α-促黑素细胞刺激素、白细胞介素-8与病理性瘢痕

α-促黑素细胞刺激素是一种由皮肤通过自分泌和旁分泌产生的神经免疫调节肽,可能参与了病理性瘢痕的色素沉着、成纤维细胞增殖、细胞因子(如IL-8、TGF-β1)的分泌以及抑制瘢痕炎症等的调控。白细胞介素-8是一种多源性的炎症趋化因子,可能通过促进内皮细胞的生长、迁移和微血管的产生参与了病理性瘢痕的形成。二者在病理性瘢痕中表达均增强。

血清α-促黑素细胞刺激素在钝性胸部外伤中的水平变化及其临床意义

目的研究钝性胸部外伤患者血清中α-促黑细胞刺激素(α-MSH)含量的动态变化及其临床意义。方法选取2014年8月—2016年2月收治入院的钝性胸部外伤患者32例和健康体检者32例,分别采用ELISA方法检测血清中α-MSH和TNF-α在入院时以及入院1 d、4 d、7 d的含量,同时采用免疫比浊法检测血清中CRP的动态变化,结合患者的病情分析,比较钝性胸部外伤患者与健康体检者血清中各指标的表达水平,并用ROC曲线判定各指标在钝性胸部外伤疾病中的敏感性和特异性。结果钝性胸部外伤患者血清中α-MSH水平较对照组明显降低(P<0.05),随着病程的延长表现为先降低后升高。患者血清中TNF-α和CRP的水平与α-MSH具有相同的统计学意义,随着病程的延长表现为先升高后降低,在患者入院1 d时达到峰值。ROC曲线分析在钝性胸部外伤患者中,血清中α-MSH,TNF-α和CRP的ROC曲线下面积分别是0.845、0.728、0.637。结论血清中α-MSH的水平在钝性胸部外伤患者中明显降低,并且敏感度及特异性均较TNF和CRP高,在疾病的诊断评估中更具临床意义。

α-促黑素细胞刺激素颅脑损伤脑保护作用研究进展

创伤性颅脑损伤(TBI)是当今重要的流行病之一,全球都在积极寻找有效的治疗手段与措施,以降低其致残率与致死率。通过探讨α-促黑素细胞刺激素(α-MSH)在颅脑损伤中发挥脑保护功能的不同机制,为其在以后的临床应用提供临床依据。

α-促黑素细胞激素在皮肤病治疗中的研究进展

α-促黑素细胞激素是一种神经内分泌激素,主要负责刺激毛发和皮肤中黑色素的产生。另外,它在控制食欲和能量平衡、性行为和缺血再灌注相关损伤等方面也发挥着重要作用。近年来,人们对开发α-促黑素细胞激素类似物有着很大的兴趣,并且已经初步用于治疗卟啉病、白癜风、家族性良性慢性天疱疮、多形性日光疹、日光性荨麻疹、寻常性痤疮等皮肤病。本文综述了α-促黑素细胞激素在皮肤病中的作用机制和治疗应用。

