.05),差异具有统计学意义.结论 甘精胰岛素联合诺和龙控制血糖效果好,能有效改善2型糖尿病高血糖状态患者体内胰岛功能,同时降低TNF-α,IL-6水平.

铁皮石斛多糖对RAW264.7细胞分泌TNF-α的影响

目的研究铁皮石斛多糖(polysaccharides from Den-drobium officinale,DOP)对小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞分泌TNF-α的影响并探讨其作用机制。方法 MTT法检测细胞活性;ELISA法检测TNF-α的分泌水平;反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测TNF-αmRNA表达量;Western blot技术检测胞质I-κBα蛋白的表达量。结果 DOP在20～160mg·L-1范围内明显促进RAW264.7细胞增殖,无细胞毒性;与空白对照组比较,DOP剂量依赖性地促进TNF-α的分泌;上调TNF-αmRNA表达;Western blot结果显示DOP能明显降低胞质内I-κBα蛋白水平。结论 DOP能增强RAW264.7细胞分泌TNF-α,其作用机制可能与降低胞质内I-κBα蛋白水平,活化核转录因子NF-κB,诱导TNF-αmRNA的表达有关。

金荞麦对克雷伯杆菌肺炎大鼠心肌损伤中炎症细胞因子表达的影响

目的研究金荞麦对克雷伯杆菌肺炎大鼠心肌组织损伤的保护作用机制。方法随机将♂SD大鼠分成正常对照组、模型组、金荞麦(6、3、1.5g生药/kg)3个剂量组、左氧氟沙星(25mg/kg)组。计数外周血中白细胞(WBC)和中性粒细胞(PMN),观察肺和心肌组织的病理改变,免疫组化检测大鼠心肌组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及细胞黏附因子-1(ICAM-1)蛋白表达。结果与正常对照组比较,模型组大鼠外周血中的WBC和PMN明显升高,肺脏和心肌组织损伤明显,并且模型组大鼠心肌组织中TNF-α和ICAM-1蛋白表达显著增强(P<0.01)。与模型组比较,金荞麦组和左氧氟沙星组大鼠外周血中的WBC和PMN明显降低,心肌组织损伤明显改善,大鼠心肌组织中TNF-α和ICAM-1蛋白表达明显减弱(P<0.05或P<0.01)。结论 TNF-α和ICAM-1蛋白表达上调参与了肺炎大鼠心肌组织的损伤,金荞麦可通过下调其表达来保护肺炎大鼠心肌组织的损伤作用。

{I_m}(α-逻辑有效公式)的理论及其应用

建立了一阶模糊语言φ的α[I]-真公式,可达α^+[I]-真公式,可数解释模型{I_m}(α-逻辑有效公式),可达{I_m}(α-逻辑有效公式)及{I_m}(α^+-逻辑有效公式)的理论,并讨论了它们的一系列性质及其在近似推理中的应用。

水飞蓟素对肝纤维化小鼠的保护作用及机制探讨

目的探讨水飞蓟素抗CCl4和酒精所致肝纤维化的作用和机制。方法50只♂昆明小鼠随机分为5组,模型组小鼠皮下注射CCl4并饮用酒精制造肝纤维化模型,治疗组以低、中、高3种不同浓度(50、100、200mg.kg-1)的水飞蓟素灌胃进行干预,正常组小鼠皮下注射等量植物油并用生理盐水灌胃。通过检测血清AST、ALT水平、肝脏病理组织学变化、肝脏组织转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-肌动蛋白(α-SMA)及Ⅰ型胶原(collagen-Ⅰ)mRNA表达水平观察水飞蓟素的疗效。结果成功建立肝纤维化模型,模型组小鼠血清AST、ALT,肝脏组织TGF-β1、α-SMA及collagen-ⅠmR-NA表达水平增高,水飞蓟素可降低血清AST、ALT水平,降低肝组织TGF-β1、α-SMA及collagen-ⅠmRNA的表达,减轻肝纤维化程度,中剂量(100mg.kg-1)疗效最好。结论水飞蓟素对酒精和CCl4所致的肝脏损伤有明显保护作用,其机制可能与降低TGF-β1mRNA的表达、抑制肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)活化有关。

