地龙2号对大鼠肝纤维化α-SMA、TGF-β1、MMP-13及TIMP-1蛋白表达的影响

目的研究地龙2号对肝纤维化大鼠肝组织α_SMA、TGF_β1、MMP_13及TIMP_1蛋白表达的影响。方法采用四氯化碳皮下注射诱导大鼠肝纤维化模型,5 2只雄性Wistar大鼠随机分成6组正常组、阴性对照组、模型组、阳性对照组、地龙2号大剂量组和地龙2号小剂量组,8周末用免疫组织化学染色法检测肝组织中α_SMA、TGF_β1、MMP_13及TIMP_1蛋白表达情况。结果与模型组相比,地龙2号组肝纤维化程度明显减轻,α_SMA、TGF_β1、及TIMP_1蛋白表达均显著降低,MMP_13表达显著升高。结论地龙2号抑制大鼠肝脏纤维组织的形成可能与其降低α_SMA、TGF_β1、TIMP_1蛋白表达并促进MMP_13蛋白表达有关。

肝心宁对大鼠肝纤维化α-SMA、MMP-13及TIMP-1蛋白表达的影响

目的研究肝心宁对肝纤维化大鼠肝组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)及金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)蛋白表达的影响。方法采用四氯化碳皮下注射并给予高脂低蛋白饲料、30%酒精诱导大鼠肝纤维化模型。将68只雄性SD大鼠随机分为正常组11只,模型组15只,阳性对照组14只,肝心宁高剂量组14只,肝心宁低剂量组14只。6周末用免疫组织化学染色法检测肝组织中α-SMA、MMP-13及TIMP-1蛋白表达情况。结果与模型组比较,肝心宁高、低剂量组肝纤维化程度明显减轻,α-SMA及TIMP-1蛋白表达均明显降低,MMP-13表达明显升高。结论肝心宁抑制大鼠肝纤维组织形成作用可能与其降低α-SMA、TIMP-1蛋白表达并促进MMP-13蛋白表达有关。

中药对大鼠肝纤维化MMP-13及α-SMA的影响

目的:探讨中药红景天、大黄酸(Rhein 1,8-二羟基-3-羧基蒽醌)对四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化模型肝组织中MMP-13及α-SMA的表达的影响。方法:本实验用四氯化碳诱导建立大鼠肝纤维化模型。健康♂SD大鼠70只,随机分组:(1)对照组(10只);(2)模型组(20只);(3)干预组1(大黄酸组,20只);(4)干预组2(红景天组,20只)。于实验8周后处死大鼠取肝组织检测MMP-13mRNA、α-SMAmRNA及蛋白的表达情况。结果:红景天、大黄酸干预组肝组织中MMP-13mRNA及蛋白阳性表达均高于模型组(P<0.05);红景天、大黄酸干预组肝组织中α-SMAmRNA及蛋白阳性表达均低于模型组(P<0.05);肝组织MMP-13mRNA表达与α-SMAmRNA表达水平变化呈负相关。结论:中药红景天与大黄酸均能有效促进肝纤维化大鼠肝脏中MMP-13、抑制α-SMA表达;中药大黄酸和红景天都能保护肝细胞活性,促进肝细胞修复再生,具有抗肝纤维化作用。

大黄酸对CCl 4中毒肝纤维化大鼠肝脏中α-SMA、MMP-13及TIMP-1的影响

目的:研究大黄酸对大鼠腹腔注射四氯化碳(CCl 4)所致肝纤维化的治疗作用。方法:雄性SD大鼠共60只,随机分为空白对照组(N)、模型组(M)、秋水仙碱组(C)、大黄酸低剂量组(RL)、大黄酸高剂量组(RH),每组各12只。40%CCl 4与花生油混合腹腔注射2次/周;CCl 4给药3周后,进行秋水仙碱和大黄酸灌胃治疗。实验进行第7周末全部大鼠颈椎离断处死,取新鲜肝脏组织置于-80℃冰箱保存做实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测,剩余肝脏组织置于10%中性福尔马林固定做免疫组织化学法(IHC)检测,分别观察α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)蛋白及mRNA表达情况。结果:与M组比较,在C组和RL组中,大鼠肝脏中α-SMA、TIMP-1蛋白及mRNA表达量减少,MMP-13表达量升高,差异具有统计学意义(P<0.05),但高于N组。RH组各项指标均优于C组和RL组,有显著性差异(P<0.05)。结论:大黄酸能够有效降低肝纤维化中α-SMA、TIMP-1的表达,升高MMP-13的表达,大黄酸高剂量组疗效明显优于低剂量和秋水仙碱组,证实大黄酸对大鼠肝纤维化具有一定的治疗作用。

