杠板归总黄酮提取物对α-萘异硫氰酸脂诱导小鼠胆汁淤积性肝损伤保护作用研究

目的:通过构建α-萘异硫氰酸脂(α-naphthylisothiocyanate,ANIT)诱导小鼠肝损伤模型,研究杠板归总黄酮提取物对小鼠肝脏的保护作用及其作用机制。方法:随机将60只昆明种小鼠分为6组,分别为空白对照组,病理模型组,阳性对照组(联苯双酯0.15 g/kg),杠板归总黄酮提取物高、中、低剂量组(1.2、0.6、0.3 g/kg)。除空白对照组外,采用腹腔注射ANIT的方法制造小鼠急性肝损伤模型,用杠板归总黄酮提取物连续灌胃9 d,禁食20 h后,眼球取血、取肝组织,测定肝组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)的含量及血清谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸转氨酶(aspartate amino transferase,AST)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、总胆汁酸(total bile acid,TBA)、总胆红素(total bilirubin,TBIL)水平。结果:与模型组相比,杠板归总黄酮高剂量组小鼠血清ALT水平[(243.14±27.35)U/L]、AST水平[(345.02±24.01)U/L]、LDH水平[(505.97±68.56)U/L]、TBA水平[(112.02±17.16)nmol/m L]、TBIL水平[(15.08±4.09)nmol/m L]以及肝组织中GSH含量[(63.08±4.88)μmol/mg]和MDA含量[(3.55±0.32)nmol/mg]明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05);中剂量组小鼠肝组织中血清ALT水平[(330.56±24.74)U/L]、AST水平[(438.60±32.51)U/L]、LDH水平[(597.90±66.90)U/L]、TBA水平[(144.62±16.37)nmol/m L]、TBIL水平[(27.36±6.51)nmol/m L]以及肝组织中GSH含量[(54.52±3.80)μmol/mg]和MDA含量[(5.65±0.35)nmol/mg]与模型组相比也明显降低,差异也具有统计学意义(P<0.05)。结论:杠板归总黄酮对ANIT诱导小鼠胆汁淤积性肝损伤有一定的疗效。

小叶黑柴胡总黄酮缓解α-萘异硫氰酸酯引起的大鼠急性黄疸型肝损伤

小叶黑柴胡(Bupleurum smithii Wolff var.parvifolium)总黄酮有显著的利胆退黄功效,而其如何在机体内发挥作用,目前尚未见报道.本文通过代谢物组学方法对小叶黑柴胡总黄酮防治α-萘异硫氰酸酯(α-naphthyl isothiocyanate,ANIT)所致大鼠急性黄疸型肝损伤过程中的尿液代谢组进行研究,从而探讨小叶黑柴胡总黄酮对急性黄疸型肝损伤的防治效果及作用机制.结果显示,给药组和模型组相比,大鼠尿液代谢物中马尿酸、庚酰肉毒碱、5β-胆甾烷-3α,7α,12α,23R,25-醇、4-羟双氢鞘氨醇、二氢神经鞘氨醇、溶血磷脂酰乙醇胺(0∶0/24∶0)、苯乙尿酸等含量降低,6-酮前列腺素F1α和3-磺基去氧胆酸含量升高,提示小叶黑柴胡总黄酮明显缓解α-萘异硫氰酸酯引起的大鼠急性黄疸型肝损伤,可用于防治急性黄疸型肝损伤.本文初步揭示了小叶黑柴胡总黄酮发挥药效的途径,为研究中药的作用机制提供了一个新思路.

