易错PCR法提高L-氨基酸脱氨酶全细胞转化L-异亮氨酸生产α-酮-β-甲基正戊酸效率

对奇异变形杆菌Proteus mirabilis中的L-氨基酸脱氨酶进行定向进化,利用易错PCR技术向基因中引入随机突变,建立突变文库来筛选可获得较高α-酮-β-甲基正戊酸产量的突变株。突变株7/23-6最适全细胞转化反应条件是以pH 8.5 Tris-HCl为缓冲液,用900 mmol/L L-异亮氨酸在30℃下进行催化反应21～24 h,其α-酮-β-甲基正戊酸产量可以达到102 g/L,底物转化率达到87%。与对照菌相比,α-酮-β-甲基正戊酸产量和底物转化率均提高了13%,热稳定性提高了36.7%。

5-氨基酮戊酸-光动力联合小剂量异维A酸治疗玫瑰痤疮的疗效及安全性研究

目的:探讨5-氨基酮戊酸(ALA)-光动力(PDT)联合小剂量异维A酸治疗玫瑰痤疮(AR)的疗效及安全性。方法:选取2022年1月至2023年1月新疆医科大学第二附属医院收治的AR患者86例,采用随机数字表法分为联合组和对照组,各43例。对照组患者采用小剂量异维A酸治疗,联合组患者采用ALA-PDT联合小剂量异维A酸治疗。比较两组患者的临床疗效,治疗前后皮肤红斑指数(EI)、痤疮特异性生活质量量表(Acne-QOL)评分、皮肤生理功能[经皮水分流失量(TEWL)、角质层含水量和pH]、角质层完整性指标(丝氨酸蛋白酶活性、粘脱蛋白质含量)及不良反应发生情况。结果:联合组患者的总有效率为95.35%(41/43),较对照组的79.07%(34/43)更高,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,联合组患者的EI低于对照组,Acne-QOL评分高于对照组;联合组患者的TEWL、pH低于对照组,角质层含水量高于对照组;联合组患者的丝氨酸蛋白酶活性、粘脱蛋白质含量低于对照组,上述差异均有统计学意义(P<0.05)。联合组、对照组患者不良反应发生率分别为9.30%(4/43)、11.63%(5/43),差异无统计学意义(P>0.05)。结论:ALA-PDT联合小剂量异维A酸治疗AR,可修复患者皮肤屏障功能,改善EI,提高生活质量,疗效显著,安全性高。

5-氨基酮戊酸光动力治疗对鲍温病皮损中p53 Caveolin-1表达的影响

目的:探讨5-氨基酮戊酸光动力疗法对鲍温病皮损中p53、Caveolin-1表达的影响及意义。方法:运用5-氨基酮戊酸光动力疗法治疗鲍温病及周围正常皮肤组织各40例,采用免疫组织化学技术(SP法)检测光动力治疗前后鲍温病及周围正常皮肤组织中p53、Caveolin-1的阳性细胞表达率。结果:治疗前p53蛋白在正常皮肤组织及BD中表达的阳性率分别为10%、40%(χ^(2)=11.202,P<0.001),差异有统计学意义。治疗后p53在正常皮肤组织及BD的阳性率为10%、5%(χ^(2)=0.712,P=0.399),两者间差异无统计学意义。治疗前后p53在BD中的阳性表达率差异有统计学意义(χ^(2)=14.811,P<0.001)。治疗前Caveolin-1在正常皮肤组织及BD中阳性表达率为15%、55%(χ^(2)=14.449,P<0.001),两者间差异有统计学意义。治疗后正常皮肤组织及BD中Caveolin-1的阳性率为5%、12.5%(χ^(2)=0.816,P=0.366),差异无统计学意义。治疗前后Caveolin-1在BD中的阳性表达率差异有统计学意义(χ^(2)=19.013,P<0.001)。BD中p53与Caveolin-1阳性表达呈正相关性(r=0.533,P=0.015)。结论:p53及Caveolin-1的高表达可能与BD的发生密切关联,且ALA-PDT能够抑制p53及Caveolin-1的表达,从而抑制疾病的发展。通过更大样本量的研究,p53及Caveolin-1可能会成为皮肤相关疾病的诊断工具,并为其治疗提供新的靶点。

