辣椒叶α-葡萄糖苷酶抑制剂的提取及稳定性研究

辣椒叶中含有在小肠中延缓糖分分解吸收的α-葡萄糖苷酶抑制剂,以辣椒叶粉为原料,乙醇为提取溶剂,在单因素(液料比、乙醇体积分数、提取温度和提取时间)试验的基础上设计响应面试验,优化提取α-葡萄糖苷酶抑制剂的工艺,并探索α-葡萄糖苷酶抑制剂在提取后真空浓缩过程中的温度、食品加工过程中的温度、强酸条件下的稳定性。结果表明,辣椒叶中α-葡萄糖苷酶抑制剂的最佳提取条件为:液料比10∶1、乙醇体积分数35%、提取温度26℃、提取时间5 h;提取液在真空浓缩过程中温度控制在50℃以下相对稳定,而在加工特性研究中发现,α-葡萄糖苷酶抑制剂对高温比较敏感,而在pH 2.0~6.0范围内稳定性良好。研究结果可为辣椒叶资源的高值化开发利用提供理论依据。

多金属氧酸盐类α-葡萄糖苷酶抑制剂的研究进展

α-葡萄糖苷酶在淀粉转化为葡萄糖的过程中发挥着重要作用,而抑制α-葡萄糖苷酶活性是控制餐后血糖升高的有效途径。对α-葡萄糖苷酶抑制剂的抑制机理和研究进展进行综述,并重点概述了多金属氧酸盐(polyoxometalates,POMs)作为α-葡萄糖苷酶抑制剂的研究成果。

瑞格列奈联合α-葡萄糖苷酶抑制剂治疗老年T2DM患者的效果观察

目的观察分析瑞格列奈联合α-葡萄糖苷酶抑制剂治疗老年2型糖尿病(T2DM)患者的效果。方法98例老年T2DM患者,以数字号形式随机分为对照组和观察组,每组49例。对照组患者行瑞格列奈治疗,观察组行瑞格列奈联合α-葡萄糖苷酶抑制剂治疗。比较两组患者临床疗效以及治疗前后的糖化血红蛋白、空腹血糖、餐后2 h血糖、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰高血糖素样肽-1(GLP-1)水平。结果观察组治疗总有效率93.88%高于对照组的75.51%,差异具有统计学意义(χ^(2)=6.376,P=0.012<0.05)。治疗后,观察组患者糖化血红蛋白(6.15±0.43)%、空腹血糖(5.86±0.70)mmol/L、餐后2 h血糖(7.11±0.32)mmol/L均低于对照组的(7.27±0.66)%、(7.14±0.94)mmol/L、(8.88±0.41)mmol/L,差异均具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组患者FINS(14.17±0.59)mU/L、GLP-1(5.07±0.26)pmol/L高于对照组的(9.97±0.93)mU/L、(3.14±0.24)pmol/L,HOMA-IR(3.31±0.53)低于对照组的(4.44±0.66),差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论老年T2DM患者行瑞格列奈联合α-葡萄糖苷酶抑制剂治疗,疗效显著,可以有效控制患者血糖水平,胰岛素分泌情况改善,值得推广。

金露梅中一种α-葡萄糖苷酶抑制剂的提取富集及活性研究

本研究采用AB-8大孔吸附树脂、半制备高效液相色谱对金露梅枝叶中槲皮素-7-O-β-D-葡糖苷酸提取分离,并通过13 C NMR鉴定其化学结构,最后采用以4-硝基酚-α-D-吡喃葡萄糖苷(pNPG)为底物的酶抑制剂筛选模型检测其对α-葡萄糖苷酶的抑制活性和类型。结果显示:槲皮素-7-O-β-D-葡糖苷酸分布在20%乙醇大孔吸附树脂(AB-8)洗脱液中,采用半制备高效液相色谱和高效液相色谱分离纯化得槲皮素-7-O-β-D-葡糖苷酸2481.8 mg,纯度为97.95%。活性检测结果表明,槲皮素-7-O-β-D-葡糖苷酸对α-葡萄糖苷酶的最大抑制率为94.67%,IC 50为0.259 mmol/L,抑制率显著高于阳性对照药物阿卡波糖,且抑制剂类型为竞争性抑制。

