γ-突触核蛋白通过调控自噬对结肠癌细胞起保护作用

目的:研究γ-突触核蛋白(γ-synuclein)对内质网应激诱导的结肠癌细胞自噬和凋亡的影响及其细胞保护作用。方法:针对稳定表达γ-synuclein siRNA的人结肠癌HCT116细胞和空载体HCT116细胞,通过基因表达谱芯片分析γ-synuclein下游差异基因,找到可能的自噬及凋亡相关分子。用毒胡萝卜素(thapsigargin,TG)模拟内质网应激,采用Western blot检测γ-synuclein蛋白、自噬相关蛋白[微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)、beclin-1、自噬相关蛋白5(autophagy-related protein 5,ATG5)和ATG7]及凋亡相关蛋白{多腺苷二磷酸核糖聚合酶[poly(ADP-ribose)polymerase,PARP]、pro-caspase-3和pro-caspase-9}的表达,CCK-8法检测细胞活力,荧光显微镜观察吖啶橙染色的酸性囊泡细胞器和绿色荧光蛋白标记的LC3,检测人结肠癌HCT116和SW480细胞自噬、凋亡及活力的变化。分别采用γ-synuclein siRNA、细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)抑制剂PD98059、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)抑制剂SP600125和JNK激活剂anisomycin预处理,Western blot检测γ-synuclein及ERK和JNK信号通路相关蛋白表达,检测伴随的HCT116细胞自噬和凋亡的变化,研究γ-synuclein通过调控相关信号通路对细胞自噬的影响及其细胞保护作用。结果:TG模拟内质网应激诱导的结肠癌细胞自噬主要发生在早期(0~24 h),细胞凋亡主要发生在晚期(36~48 h)。内质网应激上调γ-synuclein的表达,并伴有自噬的增强。γ-synuclein早期(0~24 h)通过激活ERK和JNK通路促进自噬,晚期(36~48 h)通过抑制JNK通路抑制凋亡,从而起到保护细胞的作用。γ-synuclein可能在内质网应激诱导的细胞自噬和凋亡之间的过渡发挥一定的作用。结论:在内质网应激环境下,γ-synuclein通过调控ERK和JNK信号通路来促进自噬、抑制凋亡,发挥针对结肠癌细胞的保护作用,这为抗肿瘤治疗提供了一个潜在的思路。

α-突触核蛋白的异常修饰及在帕金森病中的作用机制

背景:因α-突触核蛋白异常聚集而形成的路易体是帕金森病特征性病理变化。近年多项研究揭示α-突触核蛋白聚集体的形成与其翻译后修饰关系密切。α-突触核蛋白的磷酸化、硝基化、乙酰化、泛素化等修饰在帕金森病的发病和进展中的作用得到广泛关注。目的:通过文献综述的方法阐述关于α-突触核蛋白修饰类型、修饰位点对帕金森病的特征性病理形成和进展的影响。方法:由第一作者系统检索中国知网和PubMed数据库,以“α-突触核蛋白,帕金森病,磷酸化,乙酰化,泛素化,硝基化”为中文检索词,以“α-Synuclein,Parkinson’s disease,phosphorylation,acetylation,ubiquitination,nitration”为英文检索词,收集整理近年来与α-突触核蛋白异常修饰相关的文献,最终纳入61篇文献进行综述分析。结果与结论:①α-突触核蛋白异常修饰与其蛋白结构和其带有正负电荷密切相关,其氨基端带有正电荷,易发生泛素化和乙酰化修饰;其中心疏水区域因其疏水特性易形成β片层结构,其羧基端带有负电荷,是主要磷酸化修饰区域。②磷酸化修饰位点可促进磷酸化修饰并与α-突触核蛋白的聚集密切相关,而蛋白激酶可靶向激活翻译修饰,可能有助于促进或抑制聚集体形成。③α-突触核蛋白的降解途径主要发挥清除病理性蛋白的作用,各种激酶催化促使蛋白泛素化修饰后,使其功能受损,导致蛋白异常堆积,从而加重神经退变。④α-突触核蛋白的氨基端经过乙酰化修饰后,可提升蛋白对细胞膜的穿梭能力,减缓蛋白聚集,可能为神经细胞保护靶点,但是在突变型蛋白发生乙酰化修饰后反而产生相反作用。⑤α-突触核蛋白的硝基化修饰主要与氧化应激相关,在活性氧的作用下,硝基化修饰的蛋白聚集倾向增强。⑥由于α-突触核蛋白不同翻译后修饰产生的影响各异,因此阐明其翻译后修饰的主要机制,抑制促使蛋白聚集的翻译后修饰,可能为帕金森病早期诊断和治疗提供新靶点参考。

