补肾柔肝方对肝纤维化大鼠肝组织病理学以及α-SMA蛋白表达的影响

目的观察补肾柔肝方对肝纤维化大鼠肝组织病理学的影响。方法 SD大鼠随机分为空白对照组8只、模型组15只、秋水仙碱组15只、补肾柔肝方组15只。均以标准鼠食饲养,自由饮水,除空白对照组外,其余各组大鼠采用CCl4造模8周制备肝纤维化模型。从第9周开始,秋水仙碱组、补肾柔肝方组灌胃相应药物,空白对照组、模型组灌胃等体积生理盐水,均连续灌胃8周。末次给药后2 h,取肝组织进行HE、天狼猩红染色,评价肝细胞变性与胶原纤维增生程度。分别采用RT-PCR法和蛋白印迹法检测肝组织α-SMA表达情况。结果补肾柔肝方组大鼠肝脏的纤维化程度明显低于模型组;与空白对照组相比,模型组大鼠的α-SMA蛋白表达明显升高(P<0.01);与模型组相比,秋水仙碱组及补肾柔肝方组α-SMA蛋白表达水平有所降低(P均<0.05)。结论补肾柔肝方能够降低大鼠肝脏内α-SMA蛋白的表达水平,具有明确的抗肝纤维化作用。

乳腺癌弹性成像评分与病灶内α-SMA蛋白表达的相关性

目的：探讨乳腺癌弹性成像评分与病灶内α-SMA蛋白表达的相关性。方法：选取我科乳腺肿块患者分为良性组和恶性组,对比两组患者乳腺间质细胞平滑肌肌动蛋白α-SMA的表达情况,利用乳腺癌弹性成像技术对患者进行检测并且评分,分析成像评分与α-SMA的相关性。结果：良性组与恶性组患者α-SMA的表达结果有统计学差异（P〈0.05）,良性组与恶性组患者α-SMA检测结果比较,良性组α-SMA的表达程度较低,而恶性组α-SMA的表达程度较高,差异有统计学意义（Z=-3.599,P=0.000）。乳腺癌弹性成像评分与α-SMA的表达程度呈正相关（r=0.267,P=0.003）。结论：乳腺癌弹性成像评分与病灶内α-SMA蛋白表达有一定关联,对于乳腺癌有一定诊断价值。

34βE12、P63、CK5/6、α-SMA在前列腺基底细胞中的表达及意义

目的探讨高分子量细胞角蛋白34βE12、肌上皮标记物p63、细胞角蛋白CK5/6、平滑肌肌动蛋白α-SMA在前列腺基底细胞中的表达及意义。方法采用免疫组织化学SP法检测,观察34βE12、p63、CK5/6、α-SMA在前列腺增生(PH)、低级别上皮内瘤变(LGPIN)、高级别上皮内瘤变(HGPIN)、前列腺癌(Pca)中的表达。结果 30例PH组标本34βE12、p63、CK5/6大多阳性表达,10例LGPIN组多(++)表达,15例HGPIN组多(+)表达,Pca组大多阴性表达。Pca组与PH组、LGPIN组、HGPIN组比较差异有统计学意义(P<0.05)。α-SMA基底细胞少量表达,Pca组与PH组、LGPIN组、HGPIN组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论前列腺基底细胞表达34βE12、p65、CK5/6,p65优于34βE12,α-SMA多阴性表达。在前列腺标本中联合检测34βE12、p65、CK5/6有助于对前列腺癌及其他不同病变的鉴别诊断。