5-氯-2-戊酮与环丙基甲基酮物性及汽液相平衡

测定5-氯-2戊酮和环丙基甲基酮的物化性质:密度、黏度、摩尔体积、热膨胀系数和表面张力。测定5-氯-2-戊酮(1)+环丙基甲基酮(2)二元体系的汽液相平衡(VLE),并应用Aspen Plus V11中Van Laar方程、Wilson方程和NRTL方程对实验数据进行关联,回归得到二元交互参数。实验结果通过热力学一致性检查。该研究不仅补充了汽液相平衡数据库,也为5-氯-2-戊酮与环丙基甲基酮的分离提供热力学数据。

美拉德反应中间体2,3-二氢-3,5-二羟基-6-甲基-4(H)吡喃-4-酮的研究进展

2,3-二氢-3,5-二羟基-6-甲基-4(H)吡喃-4-酮(2,3-dihydro-3,5-dihydroxy-6-methyl-4H-pyran-4-one,DDMP),是美拉德反应关键中间体之一,在美拉德反应产物调控中起到重要作用。DDMP属于烯醇酮类化合物,广泛存在于天然尤其是热加工食品,具有抗氧化、抗菌、心脏保护等作用。当前,随着对食品安全、风味和活性功能关注度的不断提升,学者对DDMP进行了广泛而深入的研究。该文基于近年来相关文献,对DDMP的存在、形成及降解、生物活性及感官特性等方面的研究进展进行全面系统的总结,旨在为DDMP在食品、医药、香料领域的基础和应用研究提供参考。

6-甲基-5-庚烯-2-酮诱导砀山酥梨虎皮病发生与活性氧代谢的关系

探究6-甲基-5-庚烯-2-酮(6-methyl-5-hepten-2-one,MHO)处理对砀山酥梨虎皮病关系及对活性氧代谢影响。测定MHO处理砀山酥梨果皮在冷藏过程中α-法尼烯、共轭三烯、MHO、丙二醛、过氧化氢(H_(2)O_(2))、超氧阴离子自由基、总酚含量及过氧化氢酶(catalase,CAT)、过氧化物酶(peroxidase,POD)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)的活性,并观察和统计虎皮病的发病情况。结果表明,外源MHO可以诱发相似虎皮病的症状,并且显著增加果皮中MHO、H_(2)O_(2)和超氧阴离子自由基的含量,降低抗氧化酶CAT、POD和SOD的活性,增加了α-法尼烯、共轭三烯的含量。果皮MHO含量与H_(2)O_(2)和超氧阴离子自由基含量呈极显著相关,但果皮的MHO含量比H_(2)O_(2)与虎皮病发病率的关系更密切,这些结果表明MHO可能通过增加活性氧的积累而引发梨虎皮病。

间充质干细胞膜包载5-氨基酮戊酸介导的光热作用抑制皮脂分泌

目的探究间充质干细胞膜包载5-氨基酮戊酸(ALA@STCM)介导的光热作用对金黄地鼠皮脂腺斑皮脂分泌的影响。方法培养脐带来源的间充质干细胞(MSCs),提取MSC膜,制备ALA@STCM。首先,通过CCK-8实验对比5-氨基酮戊酸(ALA)和ALA@STCM对皮脂腺细胞活力的影响。其次,建立金黄地鼠痤疮动物模型,通过组织学分析对比ALA和ALA@STCM对皮脂分泌的影响。结果CCK-8结果表明,相较于ALA,使用MSC膜包载ALA未明显增加细胞毒性,证明了MSC膜作为载药工具的安全性。组织学分析结果表明,给予光照后,ALA和ALA@STCM均能不同程度地缩小皮脂腺斑面积和抑制皮脂分泌,但是我们发现ALA@STCM的缩小皮脂腺斑的作用和抑制皮脂分泌作用明显优于ALA。结论ALA@STCM介导的光热作用可缩小金黄地鼠的皮脂腺斑、抑制皮脂分泌,并且显著优于ALA。