侵袭性牙周炎患者牙龈组织中 MMP-1、MMP-8和 MMP-13蛋白的表达

目的:检测侵袭性牙周炎(AgP)患者牙龈组织中基质金属蛋白酶(MMP)-1、MMP-8及MMP-13的表达,探讨三者在AgP发病中的可能作用和意义。方法:采用免疫组化法检测30例AgP患者和20例健康对照牙龈组织中MMP-1、MMP-8及MMP-13蛋白的表达。结果:健康对照牙龈组织中MMP-1、MMP-8及MMP-13均有弱表达;AgP患者牙龈组织中MMP-1和MMP-8蛋白的表达高于健康对照(Z=3.980和2.990,P<0.05)。结论:MMP-1、MMP-8蛋白可能在AgP的发生中起重要作用。

MMP-1、MMP-13在食管鳞癌中的表达及与浸润转移的关系

目的研究食管鳞癌组织中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、MMP-13蛋白的表达情况及其与浸润转移之间的关系。方法应用免疫组织化学Elivision法检测90例食管鳞癌组织、16例重度不典型增生组织及28例正常食管黏膜组织中MMP-1、MMP-13蛋白的蛋白表达情况。结果在食管鳞癌、不典型增生及正常食管黏膜组织中MMP-1蛋白的阳性表达率分别为81.11%(73/90)、81.25%(3/16)和17.86%(5/28),MMP-13蛋白的阳性表达率分别为82.2%(74/90)、25%(4/16)、21.43%(6/28),三者差异有统计学意义(P<0.05)。MMP-1、MMP-13蛋白表达与临床分期、浸润深度及淋巴结转移有关(P<0.05)。MMP-1和MMP-13在食管鳞癌中表达呈正相关(r=0.537,P<0.05)。结论 MMP-1和MMP-13在食管鳞癌的发生、发展、浸润、转移过程中可能发挥重要作用,可能作为食管癌判断预后的重要标记。

槲皮素对关节软骨中MMP-13、TIMP-1表达的影响

目的探讨槲皮素对关节软骨中MMP-13及TIMP-1表达的影响。方法通过制备大鼠OA模型,研究槲皮素在体内对关节滑液中MMP-13及TIMP-1表达的影响。通过体外培养软骨细胞,以IL-1β为诱导刺激,研究槲皮素对MMP-13及TIMP-1在mRNA及蛋白水平表达的影响。结果槲皮素可显著降低关节滑液中MMP-13的含量,提高TIMP-1的表达水平;同时在体外细胞培养中,槲皮素也显著抑制了MMP-13的基因及蛋白表达水平,提高了TIMP-1在基因及蛋白水平上的表达。结论槲皮素可显著降低MMP-13/TIMP-1的比例,促进抑制软骨细胞外基质的降解,促进对关节软骨的保护。

非小细胞肺癌中MMP-9和MMP-13的表达及意义

目的分析MMP-9和MMP-13在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及相关性,探讨二者与NSCLC临床病理特征及预后的关系。方法采用免疫组化SP法检测88例NSCLC和18例癌旁正常肺组织中MMP-9、MMP-13的表达。结果 MMP-9与MMP-13在NSCLC中的阳性率均高于癌旁正常肺组织(P<0.05)。MMP-9表达与患者年龄、分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05);MMP-13表达与分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05)。NSCLC中MMP-9与MMP-13的表达呈正相关(P<0.05)。MMP-9和MMP-13阳性组的生存率均低于阴性组,差异有显著性(P<0.05);且肿瘤大小、淋巴结转移和MMP-13阳性表达与NSCLC的预后密切相关(P<0.05)。结论 MMP-9与MMP-13均与NSCLC的侵袭、转移及预后密切相关,MMP-13可能主要通过激活MMP-9途径来参与NSCLC的侵袭、转移。