加味黄风汤对IgA肾病大鼠肾组织α-SMA及TGF-β表达的影响

目的:观察加味黄风汤对IgA肾病模型大鼠肾组织α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及转化生长因子β(TGF-β)的影响。方法:IgA肾病大鼠造模后,随机分为空白正常组、模型组、雷公藤对照组、加味黄风汤单倍剂量及双倍剂量治疗组,给药12周。检测大鼠尿液、生化、肾组织病理及α-SMA及TGF-β表达改变。结果:加味黄风汤治疗组尿蛋白水平低于模型组(P<0.05)。治疗组肾小球系膜区IgA沉积较模型组明显减弱,系膜基质及系膜细胞增生程度较模型组轻,免疫组化α-SMA及TGF-β表达强度较模型组弱(P<0.05)。加味黄风汤治疗组α-SMA及TGF-β蛋白表达明显下降(P<0.05),m RNA表达亦明显下降(P<0.05)。结论:加味黄风汤能减少尿蛋白,减少肾组织系膜区IgA沉积,减轻系膜细胞及系膜基质增生,下调α-SMA及TGF-β蛋白及m RNA的表达,保护肾脏功能。

川芎嗪对哮喘不同时段肺组织α-SMA干预机制的实验研究

目的探讨不同时段大鼠哮喘模型肺组织α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin,α-SMA)在转录和蛋白水平的表达及川芎嗪对其的作用机制。方法以卵蛋白致敏制备大鼠哮喘模型,腹腔注射不同剂量川芎嗪、地塞米松及联合用药(川芎嗪+地塞米松)干预,分别在激发干预后的1周、2周取肺组织,采用逆转录聚合酶链反应(semi-quantitatively reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)和免疫组织化学S-P方法研究肺组织α-SMA的表达。结果与正常组比较,在激发哮喘后1周肺组织α-SMA的表达显著升高(P<0.05),2周后表达更加显著(P<0.001);与哮喘模型组比较,各用药干预组α-SMA的表达均显著降低(P<0.001),且随着干预时间的延长降低幅度增大,川芎嗪大剂量干预组与地塞米松组相似,干预至两周时接近正常水平,二者降低的幅度均大于川芎嗪小剂量和联合干预组,联合用药干预组的效果优于川芎嗪小剂量组。结论哮喘肺组织α-SMA过量表达与哮喘的发生发展密切相关,并在早期即开始参与哮喘的发病。川芎嗪可在转录和蛋白水平抑制哮喘大鼠肺组织α-SMA的过度表达。

α-SMA与瓣膜性心房颤动患者心房纤维化的关系

目的研究α-SMA在瓣膜性心房颤动(AF)患者心房组织中的表达及其与心房纤维化的关系。方法选择因风湿性心脏瓣膜病住院并行瓣膜置换手术的患者84例(AF组39例、窦性心律组45例),收集整理患者的临床资料,并于手术中获取右心房组织(0.3~0.5cm3)。Masson染色观察两组患者右心房纤维化程度;Western blot及RTqPCR技术测定心房组织中α-SMA蛋白及mRNA的表达,相关分析探讨α-SMA与心房纤维化的关系。结果两组患者的性别构成比、年龄、血压、血常规、生化指标等差异无统计学意义(P>0.05),AF组左、右心房直径明显大于窦性心律组(P<0.05);Masson染色结果提示,AF组心房组织存在明显纤维化,且胶原容积分数与胶原含量显著高于窦性心律组(P<0.05);AF组患者心房组织α-SMA的mRNA及蛋白表达均显著高于窦性心律组(P<0.05);84例患者右心房组织中α-SMA的mRNA及蛋白表达量均与胶原含量呈正相关(相关系数分别为0.587、0.607;P值分别为0.029、0.014)。结论瓣膜性AF患者心房组织存在明显的心房纤维化,与α-SMA基因转录水平上调密切相关。