脉复生通过核因子-κB通路对脂多糖诱导血管内皮细胞损伤的保护作用

【目的】观察脉复生(主要由牛大力、熟地黄、白花蛇舌草等组成)对脂多糖(LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(ECV304)内核因子-κB(NF-κB)信号通路蛋白表达的影响。【方法】体外培养ECV304细胞,实验分为正常对照组,LPS诱导组(终浓度为1μg/m L),LPS诱导+脉复生高、中、低剂量组(终浓度分别为10、1、0.1μg/m L),采用Western-blot法检测各组细胞中NF-κB p65、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、一氧化氮合酶(i NOS)、环加氧酶-2(COX-2)、血管细胞黏附因子-1(ICAM-1)及细胞间黏附分子-1(VCAM-1)的蛋白表达水平。【结果】与正常对照组比较,LPS诱导组细胞上清液中NF-κB p65、TNF-α、i NOS、COX-2、ICAM-1、VCAM-1蛋白表达均显著增加(P<0.01);脉复生各剂量组能不同程度地减少LPS诱导细胞中NF-κB p65、TNF-α、i NOS、COX-2、ICAM-1、VCAM-1蛋白表达水平,其中中、高剂量组作用显著(P<0.05或P<0.01)。【结论】脉复生可通过抑制LPS诱导的ECV304细胞中NF-κB、TNF-α、i NOS、COX-2、ICAM-1、VCAM-1的蛋白表达,调节NF-κB信号通路,从而发挥保护血管内皮细胞的作用。

氧化苦参碱对慢性胰腺炎胰腺组织中Ⅰ型胶原及α-SMA的影响

目的:探讨氧化苦参碱对大鼠慢性胰腺炎的治疗作用及其机制.方法:Wistar大鼠40只,按照随机数字表分为:阴性对照组(NC组,n=10),以300mg/kg隔日腹腔内注射生理盐水;模型组(CP组,n=10),以700mg/kg隔日腹腔内注射二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDC);OM治疗组(OT组,n=10),以700mg/kg隔日腹腔内注射DDC,1wk后开始每日腹腔注射OM100mg/kg;OM预防组(OP组,n=10),依照模型组方法注射DDC的同时每日腹腔内注射OM100mg/kg.到30d时停止注射DDC,但仍继续注射OM.将上述4组分别在20d、40d处死大鼠(n=5),用Masson染色的方法观察胶原纤维增生,用免疫组织化学的方法观察Ⅰ型胶原、α-SMA在胰腺组织的定位及表达,用Westernblot方法检测α-SMA在胰腺组织表达量的变化.结果:Masson染色可见胶原纤维面积百分比,分别在20、40d时CP组(22.54%±4.45%、35.14%±3.27%)高于其余各组(P<0.05),OP组(13.16%±1.84%、25.14%±3.67%)与OT组(19.58%±2.78%、28.68%±2.55%)较CP组降低(P<0.05),NC组(3.0%±0.32%、2.45%±0.24%)低于其余各组(P<0.05),CP组与OT组在40d时的胶原纤维面积百分比较20d时增高(P<0.05).Ⅰ型胶原与α-SMA在胰腺组织的定位:用免疫组织化学的方法发现NC组胰腺组织α-SMA在血管壁平滑肌表达阳性,其余部位未见表达;CP组α-SMA在血管周围和腺泡间有阳性表达;在OT、OP组,α-SMA在腺泡间有少量表达.Ⅰ型胶原在NC组主要位于胰腺组织周边;CP组除在上述部位外,还表达于腺泡间及小叶周围.用Westernblot方法检测胰腺组织中α-SMA与β-actin的相对表达量分别在20、40d时CP组(1.06±0.04、1.16±0.03)高于其余各组(P<0.05),NC组(0.73±0.06、0.78±0.06)低于其余各组(P<0.05),OT组与OP组比较无差别(P>0.05).结论:慢性胰腺炎时Ⅰ型胶原和α-SMA表达增强,主要位于血管和腺泡周围以及小叶间.OM可以通过减少胰腺组织内胶原的生成及PSC的活化抑制胰腺纤维化的发展.

抗心力衰竭颗粒对舒张性心力衰竭大鼠心肌纤维化的影响

目的心肌纤维化是舒张性心力衰竭(diastolic heart failure,DHF)的重要机制,文中观察抗心力衰竭颗粒对DHF大鼠心肌肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)及胶原表达的影响,以探讨其对心肌纤维化的作用及治疗DHF的机制。方法用腹主动脉缩窄法的方法建立压力超负荷型舒张性心力衰竭大鼠模型,按完全随机分组法分为分为模型组,贝那普利组,抗心力衰竭颗粒大、中、小剂量组和假手术组,用Western blot法检测其心肌TNF-α及Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原的表达,并以Masson染色观察胶原沉积。结果模型组大鼠心肌TNF-α及Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原均较假手术组明显增多,差异有统计学意义(P<0.01),贝那普利组及抗心力衰竭颗粒大剂量组TNF-α表达较模型组明显降低,差异有统计学意义(P<0.01),贝那普利组和抗心力衰竭颗粒中、大剂量组Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原表达较模型组明显降低,差异有统计学意义(P<0.01);Masson染色见贝那普利组及抗心力衰竭颗粒各组胶原沉着较模型组轻。结论抗心力衰竭颗粒能够降低压力超负荷型DHF大鼠心肌TNF-α、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原的表达,有抑制心肌纤维化的作用。