灵芝三萜对α-萘异硫氰酸酯致大鼠肝损伤的保护作用

目的观察灵芝三萜对α-萘异硫氰酸酯所致大鼠急性黄疸模型的退黄降酶作用。方法将Wistar大鼠随机分为正常组、α-萘异硫氰酸酯肝损伤模型组、灵芝三萜高、中、低(200、100、50 mg/kg)剂量组和阳性药物组(赤丹退黄颗粒)。各治疗组大鼠连续灌胃给药7 d,除正常对照组外,第4天给药后2 h,各给药组及模型组灌胃给予α-萘异硫氰酸酯橄榄油溶液(60 mg/kg)。末次给药后2 h,腹腔注射10%乌拉坦溶液麻醉大鼠,开腹分离总胆管,引流胆汁,记录胆汁流量;取血分离血清,以血清肝功能指标、肝组织超氧化物歧化酶活力和丙二醛含量以及肝脏组织病理学的改变为观察指标。结果与模型组比较,灵芝三萜能明显提高胆汁淤积大鼠的胆汁流量,可不同程度的降低丙氨酸氨基转移酶、门冬氨酸氨基转移酶、总胆红素、碱性磷酸酶,r-谷酰胺转肽酶活性和丙二醛含量,升高超氧化物歧化酶活性,肝脏病理组织学检查表明,灵芝三萜能明显减轻肝细胞变性、坏死和肝小胆管增生。灵芝三萜高、中、低剂量组之间存在一定的量效关系。结论灵芝三萜具有降低实验性胆汁淤积大鼠血清胆红素、转氨酶和改善肝脏组织损伤的作用,其作用机制可能与抗氧化作用有关。

茵苓汤对α-萘异硫氰酸酯致肝内胆汁淤积大鼠肝损伤的保护作用和机制

目的研究茵苓汤对α-萘异硫氰酸酯(α-naphthalene isothiocyanate,ANIT)致肝内胆汁淤积大鼠肝损伤的保护作用,并初步探讨其作用机制。方法60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组(熊去氧胆酸,45 mg·kg^-1)和茵苓汤高、中、低剂量组(生药77.1、38.5、19.3 g·kg^-1),每组10只。以质量浓度20 g·L-1α-萘基异硫氰酸酯(ANIT)色拉油溶液5 mL·kg^-1一次性灌胃制备大鼠肝内胆汁淤积模型,造模48 h后,给药组按公斤体重灌胃给药,一日一次,连续7 d。测定大鼠血清中总胆红素(total bilirubin,TBIL)、直接胆红素(direct bilirubin,DBIL)、谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、总胆汁酸(total bile acid,TBA)水平,2 h胆汁流量,光镜下进行肝脏病理组织形态学观察,测定肝脏组织超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malonic dialdehyde,MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、过氧化氢酶(catalase from micrococcus lysodeikticus,CAT)活性,实时荧光定量PCR检测大鼠肝脏组织钠离子-牛磺胆酸协同转运蛋白(sodium taurocholate cotransporting polypeptide,NTCP)、胆盐输出泵(bile salt export pump,BSEP)和多药耐药相关蛋白2(multidrug resistance protein 2,MRP2)mRNA的表达量。结果茵苓汤能降低TBIL、DBIL、ALT、AST、ALP、TBA水平,提高胆汁流量,改善肝脏形态,降低肝组织MDA活性,提高SOD、GSH-Px、CAT活性,上调肝组织NTCP、BSEP和MRP2 mRNA表达量。结论茵苓汤对ANIT致肝内胆汁淤积大鼠具有保护作用,其作用机制可能与抗氧化应激和影响胆汁酸转运体有关。

叶下珠总多酚对α-萘异硫氰酸酯致肝损伤大鼠的保护作用

目的:研究叶下珠总多酚对α-萘异硫氰酸酯致大鼠肝损伤的保护作用及其机制。方法:α-萘异硫氰酸酯(100 mg/kg)灌胃复制SD大鼠肝损伤模型,成模大鼠分为模型组及熊去氧胆酸(100 mg/kg)组和叶下珠总多酚(200 mg/kg)组,另设正常对照组,正常对照组和模型组灌予生理盐水。各组造模前连续给药7 d,第8天造模后4 h继续给药,各组在造模后24、48、72 h随机取处死动物取样,观察各组动物的状态变化,检测各组动物血清TBIL、DBIL、IBIL、ALT、AST、ALP、IL-6、IL-10、TNF-α、ICAM-1水平,检测肝组织病理学变化及组织中SOD、MDA水平,免疫组化检测肝组织TNF-α、NF-κB蛋白表达。结果:与同时间点模型组比较,叶下珠总多酚组血清TBIL、DBIL、IBIL、AST、ALT、ALP、IL-6、IL-10、TNF-α、ICAM-1水平不同程度降低;肝组织中SOD水平不同程度升高,MDA水平及TNF-α、NF-κB蛋白表达不同程度降低;肝组织病理损伤明显减轻。结论:叶下珠总多酚对α-萘异硫氰酸酯诱导的大鼠肝损伤有明显的保护作用,其机制可能与抑制氧化应激、炎症反应有关。