血管成形术后血管外膜α-SMA、PCNA和OPN表达变化及意义

目的探讨大鼠胸主动脉血管成形术后血管平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、增殖细胞核抗原(PCNA)和骨桥蛋白(OPN)表达的变化与血管外膜增殖的关系。方法6周龄健康、清洁纯系雄性SD(Sprague-Dawley)大鼠32只,体质量为(200±20)g;随机将其分为实验组和对照组,实验组大鼠用6 F人冠状动脉快速交换球囊扩张及剥脱胸腹主动脉内膜,对照组大鼠行胸腹主动脉假手术处理,术后第2周取胸主动脉,进行α-SMA、PCNA及OPN免疫组织化学检查;第6周取胸主动脉做组织形态学检查,并进行对比分析。结果对照组胸主动脉见α-SMA外膜和内膜极少量表达及中膜均匀表达;PCNA外膜和内膜极微量表达及外膜OPN阳性表达。实验组胸主动脉外膜和新生内膜α-SMA、PCNA及OPN阳性表达较对照组明显增强,而中膜α-SMA表达明显减弱。实验组胸主动脉外膜厚度和细胞数量及细胞增殖指数较对照组明显增加(P<0.05)。结论血管成形术后,血管外膜成纤维细胞被激活、增殖,向肌成纤维细胞表型转变,外膜OPN表达增多,外膜增厚,参与血管收缩性重塑。

肝纤维化大鼠肝脏血管紧张素Ⅱ受体1型的表达及其与α-平滑肌肌动蛋白表达相关性研究

目的了解血管紧张素Ⅱ受体1型(angiotensinⅡtype 1receptor,AT1R)在肝纤维化大鼠肝脏的表达及其与胶原纤维含量和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的关系。方法将30只SD大鼠随机分成正常组(n=10)和肝纤维化组(n=20)。正常组正常饲养,肝纤维化组给予40%四氯化碳(CCL4)橄榄油0.4mL/100g体质量背部皮下注射,每3d注射1次,第5w末处死两组大鼠,肝组织制备成石蜡切片后进行Masson三色染色、AT1R和α-SMA免疫组织化学染色,采集图片后用image pro plus 6.0软件对阳性表达进行累计光密度测定。对所得数据进行相关和回归分析。结果 AT1R在正常组大鼠肝脏不表达或血管周围弱表达,在肝纤维化组肝脏汇管区周围和纤维间隔周围大量表达,其主要在肝细胞浆和(或)膜表达,肝星状细胞未见表达;半定量测定及相关分析结果显示,α-SMA与胶原纤维、AT1R与胶原纤维、AT1R与α-SMA的相关系数分别为0.958、0.971、0.990(P<0.01)。结论 AT1R在肝纤维化大鼠肝细胞大量表达,在肝星状细胞不表达,AT1R的含量与胶原纤维含量、α-SMA表达量存在正相关性。

肾炎2号对IgA肾病大鼠α-平滑肌肌动蛋白表达的实验研究

目的：探讨肾炎2号对IrA肾病大鼠肾小球内α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达的影响。方法：使用口服和尾静脉注射牛血清白蛋白（BSA）的方法进行IrA肾病模型的制作，治疗组、对照组造模同时分别给予肾炎2号（15g／kg）和福辛普利（4．17mg／kg）至12周末。观察尿常规、24h尿蛋白定量、肾组织的病理改变及肾小球内α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达。结果：①第7～12周末模型组的24h尿蛋白定量明显高于正常组、治疗组与对照组（P〈O，01）。②与模型组比较，治疗组大鼠肾小球内α-SMA的表达减弱（P〈0．01），但治疗组、对照组相比无明显统计学上的差异（P〉0，05）。结论：肾炎2号具有减轻肾小球内α-SMA的表达的作用。