肺腺癌中MMP-9、MMP-13、HIF-1α表达与临床病理特征、EGFR突变及预后的关系

目的探讨MMP-9、MMP-13、HIF-1α在肺腺癌中的表达,分析其与肺腺癌临床病理特征、EGFR突变及预后的关系。方法采用免疫组化SP法检测629例肺腺癌组织中MMP-9、MMP-13、HIF-1α的表达,并选取癌旁正常组织、肺炎性假瘤样增生各50例作为对照。采用实时荧光PCR法检测629例肺腺癌EGFR的突变,并对患者进行随访。结果肺腺癌组中MMP-9、MMP-13、HIF-1α的表达均高于对照组(P<0.001)。MMP-9表达与患者淋巴结转移及肿瘤大小有关(P<0.05);MMP-13表达与患者吸烟史、TNM分期、淋巴结转移及肿瘤大小有关(P<0.05);HIF-1α表达与患者吸烟史、淋巴结转移有关(P<0.05);但三者表达均与EGFR突变无关(P>0.05)。经Kaplan-Meier生存分析结果显示:MMP-9、MMP-13和HIF-1α阳性组12、24、36个月的累积生存率均明显低于阴性组;COX多因素生存分析结果显示:EGFR突变、MMP-9、MMP-13、HIF-1α的表达、肿瘤大小、TNM分期均是肺腺癌患者生存状况的独立危险因素(P<0.05)。结论肺腺癌组织中MMP-9、MMP-13、HIF-1α存在过表达,其表达均与患者淋巴结转移有关,但与EGFR突变无关。MMP-9、MMP-13、HIF-1α呈阳性、EGFR无突变患者生存率低,且均为肺腺癌患者生存状况的独立危险因素。

α-SMA和MMP-9在乳腺癌中的表达及意义

目的检测乳腺癌组织中α-SMA和MMP-9的表达情况,探讨其与乳腺癌侵袭转移的关系。方法应用免疫组化通用型二步法检测58例乳腺癌中α-SMA和MMP-9的表达,并分析两者的相关性,探讨其与乳腺癌临床病理特征的关系。结果①10例正常乳腺组织中,间质纤维母细胞α-SMA(-);58例乳腺导管原位癌、导管原位癌微灶浸润和浸润性导管癌间质纤维母细胞α-SMA表达呈不同程度上调;浸润性导管癌间质纤维母细胞α-SMA表达与肿瘤大小和组织学分级无关(P>0.05),而与淋巴结转移和临床分期有关(P<0.05)。②正常乳腺组织MMP-9阳性率为20%(2/10),而乳腺浸润性导管癌中阳性率为70.7%(29/41),明显高于正常组织(P<0.01);MMP-9阳性表达与淋巴结转移、临床分期和肿瘤大小有关(P<0.05),而与乳腺癌组织学分级无关(P>0.05)。③α-SMA在乳腺浸润性导管癌相关纤维母细胞中的表达与癌细胞MMP-9的表达呈正相关(P<0.01)。结论α-SMA阳性的乳腺癌相关纤维母细胞可能参与了MMP-9降解基底膜和细胞外基质的过程,与乳腺癌侵袭转移密切相关。