α-萘异硫氰酸酯诱导幼鼠亚急性肝内胆汁淤积的动态变化

目的：制作亚急性肝内胆汁淤积动物模型，探索亚急性胆汁淤积发生的生化和病理变化。方法幼年 SD 大鼠，分为对照组与 ANIT 模型组，分别给与芝麻油以及α-萘异硫氰酸酯（ANIT）灌胃，每周一次共4次，48小时后分批处死动物，取血标本送检肝功能指标，留取肝脏标本观察肝脏以及胆道病理改变。结果ANIT 灌胃后48小时，血转氨酶、胆红素明显上升，肝脏出现结构坏死，炎症细胞浸润、增生，胆管增生，9天、16天逐渐加重，23天肝功能指标逐渐恢复，肝脏结构好转，胆管增生和纤维化仍明显。结论成功制作幼鼠亚急性胆汁淤积的动物模型， ANIT 每周一次灌胃后2～3周内胆汁淤积明显，第4周生化和病理结构逐渐恢复，但胆管增生和肝纤维化仍然明显。

栀子柏皮汤对α-萘异硫氰酸酯致大鼠肝损伤的保护作用

目的观察栀子柏皮汤对α-萘异硫氰酸酯(ANIT)所致大鼠急性肝损伤的保护作用。方法将Wistar大鼠随机分为正常组,模型组,阳性对照组,栀子柏皮汤低、中、高剂量组,ig给药10 d。各组于实验第8天,ig ANIT造模,48 h后取血,分离血清,以血清肝功能、SOD的活性以及肝脏病理组织学的改变为观察指标。结果与模型组比较,栀子柏皮汤低、中剂量组的血清ALT、AST、ALP、GGT和TBIL均显著下降(P<0.01或P<0.05),血清SOD显著升高(P<0.01或P<0.05);肝脏病理组织学检查表明,栀子柏皮汤低、中剂量组能明显减轻肝细胞变性、坏死以及炎细胞浸润。结论栀子柏皮汤低、中剂量组对ANIT所致大鼠急性肝损伤有明显的降酶保肝作用。

乙肝清对α-萘异硫氰酸酯所致小鼠黄疸的作用

目的研究乙肝清对α-萘异硫氰酸酯(ANIT)所致小鼠黄疸模型的作用。方法将小鼠随机分为正常对照组、模型组、茵栀黄组和乙肝清高、中、低剂量组,除正常对照组外,其他各组小鼠连续灌胃给药7 d,ANIT诱发黄疸模型,检测小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素(T-BiL)、碱性磷酸酶(ALP)、谷氨酰转肽酶(γ-GT),观察肝组织病理改变。结果与模型组比较,乙肝清中、高剂量组血清ALT、T-BiL、ALP水平显著降低(P<0.05,P<0.01),乙肝清高剂量组血清γ-GT水平降低(P<0.05)。乙肝清中、高剂量组肝脏病理损伤明显改善。结论乙肝清对黄疸模型小鼠具有退黄降酶作用。

双环醇在α-萘异硫氰酸酯诱导的小鼠胆汁淤积性黄疸的作用观察

目的观察双环醇对α-萘异硫氰酸酯(ANIT)致小鼠淤积性黄疸的作用。方法 ICR小鼠连续灌胃给予双环醇200 mg·kg^(-1)5天,每天给药1次,在第3天给药后2 h单次灌胃给予ANIT 110 mg·kg^(-1),观察动物状态并继续给药。双环醇末次给药前动物禁食不禁水12 h,末次给药后2 h处理动物,计算肝脾指数,制备血清,全自动生化分析仪检测血清ALT、AST、ALP、TBIL、DBIL和TBA水平,制备10%肝匀浆,测定肝组织MDA和SOD含量。结果 ANIT可引起小鼠显著毒性和肝组织损伤,动物出现死亡,脾脏指数降低,血清转氨酶及胆红素、胆汁酸等含量显著升高,肝组织MDA含量升高,SOD降低。双环醇200 mg·kg^(-1)连续给药5次,能降低动物死亡率,改善脾脏指数,但对ANIT致小鼠血清肝功能生化指标升高无降低作用,进一步增大肝脏指数,且有进一步加重的趋势。结论双环醇有加重ANIT诱导的小鼠淤积性黄疸的作用,需引起注意。