大黄素抑制肺成纤维细胞增殖及转分化和胶原蛋白合成

目的探讨大黄素对肺成纤维细胞增殖、向肌纤维母细胞转化、胶原合成的影响及相关机制。方法用二甲基亚砜(DMSO)和(0、10、20、40、80、160)μmol/L大黄素处理MRC-5人胚肺成纤维细胞24、48、72 h,采用MTT法检测细胞增殖。根据细胞增殖实验结果,以DMSO及(40、80)μmol/L大黄素分别培养MRC-5细胞48 h后,采用荧光实时定量PCR检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子β1(TGF-β1)、含1型血小板结合蛋白基序的去整合素样金属蛋白酶1(ADAMTS-1)、1型胶原蛋白(Col1)、Col3 mRNA表达水平;Western blot法检测上述分子的蛋白水平。结果 MRC-5细胞增殖抑制率随着大黄素浓度的增加和处理时间的延长而逐渐增高。在处理48 h后,与对照组相比,(40、80)μmol/L大黄素处理组α-SMA、TGF-β1、Col1、Col3 mRNA与蛋白表达水平均降低,而ADAMTS-1 mRNA与蛋白水平升高;与40μmol/L大黄素处理组比较,80μmol/L大黄素处理组α-SMA、TGF-β1、Col1、Col3 mRNA与蛋白表达进一步下调,ADAMTS-1 mRNA与蛋白表达进一步上调。结论大黄素可抑制肺成纤维细胞增殖及其向肌纤维母细胞转化,并通过抑制TGF-β1/ADAMTS-1信号通路减少Col1、Col3合成。

乳腺肿瘤组织间质中CD34、α-SMA的表达及意义

目的：探讨乳腺肿瘤组织间质中CD34、α-平滑肌激动蛋白（α-SMA）的表达及其临床意义。方法：选取我院2010年1月-2013年1月间收治的病历资料完整的乳腺肿瘤患者400例，其中乳腺导管上皮普通型增生患者100例（A组），乳腺导管上皮非典型增生患者100例（B组），乳腺导管原位癌患者100例（C组），乳腺浸润性导管癌患者100例（D组），4组患者均行择期手术治疗，术后取病变组织制备标本块，采用免疫组化法检测4组患乳腺肿瘤组织间质细胞中CD34、α-SMA的表达情况。结果：乳腺浸润性导管癌间质中CD34阳性率显著低于A、B、C3组，组间比较差异有统计学意义（P〈0．05），α-SMA阳性率明显高于A、B、C3组，组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）；A、B、C3组间CD34、α-SMA的阳性表达率比较无统计学差异（P〉0．05）。结论：乳腺肿瘤组织间质中CD34表达的丢失及α-SMA表达的增强在乳腺肿瘤从良性到恶性发展过程中起重要作用。

清化固肾排毒颗粒对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织TGF-β1和α-SMA表达的影响

目的:观察清化固肾排毒颗粒对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织转化生长因子-β1(TGF-β1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响,探讨其抗肾纤维化的作用机制。方法:72只SPF级SD大鼠随机分为假手术组、模型组、洛丁新组及清化固肾排毒颗粒组,除假手术组外,其余各组大鼠均采用单侧输尿管结扎手术方法 (UUO)建立肾纤维化梗阻大鼠模型,术后各组分别予相应药物或生理盐水灌胃,每天1次。第7、14、21天,各组大鼠禁食不禁水1天,处死,取肾组织做病理检测,HE染色观察其病理变化,免疫组织化学染色检测TGF-β1和α-SMA在肾间质的阳性染色表达。结果:与假手术组比较,干预第7、14、21天,模型组、洛丁新组、清化固肾排毒颗粒组大鼠肾小管间质损伤指数显著增加,肾组织TGF-β1和α-SMA的表达均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,干预第7、14、21天,洛丁新组和清化固肾排毒颗粒组大鼠肾小管间质损伤指数明显减轻,肾组织TGF-β1和α-SMA的表达均明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:清化固肾排毒颗粒可能通过下调TGF-β1和α-SMA的表达来抑制上皮细胞间充质转化和细胞外基质的过度积聚,实现改善肾间质纤维化的作用。