PARK2介导的帕金森病中帕金蛋白对α-突触核蛋白的作用

帕金森病(PD)是常见的神经退行性疾病之一,主要表现为运动障碍,伴有主要运动症状,如运动迟缓、僵直性和静息性震颤,还可能表现为多种非运动症状,如自主神经功能障碍、认知障碍、睡眠障碍和神经精神症状〔1〕。

核定位人源α-突触核蛋白转基因小鼠的建立

目的 建立一种核定位人源α-突触核蛋白(α-synuclein, α-syn)转基因小鼠,并探究人源α-syn核输入对小鼠行为的影响。方法 构建hSNCA-NLS和EGFP的慢病毒载体,利用显微注射法建立转基因小鼠模型,通过PCR和Western Blot方法鉴定转基因首建鼠及其子代基因型和蛋白表达情况。采用免疫荧光鉴定人源α-syn在小鼠脑组织中的共定位情况,同时采用旷场、转棒、O迷宫实验评价转基因小鼠的行为改变情况。结果 hSNCA-NLS基因成功插入小鼠基因组中,人源α-syn成功表达,并且有明显的核定位现象。进一步研究发现,核定位人源α-syn转基因小鼠在2月龄时开始表现出了运动功能障碍,发生了星形胶质细胞增生和炎症反应,于9月龄时表现出了明显的焦虑样症状,γ-氨基丁酸(GABA)基因表达减少,这些表现一直持续到小鼠12月龄。结论 成功构建了核定位人源α-syn转基因小鼠,小鼠表现出明显的运动功能障碍和焦虑样症状。该模型的成功建立可以为研究α-syn核定位现象在帕金森病中的作用提供一定的研究基础。

帕金森病前驱期α-突触核蛋白生物标志物的研究进展

帕金森病(PD)是最常见的神经退行性疾病之一,临床诊断的PD患者已出现实质性、不可逆的神经退行性病变,临床上通过多巴胺能药物对症治疗并不能阻止疾病进展和降低致残率。近年来,帕金森病研究关口前移,众多研究在其前驱期探索神经保护疗法,以期延缓与阻止疾病进展。在此类型研究中,如何大范围准确筛选、检测、识别PD前驱期患者是目前所面临的难题。α-突触核蛋白是PD的标志性蛋白,本文以α-突触核蛋白为切入点,阐述其在PD发病过程中的重要理论地位,整合近年来已报道的PD前驱期患者脑脊液、组织、粪便中α-突触核蛋白的检测特异性,整理各研究所采用的检测方法及其优缺点,为临床进一步探索该标志物提供参考。

奥氮平联合脑心通胶囊治疗精神分裂症的效果及对血清α-突触核蛋白和褪黑素水平的作用

目的:探究奥氮平联合脑心通胶囊治疗精神分裂症的疗效及对血清α-突触核蛋白和褪黑素水平的影响。方法:选取2021年3月至2023年5月该院收治的精神分裂症患者124例,采用随机数字表法分为对照组和观察组,每组62例。对照组患者接受奥氮平治疗,观察组患者在对照组的基础上加用脑心通胶囊治疗,两组患者均连续治疗8周。比较两组患者的临床疗效、精神状态、生活质量、认知功能、糖代谢、血清α-突触核蛋白和褪黑素水平。结果:观察组患者的总有效率明显高于对照组[85.48%(53/62)vs.69.35%(43/62)],差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组患者的阳性症状、阴性症状、精神病理表现以及阳性和阴性症状量表总分明显低于对照组,心理社会评分、症状和副作用评分、运动和精力评分低于对照组,神经心理状态量表评分明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组患者治疗后的空腹血糖和餐后2 h血糖水平较对照组更低,α-突触核蛋白和褪黑素水平较对照组更高,差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组、对照组患者的不良反应发生率分别为4.84%(3/62)、6.45%(4/62),差异无统计学意义(P>0.05)。结论:奥氮平联合脑心通胶囊治疗精神分裂症患者能显著提高疗效,恢复患者精神状态、生活质量、认知功能和糖代谢水平,提高血清α-突触核蛋白和褪黑素水平,且不良反应小。

