MIP-1α诱导Jurkat细胞穿过人脑微血管内皮细胞单层能力分析

本研究为探究人急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)细胞脑转移发生中枢神经系统白血病的机制及MIP-1α在T-ALL模式细胞Jurkat穿过人脑微血管内皮细胞(HBMEC)过程中的作用。应用real-time PCR、siRNA试验、跨内皮迁移试验和细胞黏附试验,分别检测MIP-1α的表达、Jurkat细胞穿透能力、迁移能力和黏附力。结果表明,Jurkat细胞作为研究T-ALL细胞穿过血脑屏障(BBB)机制的模式细胞MIP-1α表达均高于正常人T淋巴细胞以及其他3种T-ALL细胞系(HSB2、CEM、SUP-T1),Jurkat细胞分泌的MIP-1α使其穿过HBMEC单层能力增强。MIP-1αsiRNA干扰后的Jurkat细胞对HBMEC黏附和跨内皮迁移力下降。结论:Jurkat细胞分泌的MIP-1α参与了Jurkat细胞穿过HBMEC单层的过程。

1α,25二羟维生素D_3对1型糖尿病Th1/Th2平衡的调节作用

目的探讨1α,25二羟维生素D3_1,25D3)对经典1型糖尿病(T1DM)Th1/Th2比值平衡的免疫调节作用。方法选择6例新发病、GAD-Ab阳性的T1DM患者,6名年龄、性别匹配的健康志愿者为对照(NC);间接免疫荧光鉴定细胞维生素D受体(VDR)的表达;免疫印迹法分析VDR蛋白的表达;连续梯度离心法分离人外周单个核细胞(PBMC);酶联免疫斑点法定量检测GAD65反应性分泌IFN-γ、IL-4细胞,分别代表Th1、Th2细胞。结果(1)T1DM的PBMC胞核表达VDR;(2)T1DM组Th1、Th2、Th1/Th2均值分别为18.0、3.0、6.0,NC组为2.5、3.5、0.71,T1DM组1,25D3作用后则分别为5.6、4.5、1.22,溶剂(无水乙醇)对照组分别为1.5、3.2、4.8。T1DM组的Th1及Th1/Th2均明显高于NC组(P<0.01);与溶剂组比较,T1DM组1,25D3作用后的Th1及Th1/Th2均明显降低(P<0.05);三组间的Th2值差异无统计学意义(P>0.05)。结论1,25D3对T1DM患者的GAD65反应性分泌IFN-γ的Th1细胞具有直接抑制作用,显著改善Th1/Th2的免疫失衡状态。

黄芪多糖对幼鼠肠缺血再灌注损伤肠组织TNF-α、ICAM-1、IL-6及免疫功能的影响

目的:通过观察黄芪多糖对肠缺血再灌注(IR)损伤幼鼠肠组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)、白介素-6(IL-6)表达以及T淋巴细胞亚群分布的影响,探讨黄芪多糖对幼鼠肠缺血再灌注损伤肠组织的保护作用。方法:选用4周龄SD大鼠60只,随机分成假手术组、缺血再灌注组(IR组)及黄芪多糖干预组(APS组),各20只。假手术组仅暴露腹腔脏器,不做任何干预;缺血再灌注组及黄芪多糖干预组,阻断肠系膜上动脉造成缺血60 min,缺血再灌注组注射0.5 m L生理盐水,黄芪多糖干预组注射20 mg/100 g黄芪多糖。分别于再灌注后30、60、90、120 min每组处死5只大鼠取小肠组织进行免疫组织化学染色,检测小肠中TNF-α、ICAM-1及IL-6的表达,流式细胞仪检测小肠CD_3^+、CD_4^+、CD_8^+T淋巴细胞百分比,计算CD_4^+/CD_8^+比值。结果:正常肠组织中的TNF-α、ICAM-1及IL-6呈现出低水平表达,缺血再灌注模型、黄芪多糖干预组肠组织中的TNF-α、ICAM-1及IL-6含量与假手术组比较均显著升高(P<0.01),缺血再灌注模型组及黄芪多糖干预组肠组织中TNF-α、ICAM-1及IL-6含量均从30 min开始逐渐升高,至90 min时达到顶峰,之后逐渐下降。黄芪多糖干预组肠组织中TNF-α、ICAM-1以及IL-6含量在各个时间点与缺血再灌注模型组比较,均显著降低(P<0.01)。与假手术组和黄芪多糖干预组比较缺血再灌注组各个时间点小肠CD_3^+、CD_4^+T淋巴细胞百分比均显著下降(P<0.05),缺血再灌注组CD+8T淋巴细胞百分比与假手术组和黄芪多糖干预组比较各个时间点均显著升高(P<0.05),CD_4^+/CD_8^+比值,缺血再灌注组与假手术组和黄芪多糖干预组比较均显著下降(P<0.01)。结论:黄芪多糖能够有效减轻肠组织缺血再灌注损伤,可能与下调TNF-α、ICAM-1及IL-6的表达及调节T淋巴细胞亚群的平衡有关。