食管癌组织中α-SMA,CD34及VEGF的表达与其临床意义

目的 探讨食管癌组织中α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、CD34、血管内皮生长因子（VEGF）蛋白表达的改变及与食管癌侵袭转移的关系,探讨三者在食管癌血管生成中的临床意义.方法 应用免疫组织化学方法检测40例食管癌组织及29例癌旁组织中纤维母细胞α-SMA,CD34和VEGF的表达,分析三者之间及与食管癌临床病理特征的关系.结果 40例食管癌组织α-SMA,CD34和VEGF的阳性表达与29例癌旁组织纤维母细胞中的阳性表达（82.50%vs 37.93%,χ2=14.454;32.50%vs 72.41%,χ2= 10.715;72.50%vs 20.69%,χ2=18.055;均P〈0.05）;α-SMA和VEGF均与肿瘤浸润深度、临床分期和淋巴结转移有关（均P〈0.05）,且两者的表达密切相关（r=0.453,P〈0.01）.结论 食管癌组织中分布有大量的α-SMA表达阳性的肌纤维母细胞,α-SMA,CD34和VEGF的表达有一定的内在联系,三者联合可作为判断食管癌侵袭转移及评估预后的重要指标.

转化生长因子β1对肺成纤维细胞中平滑肌肌动蛋白表达的影响

目的观察不同浓度转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)刺激人胚肺成纤维细胞(MRC-5)后对细胞内平滑肌肌动蛋白(alpha smooth muscle actin,α-SMA)表达的影响。方法以浓度为0、2.5、5.0和10.0ng·mL^-1的TGF-β1刺激后收集细胞,采用实时荧光定量聚合酶链反应(Quantitative Real-time PCR)检测MRC-5细胞内α-SMA基因的相对表达水平,Western blot法测定MRC-5细胞内α-SMA蛋白的相对表达水平,采用Spearman秩相关分析TGF-β1剂量与MRC-5细胞中α-SMA基因和蛋白的相对表达量之间的相关性。结果随着TGF-β1剂量的增加,各组MRC-5细胞中α-SMA基因表达水平增高,5.0ng·mL^-1和10.0ng·mL^-1剂量组高于0ng·mL^-1组和2.5ng·mL^-1组(P均<0.05);10.0ng·mL-1剂量组高于5.0ng·mL^-1(P=0.004)。5.0ng·mL^-1组和10.0ng·mL^-1组MRC-5细胞中的α-SMA蛋白相对表达量高于0ng·mL^-1组(P均<0.05)。TGF-β1剂量与α-SMA基因和蛋白间均呈正相关关系(r基因=0.972,r蛋白=0.878;P基因=0.000,P蛋白=0.042)。结论TGF-β1能影响肺成纤维细胞中α-SMA的表达情况。

中华猕猴桃果仁非饱和脂肪酸通过下调CTGF抑制胶原蛋白合成抗大鼠肺纤维化

目的观察结缔组织生长因子(CTGF)及胶原蛋白合成在果王素(中华猕猴桃果仁非饱和脂肪酸)抗大鼠肺纤维化(PF)中的作用。方法雄性SD大鼠,随机分为对照组、模型组、(60、120、240)mg/kg果王素处理组和5 mg/kg醋酸泼尼松组,每组10只。对照组大鼠以9 g/L氯化钠溶液气管内注射,后5组大鼠则气管内注射博莱霉素A5构建PF模型,建模后次日,后4组大鼠分别以(60、120、240)mg/kg果王素和5 mg/kg醋酸泼尼松灌胃,而前2组予9 g/L氯化钠溶液灌胃,均每天1次。处理后第28天,处死大鼠取肺组织,HE和Masson染色评价PF病变程度,测定羟脯氨酸(HYP)含量,实时荧光定量PCR检测CTGF、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA表达,Western blot法测定CTGF、α-SMA、1型胶原蛋白(Col1)、Col3的蛋白水平,免疫组织化学染色分析CTGF表达情况。结果与模型组相比,(60、120、240)mg/kg果王素处理组和5 mg/kg醋酸泼尼松组肺泡炎及PF程度显著减轻,肺组织HYP含量减少,CTGF、α-SMA mRNA与蛋白表达下调,Col1、Col3蛋白水平降低。上述指标的改变在(60、120、240)mg/kg果王素处理组之间有剂量依赖性。此外,(60、120)mg/kg果王素处理组上述指标较5 mg/kg醋酸泼尼松组升高,而240 mg/kg果王素处理组与后者相比差异不明显。结论果王素下调肺组织CTGF表达,降低α-SMA水平,进而减少Col1、Col3合成,发挥抗PF作用。