8％─9％和12％─13％低氧气体诱导大鼠左右心室肌自由基增殖

α－苯基－Ｎ－叔了基甲亚胺－Ｎ－氧化物（ＰＢＮ，α－ｐｈｅｎｙｌ－ｔｅｒｔ－ｂｕｔｙｌｎｉｔｒｏｎｅ）由股静脉注入ＳＤ大鼠体内，鼠暴露于８％—９％Ｏ２（ｉｎＮ２）１５ｍｉｎ，左心肌ＰＢＮ－自旋加合物电子自旋共振（ＥＳＲ，ｅｌｅｃｔｒｏｎｓｐｉｎｒｅｓｏｎａｎｃｅ）信号明显增强（与常氧组比，ｎ＝５，Ｐ＜０．０５），而右心肌变化不明显（ｎ＝５，Ｐ＞０．０５）。暴露于１２％—１３％Ｏ２（ｉｎＮ２）的鼠分四组：Ⅰ（低氧１５ｍｉｎ）、Ⅱ（低氧６０ｍｉｎ）、Ⅲ（低氧３０ｍｉｎ／常氧１５ｍｉｎ／低氧３０ｍｉｎ）和Ⅳ（低氧前由股静脉注入ＭＰＥＧ－ＳＯＤ后低氧６０ｍｉｎ）。Ⅱ组左右心肌ＰＢＮ－自旋加合物ＥＳＲ信号增强十分明显（与常氧组比，ｎ＝５，Ｐ＜０．０１），但在Ⅰ组变化不明显（与常氧组比，ｎ＝５，Ｐ＞０．０５）。Ⅲ组右心肌ＰＢＮ－自旋加合物ＥＳＲ信号明显下降（与Ⅱ组比，ｎ＝５，Ｐ＜０．０５），而左心肌下降不明显。Ⅳ组左心肌ＰＢＮ－自旋加合物ＥＳＲ信号明显下降（与Ⅱ组比，ｎ＝５，Ｐ＜０．０５），而右心肌下降不明显。鼠暴露于８％—９％Ｏ２（ｉｎＮ２）１５ｍｉｎ和１２％—１３％Ｏ２（ｉｎＮ２）６０ｍｉｎ期间，左右心肌中超氧化物?

IGF-I、TGF-α、bFGF对猪卵母细胞体外成熟和卵裂的影响

研究了IGF-I、bFGF、TGF-α3种细胞因子单独或者联合作用对猪卵母细胞体外成熟和孤雌激活后卵裂的影响,以确立猪卵母细胞体外成熟的最佳条件。结果表明,3种细胞因子对卵母细胞的成熟和激活后卵裂呈现双重效应(1)20ng·ml-1的IGF-I的成熟率和卵裂率显著的高于对照组和10、30、40、50、100ng·ml-1组[(85.3±2.11)%,(85.4±2.81)%;(71.1±1.91)%,(62.5±0.98)%;(77.5±2.5)%,(59.1±3.93)%;(61.9±1.72)%,(54.3±3.48)%;(58.6±4.26)%,(53.1±1.23)%;(44.4±5.10)%,(49.8±3.55)%;(33.9±3.48)%,(46.1±3.59)%,P<0.05),当IGF-I的浓度达到100ng·ml-1时,成熟率(33.9±3.48)%和卵裂率(46.1±3.59)%降低,与其它各组相比差异显著(P<0.05)。(2)20ng·ml-1的bFGF的成熟率(85.0±1.70)%和卵裂率(85.0±2.82)%最高,和其它各组相比,差异显著(P<0.05)。(3)15ng·ml-1的TGF-α的成熟率(86.9±0.46)%和卵裂率(86.3±2.01)%最高,和其它各组相比,差异显著(P<0.05)。(4)15ng·ml-1TGF-α和20ng·ml-1bFGF联用组,卵母细胞成熟率和分裂率显著高于20ng·ml-1bFGF和20ng·ml-1IGF-I联合组;15ng·ml-1TGF-α和20ng·ml-1IGF-I联合组;与20ng·ml-1bFGF、20ng·ml-1IGF-I和15ng·ml-1TGF-α三者联用组。[(89.2±1.44)%和(88.8±0.17)%.(75.6±0.98)%和(78.3±1.65)%;(77.2±2.54)%和(80.2±2.26)%;(76.4±1.28)%和(77.4±3.73)%,P<0.05]。