乳腺癌中α-SMA蛋白与MMP-3蛋白的表达及其生物学行为

目的探讨乳腺癌组织中α-SMA蛋白与基质金属蛋白酶-3(matrix metalloproteinase-3,MMP-3)蛋白的表达及生物学行为的关系。方法采用免疫组化SP法检测α-SMA蛋白与MMP-3蛋白在100例乳腺癌组织及30例良性乳腺组织中的表达,并分析其生物学行为及二者间的相关性。结果(1)α-SMA蛋白与MMP-3蛋白在乳腺癌组织中的阳性率分别为68.0%(68/100)、61.0%(61/100),均高于良性乳腺组织,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)α-SMA蛋白、MMP-3蛋白表达均与乳腺癌的临床分期、淋巴结转移显著相关(P<0.05);与患者年龄、肿瘤直径、组织学分级无显著相关(P>0.05)。(3)乳腺癌组织中α-SMA蛋白与MMP-3蛋白的表达呈正相关(rs=0.312,P<0.05)。结论α-SMA蛋白与MMP-3蛋白与乳腺癌的发生、发展、浸润、转移密切相关,联合检测α-SMA蛋白与MMP-3蛋白可作为评估乳腺癌的恶性程度和预后指标。

腺相关病毒介导的klotho基因表达对去势大鼠骨Runx2及MMP-13表达的影响

目的探讨腺相关病毒介导的klotho(KL)基因表达对去势骨质疏松大鼠的调控作用。方法 SD雌性大鼠随机分为假手术组(S组)和手术组,外科去势术后12周再随机分为模型组(O组)、17β-雌二醇组(E组)、KL基因组(KO组)和空质粒组(GO组),实验12周后处死。取股骨、胫骨测骨密度;冰冻切片及免疫组化法观察肾KL荧光及KL蛋白表达;RT-PCR和免疫组化法检测骨Runx2、MMP-13 mRNA及蛋白表达;HE染色观察骨组织形态学变化。结果 KO组和E组骨密度高于O组和GO组(P<0.05);KO组大鼠肾有小鼠KL基因特异性表达;与O组相比,KO组Runx2 mRNA表达明显上调,MMP-13 mRNA表达显著下调(P<0.05);免疫组化分析KO组Runx2吸光度值为411±96,显著高于O组的353±50(P<0.05);KO组MMP-13吸光度值为397±84,显著低于O组的656±89(P<0.05)。KO组、E组和S组大鼠骨小梁排列紧密,连接成网,形态结构较完整,明显优于O组和GO组。结论 KL基因表达上调可减缓去势大鼠骨质疏松症的发展及骨组织微结构的破坏,提示KL基因可能在骨质疏松症的发展中扮演重要角色。

温针灸对不同时间点KOA模型兔关节软骨中MMP-1、MMP-13表达的影响

目的:观察温针灸(warming moxibustion)对兔膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)软骨细胞中基质金属蛋白-1、13(matrix metalloproteinase-1、13,MMP-1、MMP-13)表达的影响,明确温针灸治疗KOA的作用机制。方法:选取70只新西兰大耳兔,其中10只作为空白对照组,剩余随机分为模型2周组、模型4周组、模型6周组、温针灸2周组、温针灸4周组、温针灸6周组。采用右后肢伸直位石膏固定制备KOA兔模型,模型2、4、6周组不予处理,温针灸2、4、6周组分别给予温针灸治疗2周,治疗结束后取材。采用免疫组化及RT-PCR检测各组治疗前后关节软骨中MMP-1、MMP-13蛋白及mRNA的表达。结果:与空白对照组比较,模型2周组、模型4周组、模型6周组软骨中MMP-1、MMP-13表达明显升高(P<0.05),且各组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。与相应模型组比较,温针灸治疗后,MMP-1、MMP-13的表达降低(P<0.05),且各组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:温针灸可降低KOA兔软骨中MMP-1、MMP-13的表达,说明温针灸治疗KOA可能与其抑制MMP-1、MMP-13的表达有关。

光动力疗法对兔耳增生性瘢痕组织中MMP-9,MMP-13和TIMP-1的影响

目的研究ALA-PDT治疗对兔耳增生性瘢痕中基质金属蛋白酶(MMP)-9,MMP-13和金属蛋白酶组织抑制物(TIMP)-1的变化,探讨ALA-PDT治疗对兔耳增生性瘢痕的初步治疗机制。方法将实验动物分为正常组、阴性对照组、高浓度ALA-PDT治疗组、低浓度ALA-PDT治疗组和PDT治疗组,对治疗组分别进行干预治疗,1次/周,共3次,于治疗后1月、2月和3月采集样本,进行Western blot实验。结果治疗组中MMP-9,MMP-13在ALA-PDT治疗后1月、2月和3月的增生性瘢痕表达水平明显高于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.01);而治疗组中TIMP-1表达水平明显低于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.01);高浓度治疗组与低浓度治疗组之间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ALA-PDT治疗对兔耳增生性瘢痕的治疗是有效的,其治疗机制可能是通过逆转MMP-9,MMP-13和TIMP-1之间的失衡状态实现的。