CD4^+CD28^-T细胞、TNF-α、VCAM-1在急性脑梗死中的意义及其与颈动脉斑块性质的相关性分析

目的探讨急性脑梗死患者外周血中CD4^+CD28^-T淋巴细胞亚群、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)在不同类型脑梗死中的含量变化,以及其与颈动脉斑块性质的相关性,进一步分析CD4^+CD28^-T细胞、TNF-α、VCAM-1在脑梗死患者发病中的相关性。方法收集2018年8月~2019年4月于中国医科大学附属盛京医院神经内科住院患者,采用流式细胞仪和ELISA方法将57例急性大动脉粥样硬化型脑梗死患者和43例急性小动脉型脑梗死患者以及40例健康对照患者的外周血CD4^+CD28^-T淋巴细胞、TNF-α以及VCAM-1进行检测,分析CD4^+CD28^-T淋巴细胞、TNF-α及VCAM-1水平在不同组之间的变化。57例急性大动脉粥样硬化型脑梗死患者通过颈动脉彩超得出47例颈内动脉斑块患者,其中19例稳定斑块组和28例不稳定斑块组,分析CD4^+CD28^-T淋巴细胞、TNF-α、VCAM-1与大动脉粥样硬化型脑梗死斑块稳定性的关系,并通过散点图判断其在急性脑梗死患者中的相关性。结果急性大动脉粥样硬化型脑梗死患者外周血中CD4^+CD28^-T淋巴细胞和TNF-α水平高于小动脉型脑梗死患者,两组的CD4^+CD28^-T淋巴细胞、TNF-α、VCAM-1水平均高于健康对照组,三组两两比较均有统计学差异(P<0.05);其中不稳定斑块组CD4^+CD28^-T淋巴细胞、TNF-α及VCAM-1水平高于稳定斑块组,两组比较有统计学差异(P<0.05);同时所有急性脑梗死患者的CD4^+CD28^-T淋巴细胞与TNF-α以及VCAM-1之间呈线性相关。结论当发生急性脑梗死时,患者外周血中CD4^+CD28^-T淋巴细胞、TNF-α、VCAM-1水平在急性期增高,并且CD4^+CD28^-T淋巴细胞、TNF-α、VCAM-1主要参与大动脉粥样硬化型不稳定斑块的形成,CD4^+CD28^-T淋巴细胞在急性脑梗死患者中分别与TNF-α、VCAM-1存在相关性,因此在脑梗死发病中起重要作用。