帕金森病患者血清同型半胱氨酸、脑源性神经营养因子、α-突触核蛋白水平与脑白质病变的关系研究

目的 探讨帕金森病患者血清同型半胱氨酸(Hcy)、脑源性神经营养因子(BDNF)、α-突触核蛋白(α-Syn)水平与脑白质病变的关系。方法 选取扬中市人民医院2022年6月至2023年6月收治的104例帕金森病患者为观察组,并选取同期健康体检者60例为对照组,收集两组临床资料并测定血清Hcy、BDNF、α-Syn水平;依据脑白质病变分级将观察组患者分正常组、轻度病变组、中度病变组及重度病变组,比较四组临床资料以及上述指标,并采用多因素Logistic回归分析帕金森病患者脑白质病变的影响因素、受试者工作特征曲线(ROC)分析生化指标对脑白质病变的预测价值。结果 观察组血清Hcy、α-Syn水平高于对照组,BDNF水平低于对照组(P<0.05);轻度病变、中度病变及重度病变组患者年龄、病程、Hoehn-Yahr(HY)分级、统一帕金森病评定量表(UPDRS)-Ⅲ评分、Hcy、α-Syn水平高(大)于正常组,BDNF水平低于正常组(P<0.05);多因素Logistic回归分析显示,Hcy、BDNF、α-Syn水平为帕金森病患者脑白质病变的影响因素(P<0.05);结果显示α-Syn水平诊断帕金森病患者脑白质病变的AUC值最高为0.949,敏感度、特异度分别为82.69%、96.67%;其次为BDNF(0.829);且α-Syn诊断AUC值明显高于BDNF、Hcy诊断(Z=2.832、4.991,P<0.05)。结论 Hcy、α-Syn升高是帕金森病患者脑白质病变的独立危险因素,BDNF升高是其保护因素,且Hcy、α-Syn、BDNF可作为帕金森病患者是否发生脑白质病变的生物标志物。

血清生长相关蛋白-43、α-突触核蛋白对小儿癫痫诊断价值研究

目的探讨癫痫患儿血清生长相关蛋白-43(GAP-43)、α-突触核蛋白(α-Syn)水平,分析两者对小儿癫痫的诊断价值。方法纳入2019年4月—2022年4月临汾市人民医院儿科诊治小儿癫痫患者80例为癫痫组,晕厥患儿50例为晕厥组,腹股沟斜疝患儿50例为对照组。利用酶联免疫吸附试验检测血清GAP-43、α-Syn水平;比较3组患儿间及不同临床特征癫痫患儿血清GAP-43、α-Syn水平差异;Pearson相关分析血清GAP-43、α-Syn与癫痫发作严重程度量表评分(NHS3)的相关性;受试者工作特征曲线分析血清GAP-43、α-Syn对小儿癫痫的诊断价值。结果血清GAP-43水平比较,癫痫组<晕厥组<对照组(F/P=821.793/<0.001),血清α-Syn水平比较,癫痫组>晕厥组>对照组(F/P=419.176/<0.001);癫痫患儿血清GAP-43在癫痫局灶性发作、无认知功能损害者中升高(t/P=8.745/<0.001,10.070/<0.001),α-Syn水平在癫痫局灶性发作、无认知功能损害者中降低(t/P=4.236/<0.001,14.881/<0.001),二者在患儿性别、年龄、脑电图异常、头颅MR异常者中比较,差异无统计学意义(P均>0.05);血清GAP-43水平与NHS3评分呈显著负相关(r/P=-0.645/<0.001),血清α-Syn水平与NHS3评分呈显著正相关(r/P=0.702/<0.001);血清GAP-43、α-Syn及两项联合预测小儿癫痫的AUC分别为0.740、0.738、0.835,二项联合的AUC高于单项预测(Z=4.482、4.391,P均<0.001)。结论癫痫患儿血清GAP-43降低,α-Syn水平升高,两者与癫痫类型、认知功能损害有关,两项联合对小儿癫痫具有较高的诊断价值。