基于偏最小二乘法分析枇杷叶提取物中α-葡萄糖苷酶抑制剂

为快速筛选枇杷叶(Eriobotrya japonica)提取物中的α-葡萄糖苷酶抑制剂,本研究基于组效分析法探究有效组分与酶抑制活性间的关系,揭示其关键活性组分。通过测定不同产地的枇杷叶提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制效果,采用超高效液相色谱-质谱联用(UPLC-MS)对其进行成分分析,运用偏最小二乘回归分析法分析活性,并通过分子对接进行验证。结果表明,10种提取物能有效抑制α-葡萄糖苷酶,IC_(50)值为1.31~2.65μg·mL^(-1),且抑制活性强于阳性对照阿卡波糖(IC_(50)为81.98μg·mL^(-1)),其中产自陕西省汉中市的野生枇杷叶提取物的抑制效果最佳,IC_(50)为1.31μg·mL^(-1),对α-葡萄糖苷酶呈竞争型抑制。10批样品的UPLC-MS特征指纹图谱中有16个共有峰,其中有6个共有峰的回归系数与抑制活性呈正相关,变量重要性较大,贡献度较高。通过与二级质谱、数据库及标准品比对,明确其中4个成分分别为科罗索酸、科罗索酸甲酯、奎宁酸和nerolido-3-α-L-rhamnopyranosyl(1→4)-α-L-rhamnopyranosyl(1→2)-[α-L-rhamnopyranosyl(1→6)]-β-D-glucopyranoside。进一步的分子对接结果表明,上述4种活性成分与α-葡萄糖苷酶对接的结合能小于-6.0 kcal·mol^(-1),其中科罗索酸的结合能最低(-8.9 kcal·mol^(-1)),主要通过氢键作用于酶活性中心。本研究结果为后续应用枇杷叶提取物开发降血糖药物提供了研究思路。

枯草芽孢杆菌发酵紫菜制备一种α-葡萄糖苷酶抑制剂

糖尿病是一种以高血糖为特征的慢性代谢疾病,由于化学降糖药物容易增加患者的肝肾负担与心血管疾病风险,因此针对轻症患者亟需一种能够控制血糖水平且低副作用的方法。许多研究表明紫菜具有降低餐后血糖的潜力,在降糖功能食品开发方面具有广阔的前景。该研究采用源自威海紫菜养殖基地的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)对条斑紫菜(Porphyra yezoensis)进行发酵,探究并优化了具有α-葡萄糖苷酶(α-glucosidase,GTase)抑制活性发酵产物的发酵条件,采用凝胶色谱法、LC-MS/MS分离并鉴定出具有GTase抑制活性的肽段,最后使用分子对接法对活性成分进行了模拟验证。结果表明,紫菜发酵粉对GTase形成竞争型抑制,IC_(50)为0.21 mg/mL,优于阳性对照阿卡波糖(IC_(50)=0.88 mg/mL)。成分分析与分子对接结果表明,抑制活性可能来源于肽段GPGDFL和SPPPPPA。该研究制备了一款具有GTase抑制作用的食品原料,并初步阐明了其中的主要活性成分,证明紫菜可以作为降血糖功能食品的来源之一,为紫菜的高值化开发利用提供了有效的理论支持。

不同月份香椿不同部位叶片提取物中α-葡萄糖苷酶抑制剂的分布规律及其降血糖活性

为探究不同月份香椿不同部位叶片提取物中α-葡萄糖苷酶抑制剂的分布规律和降血糖效果,2020年8~11月,从3棵香椿树中采集36个样本,φ=50%乙醇提取α-葡萄糖苷酶抑制剂。分析香椿叶提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制活性、酶抑制动力学和荧光光谱特征。进而将不同浓度香椿叶提取物与质量分数为3%葡萄糖共暴露斑马鱼,研究在斑马鱼体内的降血糖效果。结果表明:香椿叶中α-葡萄糖苷酶抑制剂的时间分布规律为8月、11月抑制率较高,可达99%;空间分布规律为从上层到下层抑制率依次递减,α-葡萄糖苷酶的抑制活性在时间和空间呈现显著性差异。香椿叶提取物对α-葡萄糖苷酶抑制的IC 50为0.45 mg/mL,远低于阳性对照阿卡波糖5.05 mg/mL。香椿叶提取物的酶抑制类型为竞争性抑制,香椿叶提取物与酶的相互作用模式属于动态荧光猝灭。当香椿叶提取物暴露浓度为4 mg/L时,斑马鱼体内血糖浓度与高糖组有显著性差异。该研究为从香椿叶中大量提取α-葡萄糖苷酶抑制的采样方法设计及开发一种新型降血糖药物提供理论支持。