清热凉血养阴祛风法对佐剂性关节炎大鼠外周血T淋巴细胞亚群及相关细胞因子TNF-α、IL-1β的研究

目的:探讨清热凉血养阴祛风法对佐剂性关节炎大鼠外周血T淋巴细胞亚群及相关细胞因子TNF-α、IL-1β的影响。方法:取SD大鼠制成佐剂性关节炎模型,设正常组、模型组、痹颗粒组、实验组。造模后第7天起分别予痹颗粒1.88 g/(kg·d),实验方29 g/(kg·d),正常组、模型组予生理盐水3 mL/(只·d),连续灌胃3周。腹主动脉取血,用流式细胞技术检测外周血中T淋巴细胞亚群(CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD4+/CD8+),用酶联免疫吸附法(ELISA)检测外周血血清中细胞因子TNF-α及IL-1β。结果:实验组CD4+、CD8+T淋巴细胞,CD4+/CD8+的比值与模型组比较差异有显著性(P<0.01或P<0.05),CD4+淋巴细胞水平降低,CD8+淋巴细胞水平升高,CD4+/CD8+的比值降低。实验组细胞因子TNF-α及IL-1β水平与模型组比较差异有显著性(P<0.01),TNF-α、IL-1β水平降低。结论:清热凉血、养阴祛风法能调节T淋巴细胞紊乱和相关细胞因子水平,对大鼠佐剂性关节炎有治疗作用。

Tuftsin衍生物TP影响肿瘤相关巨噬细胞MIP-1α分子表达

目的探讨TP对肿瘤相关的趋化因子巨噬细胞炎性蛋白1-α(MIP-1α)表达的影响。方法使用RT-PCR的试验方法,检测小鼠巨噬细胞Ana-1细胞和肿瘤组织中提取的巨噬细胞中MIP-1α的表达;建立小鼠S180肉瘤细胞皮下移植瘤双瘤模型,待肿瘤体积生长至约250 mm3时,将其中一侧建立术后残瘤模型,并开始以8 mg·kg-1剂量的TP给药,隔天1次,给药4次后,分离肿瘤组织,免疫组化检测MIP-1α的表达。结果不同浓度TP对小鼠TAMs的MIP-1α表达较空白对照组明显减少,并呈剂量依赖性;体内试验中,TP处理组的荷瘤小鼠的肿瘤组织MIP-1α与对照组相比表达明显降低,接近于阳性药环磷酰胺组;但是MIP-1α在小鼠Ana-1细胞和TAMs中的mRNA表达量差异没有统计学意义;不同浓度TP对小鼠Ana-1细胞的MIP-1α表达差异也没有统计学意义。结论 TP不能影响小鼠Ana-1细胞系的MIP-1α表达,但TP对肿瘤组织中的巨噬细胞MIP-1α的表达有明显影响;MIP-1α有可能是TP抗癌作用机制的新靶点。

卡维地洛及TNF-α对内皮细胞释放t-PA和PAI-1的影响

目的 研究卡维地洛及肿瘤坏死因子α(TNF α)对内皮细胞分泌组织纤溶酶原激活物 (t PA)和纤溶酶原激活物抑制剂 1(PAI 1)的影响。方法 培养内皮细胞株 (ECV3 0 4) ,分为TNF α刺激组 ,培养基中TNF α加至终浓度为 5、10、2 5、5 0、10 0ng/ml;卡维地洛干预组 ,培养基中加TNF α (5 0ng/ml)后加入卡维地洛 ,终浓度为 2 0、5 0、10 0、2 0 0nmol/L ,2 4h后测定上清中的组织纤溶酶原激活物 (t PA)和纤溶酶原激活物抑制剂 1(PAI 1)的含量。结果 内皮细胞在TNF α刺激 2 4h后 ,其分泌的PAI 1抗原含量与对照组比有明显升高 ,有显著性差异 (P <0 0 5 ) ,而两组间t PA含量无明显差异 (P >0 0 5 )。而卡维地洛干预组却显著降低PAI 1(P <0 0 5 ) ,对t PA含量无明显作用 (P >0 0 5 )。结论 TNF α对内皮细胞株分泌的PAI 1有显著的升高作用 ,而对t PA无显著影响 ;用卡维地洛干预后 ,PAI 1显著降低 ,t PA含量无明显改变。