α-突触核蛋白在帕金森疾病中诱导线粒体损伤的机制

背景:目前对于帕金森病的发病机制尚不清楚,相关研究表明α-突触核蛋白、线粒体与帕金森病发病机制密切相关,主要涉及氧化应激、线粒体复合物损伤、钙稳态、线粒体动力学和线粒体质量控制等方面。目的:对帕金森病中α-突触核蛋白与线粒体损伤之间的关系进行综述。方法:第一作者以“帕金森病,线粒体损伤及机制,α-突触核蛋白”为检索词检索中国知网、万方数据库2010-2024年相关文献50余篇;以“Parkinson’s disease,Alpha-synuclein,mitochondria,Oxidative stress,Calcium homeostasis,Mitophagy,Mitochondrial dynamics,Mitochondrial protein introduction”为检索词检索PubMed数据库2010-2024年相关文献750余篇,最终纳入70篇文献进行综述。结果与结论:最近研究证实了线粒体功能障碍在帕金森病病理生理学中的重要作用,尤其α-突触核蛋白与线粒体之间的相互作用是帕金森病发病机制中尤为显著的因素。从天然未折叠的α-突触核蛋白开始,最终形成成熟的原纤维的级联事件统称为α-突触核蛋白聚集。聚集产生的毒性在多巴胺能神经元中积累,继而破坏线粒体功能引起帕金森病。因此,α-突触核蛋白与线粒体功能障碍之间这种双向关系的潜在机制可能为帕金森病的病理生理学提供新的见解。

α-突触核蛋白在帕金森病中的研究进展

帕金森病(Parkinson disease,PD)是一种慢性且逐渐进展的神经退行性疾病,居于神经退行性疾病中的第二位,以65岁老年人多见。近年来帕金森患者年轻化趋势明显,30~50岁患者越来越多。据统计,2020年PD的全球患病率已由原来的1%增加到4%,随着全球人口老龄化的趋势,预计PD的患病率将迎来急剧增长[1]。PD的临床表现包括多种运动和非运动症状。

α-突触核蛋白在红核中异常沉积对运动和痛觉的影响

目的:在红核(RN)中利用病毒表达α-突触核蛋白(α-Syn)探讨RN中α-Syn异常沉积对运动和感觉障碍的影响。方法:将C57BL/6J小鼠随机分成两组:实验组(在RN注射表达α-Syn的病毒)和对照组(在RN注射对照病毒)。采用旷场实验评估小鼠的运动能力,转棒测试评估小鼠的平衡协调能力,爬杆实验评估小鼠的运动控制功能,铁丝悬挂实验评估小鼠的前肢肌肉力量和运动协调能力,握力测量评估小鼠的神经肌肉力量,机械刺激和热刺激测试评估小鼠的痛阈。结果:与对照组相比,实验组小鼠α-Syn异常沉积在RN,并显著损毁该区域神经元;实验组小鼠在旷场中的运动距离(P<0.001)和运动时间(P<0.001)显著增加,不动时间明显降低(P<0.001),转棒测试中掉落潜伏期明显减少(P<0.05),爬杆实验中转身到达底部的时间增加(P<0.05),肌力实验中四肢肌力和体质量归一化的四肢肌力增加(P<0.05),热缩足反射潜伏期显著降低(P<0.05)。结论:α-Syn在RN异常沉积促进小鼠的自主运动,降低小鼠的平衡协调能力和运动控制功能,增强小鼠的四肢肌肉力量,对热痛刺激较为敏感。

血清胃泌素17、胃蛋白酶原、γ-突触核蛋白检测在老年消化道早癌、癌前病变诊断中的应用

目的分析血清胃泌素17(G-17)、胃蛋白酶原I(PG I)、胃蛋白酶原II(PG II)、γ-突触核蛋白(SNCG)检测在老年消化道早癌、癌前病变诊断中的应用价值。方法选取我院198例老年早期胃癌及癌前病变患者,均经内窥镜检查与病理证实,分为早癌组与癌前病变组,并取同期50例老年胃镜良性病变者为胃镜良性病变组,检测其血清G-17、PG I、PG II及SNCG水平,进行相关性分析,并采用受试者工作特征(ROC)曲线分析G-17、PG I/PG II联合SNCG对早期胃癌及癌前病变诊断效能。结果早癌组血清G-17、SNCG水平显著高于其余两组,且癌前病变组高于胃镜良性病变组(P<0.05);早癌组血清PG I水平、PG I/PG II显著低于其余两组,且癌前病变组显著低于胃镜良性病变组(P<0.05);PG I与G-17、SNCG呈负相关(P<0.05),G-17与SNCG呈正相关(P<0.05);ROC曲线分析显示,四项联合诊断敏感度为93.4%、特异度为96.0%,曲线下面积(AUC)为0.987,大于G-17、PG I、PG I/PG II及SNCG单独诊断(0.960、0.824、0.810、0.961)。结论血清G-17、PG I、PG I/PG II联合SNCG检测对老年早期胃癌及癌前病变具有较高诊断效能。