缺氧对SD大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞表型转化的影响

[目的]研究缺氧对阴茎海绵体平滑肌细胞(cavernosum smooth muscle cells,CCSM)表型转化的影响。[方法]用酶消化法获取SD大鼠的原代CCSM,并用细胞免疫荧光法进行鉴定。将原代CCSM置于缺氧小室中(37℃,5%CO2,1%O2,94%N2)培养,按缺氧时间分为0h组、24h组、48h组、72h组,用western-blot法检测四组的α-SMA、OPN蛋白表达量。[结果]低氧可以诱导CCSMα-SMA蛋白表达下降,且在72h内随着缺氧时间延长差异显著性增加。低氧24h组细胞OPN蛋白表达增加(P<0.05);低氧48h组细胞OPN蛋白表达显著增加(P<0.01);48h后随着时间延长差异可能会减小(P>0.05)。[结论]缺氧可以诱导CCSM由收缩型向合成型转化。

肌成纤维细胞与排卵的关系

目的:探讨肌成纤维细胞在排卵过程中的作用。方法:取动情期大鼠卵巢,运用免疫组化方法检测肌成纤维细胞特征性标记α-SMA在该组各级卵泡卵泡膜细胞上的表达情况,并进行图像分析。结果:α-SMA 表达于动情期卵巢各级卵泡的卵泡膜细胞上(窦前卵泡、小窦状卵泡、大窦状卵泡),α-SMA在大窦状卵泡的卵泡膜细胞上表达最强,46．59±17．88数量也最多,组内各级卵泡间α-SMA表达比较差异有显著性(P<0．05), 并且α-SMA表达与卵泡直径大小成正的直线关系(r=0．631)。结论:肌成纤维细胞可能在排卵过程中起重要作用。

麻芍平喘汤对哮喘模型大鼠气道重塑的干预作用

目的:观察麻芍平喘汤对哮喘大鼠肺组织转化生长因子β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA蛋白)的影响,初步探讨麻芍平喘汤防治哮喘气道重塑的可能作用机制。方法:采用10%卵白蛋白加氢氧化铝干粉10 mg致敏和激发,建立哮喘大鼠气道重塑模型,将70只大鼠随机分为正常组、模型组、麻芍平喘低剂量组、麻芍平喘中剂量组、麻芍平喘高剂量组、地塞米松组、阳和平喘组,造模成功后,采用麻芍平喘汤、地塞米松和阳和平喘汤进行干预,干预结束后,HE染色法观察气道病理切片,肺功能测定仪测定用力呼气肺活量(FVC)、0.3 s用力呼气容积(FEV0.3)、最大呼气流量(PEF)与0.3 s用力呼气容积占用力呼气肺活量的比值(FEV0.3/FVC),RT-PCR法检测TGF-β1 mRNA、α-SMA mRNA在肺组织中的表达。结果:模型组大鼠FVC、FEV0.3、PEF明显低于正常组(P<0.01),FEV0.3/FVC值明显高于正常组(P<0.01)。各给药组大鼠FVC、FEV0.3、PEF均有改善(P<0.05);模型组大鼠肺组织TGF-β1 mRNA、α-SMA mRNA蛋白表达水平明显高于正常组,各给药组灰度值低于模型组(P<0.01),麻芍平喘高剂量组和阳和平喘组与地塞米松组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:麻芍平喘汤能够改善肺功能,降低TGF-β1、α-SMA的蛋白表达,抑制支气管平滑肌增生,减轻气道壁厚度,从而减轻气道炎症,延缓气道重塑。