1α,25-二羟维生素D_3对早期角膜移植小鼠Th17细胞的免疫调控作用

目的:观察在同种异体角膜移植的小鼠模型中,1α,25-二羟维生素D3对Th17细胞及其相关细胞因子的影响。方法:C57BL/6小鼠作为受体,BALB/c小鼠作为供体,建立小鼠穿透性角膜移植术模型。术后隔日对角膜移植小鼠腹腔注射1.0μg 1α,25二羟维生素D3(维生素D3干预组),模型组和正常对照组腹腔注射等量大豆油。在裂隙灯活组织镜下观察角膜移植物的透明情况,评估排斥反应的发生情况,并取角膜移植物做病理学检测。采用实时荧光定量PCR检测脾脏中IL-17、RORγt和IFN-γ的表达水平,Western blotting分析外周血中RORγt及IL-17的蛋白含量,流式细胞术检测外周血IL-17和IFN-γ细胞因子的表达情况。结果:1α,25-二羟维生素D3显著地抑制了同种异体角膜移植排斥反应,同时减少了角膜移植物的炎性渗出。应用1α,25-二羟维生素D3治疗后,小鼠脾脏中IL-17、RORγt和IFN-γ的表达水平降低;外周血中IL-17、RORγt和IFN-γ的表达水平被下调。结论:1α,25-二羟维生素D3抑制小鼠同种异体角膜排斥反应的作用与IL-17及相关细胞因子RORγt细胞调节密切相关。

Ku70对HTLV-1阳性T细胞中HTLV-1病毒蛋白表达的影响

目的:探讨Ku70对人嗜T淋巴细胞病毒1(HTLV-1)阳性T细胞中HTLV-1病毒蛋白表达的影响。方法:Western blot实验检测不同的HTLV-1阳性T细胞系中Ku70的表达水平;构建Ku70基因沉默siRNA并通过Western blot实验检测其敲减Ku70表达的效率;采用siRNA在HTLV-1阳性的T细胞中敲减Ku70表达后,通过real-time PCR和Western blot实验分别检测HTLV-1病毒蛋白在mRNA和蛋白水平上的表达量,并通过real-time PCR实验检测干扰素和促炎因子的表达量。结果:HTLV-1阳性T细胞系MT2、MT4及C8166中的Ku70均呈高表达;采用siRNA敲减Ku70的表达后,MT2细胞及MT4细胞中的HTLV-1病毒蛋白表达量上升;采用siRNA敲减Ku70的表达后,MT2细胞及MT4细胞中干扰素α、干扰素γ及肿瘤坏死因子α的表达下降。结论:Ku70在HTLV-1阳性T细胞中高表达;在HTLV-1阳性T细胞中,Ku70促进干扰素和促炎因子的表达,抑制HTLV-1病毒蛋白的表达。