α-黑素细胞刺激素联合羧甲基纤维素钠对干眼大鼠眼表的保护作用

背景研究表明，α-黑素细胞刺激素（α—MSH）具有抗炎作用，可缓解氢溴酸东莨菪碱诱导的大鼠干眼模型的眼表异常，而人工泪液羧甲基纤维素钠（CMC）能够润滑干眼眼表，但α-MSH能否在大鼠干眼模型中促进人工泪液CMC的治疗效果尚有待进一步研究。目的探讨α-MSH联合CMC对氢溴酸东莨菪碱诱导的大鼠干眼模型中眼表的保护作用。方法选取清洁级雌性Wistar大鼠60只，采用随机数字表法随机分为正常对照组、模型对照组、NaCI点眼组、CMC点眼组、α—MSH点眼组和OL—MSH＋CMC点眼组，每组10只。除正常对照组外，其他各组大鼠分别于每日9：00、12：00、15：00、18：00接受0．5ml（6mg／m1）氢溴酸东莨菪碱皮下注射，共28d，以诱导干眼模型，NaCl点眼组、CMC点眼组、α-MSH点眼组和α—MSH＋CMC点眼组于注射后第1天分别用质量分数0．9％NaCl溶液、质量分数0．5％CMC滴眼液、1×10^-3 mg／mlα-MSH溶液、1×10^-3mg／mld—MSH＋0．5％CMC混合液点右眼，每日2次（8：00和17：00）。各组大鼠分别于用药后0、7、14、21和28d行Shirmer试验I检测（SIt）、泪膜破裂时间（BUT）检测、角膜上皮荧光素染色评分，并于用药后28d完成检查后处死，取包含上下眼睑的整个大鼠眼球，取角膜组织行苏木精一伊红染色，光学显微镜下观察大鼠角膜的形态学变化，大鼠结膜组织行过碘酸希夫染色，光学显微镜下观察各组大鼠结膜杯状细胞的数量。结果随着造模后时间的延长，大鼠sIt值和BUT值逐渐下降，角膜荧光素染色评分逐渐增加，造模后各时间点模型对照组与正常对照组比较，差异均有统计学意义（均P〈0．01）。大鼠用药后7、14和21和28d，NaCl点眼组SIt值、BUT值和角膜荧光素染色评分与模型对照组比较，差异均无统计学意义（均P〉0．05）。用药后7、14和21d，仅-MSH＋CMC点眼组大鼠Sit值分别为（4．800±0．789）、（4．100±0．516）和（4．300±0．856）mm，明显高于相应时间点NaCl点眼组的（2．875±0．719）、（2．375±0．619）和（2．532±0．957）mm，差异均有统计学意义（均P〈0．01）。用药后7d，n—MSH点眼组和α-MSH＋CMC点眼组的BUT值分别为（4．938±1．843）S和（5．000±1．491）s，明显高于NaCl点眼组的（3．250±1．000）S，差异均有统计学意义（均P〈O．01）。用药后各时间点CMC点眼组、α-MSH点眼组和α—MSH＋CMC点眼组大鼠角膜荧光素染色评分均明显低于NaCl点眼组，差异均有统计学意义（均P〈0．05），以α-MSH＋CMC点眼组角膜荧光素染色评分最低。苏木精一伊红染色显示，模型对照组和NaCl点眼组大鼠出现角膜上皮层增厚、角膜水肿、角膜上皮粗糙和角膜基质层纤维排列紊乱，α—MSH＋CMC点眼组大鼠角膜水肿和上皮细胞的增生轻微，角膜形态接近正常对照组。大鼠结膜组织过碘酸希夫染色显示，CMC点眼组、α-MSH点眼组和α-MSH＋CMC点眼组大鼠结膜杯状细胞数量明显多于模型对照组和NaCl点眼组（均P〈0．01）。结论单独使用α—MSH和CMC可一定程度上改善干眼大鼠的角膜组织损伤、角膜形态学异常以及结膜杯状细胞数量的减少，但相对于单独用药，α—MSH和CMC联合应用在造模后早期对改善干眼模型大鼠泪液分泌量和泪膜稳定性作用更明显。

α-促黑素细胞激素对IL-1_β刺激家兔离体下丘脑释放cAMP的抑制作用

本研究采用体外组织培养法观察α-促黑素细胞激素(α-MSH)对白细胞介素-1_β/(IL-1_β)刺激家兔下丘脑组织释放环—磷酸腺苷(cAMP)的影响。结果显示,IL-1_β与下丘脑组织培养40min后,培养上清液中cAMP含量显著高于未加IL-1_β的对照组(P<0.01);而预先(前20min)加入α-MSH再加入同量IL-1_β培养40min,则培养上清液的cAMP含量接近对照组水平(P>0.05)。我们认为,α-MSH抑制下丘脑cAMP的产生,可能是其解热的重要机制之一。