广义MP问题的三I真度解

基于真度理论讨论了三I推理机制在真度理论下的意义,求出了真度理论下的广义MP问题的三I解,证明了该解与其形式解是等价的解,并推广得到了广义MP问题的α-三I真度解。

1,25-二羟维生素D_3对脐血单核细胞来源树突状细胞分化、成熟及凋亡的影响

目的探讨1,25-二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]对脐血单核细胞来源树突状细胞(DCs)分化、成熟及凋亡的影响。方法体外分离获得脐血单核细胞,经重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)、重组人白介素-4(rhIL-4)和重组人肿瘤坏死因子-α(rhTNF-α)诱导分化为未成熟树突状细胞(iDCs)以及成熟树突状细胞(mDCs),用1,25(OH)2D3(10 nmol/L)干预(干预组)。采用流式细胞仪检测单核细胞来源DCs分化、成熟各阶段细胞表面分子的表达;Real-Time PCR方法检测1,25(OH)2D3对DCs分化成熟过程中维生素D受体(VDR)和1α-羟化酶(CYP27B1)mRNA表达的影响;Annexin V-FITC和PI染色流式细胞术检测DCs的凋亡情况。另设不使用1,25(OH)2D3干预者为对照组。结果①干预组iDCs表面CD14分子表达显著高于对照组(40.05%vs 5.14%,P<0.001),而CD1a和CD11c分子表达则显著低于对照组(12.73%vs 30.07%,P<0.01;91.27%vs 95.94%,P<0.05),mDCs表面CD80、CD86和HLA-DR分子表达均显著低于对照组(3.52%vs 17.75%,P<0.01;51.10%vs 69.76%,P<0.01;69.38%vs 92.35%,P<0.01)。②随着DCs的分化成熟,iDCs和mDCs的CYP27B1表达均显著高于单核细胞(P=0.005,P=0.002),而且mDCs CYP27B1的表达显著高于iDCs(P=0.01)。iDCs和mDCs的VDR表达显著低于单核细胞(P=0.01,P=0.003),但iDCs和mDCs的VDR表达差异无统计学意义(P=0.43)。③干预组iDCs的CYP27B1表达显著高于对照组(P<0.01),而VDR的表达显著低于对照组(P<0.01),但1,25(OH)2D3对mDCs的CYP27B1和VDR表达无显著影响(P>0.05)。④FITC和PI双染后,流式细胞术检测显示:rhTNF-α刺激48 h后,干预组DCs的早期凋亡率显著高于对照组(20.8%vs 9.23%,P<0.01);rhTNF-α刺激72 h后,干预组DCs的晚期凋亡率显著高于对照组(19.39%vs 7.27%,P<0.01)。结论 1,25(OH)2D3抑制了脐血单核细胞来源DCs的分化和成熟,促进脐血单核细胞来源DCs的凋亡。

强力霉素对大鼠干眼症的疗效观察及眼角膜组织中IL-6和TNF-α的表达变化

目的探讨强力霉素对大鼠干眼症的疗效及眼角膜组织中IL-6、TNF-α的表达变化。方法健康成年SD大鼠48只,摘除主泪腺后建立中重度干眼大鼠模型,随机分为3组进行药物干预,每组16只大鼠,16只眼,分别为:强力霉素组(doxy组),1g/L强力霉素溶液滴眼,4次/d;羧甲基纤维素组(CMC组),10g/L羧甲基纤维素滴眼,4次/d;NaCl组为生理盐水滴眼,4次/d。给药后1、2、5周分别在裂隙灯下观察各组大鼠角膜形态并进行SchirmerⅠ实验、BUT时间(break-up time)测定、荧光素染色评分,5周后应用免疫组化方法检测角膜组织中的IL-6和TNF-α的表达。结果与NaCl组比较,治疗5周时doxy组大鼠角结膜表面湿润度明显增加,SchirmerⅠ试验滤纸湿长(9.56±0.94)mm/5min,BUT时间(9.53±1.06)s,荧光素染色评分(3.37±2.94)分,有显著性差异(P<0.05)。IL-6和TNF-α在3组大鼠角膜中均见表达,doxy组角膜组织中1 000个细胞的IL-6和TNF-α阳性细胞数分别为:78.67±25.29、55.18±28.93,较同一时间CMC组及NaCl组IL-6和TNF-α阳性表达的细胞数明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论强力霉素滴眼液可明显减轻大鼠干眼症状,其机制可能与抑制眼表的炎性因子IL-6和TNF-α表达从而减轻炎症反应有关。