气管支气管恶性病变狭窄患者肺泡灌洗液中TNF-α和Th1/Th2对再狭窄的预测价值

目的探讨气管支气管恶性病变狭窄患者肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和辅助性T细胞(Th)1/Th2对再狭窄的预测价值。方法选取我院2019年2月至2021年8月收治的140例气管支气管恶性病变狭窄患者作为研究对象。全部患者均接受气管镜下介入手术治疗,并于术后随访3个月,观察记录患者术后再狭窄情况;调查患者基线资料,并收集肺泡灌洗液,检测肺泡灌洗液中TNF-α、癌胚抗原(CEA)和Th1/Th2比值和其他相关血清学指标,比较患者基线资料、实验室指标;分析肺泡灌洗液中TNF-α、CEA和Th1/Th2比值预测气管支气管恶性病变狭窄患者再狭窄的价值。结果140例气管支气管恶性病变患者中,有26例术后发生再狭窄,发生率为18.57%。再狭窄组肺泡灌洗液中TNF-α和CEA水平均高于非再狭窄组,Th1/Th2比值低于非再狭窄组(均P<0.05);组间其他基线资料和实验室指标比较差异无统计学意义(P>0.05);经点二列相关性检验分析结果显示,TNF-α、Th1细胞水平和Th1/Th2比值与气管支气管恶性病变狭窄患者术后再狭窄呈正相关性(r=0.317、0.337、0.211、0.517,P<0.05),Th2细胞水平与气管支气管恶性病变狭窄患者术后再狭窄呈负相关性(r=-0.449,P<0.05);绘制受试者工作特征(ROC)曲线图,肺泡灌洗液中TNF-α和Th1/Th2比值单独及联合预测对患者术后再狭窄均有一定预测价值,且以联合预测的价值最好;绘制决策曲线显示,在阈0.10~0.18、0.20~0.24、0.41~0.51、0.82~0.89、0.90~0.94范围内,联合肺泡灌洗液中TNF-α和Th1/Th2比值的预测模型预测气管支气管恶性病变狭窄患者术后再狭窄净收益率优于单独TNF-α或Th1/Th2比值。结论气管支气管恶性病变狭窄患者肺泡灌洗液中TNF-α和Th1/Th2比值可用于预测再狭窄,预测价值较好。

上调miR-21表达促进肺成纤维细胞增殖和胶原蛋白合成

目的探讨miR-21在肺纤维化小鼠肺组织中的表达及其在肺成纤维细胞增殖、转分化、胶原蛋白合成中的作用。方法将30只C57BL／6小鼠随机分为对照组（n=5）和模型组（n=25）。经气管内注入博莱霉素A5建立肺纤维化模型，分别于第3、7、14、28、56天随机处死5只小鼠，而对照组于第56天全部处死作为总体对照，采用荧光实时定量PCR测定肺组织中miR-21表达。另外，NIH3T3肺成纤维细胞分别予Lipofectamine^TM 2000转染试剂（空白对照组）以及miR-21阴性对照物、模拟物、抑制物处理，通过MTY法检测细胞增殖能力，应用荧光实时定量PCR和Western blot法分别检测d平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、含1型血小板结合蛋白基序的去整合素和金属蛋白酶1（ADAMTS-1）、1型胶原蛋白（Coll）、3型胶原蛋白（C013）mRNA与蛋白表达情况。结果模型组第7～56天，肺组织中miR-21表达水平明显高于对照组，第28天达到高峰。在共同培养24、48、72、96h后，miR-21模拟物组细胞活力较空白对照组增加，而miR-21抑制物组细胞活力较空白对照组降低。与空白对照组比较，miR-21模拟物组α-SMA、Coll、CoBmRNA与蛋白表达水平升高，ADAMTS-1 mRNA与蛋白表达水平减少；然而miR-21抑制物组α-SMA、Coll、Co13 mRNA与蛋白表达水平下降，ADAMTS-1 mRNA与蛋白表达水平上升。阴性对照组上述指标与空白对照组比较，无显著性差异。结论miR-21在肺纤维化小鼠肺组织中表达上调，miR-21高表达可促进肺成纤维细胞增殖、转分化以及胶原蛋白的合成。