α-黑素细胞刺激素对皮肤黑素合成的调控作用

皮肤色素异常是整形美容外科常见的问题 ,目前还无较好的解决方法 ,主要是对皮肤色素沉着的机制还不完全清楚。近年来 ,逐步认识到α 黑素细胞刺激素 (α melanocyte stimulatinghormone ,α MSH)与黑素的合成有密切关系。α MSH通过与其黑素细胞表面受体—黑皮素 1受体 (melanocortin 1receptor,MC 1R)结合 ,使黑素细胞内酪氨酸酶的表达增加、活性增强 ,黑素合成增加并优先刺激优黑素细胞的合成 ;α MSH还可促进黑素细胞的增生和树突形成及黑素小体的转运 ,同时α MSH对黑素细胞的免疫保护作用及与其他外源性刺激因素协同作用而调控皮肤的色素沉着过程。α MSH的内源性拮抗剂刺鼠信号蛋白 (ASIP)可明显减弱其黑素合成作用 ,降低皮肤的着色能力。随着对α MSH调控黑素合成作用的更进一步了解 ,必将为解决临床上获得性色素沉着或色素脱失性疾病提供一种新的治疗方法。

α-黑素细胞刺激素处理的树突状细胞对小鼠心脏移植物存活时间的影响

目的:观察α黑素细胞刺激素(αMSH)处理的小鼠骨髓来源的树突状细胞(DC)预防同种异基因小鼠心脏移植排斥反应的效果。方法:在供者BALB/c小鼠DC培养的过程中加入αMSH,用流式细胞仪分析DC的表型变化,用ELISA方法检测培养上清中IL 12的分泌水平。在同种异基因心脏移植前,分别将αMSH处理后7 d的DC(αMSH DC)和正常培养7 d的DC(Day7 DC)输至受者C57BL/6小鼠体内,并另设输入PBS的小鼠为对照组,通过颈部Cuff法小鼠异位心脏移植模型,观察心脏移植物存活时间,并用ELISA方法测定受者血清细胞因子水平的变化。结果:αMSH DC表面分子的表达明显低于Day7 DC。αMSH DC培养上清中分泌IL 12 [(95.2±6.3) pg/ml]的水平也明显低于Day7 DC[(197.1±10.2) pg/ml]。与PBS组[(7.17±0.26) d]相比,Day7 DC组[(6.25±0.61) d]的心脏移植物存活时间缩短;而αMSH DC组[(15.08±1.32) d]的心脏移植物存活时间明显延长。与Day7 DC和PBS组相比,αMSH DC组移植后血清IL 2 和IFN γ细胞因子水平明显降低。结论:αMSH可以抑制体外培养的DC表面分子的表达和IL 12的分泌;αMSH处理的DC在体内能延长同种异基因心脏移植物的存活时间。

α-黑素细胞刺激素对体外培养黑素细胞迁移和细胞内钙离子浓度的影响

目的:探讨α黑素细胞刺激素(αMSH)对体外培养黑素细胞迁移和细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)的影响。方法:从正常人包皮分离并纯培养黑素细胞,用αMSH处理纯培养的人表皮黑素细胞,用Transwell微孔膜法研究黑素细胞迁移,激光共聚焦扫描显微镜检测[Ca2+]i。结果:αMSH可诱导黑素细胞迁移,并使[Ca2+]i浓度升高。结论:αMSH可能通过诱导黑素细胞内的Ca2+浓度升高,从而促进黑素细胞的迁移。

α-黑素细胞刺激素在自体移植皮片中的mRNA表达及意义

目的初步探索α-黑素细胞刺激素(α-melanocyte-stimulatinghormone,α-MSH)在自体移植皮片过度色素沉着中的作用。方法标本取自颈部自体中厚移植皮片术后1年,局部需再次矫正的18例患者。在切取颈部自体中厚移植皮片同时于每例移植皮片受区及原供区腹部周围分别切取正常皮肤作对照,切取范围1.0cm×0.5cm。分别利用RT-PCR、银染-丽春红染色法计算自体中厚移植皮片、原供区及受区周围自体正常对照皮肤中α-MSHmRNA电泳条带及表皮的灰度值,测定各组中α-MSHmRNA的半定量表达及黑色素的含量。结果α-MSH在自体中厚移植皮片中的mRNA表达明显高于自体正常对照皮肤,差异有统计学意义(P<0.01);自体中厚移植皮片表皮中黑色素含量较自体正常对照皮肤表皮中的黑色素含量明显增多,差异亦有统计学意义(P<0.01);且表皮中黑色素的含量与α-MSH的mRNA表达量呈正相关。结论α-MSH在自体中厚移植皮片中的表达较在自体正常对照皮肤中显著增高,致皮片中黑色素含量升高,在自体移植皮片过度色素沉着中起重要调控作用。