钯催化羰基化合成α-三氟甲基取代酮和羧酸衍生物

α-三氟甲基取代的有机化合物在制药和材料领域有着广泛的应用,因而其合成引起了有机化学研究者的广泛关注.然而,构建这类化合物的方法相对有限.在众多α-三氟甲基取代的有机物中,α-三氟甲基取代的羧酸衍生物因其特殊性而备受关注.许多商业化药物的活性成分都含有这种基团.在制备这类化合物时,研究者们通常选择含羰基类化合物和三氟甲基源作为原料.虽然这种方法在合成过程中展现了一定的优势,但也存在一些明显的缺点,其中最为突出的是原料的稳定性和易得性问题,因此发展新的合成策略非常重要.羰基化反应是制备含羰基类化合物的一种直接且有效的方法.然而,目前大多数羰基化反应主要集中在使用芳基类底物上,而对于烷基类底物,由于其键能相对较高,因此在实际应用中受到了较多的限制.本文利用Csp3-X键能高的特点,通过钯催化活化及自由基中间体的作用,成功实现了α-三氟甲基取代酮和羧酸衍生物的高效合成.在标准反应条件下,苯酚类和醇类化合物均可作为反应底物转化制得相应的酯类化合物.当使用亲核性更强的芳基胺或烷基胺作为底物时,也可以高效制备出酰胺类目标产物.值得一提的是,即使采用亲核性较低的磺酰胺和酰胺作为反应底物,也能以较高的收率得到对应的酰亚胺类化合物.此外,当使用更具挑战性的碳亲核试剂——芳基硼酸类化合物时,该反应仍能实现中等以上的收率,得到目标产物α-三氟甲基取代酮.总体而言,该反应具有良好的底物官能团兼容性,可以高收率制得酰胺类、酯类、酮类和酰亚胺类化合物.此外,该策略可以在较低的一氧化碳压力下实现该转化的放大反应,并且适用于25种具有密集官能团的药物和天然产物的后期修饰.实验发现,对于不同亲核试剂的竞争反应,苯酚的反应速度大约是苯胺的2倍.此外,通过自由基抑制剂、捕获剂等实验证实了反应过程中存在自由基.因此,在反应机理方面,我们认为三氟碘乙烷和零价钯的反应经历了单电子的碳自由基中间体过程,最终形成了二价钯配合物中间体,从而完成了后续反应.综上,本文开发了一种钯催化羰基化合成α-三氟甲基取代酮和羧酸衍生物的方法,可用于复杂含α-三氟甲基类化合物的制备.该反应策略可以应用于天然产物的修饰、新型药物的研发等领域,也为烷基卤代物的羰基化转化提供了新思路.

催化邻羟基苯基取代对亚甲基醌与酮亚胺环加成反应合成二氢-1,3-苯并噁嗪化合物

发展了邻羟基苯基取代对亚甲基醌与酮亚胺在磷酸催化体系中的[4+2]环加成反应,以高产率和优良的非对映选择性得到了一系列二氢-1,3-苯并噁嗪化合物.当向反应体系加入催化量的B(C_(6)F_(5))_(3)时,产物的产率得到保持且发生非对映选择性翻转.

磷酸三丁酯、4-甲基-2戊酮对铝锂溶液中锂的萃取行为

以磷酸三丁酯(TBP)作为主要萃取剂,4-甲基2-戊酮(MIBK)作为协助萃取剂,三氯化铁(FeCl3)作为共萃剂,以铝锂溶液体系作为试验对象,全面系统的研究了萃取剂的各组成成分、水相溶液的pH值、铁锂原子比、萃取相比、萃取时间以及静置时间对铝锂溶液中锂的萃取效果的影响。通过正交试验确定了萃取反应的最佳反应参数:萃取相比为5∶2,铁锂原子比为2∶1,pH值为1.5,TBP体积分数为70%,MIBK体积分数为15%,萃取时间为10 min。在此条件下,锂的单级萃取率可达82%,锂铝单级分离因数可达51。对萃取分离过程的反应机理进行了研究,深入探索了铁锂共萃取效应,确定了反应产生的萃合物形态为LiFeCl4·2TBP·MIBK,并探究了萃合物形成过程中的键合方式。该萃取方法经济高效,适用于铝锂溶液中锂的分离。