更正:应重视自主神经功能障碍在中枢性α-突触核蛋白病诊断与预后预测中的作用

我刊2024年第24卷第3期刊出的“应重视自主神经功能障碍在中枢性α-突触核蛋白病诊断与预后预测中的作用”[I)一文,由于编辑加工失当,致使部分内容的描述欠妥,在此特向该文作者王含教授致歉,并做出如下更正:第113页左栏第1~6行“α-突触核蛋白病(α-synucleinopathy)亦称中枢性α-突触核蛋白病,是一类神经系统变性疾病。

姜黄素通过抑制α-突触核蛋白对脂多糖诱导的帕金森病模型的神经保护作用

目的 探究姜黄素(Cur)对帕金森病模型的神经保护作用及其机制。方法 SD大鼠随机分为对照(CON)组、模型(PD)组和姜黄素(Cur)低、中、高剂量组,每组10只。脂多糖注射至大鼠黑质建立帕金森病模型,Cur各组每天腹腔注射姜黄素20、40、60 mg/kg,共21d。采用免疫组织化学(IHC)法检测大鼠脑组织α-突触核蛋白(α-syn)、核转录因子κB蛋白(NF-κB、IKBα、p-NF-κB、p-IKBα)和星形胶质细胞的活化水平。通过实时定量PCR(qRT-PCR)测定促炎因子(TNF-α、IL-β、IFN-γ、IL-6)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、环氧化酶(COX-2)、NADPH氧化酶复合物(gp47phox、gp91phox、gp67phox)及凋亡因子(Bax、Bcl-2、Caspase-3和Caspase-9)mRNA水平。采用滚轴实验和爬杆实验评估大鼠运动协调性。结果 与CON组相比,PD大鼠α-syn、p-NF-κB、p-IKBα水平、星形胶质细胞活化、TNF-α、IL-β、IFN-γ、IL-6、iNOS、COX-2、Bax、Caspase-3、Caspase-9、gp47phox、gp91phox、gp67phox的mRNA表达水平显著升高(P <0.05);而Bcl-2水平显著降低(P <0.05)。中、高剂量Cur组在抑制α-syn蛋白的聚集、减少NF-κB通路的激活、降低炎症和凋亡因子的表达方面均比PD组显著(P <0.05)。中、高剂量的Cur处理显著改善了大鼠的运动协调性,与PD组相比,滚轴实验和爬杆实验的表现有显著提高(P<0.05)。结论 Cur可通过抑制神经炎症和氧化应激反应抑制α-syn的聚集,改善帕金森病大鼠的运动协调能力,发挥神经保护作用。

脑脊液α-突触核蛋白寡聚体与髋关节置换术后认知功能障碍的关系

目的:探讨脑脊液中α-突触核蛋白寡聚体(o-α-syn)与老年患者髋关节置换术后认知功能障碍(POCD)的关系。方法:选取择期行髋关节置换术的136例老年患者作为研究对象,患者拟行蛛网膜下隙阻滞,抽取脑脊液2 mL。记录患者手术时长、体质量指数、年龄、性别、术中出血量等。分别于术前1 d、术后7 d评估认知功能。将术后发生POCD为POCD组,采用1∶1配对,从未发生POCD的患者中选取病例数,为Non-POCD组。采用ELISA法测量两组脑脊液中的总α-突触核蛋白(t-α-syn)、o-α-syn、Aβ40、Aβ42的浓度。结果:发生POCD有17例,POCD发生率为16%。两组患者受教育年限、性别、年龄、BMI、术前MMSE评分、术中失血量和手术时间均无统计学差异。与Non-POCD组比较,POCD组MMSE、DST2、CDT评分降低(P<0.05);与Non-POCD组比较,POCD组t-α-syn、o-α-syn、Aβ40、Aβ42均显著升高(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,t-α-syn(OR=1.003,95%CI:1.000~1.006,P<0.05)、o-α-syn (OR=1.245,95%CI:1.020~1.520,P<0.05)、Aβ40(OR=1.001,95%CI:1.000~1.002,P<0.05)、Aβ42(OR=1.024,95%CI:1.006~1.043,P<0.05)均是老年人髋关节置换术后认知功能障碍的危险因素。ROC曲线分析提示,o-α-syn是预测POCD曲线下面积为0.749(P<0.05)。结论:脑脊液中o-α-syn浓度升高是老年髋关节置换患者术后发生认知功能障碍的独立危险因素,是预测POCD的一个良好的指标。