碱性成纤维细胞生长因子和α-黑素细胞刺激素对体外培养黑素细胞黏附和迁移的影响

目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和α-黑素细胞刺激素(-αM SH)对黑素细胞黏附、迁移的影响。方法:从正常人包皮分离、纯培养黑素细胞,分别用bFGF和-αM SH处理培养黑素细胞;采用纤维连接素包裹的培养板观测黑素细胞黏附,用T ransw ell微孔膜法研究黑素细胞迁移。结果:bFGF和-αM SH均可促进黑素细胞黏附于培养板,bFGF可诱导黑素细胞迁移并呈剂量依赖性(P<0.05),-αM SH对黑素细胞迁移无明显影响(P>0.05)。结论:bFGF和-αM SH可以诱导黑素细胞的黏附和/或迁移,参与白癜风的恢复。

β-促黑素细胞刺激素与维持性腹膜透析患者皮肤色素沉着的关系及危险因素分析

目的探讨β-促黑素细胞刺激素(beta of melanocyte stimulating hormone,β-MSH)与慢性肾脏病5期患者皮肤色素沉着(skin pigmentation,SP)的关系及其危险因素分析,以期在临床治疗过程中可以通过检测患者的各项临床生化指标为制订治疗方案提供参考,减少其发生皮肤色素沉着的概率,提高患者生活质量以及总体缓解率。方法选取2019年12月至2020年10月新乡医学院第一附属医院肾脏病医院完整诊断并确诊为慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)5期患者70例。采用ELISA方法检测入院时血浆中β-MSH水平,以中位数分为高β-MSH水平和低β-MSH水平两组进行基线特征比较;同时根据肉眼观察皮肤情况选取不同皮肤色度的15例患者,由皮肤科医师进行皮肤活检,分别行苏木素-伊红染色和免疫组化,采用Spearman方法分析血浆β-MSH与黑色素细胞数量的相关性。腹主动脉钙化(abdominal aorrtic calcification,AAC)评分:两位放射科医师背靠背评估AAC得分。采用单因素和多因素logistic回归分析β-MSH与CKD 5期皮肤色素沉着的危险因素。结果不同皮肤色度的15例患者血浆β-MSH水平与皮肤黑色素细胞数量呈显著相关性(r=0.814,P<0.001)。与低水平血浆β-MSH组比较,高水平血浆β-MSH组透析龄、血尿素氮、血肌酐、超敏-C反应蛋白均升高,估算肾小球滤过率降低,差异有显著性;高水平血浆β-MSH组的ACC评分降低,差异有显著性(P=0.046)。单因素logistic回归分析显示:透析龄、血肌酐、超敏C反应蛋白是高水平血浆β-MSH的危险因素,估算肾小球滤过率(estimated glomerular filtration rate,eGFR)是其保护因素。多因素logistic回归分析显示:血尿素氮、超敏C反应蛋白是高水平血浆β-MSH的危险因素,eGFR是其保护因素。结论CKD 5期患者皮肤色素沉着的严重程度与血浆β-MSH水平密切相关,皮肤色素沉着越深,β-MSH水平越高。超敏C反应蛋白、血尿素氮是CKD 5期患者皮肤色素沉着的危险因素。