α-葡萄糖苷酶抑制剂的制备和活性研究进展

文中综述了国内外用天然植物和微生物制备具有降血糖作用的α-葡萄糖苷酶抑制剂的工艺过程,并对α-葡萄糖苷酶抑制剂的检测方法进行了总结。

用固定化酶筛选模型从天然产物中筛选α-葡萄糖苷酶抑制剂

目的:用固定化酶筛选模型从天然产物中筛选α-葡萄糖苷酶抑制剂。方法:把α-葡萄糖苷酶固定化,模拟其在体内小肠壁上的情况,建立固定化酶筛选模型,先用α-葡萄糖苷酶抑制剂阿卡波糖对该模型进行验证,然后用该筛选模型对2种天然产物-虎杖水溶性部位和广西血竭甲醇溶液进行筛选。结果:阿卡波糖对固定化α-葡萄糖苷酶和游离α-葡萄糖苷酶的IC50分别为0.413 mg.mL-1和0.126 mg.mL-1,虽然固定化酶被阿卡波糖抑制的IC50值是游离酶的3.3倍,但固定化酶筛选模型更准确地反映阿卡波糖的体内作用。虎杖水溶性部位和广西血竭的甲醇溶液对固定化α-葡萄糖苷酶的IC50分别为0.224 mg.mL-1和5.5μg.mL-1。结论:该筛选模型能很好的进行体外α-葡萄糖苷酶抑制剂的筛选,其筛选结果和文献报道相符。

海藻提取物中α-葡萄糖苷酶抑制剂的初步筛选

α-葡萄糖苷酶抑制剂不仅能调节体内糖代谢,还具有抗HIV和抗病毒感染的作用,对治疗和预防糖尿病及其并发症和控制艾滋病的传染等具有重要作用。本文采用快速灵敏的比色法,对青岛沿海20种常见大型海藻的脂溶性提取物的酶抑制活性进行了初步筛选。结果发现所有的海藻的脂溶性提取物对α-葡萄糖苷酶都有一定的抑制活性,其中松节藻、扁江篱、海头红、叉开网翼藻和肠浒苔等藻类提取物对α-葡萄糖、苷酶的抑制活性比较显著,抑制率达到60%以上。从总体上看红藻提取物活性相对较强,而褐藻提取物活性相对较弱。从活性测定结果来看,很有希望从海藻提取物中发现新的α-葡萄糖苷酶抑制剂。

α-葡萄糖苷酶抑制剂的分离纯化及其性质研究

目的 :从中药中筛选 α-葡萄糖苷酶抑制剂。方法 :采用水浸提、活性炭脱色、离子交换树脂交替层析、Sephadex G- 2 0 0柱层析等步骤分离纯化。结果 :得到 α-葡萄糖苷酶抑制剂 HGI,其热稳定性好 ,p H适应范围广 ,分子量约在 14万以上。获得的 HGI对α-葡萄糖苷酶有很强的抑制作用 ,属非竞争性抑制 ,Ki=6.0 mg/ L。结论 :其作用特点有别于多数已有的 α-葡萄糖苷酶抑制剂。

五味子中α-葡萄糖苷酶抑制剂对小鼠的降血糖作用

目的探讨五味子所含α 葡萄糖苷酶抑制剂的体内活性。方法以 1 0 0mg/(kg·d)剂量灌胃 ,观察其对小鼠血糖含量以及糖耐量的影响。结果该抑制剂能明显降低正常及四氧嘧啶糖尿病小鼠的血糖 ,降低肾上腺素引起的高血糖 ,提高正常小鼠的糖耐量。结论从中药五味子中分离得到的α 葡萄糖苷酶抑制剂可能具有良好的降糖作用。

超滤亲和结合液相色谱-质谱联用和分子对接技术筛选毛菊苣种子中高亲和性α-葡萄糖苷酶抑制剂

采用超滤亲和结合液相色谱-质谱联用(UF-LC-MS)和分子对接技术筛选毛菊苣种子中高亲和α-葡萄糖苷酶抑制剂。以4-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)为底物,阿卡波糖为阳性对照,评价毛菊苣种子提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制活性,其中阿卡波糖IC_(50)为0.003 mg/m L,毛菊苣种子IC_(50)为0.447 mg/m L。利用UF-LC-MS技术对毛菊苣种子提取物进行筛选鉴定,获得4种化合物;通过Autodock软件筛选出2种与α-葡萄糖苷酶有较高亲和力的化合物,分别是绿原酸和异绿原酸A。结合体外酶活实验,验证了绿原酸、异绿原酸A对α-葡萄糖苷酶的抑制活性。结果表明,各化合物对α-葡萄糖苷酶的抑制活性由大到小依次是:阿卡波糖>异绿原酸A>绿原酸,其中异绿原酸A与阿卡波糖抑制率相近。

