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题名表达产气荚膜梭菌α-β融合蛋白基因工程菌株的构建
被引量:2
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作者
卫广森
许崇波
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机构
辽宁省益康生物制品厂
解放军军需大学军事兽医研究所
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出处
《中国兽药杂志》
2001年第5期5-9,共5页
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文摘
用 PCR从含产气荚膜梭菌 α毒素基因的质粒 p XETA1中扩增出 α毒素基因 ,用 Nco I和 Bam HI双酶切该α毒素基因 ,回收 0 .95 kb的α毒素基因片段 ,再用 Nco I和 Bam HI双酶切含产气荚膜梭菌 β毒素基因质粒 p XETB2 ,与上述回收的 α毒素基因片段连接 ,转化至受体菌 BL2 1( DE3)中。经 Nco I、Bam HI、Not I酶切反应鉴定和核苷酸序列分析证实 ,获得了理想重组质粒p XCPAB2 ,该重组质粒含有α-β融合基因。重组菌株 BL 2 1 ( DE3) ( p XCPAB2 )经 IPTG诱导后 ,其表达产物经 ELISA检测和 SDS- PAGE分析 ,结果表明重组菌株可以高效表达α-β融合蛋白 ,该融合蛋白占菌体总蛋白的 2 2 .1 4%。用从 IPTG诱导的工程菌中提取的包涵体或经甲醛灭活的工程菌制成抗原免疫小鼠 ,免疫小鼠至少能抵抗 2 MLD的 C型产气荚膜梭菌的攻击。这表明构建的工程菌株 BL2 1 ( DE3) ( p XCPAB2 )
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关键词
气荚膜梭菌
α-β融合蛋白
基因工程
菌株
动物
坏死性肠
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Keywords
Closridium perfringens
alpha toxin
beta toxin
fusion gene
gene expression
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分类号
S852.616
[农业科学—基础兽医学]
S856.4
[农业科学—临床兽医学]
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