α-黑素细胞刺激素对恶性黑色素瘤细胞Fas/FasL表达的影响及其与凋亡的关系

目的:研究α黑素细胞刺激素(αMSH)对恶性黑色素瘤细胞凋亡特性的影响。方法:采用流式细胞检测分析、DNA琼脂糖凝胶电泳方法检测α黑素细胞刺激素作用后恶性黑色素瘤细胞的凋亡情况,应用RT PCR检测恶性黑色素瘤细胞Fas/FasLmRNA的表达情况。结果:α黑素细胞刺激素作用1、3、24小时恶性黑色素瘤细胞凋亡率分别为14.9%、33.7%、46.7%,α黑素细胞刺激素能明显上调恶性黑色素瘤细胞Fas/FasL的表达,各处理组间差异比较均具有显著性(P<0.05);α黑素细胞刺激素作用24小时组细胞的DNA琼脂糖凝胶电泳显示明显“梯状(ladder)”条带。结论:α黑素细胞刺激素能上调恶性黑色素瘤细胞Fas/FasL的表达并诱导恶性黑色素瘤细胞的凋亡。

新型α-黑素细胞刺激素类似物对内毒素休克小鼠的保护作用

目的:评价新型α-黑素细胞刺激素(α-MSH)类似物对内毒素休克小鼠的保护作用。方法:雌性BALB/c小鼠经腹腔注射(ip)1μg脂多糖(LPS)和20 mg D-半乳糖胺(D-GalN)建立内毒素休克模型,30 min内ip给予2．5 mg·kg^(-1)新型α-MSH类似物,同时设置α-MSH,[Nle^4,D-Phe^7]α-MSH(NDP-MSH)和磷酸盐缓冲液对照。取小鼠眼眶血分离血清,以ELISA法测定TNF-α和IL-1β含量,用Griess试剂检测NO。观察小鼠生存情况,取主要脏器做常规组织病理检查。结果:新型α-MSH类似物能明显延长内毒素休克小鼠存活时间,其中位生存时间为32 h;显著降低血清TNF-α,IL-1β和NO水平(P＜0．01),并减轻重要脏器的炎症损伤。结论:新型α-MSH类似物对内毒素休克小鼠有显著的保护作用。

α-黑素细胞刺激素在不同实验动物表皮中的表达及意义

[目的]初步研究α-黑素细胞刺激素(α-melanocyte-sti mulating hormone,α-MSH)在不同实验动物表皮中的表达并阐明其意义,为色素障碍性皮肤病动物实验提供新的理论依据。[方法]对4组不同正常实验动物的表皮标本进行组织切片,应用免疫组织化学技术,观察α-MSH在4组不同实验动物表皮中的表达。[结果]α-MSH在白色昆明小鼠毛囊及白色FMN豚鼠表皮中呈阴性表达,在C57BL/6J小黑鼠毛囊黑素细胞及棕黄色HARTLY豚鼠表皮黑素细胞中呈阳性表达。[结论]白色昆明小鼠及白色FMN豚鼠适宜做色素增加动物实验研究,C57BL/6J小黑鼠及棕黄色HARTLY豚鼠适宜做色素减退动物实验研究;α-MSH可做为观测色素代谢障碍性疾病动物实验研究的一个重要指标。

在羊驼皮肤黑色素细胞中α-黑素细胞刺激素对诱导一氧化氮合酶的影响

为研究α-黑素细胞刺激素(α-Melanocyte stimulating hormone,α-MSH)对诱导型一氧化氮合酶(NOS2)在羊驼皮肤黑素细胞中的影响。采用体外培养正常羊驼皮肤黑素细胞,检测不同浓度α-MSH(0、10-9、10-8、10-7mol/L)对羊驼皮肤黑素细胞中诱导型一氧化氮合酶(NOS2)基因表达量的影响;检测不同浓度一氧化氮供体(SNP)(0、10-5、10-4、10-3mol/L)对羊驼皮肤黑素细胞中阿黑皮素原(POMC,α-黑素细胞刺激素的前体)基因表达量的影响。结果表明:α-MSH处理羊驼皮肤黑素细胞5 d后,NOS2mRNA表达量有降低趋势,10-8mol/L较为明显;SNP处理5 d后,POMCmRNA表达量无明显变化。α-MSH能诱导羊驼皮肤黑素细胞NOS2mRNA基因表达量降低。