以中草药为来源的α-葡萄糖苷酶抑制剂筛选研究进展

α-葡萄糖苷酶抑制剂在控制餐后高血糖方面具有重要的作用。目前已发现的以中草药为来源的α-葡萄糖苷酶抑制剂包括:黄酮类,生物碱类,皂苷类等化合物以及一些活性成分尚未确定的中草药。现对以中草药为来源的α-葡萄糖苷酶抑制剂的筛选研究进展进行综述。

食品中α-葡萄糖苷酶抑制剂的研究进展

本文着重介绍了α-葡萄糖苷酶抑制剂的降血糖机理,以及在治疗2型糖尿病中的使用,并详细阐述了目前在食品中发现的各类α-葡萄糖苷酶抑制剂以及其结构组成。

靶向亲和-液质联用技术对人参茎叶总皂苷中α-葡萄糖苷酶抑制剂的快速筛选

建立了用于快速筛选人参茎叶总皂苷中α-葡萄糖苷酶抑制剂的靶向亲和-液相色谱-质谱联用技术(Target molecule affinity-LC-ESI-MSn)。从人参茎叶总皂苷中筛选并鉴定出了人参皂苷Rb3等12种具有潜在α-葡萄糖苷酶抑制活性的化合物,同时对其中5种化合物(包括人参皂苷F2,Rf,Rg3,Rd和Rb3)进行了活性验证,发现人参皂苷Rb3活性最强,对α-葡萄糖苷酶活性抑制率为43.16%,抑制作用接近总皂苷。本方法直接从复杂的中药提取物中筛选出具有抑制α-葡萄糖苷酶的活性成分,简单、快速、准确,适用于实现复杂体系中α-葡萄糖苷酶抑制剂的高通量筛选。

荔枝水溶性多糖作为α-葡萄糖苷酶抑制剂的活性测定

对荔枝果肉水溶性多糖(LCWSP)对α-葡萄糖苷酶的活性影响进行研究,以黑叶荔枝作为材料,通过热水浸提、醇沉、离心得到LCWSP提取液,经过脱色,Sevag法去蛋白,透析除去离子后,将LCWSP提取液加入α-葡萄糖苷酶溶液中,利用4-硝基酚-α-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)法测定α-葡萄糖苷酶的活性。结果表明:LCWSP对α-葡萄糖苷酶具有明显抑制作用,且其抑制效果是阿卡波糖的1.25倍;LCWSP抑制作用的大小会受到温度、pH值、时间及LCWSP质量浓度的影响,在单因素试验的基础上,通过正交试验确定LCWSP对α-葡萄糖苷酶抑制的最佳反应温度为30℃、pH值为6.8、时间25min、抑制剂质量浓度为80mg/mL。说明LCWSP对α-葡萄糖苷酶的抑制作用比较明显,可以作为α-葡萄糖苷酶抑制剂;LCWSP可能具有降血糖的作用。

高寒菊科植物提取物中α-葡萄糖苷酶抑制剂的筛选

目的:从高寒菊科植物中筛选α-葡萄糖苷酶抑制剂。方法:采用α-葡萄糖苷酶活性测定方法,对37种经水提取的高寒菊科植物进行了α-葡萄糖苷酶抑制活性的筛选。结果:在样品浓度0.625mg/mL反应体系下,5种高寒菊科植物水提取物显著抑制α-葡萄糖苷酶活性,抑制率达到50%上。结论:α-葡萄糖苷酶活性测定结果显示,某些高寒菊科植物提取物能显著抑制α-葡萄糖苷酶活性,如果对其进一步的分离、纯化并提取活性部位,有望获得高活性的α-葡萄糖苷酶抑制剂。

产α-葡萄糖苷酶抑制剂的桑树内生细菌分离及鉴定

从桑树内生细菌中筛选得到一株产α-葡萄糖苷酶抑制剂的内生细菌S-J-X-4,通过生理生化及分子生物学鉴定,初步鉴定其为萎缩芽孢杆菌(Bacillus atrophaeus)。对α-葡萄糖苷酶抑制剂的来源进行了初步研究,结果表明发酵液中的活性物质为萎缩芽孢杆菌的一种胞外分泌物。

α-葡萄糖苷酶抑制剂体外筛选方法的研究

以对-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷为底物,通过高效液相色谱定量分析水解产物对-硝基苯酚,确定α-葡萄糖苷酶的活性,建立新的α-葡萄糖苷酶抑制剂的体外筛选方法,为了提高筛选方法的灵敏度,对酶促反应条件进行了优化,并用阿卡波糖验证筛选方法的可靠性,结果测得阿卡波糖的IC50为2.07 mg/mL,与文献报道相近,说明该法可替代传统的Trembly法,并可用于α-葡萄糖苷酶抑制剂的高通量筛选。