血清α-突触核蛋白、沉默调节蛋白1与进展性脑梗死的相关性研究

目的 探讨血清α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)、沉默调节蛋白1(Sirtuin-1,SIRT1)水平与进展性脑梗死患者神经功能、梗死体积及预后的相关性。方法 回顾性分析100例急性脑梗死病例资料。根据脑梗死病情变化情况,分为进展组(n=45)和非进展组(n=55)。依据入院时美国国立卫生研究院卒中量表(national institute of health stroke scale,NIHSS)评分、梗死体积及预后,对进展组病例进一步亚分组。比较不同神经功能缺损程度、梗死体积和预后结局,进展组病例血清α-syn、SIRT1水平差异及相关性,采用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析α-syn、SIRT1对进展性脑梗死的诊断及预后预测价值。结果 进展组血清α-syn水平高于非进展组,SIRT1低于非进展组(均P<0.05)。SIRT1与α-syn联合预测进展性脑梗死的ROC曲线下面积(area under curve,AUC)为0.911(0.849~0.973),敏感度和特异度分别为84.38%和82.33%。随着神经功能缺损程度加重,进展性脑梗死患者血清α-syn水平呈现逐渐升高趋势,而SIRT1不断降低(P<0.05)。随着梗死体积增加,进展性脑梗死患者血清α-syn水平不断升高,而SIRT1表现为降低趋势(P<0.05)。与预后良好组比较,预后不良组血清SIRT1水平较低,α-syn水平偏高(P<0.05)。血清α-syn水平与进展性脑梗死患者神经功能缺损程度、梗死体积及预后不良均呈正相关(r=0.713、0.821、0.739,P<0.05)。血清SIRT1水平与进展性脑梗死患者神经功能缺损程度、梗死体积及预后不良均呈负相关(r=-0.694、-0.773,-0.633,P<0.05)。SIRT1与α-syn联合检测预测进展性脑梗死患者预后不良AUC为0.887(0.812~0.963),敏感度87.64%、特异度77.63%。结论 联合检测α-syn与SIRT1水平对预测脑梗死进展情况及预后不良具有较高价值,可为临床提供指导。

α-突触核蛋白的生理功能和病理作用新研究进展

α-突触核蛋白(α-Syn)是中枢神经系统中高表达的可溶性蛋白质,主要分布在神经元的突触前结构,通过调控突触囊泡的运输、神经递质的释放和回收来维持正常突触功能。在病理状态下,错误折叠或过度磷酸化的α-Syn在脑内的异常沉积可诱发多种神经退行性疾病,但到目前为止,还没有找到治疗这些疾病的方法,其致病机制仍处于研究阶段。阐述α-Syn的生理功能对α-Syn发病机制的研究至关重要,将为疾病的早期诊断和早期治疗提供新靶点、新线索。本文就α-Syn的生理功能和病理作用相关的新研究进展进行综述。

颅脑MRI和肛门括约肌肌电图联合α-突触核蛋白在帕金森病和多系统萎缩P型患者中的应用

目的探讨颅脑MRI、肛门括约肌肌电图联合唾液α-突触核蛋白(α-syn)水平在帕金森病(PD)和多系统萎缩P型(MSA-P)患者中的鉴别诊断价值。方法选取2016年9月至2023年6月福建省老年医院收治的142例患者,其中81例PD患者作为PD组、41例MSA-P患者作为MSA-P组,比较两组患者在颅脑MRI壳核裂隙征、肛门括约肌肌电图的卫星电位及唾液α-syn水平上的差异。结果MSA-P组患者壳核裂隙征和卫星电位的出现率显著高于PD组,唾液α-syn水平也明显高于PD组。多元回归和ROC曲线分析显示,壳核裂隙征、唾液的α-syn水平及卫星电位的联合应用可鉴别PD和MSA-P患者。结论联合应用颅脑MRI、肛门括约肌肌电图及唾液α-syn可以有效地鉴别PD和MSA-P型,为临床诊断提供重要的辅助手段。