习惯性流产患者血清ENO1Ab、ACA、Tim-1的水平及意义

目的探究抗α-烯醇化酶抗体(ENO1Ab)、抗心磷脂抗体(ACA)、T细胞免疫球蛋白域黏蛋白域蛋白-1(Tim-1)在习惯性流产(RSA)患者血清中的水平及意义。方法选取2016年2月至2019年12月该院诊治的124例RSA患者为RSA组,选取同期该院体检健康的129例早孕女性作为健康对照组。采用酶联免疫吸附试验法检测所有受试者血清ENO1Ab、ACA、白细胞介素(IL)-2、IL-4水平;采用实时荧光定量PCR法检测所有受试者血清Tim-1水平;分析RSA患者血清ENO1Ab、ACA、Tim-1水平与IL-2、IL-4的相关性;分析RSA发生的影响因素。结果RSA组患者生殖道感染、孕期被动吸烟比例、血清ENO1Ab、ACA、Tim-1、IL-2水平高于健康对照组,IL-4水平低于健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。RSA患者血清ENO1Ab、ACA、Tim-1水平与IL-2水平呈正相关(r=0.587、0.473、0.456,P<0.05),与IL-4水平呈负相关(r=-0.462、-0.515、-0.347,P<0.05),血清ENO1Ab、ACA水平与Tim-1水平呈正相关(r=0.467、0.465,P<0.05)。生殖道感染、高ENO1Ab、ACA、Tim-1、IL-2水平是影响RSA发生的危险因素(P<0.05),高IL-4水平是影响RSA发生的保护因素(P<0.05)。结论RSA患者血清ENO1Ab、ACA、Tim-1水平均明显升高,三者可能与IL-2、IL-4相互作用,进而共同影响RSA的发生、发展。

变应性鼻炎患者TNF-α、Tim-1及TLR4变化与病情程度的相关性研究

目的探讨变应性鼻炎(AR)患者血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、T细胞免疫球蛋白域黏蛋白域蛋白-1(Tim-1)、Toll样受体4(TLR4)变化与病情程度的相关性。方法选取南阳市第一人民医院2021年10月—2022年10月接受的77例AR患者为研究组,同期选取100例健康者为对照组,进行血清TNF-α、Tim-1、TLR4水平检测,并采用Pearson相关性分析法分析患者血清TNF-α、Tim-1、TLR4水平与病情程度关系;采用多因素Logistic回归分析影响AR的危险因素。结果相比对照组、研究组轻度与中度患者,重度患者血清TNF-α、Tim-1、TLR4水平及AR评分量表(SFAR)评分较高(P<0.05)。血清TNF-α、Tim-1、TLR4水平与SFAR评分呈正相关(P<0.05)。TNF-α、Tim-1、TLR4是影响AR病情程度的危险因素(P<0.05)。结论随着病情严重程度的发展,AR患者机体内血清TNF-α、Tim-1、TLR4水平升高,血清TNF-α、Tim-1、TLR4变化与SFAR评分呈正相关性,同时TNF-α、Tim-1、TLR4水平是影响AR严重程度的影响因素,临床可通过监测其水平变化对AR病情程度作出评定。

膝关节炎家兔外周血BTLA、IL-1、TNF-α、IL-10及部分血小板参数的变化

目的:探讨B、T淋巴细胞衰减因子(BTLA)、血清白介素-1(IL-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-10(IL-10)及部分血小板指标在膝关节炎(OA)新西兰家兔外周血中的变化。方法:30只新西兰家兔均分为模型组、治疗组和假手术组,切断模型组和治疗组新西兰家兔前交叉韧带、剪除内侧半月板、建立兔膝OA模型,假手术组仅打开关节腔;手术结束3周时流式细胞技术检测3组大鼠外周血CD3^+BTLA^+T细胞、CD4^+BTLA^+T细胞、CD8^+BTLA^+T细胞及调节性T细胞(Treg),ELISA法检测血清IL-1、TNF-α、IL-10水平,全自动生化分析仪检测血小板计数(PLT)、血小板压积(PCT)、血小板分布宽度(PDW)及血小板平均体积(MPG)。结果:造模成功后3周时模型组家兔外周血IL-1、TNF-α、IL-10水平高于另外两组(P<0.05),CD3^+BTLA^+T细胞、CD4^+BTLA^+T细胞、CD8^+BTLA^+T细胞及Treg百分比均明显低于另外两组(P<0.05),PLT及PCT均明显低于另外两组(P<0.05);模型组家兔外周血PLT与CD3^+BTLA^+T细胞、CD4^+BTLA^+T细胞及Treg水平成正相关;PCT、PDW与CD8^+BTLA^+T细胞水平成正相关,MPV与CD4^+BTLA^+T细胞水平成正相关(P<0.05)。结论:BTLA阳性T淋巴细胞水平、IL-1、TNF-α、IL-10以及部分血小板参数可能参与了OA的发生发展。