氨基酮戊酸-光动力疗法对宫颈低级别鳞状上皮内病变的疗效及特定免疫因子的影响

目的探究氨基酮戊酸-光动力疗法(ALA-PDT)对高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)持续感染的宫颈低级别鳞状上皮内病变(LSIL)的临床疗效及可能的免疫炎症作用机制。方法选取200例经组织病理学检查证实为宫颈LSIL合并HR-HPV感染的女性患者,根据患者意愿分为2组,研究组接受ALA-PDT治疗,对照组接受CO_(2)激光治疗。在治疗后3个月和6个月随访,随访项目包括有效性(细胞学检查、HPV检测、阴道镜检查及阴道镜定向活检)、安全性(不良反应);进一步用免疫组化法比较治疗前及治疗后6个月宫颈LSIL组织Toll样受体(TLR4)、核转录因子-κB(NF-κB)的表达变化。结果治疗后3个月和6个月,研究组HR-HPV转阴率、病变逆转率均高于对照组,治疗后6个月2组差异更显著(P<0.05);治疗后6个月,研究组和对照组间的宫颈病变持续率、进展率和复发率差异均无统计学意义(P>0.05);研究组患者治疗期间不良反应少,阴道分泌物增加、下腹部不适和外阴瘙痒是最常见的症状。ALA-PDT治疗前后宫颈病变组织中TLR4、NF-κB的阳性表达率差异有统计学意义(P<0.05)。结论ALA-PDT对宫颈LSIL患者的HR-HPV感染疗效显著,HR-HPV转阴率、病变逆转率优于CO_(2)激光治疗。ALA-PDT促进宫颈病变消退及清除HPV感染的免疫机制之一可能是通过减少TLR4和NF-κB的表达来发挥作用。

5-氨基酮戊酸光动力疗法及CO_(2)激光分别联合复方利多卡因凝胶治疗尖锐湿疣的疗效及复发的相关性分析

目的探讨5-氨基酮戊酸光动力疗法(ALA-PDT)及二氧化碳(CO_(2))激光分别联合复方利多卡因凝胶治疗尖锐湿疣(CA)的疗效及复发的相关性分析。方法回顾性分析2021年1月至2023年1月徐州医科大学附属医院收治的121例CA患者的临床资料,根据治疗方式分为A组(n=62)、B组(n=59),A组采用ALA-PDT联合复方利多卡因凝胶治疗,B组采用CO_(2)激光联合复方利多卡因凝胶治疗,比较两组的临床疗效。治疗后6个月随访统计复发情况,并将患者分为复发组(n=34)和未复发组(n=87),分析CA患者复发的影响因素。结果A组临床总有效率高于B组,差异具有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,多发CA、偶尔/经常使用或不使用安全套、2名及以上性伴侣、经常熬夜、CO_(2)激光联合复方利多卡因凝胶治疗是CA患者复发的独立危险因素(P<0.05)。结论ALA-PDT联合复方利多卡因凝胶治疗CA的疗效优于CO_(2)激光联合复方利多卡因凝胶治疗,CA数目、安全套使用情况、性伴侣数量、经常熬夜及治疗方式等是CA患者复发的相关因素,临床需重视以上因素并制定针对性干预措施以降低CA复发率。