新型泛过氧化物酶体增殖物激活受体激动剂MBT1805对α-萘异硫氰酸酯诱导的小鼠胆汁淤积症的治疗作用

【据Frontiers in Pharmacology 2021年10月报道】代谢组学分析揭示了新型泛过氧化物酶体增殖物激活受体激动剂MBT1805对α-萘异硫氰酸酯诱导的小鼠胆汁淤积症的治疗作用(作者Wang C等)胆汁淤积性肝损伤的治疗药物相对缺乏。

注射用胡黄连总苷对α-萘异硫氰酸酯诱发小鼠胆汁淤积性黄疸的保肝退黄作用

目的 利用α-萘异硫氰酸酯（α-Naphthylisothiocyanate,ANIT）引起的胆汁淤积性肝损伤模型,考察注射用胡黄连总苷的保肝退黄活性。方法 注射用胡黄连总苷静脉注射给予ICR小鼠（0.33-9mg·kg-1,1次/天×5天）,在第3次给药后2 h口服给予ANIT 80 mg·kg-1一次,建立胆汁淤积性黄疸模型。末次给药后2 h处理动物,制备血清,全自动生化分析仪检测血清ALT、AST、ALB、ALP、TBIL、DBIL及TBA水平,H.E.染色考察肝脏病理状态。结果ANIT 80 mg·kg-1引起小鼠显著的肝损伤及黄疸,血清ALT、AST、ALP、TBIL、DBIL及TBA水平均显著升高,肝组织细胞凋亡、胆管细胞受损。注射用胡黄连总苷0.33~9 mg·kg-1对ANIT引起的胆汁淤积性黄疸具显著的阻抑活性,能够降低血清转氨酶水平和胆红素及胆汁酸水平,改善肝脏病理状态。0.33~3 mg·kg-1剂量范围内显示一定量效关系。结论 注射用胡黄连总苷在0.33~9 mg·kg-1范围内对ANIT引起的小鼠黄疸具显著的保肝退黄作用,1~3 mg·kg-1剂量范围内活性最佳,值得临床试验参考。

山柰酚固体分散体对α-萘异硫氰酸诱导大鼠胆汁淤积性肝损伤的影响

目的:研究山柰酚固体分散体对α-萘异硫氰酸酯(ANIT)诱导的肝内胆汁淤积所致大鼠急性肝损伤模型的影响。方法:以聚乙烯己内酰胺-聚醋酸乙烯酯-聚乙二醇接枝共聚物(Soluplus)和泊洛沙姆188为载体,采用溶剂法制备山柰酚固体分散体;大鼠连续灌胃给予山柰酚或山柰酚固体分散体,以熊去氧胆酸为阳性对照,共给药7 d,于第5日灌胃给予ANIT诱导SD大鼠肝内胆汁淤积形成急性肝损伤模型,计算肝脏指数,测定大鼠血清ALT、AST、TBIL、γ-GGT、SOD、GSH-Px、MDA水平,RT-PCR检测胆汁淤积相关基因mRNA表达,并观察肝组织病理学变化。结果:山柰酚固体分散体能显著降低ANIT诱导肝损伤大鼠的肝脏指数及血清ALT、AST、TBIL、γ-GGT、MDA水平,显著升高血清SOD、GSH-Px活性及肝组织Bcl-2、FXR mRNA表达,显著降低肝组织PTGS2、CYP7A1、IL-1β、TNF-αmRNA表达,改善肝组织损伤,且作用优于山柰酚原料药。结论:以固体分散体作为载体,通过升高山柰酚的生物利用度,能提高其药效,从而更好地发挥对大鼠急性肝损伤的保护作用。