新型α突触核蛋白PET探针的合成及初步生物学评价

异常聚集的α-突触核蛋白(α-synuclein)是帕金森病的主要病理特征,研发α-synuclein PET显像剂有助于帕金森病的早期诊断和治疗。本文设计并合成了一种新型α-synuclein探针^(18)F-YM(2-((3-氟[^(18)F]苄基)硫基)-6-(3-氟丙氧基)苯并噻唑),采用铜介导的放射性氟化标记策略,结合A53T小鼠和正常小鼠PET成像,评估此新型探针的体内性能。研究表明,^(18)F-YM的合成时间约60min,未校正收率大于10%,比活度为8.5 GBq·μmol^(-1),放射化学纯度大于95%。小动物PET显像结果显示,苯并噻唑类化合物^(18)F-YM在表达α-synuclein的A53T小鼠脑中浓聚且摄取值显著高于正常小鼠脑中对应值。定量分析结果显示,注射后30 min,A53T小鼠与正常小鼠脑摄取值分别为(2.35±0.06)%ID/g和(1.38±0.15)%ID/g。体内外自显影和病理分析证实^(18)F-YM能够识别A53T小鼠中丘脑、黑质和纹状体等脑区聚集的α-synuclein。而体内生物分布观测显示^(18)FYM在正常小鼠脑中被快速清除。这表明^(18)F-YM在大脑中的非特异性结合较低,有利于获得对比度良好的图像。临床前研究初步表明,苯并噻唑类化合物,^(18)F-YM,具有较好的成像性能,可能是潜在的α-synuclein PET探针。

氨溴索对α-突触核蛋白寡聚体诱导鼠多巴胺能神经元细胞株MES23.5损伤的预防作用观察

目的观察氨溴索(AMB)对α-突触核蛋白(α-syn)寡聚体诱导鼠多巴胺能神经元细胞株MES23.5(帕金森病模型细胞)损伤的预防作用。方法将MES23.5细胞分为A、B、C、D组4组,A组细胞加入二甲基亚砜,B组细胞加入终浓度为5μmol/L的α-syn寡聚体,C组细胞加入终浓度为100μmol/L的AMB,D组细胞先加入终浓度为100μmol/L的AMB预处理12 h后再加入终浓度为5μmol/L的α-syn寡聚体。各组继续培养24 h后,采用ELISA法测算细胞β-葡萄糖脑苷脂酶(GCase)活性和α-syn寡聚体水平,采用MTT法检测细胞增殖能力(以OD_(450)值表示),使用JC-1探针检测线粒体膜电位,采用Western Blotting法检测酪氨酸羟化酶(TH)磷酸化水平。结果B组细胞GCase活性均低于其余三组(P均<0.05),C组细胞GCase活性均高于其余三组(P均<0.05)。B组细胞中α-syn寡聚体水平均高于其余三组(P均<0.05),C组细胞中α-syn寡聚体水平均低于其余三组(P均<0.05)。与A组相比,B组细胞培养24、48、72 h的OD_(450)值均降低(P均<0.05),D组细胞培养72 h的OD_(450)值降低(P<0.05);与B组相比,C、D组细胞培养24、48、72 h的OD_(450)值均升高(P均<0.05);与C组相比,D组细胞培养24、72 h的OD_(450)值均降低(P均<0.05)。B组细胞线粒体膜电位均低于其余三组(P均<0.05),D组细胞线粒体膜电位均低于A、C组(P均<0.05)。B组细胞TH磷酸化水平均低于其余三组(P均<0.05),C组细胞TH磷酸化水平均高于其余三组(P均<0.05)。结论AMB可通过升高GCase活性、降低α-syn寡聚体水平,恢复MES23.5细胞增殖能力、线粒体膜电位、TH磷酸化水平,对α-syn寡聚体诱导的细胞损伤起预防作用。