行为改变轮理论在5-氨基酮戊酸光动力疗法治疗尖锐湿疣患者中的应用

目的探讨行为改变轮(BCW)理论在5-氨基酮戊酸光动力疗法(ALA-PDT)治疗尖锐湿疣(CA)患者中的应用。方法回顾性分析2021年10月至2023年5月89例在安徽省宣城市中心医院确诊CA的患者的临床资料,根据治疗方案的不同将患者分为观察组(n=47)和对照组(n=42)。两组均接受ALA-PDT治疗,对照组采用常规CA护理方式,观察组在对照组基础上采用BCW理论干预,均干预1个月。在干预前后,比较两组焦虑自评量表(SAS)评分、皮肤病生活指数(DLQI)、健康行为量表(HPL)和自我健康管理能力量表(ESCA)评分。随访3个月,比较两组人乳头瘤病毒(HPV)感染根除率。结果干预后,两组SAS评分均低于干预前,且观察组低于对照组(P<0.05);干预后,两组DLQI各维度评分均低于干预前,且观察组低于对照组(P<0.05);干预后,两组HPL、ESCA评分均高于干预前,且观察组高于对照组(P<0.05)。随访3个月后,观察组HPV感染根除率为89.36%(42/47),对照组HPV感染根除率为83.33%(35/42),两组无显著差异(P>0.05)。结论采用BCW理论干预ALA-PDT治疗的CA患者,可改善患者生活质量,提高其自我管理能力和促进健康行为。

5-氨基酮戊酸光动力学疗法联合干扰素栓对持续高危型人乳头瘤病毒感染患者病毒清除率及阴道微环境的影响

目的探究5-氨基酮戊酸光动力学疗法(ALA-PDT)联合干扰素栓对持续高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染患者HPV清除率及阴道微环境的影响。方法选取2020年1月至2023年1月景德镇市第一人民医院收治的80例持续高危型HPV感染患者作为研究对象,采用随机数字表法将其分为对照组和观察组各40例,对照组采用干扰素栓治疗,观察组采用干扰素栓联合ALA-PDT治疗,观察两组病毒载量变化和HPV清除率、菌群密集度、菌群多样性、优势菌情况、阴道pH变化、Nugnet评分变化以及6个月内复发率。结果观察组治疗后的病毒载量低于对照组,HPV清除率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组治疗后的菌群密集度正常率、菌群多样性正常率、优势菌群健康率均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组治疗后的阴道pH、Nugnet评分均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组6个月内复发率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论ALA-PDT联合干扰素栓治疗持续高危型HPV感染患者可以提高HPV清除率,改善阴道微环境,降低复发率。

5-甲基-7-甲氧基异黄酮绿色合成工艺研究

以3,5-二羟基甲苯为原料,经Hoesch反应得到2,4-二羟基-6-甲基脱氧安息香,再经环合反应得到5-甲基-7-羟基异黄酮,使用绿色合成试剂碳酸二甲酯经甲氧基化反应得到5-甲基-7-甲氧基异黄酮,并获得最佳工艺条件,最优条件下三步反应总收率达47.8%。

(E)-4-(3,5-二溴-4-羟基苯亚甲基氨基)-2,3-二甲基-1-苯基-1,2-二氢吡唑-5-酮的合成与表征

采用3,5-二溴-4-羟基苯乙醛与4-氨基安替比林以甲醇作为溶剂通过缩合反应合成了(E)-4-(3,5-二溴-4-羟基苯亚甲基氨基)-2,3-二甲基-1-苯基-1,2-二氢吡唑-5-酮。对所生成化合物采用乙醇进行结晶,5 d后获得浅黄色的晶体,其结构经X-射线单晶衍射表征,属单斜晶系,P21/c空间群,晶胞参数a=12.0197(11),b=10.8239(10),c=13.3921(12),β=94.870(2)°,V=1736.0(3)3,Z=4,D x=1.780 mg·m-3,θ=2.4~25.5°,μ=4.69 mm-1,T=295(2)K,利用傅里叶变换红外光谱仪得到产物的红外光谱图。

一种合成4-亚苄基-3-甲基-1-苯基吡唑啉酮的新方法

4-亚苄基-3-甲基-1-苯基吡唑啉酮是一种重要的合成子,合成4-亚苄基-3-甲基-1-苯基吡唑啉酮的方法较多,但反应条件较为苛刻。本文用苯并噻唑亚胺与吡唑酮进行反应,合成了4-亚苄基-3-甲基-1-苯基吡唑啉酮,收率高达96%,并进行了普适性研究,均能以较好的收率得到目标产物。