退黄汤联合熊去氧胆酸对α-萘异硫氰酸酯诱导的大鼠急性肝损的保护作用

目的:探讨退黄汤(THT)联合熊去氧胆酸(UDCA)对α-异硫氰酸萘酯(ANIT)诱导大鼠肝损过程保护作用及机制。方法:选取Sprague-Dawley(SD)大鼠84只,设立空白组6只,对剩余78只在0 h时间点均以ANIT 100 mg/kg予以灌胃造成急性肝损伤,在肝损后24 h取6只处死留取标本(肝损24 h组),然后分为生理盐水组(18只,9 mL/kg体重的生理盐水灌胃)、UDCA组(18只,20 mg/kg体重的UDCA溶液灌胃)、THT组(18只,20 mL/kg体重的THT灌胃)、UDCA/THT组(18只,20 mg/kg体重的UDCA和20 mL/kg体重的THT联合灌胃),各组分别在肝损造模后48 h、72 h、96 h处死6只大鼠。所有大鼠处死留取血清和肝组织,生化仪检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBI)、总胆汁酸(TBA),酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清白介素-10(IL-10)白介素-6(IL-6)肿瘤坏死因子-α(TNF-α),实时荧光定量PCR检测肝组织多药耐药相关蛋白2(Mrp2)mRNA,苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织炎症活动度。结果:UDCA和THT在降低血清ALT、AST、TBI、TBA、IL-6、TNF-α和提升血清IL-10及肝组织Mrp2 mRNA均存在明显的主效应(P<0.01),两药在调控血清TBI、IL-6、TNF-α、IL-10及肝脏Mrp2 mRNA均存在明显交互协同作用(P<0.01或P<0.05)。HE染色显示联合用药组96 h肝组织炎性程度轻于单药组及生理盐水组。结论:UDCA和THT联合降低了ANIT诱导的肝损作用可能和两药联合作用调控血清细胞因子及肝脏Mrp2表达有关。

麻黄连翘赤小豆汤对α-萘异硫氰酸酯诱导大鼠胆汁淤积性肝损伤的防护作用

目的探讨麻黄连翘赤小豆汤对α-萘异硫氰酸酯(ANIT)诱导的胆汁淤积性肝损伤模型大鼠的防护作用。方法取大鼠50只,按体质量随机分为正常对照组(A组,等体积0. 9%氯化钠溶液),模型组(B组,等体积0. 9%氯化钠溶液)、麻黄连翘赤小豆汤低、中、高剂量(0. 14,0. 28,0. 56 g/m L)组(C1组、C2组、C3组),各10只,连续灌胃给药(15 m L/kg)7 d,第5天时,除A组予橄榄油外,其各组均予ANIT灌胃,建立大鼠胆汁淤积肝损伤模型。收集胆汁,计算胆汁流量;取肝脏,称定质量并计算肝脏指数;苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织病理形态学变化;检测大鼠血清天门冬酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、γ-谷氨酰转移酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TBil)、直接胆红素(DBil)水平;Western Blot法和逆转录聚合酶链(RT-PCR)法检测核转录因子-kappaB(NF-κB)p65、环氧合酶-2(COX-2)的蛋白和mRNA表达水平。结果与A组比较,B组大鼠不同时间段胆汁流量减少,肝脏系数显著升高,肝脏病理病变明显,血清中AST,ALT,γ-GGT,ALP,TBil,DBil水平均显著升高,肝组织中NF-κB p65及COX-2的蛋白和mRNA表达水平均明显升高(P <0. 05);与B组比较,C1组,C2组和C3组大鼠的胆汁流量增加,肝脏病变程度明显减轻,血清中AST,ALT,γ-GGT,ALP,TBil,DBil等肝功能指标均显著降低,肝组织中NF-κBp65及COX-2的蛋白和mRNA表达水平均显著降低,且除胆汁流量外,其他几项指标均呈剂量依赖型(P <0. 05)。结论麻黄连翘赤小豆汤对ANIT诱导的大鼠胆汁淤积性肝损伤有一定的防护作用,作用机制可能与抑制NF-κB/COX-2信号通路有关。

