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抗meso-四(α,α,α,α-O-苯乙酰苯)卟啉抗体的酶学性质研究 被引量:1
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作者 丁兰 刘志强 +4 位作者 刘立岩 赵大庆 祁超 丁天兵 张玉静 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2002年第4期530-534,共5页
利用小分子meso-四(α,α,α,α-O-苯乙酰苯)卟啉作为全抗原免疫小鼠,通过细胞融合等技术制备了单克隆抗体(McAb)1F2,利用高效液相色谱(HPLC)、基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MALDI/TOFMS)证明纯化得到的... 利用小分子meso-四(α,α,α,α-O-苯乙酰苯)卟啉作为全抗原免疫小鼠,通过细胞融合等技术制备了单克隆抗体(McAb)1F2,利用高效液相色谱(HPLC)、基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MALDI/TOFMS)证明纯化得到的单抗是很纯的.McAb1F2的保留时间是2.63 min,亚型为IgG2a,相对分子量为156 678.8.McAb 1F2-卟啉复合物形成时,卟啉Soret带最大吸收峰从408nm红移到416nm,并有增色效应,说明McAb1F2-卟啉是刚性且紧密结合.抗体酶稳定性很高,但比活力只有4.687 5 U/mg,为天然酶HRP的1.899%.抗体酶的Km=20.29 mmol/L,kcat=396.82 min-1,kcat/Km=1.955 7×104L·mol-1·min-1. 展开更多
关键词 meso-四(α α α α-o-苯乙) 单克隆抗体 全抗原 过氧化物酶 淋巴杂交瘤技术 细胞融合 酶学性质 抗体酶
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抗meso—四(α,α,α,α—o—苯乙酰苯)卟啉的单克隆抗体制备 被引量:4
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作者 祁超 刘立岩 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 2000年第6期511-512,共2页
关键词 meso-四(α α α α-o-苯乙)卟啉 加卤酶 单克隆抗体 制备
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圆二色谱和紫外可见光谱研究抗体-卟啉的相互作用 被引量:3
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作者 祁超 李伟国 +2 位作者 张玉静 刘立岩 赵大庆 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2002年第5期601-604,共4页
圆二色谱 (CD)和紫外可见光谱 (UV VIS)可用来研究单克隆抗体 (McAb) 卟啉之间的相互作用。卟啉形成McAb 卟啉复合物 ,在Soret带区域最大吸收峰有显著红移和增色现象。在 3 5 0~ 45 0nm区域 ,形成复合物时能检测诱导的CD光谱。CD光谱... 圆二色谱 (CD)和紫外可见光谱 (UV VIS)可用来研究单克隆抗体 (McAb) 卟啉之间的相互作用。卟啉形成McAb 卟啉复合物 ,在Soret带区域最大吸收峰有显著红移和增色现象。在 3 5 0~ 45 0nm区域 ,形成复合物时能检测诱导的CD光谱。CD光谱遵守朗伯 比尔定律 ,显示等吸收行为。McAb 卟啉复合物的紫外可见吸收及诱导的CD光谱在pH 6~ 1 1的范围内保持不变 ,说明复合物异常稳定 ,也说明McAb 卟啉结合位点之间疏水相互作用是主要因素。 展开更多
关键词 圆二色谱 紫外可见光谱 相互作用 单克隆抗体 meso-四(α α α-o-苯乙)卟啉
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人工模拟加卤酶II.酶学性质 被引量:3
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作者 祁超 丁兰 +2 位作者 张玉静 刘仔 赵大庆 《应用化学》 CAS CSCD 北大核心 2001年第7期560-562,共3页
The meso-tetra(α,α,α,α-O-phenylacetylbenzene)porphyrin was used as a complete antigen to elicit monoclonal antibody 1F2 through the immunization and cell fusion techniques. The antibody could combine with Mn porph... The meso-tetra(α,α,α,α-O-phenylacetylbenzene)porphyrin was used as a complete antigen to elicit monoclonal antibody 1F2 through the immunization and cell fusion techniques. The antibody could combine with Mn porphyrin and showed a haloperoxidase activity. The affinities of the antibody for antigen and Mn porphyrin were 4 98×10 -5 mol/L and 7 63×10 -5 mol/L, respectively. When the antibody-Mn porphyrin complex was used to catalyze the halogenation reaction, the Michaelis constant and reactive rate constant κ cat for H 2O 2 were 5 127 0×10 -3 mol/L and 0 483 4 s -1, respectively. The enzyme exchange number κ cat/K m=94 285 1 mol/(L·s). 展开更多
关键词 全抗原 加卤酶 meso-四(α α α α-o-苯乙)卟啉 酶学性质 抗体酶 人工模拟酶
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一种制备过氧化物酶的新方法
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作者 祁超 赵文斌 +4 位作者 张玉静 刘仔 丁兰 赵大庆 倪嘉缵 《北华大学学报(自然科学版)》 CAS 2001年第4期297-298,313,共3页
以meso-四(α,α,α,α-O-苯乙酰苯)卟啉为抗原,通过动物免疫、细胞融合等技术筛选细胞株3E4.该细胞株产生的抗体具有结合铁卟啉的能力,且表现出过氧化物酶的活力.该抗体对抗原和铁卟啉的亲和常数为3.65×10-9和8.20×10-8.抗体... 以meso-四(α,α,α,α-O-苯乙酰苯)卟啉为抗原,通过动物免疫、细胞融合等技术筛选细胞株3E4.该细胞株产生的抗体具有结合铁卟啉的能力,且表现出过氧化物酶的活力.该抗体对抗原和铁卟啉的亲和常数为3.65×10-9和8.20×10-8.抗体-铁卟啉复合物催化反应时,得到比活力为46.875U/mg,为天然HRP的18.99%. 展开更多
关键词 抗原 过氧化物酶 meso-四(α α α α-o-苯乙)卟啉 抗体酶 酶活力 细胞融合
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单克隆抗体1F2的制备、纯化及质谱测定
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作者 祁超 孙淑清 +5 位作者 杜丽 丁兰 张玉静 刘仔 赵大庆 倪嘉缵 《化学研究》 CAS 2001年第2期1-3,共3页
用小分子meso -四 (α,α ,α ,α -O -苯乙酰苯 )卟啉免疫Balb/c小鼠 ,用单克隆抗体技术得到细胞株 1F2和单抗 1F2 ,这是对传统免疫理论的一个突破 .利用高效液相色谱和基质辅助激光解吸质谱 (matrixassistedlaserdesorptionionization... 用小分子meso -四 (α,α ,α ,α -O -苯乙酰苯 )卟啉免疫Balb/c小鼠 ,用单克隆抗体技术得到细胞株 1F2和单抗 1F2 ,这是对传统免疫理论的一个突破 .利用高效液相色谱和基质辅助激光解吸质谱 (matrixassistedlaserdesorptionionizationtime_of_flightmassspectography ;缩写为MALDI/TOFMS)证明了纯化得到单抗体 1F2的纯度很好 ,同时得到的单抗 1F2的相对分子量为 15 6 6 78.8Da . 展开更多
关键词 单克隆抗体 全抗原 meso-四(α α α α-o-苯乙)卟啉 基质辅助激光解吸质谱 制备 纯化 分子量测定
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