观察5-氨基酮戊酸光动力疗法(ALA-PDT)与CO2激光治疗尖锐湿疣的疗效

观察ALA-PDT与CO2的激光治疗该种疾病疗效。方法:采用2021年3月-2022年3月患者100例随机分组,对照组CO2的激光治疗,观察组同时采用ALA-PDT治疗,分析效果。结果:生活质量相比差异不显著,各项指标对照组均较低,观察组总有效率较高,疾病复发率较低(P<0.05)。结论:尖锐湿疣采用ALA-PDT与CO2激光治疗疗效确切,应用价值较高。

3-甲基巴豆酰辅酶A羧化酶缺乏症6例患儿的临床特征及遗传学分析

目的探讨3-甲基巴豆酰辅酶A羧化酶缺乏症(3-methylcrotonyl-coenzyme A carboxylase deficiency,MCCD)患儿的临床及遗传学特征。方法回顾性分析2018年1月-2023年10月就诊于郑州大学附属儿童医院的6例MCCD患儿的临床表现及基因检测结果。结果6例MCCD患儿中,男性4例,女性2例,平均就诊年龄为7 d,平均确诊年龄为45 d。1例小便气味异常,5例无临床症状。6例患儿血3-羟基异戊酰肉碱、尿3-羟基异戊酸、3-甲基巴豆酰甘氨酸均增高,5例伴游离肉碱降低。共检出MCCC1基因变异6个:c.1630del(p.R544Dfs*2)、c.269A>G(p.D90G)、c.1609T>A(p.F537I)、c.639+2T>A、c.761+1G>T、c.1331G>A(p.R444H),以及MCCC2基因变异3个:c.838G>T(p.D280Y)、c.592C>T(p.Q198*,366)、c.1342G>A(p.G448A),其中MCCC1基因c.269A>G(p.D90G)、c.1609T>A(p.F537I)未见文献报道。1例为母源性MCCD,患儿携带来自母亲的一个杂合变异。5例伴游离肉碱降低患儿予补充左卡尼汀,末次随访时游离肉碱均恢复至正常水平。结论MCCC1基因c.269A>G(p.D90G)、c.1609T>A(p.F537I)为新发现的变异,丰富了MCCC1基因变异谱。血氨基酸及酰基肉碱谱和尿有机酸谱联合基因检测有助于MCCD早期诊断和治疗,并为遗传咨询提供参考。

5-氨基酮戊酸光动力对人乳头瘤病毒感染尖锐湿疣患者炎性反应及预后影响

目的 研究5-氨基酮戊酸光动力(5-aminolevulinic acid-photodynamic therapy,ALA-PDT)治疗对尖锐湿疣患者炎性反应及预后影响。方法 选取2016年1月至2019年1月新疆医科大学第一附属医院收治的尖锐湿疣患者88例,采用随机数字表法分为观察组44例(采用ALA-PDT治疗)和对照组44例(采用CO_(2)激光治疗)。比较两组临床治疗效果及复发率,比较治疗前后白细胞介素-6(interleukin 6,IL-6)、超敏C-反应蛋白(hypersensitive C-reactive protein,hs-CRP)、血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、T淋巴细胞(CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+))、血管内皮生长因子(vascular endothelial growthfactor,VEGF)、血清缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)水平。结果 观察组总有效率高于对照组,差异有显著性(P<0.05)。两组治疗后IL-6、hs-CRP、TNF-α较治疗前降低;观察组治疗后IL-6、hs-CRP、TNF-α低于对照组,差异有显著性(P<0.05)。两组治疗后CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)较治疗前升高,CD8^(+)较治疗前降低;观察组治疗后CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)高于对照组,CD8^(+)低于对照组,差异有显著性(P<0.05)。两组治疗后VEGF、HIF-1α水平较治疗前降低;观察组治疗后VEGF、HIF-1α水平低于对照组,差异有显著性(P<0.05)。观察组复发率低于对照组(χ^(2)=4.061,P=0.043)。结论 ALA-PDT治疗HPV感染尖锐湿疣患者疗效显著,可降低炎性反应,减少复发风险。