在线固相萃取/二维液相色谱法检测婴幼儿配方食品中视黄醇顺反异构体和α-生育酚手性异构体

建立了在线固相萃取/二维液相色谱分离检测婴幼儿配方食品中全反式视黄醇、13-顺式视黄醇和α-生育酚手性异构体的方法。样品经皂化,定容、离心、过滤后进样,经二乙烯基苯与N-乙烯基吡咯烷酮大孔共聚物(HLB)在线固相萃取柱在线净化后,通过切换阀将视黄醇、4种生育酚洗脱至一维色谱柱五氟苯基填料柱(PFP),在一维色谱柱中实现总视黄醇和4种生育酚异构体的分离。再通过捕集柱与中心切换阀将总视黄醇和α-生育酚切割至二维色谱柱,在3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯涂敷的手性色谱柱(CND)上实现了全反式与13-顺式视黄醇的异构体分离,以及α-生育酚的d、l手性异构体分离。采用紫外和荧光检测器检测,外标法定量。结果表明:全反式视黄醇、13-顺式视黄醇的线性范围为0.1~5.0 mg/L,d-α-生育酚、l-α-生育酚的线性范围为1.0~30.0 mg/L,相关系数均大于0.999,定量下限分别为53μg/100 g、56μg/100 g、290μg/100 g和340μg/100 g;低、中和高3个加标浓度下的回收率为90.9%~106%,相对标准偏差(RSD)不大于2.8%。该方法可用于乳基婴幼儿配方食品中视黄醇和α-生育酚的检测及其生物有效性评价。

手性液相色谱法直接定量乳粉中RRR-α-生育酚

目的建立手性液相色谱法直接测定乳粉中RRR-α-生育酚的检测方法。方法样品经氢氧化钾皂化,石油醚-异丙醚萃取。经小粒径纤维素衍生物型手性柱Daicel Chiralcel OD-3 (2.1 mm×150 mm, 3μm)直接分离,采用无水乙醇-正己烷(5:995, V:V)(A)和三乙胺-正己烷(5:995, V:V)(B)(A:B=10:90)作为流动相进行等度洗脱,流速为0.2 mL/min,柱温30℃,检测波长为294 nm,外标法定量。结果 RRR-α-生育酚和其他α-生育酚异构体的分离度大于1.2。在0.5~50μg/mL范围内线性关系良好,相关系数大于0.999,检出限为0.20 mg/100 g,定量限为0.60 mg/100 g,加标回收率为95.0%~109.4%,相对标准偏差为2.7%。结论该方法快速、准确、灵敏,适合测定乳粉中RRR-α-生育酚的含量。

α—生育酚立体异构体的饲蛋转移

全消旋α-生育酚乙酸酯是用于添加饲料的最普通的维生素E制剂。这一化学合成物是α-生育酚乙酸酯八种立体异构体或四种对映体对的混合物。已有人证明这种对映体对。即外消旋体,以等摩尔量存在。这一结果说明此种合成方法可使全消旋α-生育酚乙酸酯内八种立体异构体的比例相似。已经证实,α-生育酚乙酸酯的八种立体异构体的生物活性,有着明显差异。只有天然来源的异构体,即(R,R,R)α-生育酚的生物活性最高。采用统一的白鼠吸收妊娠试验,确定其它异构体的活性,已发现它们是(R,R,R)-α-生育酚乙酸酯活性的21～90％。

高效液相色谱-荧光检测法同时测定多烯酸乙酯软胶囊中4种生育酚的含量

目的：建立多烯酸乙酯软胶囊中4种生育酚的HPLC含量测定方法,同时对不同厂家产品中4种生育酚（α、β、γ、δ-生育酚）的含量进行比较。方法：采用色谱柱为MERCK Lichro CART 250-4硅胶柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为正己烷-异丙醚（80∶20）,流速1.0 m L·min-1,柱温25℃,荧光检测器激发波长298 nm,发射波长325 nm。结果：4种生育酚的质量浓度均在40～1 000 ng·m L-1范围内线性关系良好（r〉0.999）;检出限分别为7.0、6.0、6.2、6.2 ng·m L-1;加样平均回收率为90.1%～99.7%。国内不同厂家的α-生育酚的含量范围为1.92～32.95μg·g-1,γ-生育酚范围为1.23～21.22μg·g-1,δ-生育酚范围为0.83～13.05μg·g-1,β-生育酚均未检出,国外同类品种中α-生育酚的含量约为1 800μg·g-1。结论：本文建立的生育酚的高效液相色谱-荧光检测法具有较高的灵敏度、精密度和准确性,可作为有效控制ω-3多不饱和脂肪酸乙酯类药物的产品质量的检测方法。