IL-1β和MMP-13在兔骨关节炎模型软骨和滑液中的表达

目的评价兔膝关节内侧半月板损伤制作骨关节炎(OA)模型的方法的可行性,探讨白细胞介素-1β(IL-1β)和金属蛋白酶-13(MMP-13)在兔骨关节炎模型软骨和滑液病变中的作用机制。方法新西兰大白兔40只,随机分为实验组(n=30)和对照组(n=10),于术后2、6、12周观察股骨髁关节软骨的病理变化并进行评分;用免疫组化方法检测关节软骨中IL-1β和MMP-13的表达情况;用酶联免疫吸附法测定关节液中IL-1和MMP-13的含量。结果实验组和对照组在大体和病理观察不同时间点关节软骨评分及HE染色差异均有统计学意义(P<0.05)。免疫组织化学检测结果显示IL-1β在两组中均有表达,实验组和对照组2周时细胞分数差异无统计学意义,6、12周差异有统计学意义(P<0.05)。MMP-13在对照组关节软骨细胞中未见表达,实验组的关节软骨细胞中可见MMP-13蛋白的表达,差异有统计学意义(P<0.05)。关节滑液中IL-1β表达和在软骨中表达一致。结论采用损伤兔膝关节半月板的方法可建立合理的动物OA模型;IL-1β和MMP-13在OA发病过程中表达水平有明显变化,需要进一步的临床研究来探讨其是否可以作为早期诊断OA的指标之一。

臭氧联合玻璃酸钠对骨性关节炎患者关节液中MMP-13的影响

目的:探讨臭氧联合玻璃酸钠对骨性关节炎患者关节液中基质金属蛋白酶13(matrix metro politanate 13,MMP-13)的影响。方法:90例患者按就诊顺序随机平均分为A组为医用臭氧组,B组为玻璃酸钠组,C组为医用臭氧+玻璃酸钠组。在每次治疗前及治疗结束后1周及6个月行疼痛视觉模拟评分(Visual analogue scale,VAS)及临床疗效评分,检测关节液中MMP-13的含量。结果:A组患者治疗后VAS显著下降(P<0.05),MMP-13含量显升高(P<0.05);B组患者在治疗后VAS和临床疗效评分与治疗前无变化(P>0.05),MMP-13含量降低(P<0.05)。C组患者治疗后VAS降低(P<0.05),MMP-13含量降低(P<0.05)。结论:医用臭氧联合玻璃酸钠可以降低关节液中MMP-13的含量,具有一定程度的关节软骨保护作用,临床治疗效果良好,可以作为治疗膝骨性关节炎的一个方法在临床推广应用。

MMP-13、VEGF在三阴性乳腺癌中的表达及其临床意义

目的探讨基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)在三阴性(ER-、PR-、HER2-)乳腺癌发生、发展过程中的临床意义。方法应用免疫组织化学SP法检测MMP-13、VEGF在60例三阴性乳腺癌、36例HR型乳腺癌(ER+/PR+、HER-2-)、28例HER2型乳腺癌(ER-、PR-、HER2+)和12例乳腺纤维腺瘤中的表达情况,并分析其与临床病理参数的关系。结果三阴性乳腺癌中MMP-13、VEGF的表达显著高于乳腺纤维腺瘤和HR型乳腺癌(P<0.005),而且MMP-13在三阴性乳腺癌中的表达显著高于HER2型乳腺癌(P<0.005);三阴性乳腺癌中MMP-13、VEGF阳性表达与腋窝淋巴结转移、临床分期有关(P<0.05),而与患者年龄、肿瘤大小无关(P>0.05)。相关分析显示,在三阴性乳腺癌、HR型乳腺癌及HER2型乳腺癌中MMP-13与VEGF的表达均呈正相关(r=0.522,r=0.482,r=0.571;P<0.01)。结论 MMP-13和VEGF与三阴性乳腺癌的发生、发展有着密切关系,可作为评估三阴性乳腺癌浸润和转移的重要生物学指标。