护肝片通过抑制肝纤维化而阻碍肝细胞癌发展

目的探讨在DEN诱导的大鼠肝癌模型中,护肝片在肝纤维化—肝癌发展过程中所产生的影响。方法雄性SD大鼠90只随机分为二乙基亚硝胺(diethylinitrosamine,DEN)组,正常对照组,护肝片组(921 mg·kg-1)。DEN组和护肝片组给予0.2%DEN溶液灌胃,按体重10 mg·kg-1给药,每周5次,至14周,对照组给予溶媒。护肝片组同时灌胃(ig)给予护肝片溶剂(羟甲基纤维素钠(CMC-Na)溶液配制),每日1次,直至16周。收集所有大鼠血液样本,进行血清学检测。通过病理组织学检查检测肝纤维化的程度。采用试剂盒检测肝组织中羟脯氨酸的含量。采用免疫组化法检测肝组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)及胎盘型谷胱甘肽硫转移酶(Glutathione S-transferase placenta,GST-P)蛋白的表达。结果 DEN能够成功的诱导大鼠在12周发生肝纤维化,在16周发生肝癌。护肝片能够显著抑制肝纤维化—肝癌的发生。在12周时,护肝片能显著降低与肝功能相关的血清学指标以及α-SMA的过度表达,降低纤维化的程度。在16周时,护肝片能显著降低DEN诱导的大鼠肝癌的发生率和多样性。此外护肝片还能降低癌前病变指标γ-谷氨酰转肽酶(gamma-glutamyl transferase,GGT)和GST-P蛋白的表达。结论护肝片能够通过降低癌前病变指标GGT和GST-P的表达来阻止DEN诱导的肝癌的发生,同时也能减轻肝纤维化的程度,提示GGT与GST-P表达增强与肿瘤的发生密切相关,可能可以作为由纤维化进一步发展为肿瘤的标志,或者有可能成为预测肝癌发生的指标。

丹皮酚联合三七总皂苷对AngⅡ诱导的心脏成纤维细胞增殖及TGF-β/Smads信号通路的影响

目的探讨丹皮酚联合三七总皂苷应用对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导新生大鼠的心脏成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFs)增殖及TGF-β/Smads信号通路的影响。方法采用胰酶消化法分离培养的CFs随机分为6组:正常对照组,模型组,三七总皂苷组,丹皮酚组,丹皮酚与三七总皂苷联合用药大、小剂量组。采用MTT比色法测定各组培养液中CFs增殖情况,免疫细胞化学法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的蛋白表达水平,RTPCR法检测转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,Tgfb1)的mRNA表达水平,Western blot法检测TGF-β1、磷酸化的Smad2/3(p-Smad2/3)的蛋白表达水平。结果与正常对照组比较,模型组大鼠CFs增殖明显增高,Tgfb1的mRNA表达显著增加,α-SMA及TGF-β1、p-Smad2/3的蛋白表达显著增加;与模型组比较,丹皮酚组、三七总皂苷组、联合用药的大剂量和小剂量组均可抑制由AngⅡ诱导的CFs的增殖,Tgfb1的mRNA表达显著减少,α-SMA及TGF-β1、p-Smad2/3的蛋白表达显著减少;与丹皮酚组、三七总皂苷组比较,联合用药大、小剂量组在抑制CFs增殖的作用上显著增强,抑制Tgfb1的mRNA表达效果显著增强,抑制α-SMA及TGF-β1、p-Smad2/3的蛋白表达效果显著增强;与联合用药小剂量组比较,联合用药大剂量组对以上指标的抑制效果更佳,显示一定的剂量依赖性。结论丹皮酚与三七总皂苷联合应用对抑制CFs增殖,呈现明显的协同作用。其作用机制与抑制TGF-β/Smads信号通路的传导有关。