α-萘异硫氰酸酯实验性黄疸模型及其在中药研究中的应用

作者根据α-萘异硫氰酸酯(简称ANIT)使小白鼠和大白鼠产生显著的高胆红素血症和胆汁郁积的报导,用ANIT造成了实验性黄胆模型。文中详细地介绍了其实验方法和作用机制。作者认为,这一模型重复性好、稳定、方法简单、易于掌握。在肝病的药物筛选和研究中,将有助于全面地认识和评价中药的药理作用,为中药的理论研究和临床应用提供实验依据。

三黄颗粒对α-萘异硫氰酸酯诱导胆汁淤积大鼠肝损伤保护作用的研究

目的:探究三黄颗粒对α-萘异硫氰酸酯诱导胆汁淤积性大鼠肝损伤的保护作用。方法:将72只SD大鼠随机分为6组,正常对照组、模型组、阳性对照组和三黄颗粒低、中、高剂量组,每组12只,隔日1次ANIT灌胃造模,各组连续灌胃给药4周,取血并采集肝脏标本。放射免疫法检测LA、HA、PC-Ⅲ、IV-C值;全自动生化分析仪检测大鼠血清肝功能生化指标;切取大鼠肝中叶,制作病理组织切片,光学显微镜下观察。结果:三黄颗粒组大鼠肝功能指标较模型组均不同程度的降低;肝脏纤维化指标有明显的改善;大鼠肝HE染色切片得出,高、中、低剂量组之间存在差异,肝脏形态改善明显。结论:三黄颗粒可减轻α-萘异硫氰酸酯诱导胆汁淤积性大鼠肝损伤病理变化,改善肝功能,减轻肝脏纤维化,中等剂量疗效较好。

短穗兔耳草对α-萘异硫氰酸脂致肝损伤小鼠保护作用的研究

目的研究短穗兔耳草对α-异硫氰酸萘酯(ANIT)所致肝损伤小鼠的保护作用。方法取昆明种小鼠60只,随机分为6组,每组10只,分别为正常组,模型组,联苯双酯组(0.15 g·kg^(-1)),短穗兔耳草提取物低、中、高剂量组(1.0,2.0,4.0 g·kg^(-1))。采用灌胃ANIT 100 mg·kg^(-1)花生油溶液的方法制备小鼠急性肝损伤模型,连续灌胃给药7 d,末次给药1 h后取血、取肝脏,检测血清中ALT、AST、TBA、TBIL和TNF-α的含量;检测肝组织匀浆中SOD、MDA、GSH-Px的含量,PCR检测肝组织中TNF-αm RNA的表达量,HE染色显微镜下观察肝组织病理变化。结果与模型组比较,短穗兔耳草低、中、高剂量组均能显著降低肝损伤小鼠血清ALT、AST、TBA、TBIL和TNF-α的水平和肝匀浆中MDA含量,同时显著升高小鼠肝匀浆中SOD和GSHPx的含量,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);短穗兔耳草提取物各剂量组均可显著下降肝组织中TNF-αm RNA的相对表达量(P<0.05,P<0.01)。病理切片显示短穗兔耳草各剂量组能显著改善肝组织的病理变化。结论短穗兔耳草对ANIT所致小鼠肝损伤有保护作用。