温针灸对兔膝关节退变模型血清MMP-1和MMP-13水平的影响

目的观察温针灸治疗兔膝关节退变模型前后血清基质金属蛋白酶1、13(MMP-1,MMP-13)及软骨形态的变化,探讨温针灸治疗膝骨性关节炎的作用机理。方法 30只雄性兔随机分为模型组、温针灸组和西药组,每组10只,采用右后肢伸直位固定制作兔膝关节退变模型。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测造模前、治疗前和治疗后兔血清中MMP-1,MMP-13水平,参考彭太平法观察膝关节组织形态学变化。结果治疗2周后,大体和光镜观察模型组膝关节软骨变薄,出现明显的关节软骨损伤,温针灸组可明显改善关节软骨组织学结构。各组治疗前较造模前血清MMP-1、MMP-13的浓度均显著升高(P<0.05);治疗两周后,与模型组比较,温针灸组MMP-1、MMP-13水平降低(P<0.05),但与西药组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论温针灸能治疗KOA的软骨损伤,可能与降低MMP-1和MMP-13表达有关。

MMP-13基因多态性与食管癌、贲门癌遗传易感性的关联研究

采用病例一对照研究，分析河北省磁、涉县食管鳞状细胞癌（ESCC）患者和贲门腺癌（GCA）患者与健康对照人群的基质金属蛋白酶-13（MMP-13）基因启动子区转录起始点上游77bp处A／G多态等位基因和基因型频率分布的差异，旨在探讨此基因多态性与ESCC、GCA遗传易感性的关系。采用聚合酶链反应．限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）技术检测316名ESCC患者、243名GCA患者和609名健康对照的MMP-13A-77GSNP的基因型。结果表明，MMP-13SNP的基因型及等位基因型频率在两患者组和健康对照组之间，其总体分布均无显著性差异（P〉0．05）。根据吸烟状况分层分析发现，吸烟组中GCA患者组与对照组A／A、A／G、G／G基因型频率分别是27.1％、44.1％、28．8％和17．8％、60．5％、21．7％，两组相比具有显著性差异（x^2=9．01，P=0．01），GCA患者组A／G基因型频率明显低于对照组，与A／A基因型比较，A／G基因型可能减少吸烟个体GCA的发病风险（DR=0．48，95％ CI=0．28—0．83）。认为MMP-13基因A-77GSNP可能与河北省磁、涉县人群的食管癌、贲门癌发病风险无关；但A／G基因型对吸烟人群的GCA发病可能具有防护作用。

瘦素对体外培养软骨细胞分泌NO和MMP-13的影响

目的:观察瘦素对体外培养兔关节软骨细胞分泌一氧化氮(NO)和基质金属蛋白酶-13(MMP-13)的影响。方法:获取2月龄兔原代软骨细胞,培养、鉴定、传代。将第3代软骨细胞按实验要求种板培养,饥饿12 h后,以不同浓度瘦素单独或与TNF-α联合干预48或96 h,测定各组细胞上清液中NO及MMP-13的浓度。结果:不同浓度瘦素(5,10,15和20μg/mL)组NO浓度与空白对照组差异无统计学意义(P>0.05);而不同浓度的瘦素与TNF-α(10 ng/mL)联合应用后,与TNF-α组差异有统计学意义(P<0.05)。空白对照组并未测出MMP-13的存在,不同瘦素浓度(10,50和100 ng/mL)组测得MMP-13浓度在剂量主效应和时间主效应均有统计学意义(P<0.05)。结论:瘦素在体外能协同TNF-α促进兔关节软骨细胞分泌NO和MMP-13。