新型α-黑素细胞刺激素类似物亲和力和生物学效应的测定

检测新型α-黑素细胞刺激素(α-MSH)类似物与受体的亲和力和生物学效应。构建黑皮质激素受体表达质粒,经测序鉴定后以磷酸钙-DNA共沉淀法转染HEK-293细胞,48h后加入含900μg.mL-1G418的细胞维持液,稳定表达后以流式细胞仪检测。采用放射性配体结合分析测定新型α-MSH类似物对受体的亲和力,并以[3H]环磷酸腺苷(cAMP)测定盒检测新型α-MSH类似物作用细胞后的cAMP水平。结果显示,新型α-MSH类似物对MC1R,MC3R,MC4R及MC5R的抑制常数Ki分别为(0.159±0.040),(35.430±6.743),(19.293±2.780)和(2.230±0.670)nmol.L-1。其对MC1R,MC3R,MC4R及MC5R的EC50值分别为(0.45±0.07),(7.80±0.65),(2.55±0.23)和(0.33±0.09)nmol.L-1。新型α-MSH类似物是MC1R和MC5R高选择性的激动剂。

α-黑素细胞刺激素对同种异体小鼠异位心脏移植排斥反应的抑制作用

目的观察α-黑素细胞刺激素(α-MSH)对同种异基因小鼠移植心脏存活时间的影响,以了解其在移植免疫中的作用。方法小鼠颈部心脏移植的Cuff模型,腹腔给予α-MSH,观察移植心脏的存活时间和病理改变。结果移植小鼠给予α-MSH后,移植心脏的存活时间比对照组显著延长,心脏病理显著改善,其中以50μg组效果最佳。结论α-MSH能抑制同种异基因小鼠的心脏移植排斥反应。

α-黑素细胞刺激素基因修饰的树突状细胞延长小鼠移植心脏的存活时间

为观察α-黑素细胞刺激素(α-MSH)基因修饰的树突状细胞(DC)抑制同种异型基因小鼠心脏移植排斥反应的效果,以腺相关病毒(AAV)为载体将α-MSH基因导入BALB/c小鼠骨髓来源的未成熟DC,制备了α-MSH基因修饰的DC(α-MSH-DC)。在小鼠心脏移植前7 d,将α-MSH-DC输至受者C57BL/6小鼠体内,通过免疫组化方法观察供者α-MSH-DC在受者脾脏内存在的情况,用混合淋巴细胞反应(MLR)测定受者脾脏T细胞对供者同种抗原的反应性。通过颈部Cuff法小鼠异位心脏移植模型,观察心脏移植物存活时间,并用ELISA方法测定受者血清细胞因子水平的变化。结果显示,α-MSH-DC在受者脾脏内存在时间延长,能诱导受者脾脏T细胞的抗原特异性低反应性,使移植心脏存活天数延长至(19.3±2.35)d,较PBS对照组的(7.0±0.33)d明显延长(P<0.01)。使受者小鼠血清IL-2和IFNγ-水平显著降低(P<0.01),明显升高IL-4、IL-10水平(P<0.01)。表明移植前输入供者α-MSH基因修饰的DC能延长同种异型基因心脏移植的存活时间。

α-黑素细胞刺激素对缺血再灌注损伤大鼠肠黏膜免疫功能的影响

目的 :探讨α 黑素细胞刺激素 (α MSH )对缺血再灌注 (I/R)损伤大鼠肠黏膜免疫屏障的保护作用及机制。方法 :采用大鼠小肠缺血 45min再灌注模型 ,治疗组于再灌注 5min内尾静脉注射α MSH。于再灌注后 2h用免疫放射法测定血清、肠黏膜组织中分泌型免疫球蛋白A (sIgA)的含量 ;四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法 (MTT)测定Peyer’s淋巴结 (PP)、上皮内淋巴细胞 (IEL)和固有层淋巴细胞 (LPL)增殖活力。结果 :肠I/R后血清和肠黏膜中sIgA含量下降 ,淋巴细胞增殖活性下降 (P <0 0 1) ;不同剂量的α MSH治疗组均能逆转I/R后sIgA含量下降和淋巴细胞增殖活力下降 ,差异有显著意义 (P <0 0 1) ,而不同剂量α MSH治疗组间各指标无显著性差异 (P >0 0 5 )。结论 :外源性α MSH可参与调节肠道相关淋巴组织免疫功能 。