基于胆汁酸代谢组学探讨芍药苷改善α-萘异硫氰酸酯诱导胆汁淤积的作用机制

目的 基于胆汁酸代谢组学及分子生物学探讨芍药苷调控胆汁酸改善胆汁淤积的作用及机制。方法 雄性SD大鼠连续7 d ig熊去氧胆酸(ursodesoxycholic acid,UDCA)或芍药苷,于实验第4天ig α-萘异硫氰酸酯(α-naphthylisothiocyanate,ANIT)建立胆汁淤积模型。通过血清生化指标、肝脏病理组织染色、胆汁酸体积流量明确芍药苷缓解胆汁淤积的药效学基础。收集大鼠胆汁进行胆汁酸代谢组学分析,收集肝脏检测法尼醇X受体(farnesoid X receptor,FXR)和胆酸盐外排泵(bile salt export pump,BSEP)表达。结果 药效学实验显示,与对照组比较,模型组大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、γ-谷氨酰转移酶(γ-glutamyltranspeptidase,γ-GT)、总胆汁酸(total bile acid,TBA)、总胆红素(total bilirubin,TBIL)和直接胆红素(direct bilirubin,DBIL)水平均显著升高(P<0.01);给予芍药苷后,上述指标显著降低(P<0.01),且呈剂量相关性。同时芍药苷能够改善大鼠肝组织水肿和炎性浸润,减少汇管区胆管增生,抑制肝细胞脂肪变性。胆汁酸代谢组学结果显示,与对照组比较,模型组牛磺胆酸(taurocholate acid,TCA)、牛磺α鼠胆酸(tauro-α-muricholic acid sodium,TαMCA)、胆酸(cholic acid,CA)、牛磺熊脱氧胆酸(tauroursodeoxycholicacid,TUDCA)、甘氨熊脱氧胆酸(glycoursodeoxycholicacid,GUDCA)、甘氨鹅脱氧胆酸(glycochenodeoxycholic acid,GCDCA)、甘氨胆酸(glycocholic acid,GCA)、熊脱氧胆酸(ursodeoxycholic acid,UDCA-7S)、牛磺石胆酸(taurocholic acid,TLCA)、牛磺猪脱氧胆酸(taurohyodeoxycholic acid,THDCA)、甘氨猪胆酸(glycohyocholic acid,GHCA)、甘氨脱氧胆酸(glycodeoxycholic acid,GDCA)、甘氨猪脱氧胆酸(glycohyodeoxycholic acid,GHDCA)、甘氨石胆酸(glycolithocholic acid,GLCA)、熊胆酸(ursocholic acid,UCA)、牛磺脱氧胆酸(taurodeoxycholate acid,TDCA)含量明显降低(P<0.05、0.01),牛磺β鼠胆酸(tauro-β-muricholic acid sodium,TβMCA)含量显著升高(P<0.01);上述胆汁酸含量在芍药苷干预后明显回调(P<0.05、0.01)。分子生物学验证结果显示模型组大鼠肝组织FXR和BSEP的m RNA和蛋白表达水平均明显降低(P<0.05、0.01),经芍药苷治疗后二者表达明显上调(P<0.05、0.01)。结论 芍药苷能够调节胆汁酸池组成,降低毒性胆汁酸含量,上调FXR和BSEP活性,恢复胆汁酸池稳态,改善ANIT诱导的胆汁淤积。

消黄方对α-萘异硫氰酸酯大鼠黄疸模型肝组织氧化应激的影响

目的:探讨消黄方对α-萘异硫氰酸酯(ANIT)大鼠黄疸模型的治疗作用及抗氧化应激效应。方法:Wistar雄性大鼠40只,随机分为正常组(10只)和ANIT处理组(30只)。ANIT按照2mL/kg一次性经口灌胃,48h后,ANIT处理组随机分为模型组,消黄方组及熊去氧胆酸(UDCA)组(各10只),各组每天分别给予生理盐水、消黄方、UDCA治疗1周,实验结束处死全部大鼠。观测大鼠死亡率、检测肝功能及肝组织总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽-S转移酶(GST)活性和丙二醛(MDA)含量。结果:肝功能结果发现:与正常组比较,模型组大鼠肝ALT、AST、ALP、TBIL、DBIL显著升高(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,UDCA和消黄方显著降低血清TBIL和DBIL含量(P<0.01),消黄方显著降低ALT、AST及ALP活性(P<0.05,P<0.01)。肝组织氧化应激结果显示:与正常组比较,模型组肝组织GST活性及MDA含量显著升高(P<0.01),T-SOD活性显著下降(P<0.01),而消黄方显著降低GST活性及MDA含量(P<0.01),升高肝组织SOD活性(P<0.01)。结论:消黄方具有保肝退黄作用;氧化应激是ANIT大鼠黄疸模型的重要病理环节,抗氧化应激效应是消黄方退黄主要机制之一。