rmhTNF-α联合PD-1单抗治疗小鼠Lewis肺癌的研究

目的研究重组改构人肿瘤坏死因子-α(rmhTNF-α)联合PD-1单抗(anti-PD-1)对小鼠Lewis肺癌的治疗效果及作用机制。方法24只6~8周龄C57BL/6雌鼠,依据随机数字表法分为4组,每组6只:生理盐水组、rmhTNF-α组、anti-PD-1单抗组、联合给药组。游标卡尺测瘤体并用活体成像观测。16 d后安乐处死小鼠,剥离肿瘤称重。观察小鼠生存期。免疫组化检测肿瘤CD8+T细胞数目。结果与生理盐水组比较,rmhTNF-α组、antiPD-1组、联合给药组肿瘤体积、瘤重均减小,差异有高度统计学意义(P<0.01);rmhTNF-α组肿瘤体积大于联合给药组,差异有统计学意义(P<0.05);而联合给药组与anti-PD-1组肿瘤体积差异无统计学意义(P>0.05);联合给药组瘤重分别与rmhTNF-α、anti-PD-1组比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。与生理盐水组比较,rmhTNF-α组、anti-PD-1组、联合给药组生存期增加,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),而联合给药组生存期分别与rmhTNF-α组、anti-PD-1组比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。rmhTNF-α组与生理盐水组比较,肿瘤CD8+T细胞数目增多(P<0.05);anti-PD-1组、联合给药组与生理盐水组比较,肿瘤CD8+T细胞数目显著增加(P<0.01);联合给药组肿瘤CD8+T细胞数目少于rmhTNF-α组(P<0.01),而与anti-PD-1组比较,肿瘤CD8+T细胞数目差异无统计学意义(P>0.05)。结论rmhTNF-α具有抑制小鼠肺癌的作用,但不具有增强PD-1抗体治疗肺癌的作用。

α-分离公理的研究

在L-拓扑空间介绍了α-T0,α-T-1,次-α-T0分离公理.给出了它们的等价刻画,并且指出了α-T0意味着α-T-1和次-α-T0,证明了α-T0,α-T-1和次-α-T0具有遗传性.

胸腺法新为基础的药物治疗对肝移植术后肿瘤复发及相关细胞因子的影响

目的:探讨以胸腺肽联合槐耳颗粒对肝移植术后肿瘤复发及Foxp3+调节性T细胞(Treg细胞)、白介素(interleukin,IL)-10、转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)的表达.方法:从2011-01/2015-01在解放军第309医院接受肝移植的患者中搜集病例数共计42例患者的临床资料(均符合杭州标准),包括肝细胞癌(肝癌)患者42例.根据患者术后用药情况分为联合用药组19例,槐耳颗粒组16例,胸腺法新组7例.术后各组根据个体差异调整免疫抑制剂的种类和剂量[他克莫司(F K506)+吗替麦考酚酯(M M F)+西罗莫司].1 mo后联合用药组采用以胸腺法新联合槐耳颗粒抗肿瘤药物治疗,其他2组分别单用槐耳颗粒及胸腺法新.观察肝癌患者肿瘤的复发时间及各组外周血中调节性T细胞(Treg细胞)、IL-10、TGF-β的表达情况.每例患者的观察时间均为12 mo.结果:联合药物组的无瘤生存时间明显高于槐耳颗粒组及胸腺法新组(P<0.05);术后第6个月联合用药组中Treg细胞和IL-10的表达明显高于胸腺法新组(P<0.05),而联合药物组与胸腺法新组差异无统计学差异(P>0.05).术后第12个月,联合药物组Treg、TGF-β、IL-10的表达明显高于胸腺法新组及槐耳颗粒组(P<0.05).结论:胸腺法新联合槐耳颗粒抗肿瘤疗法可明显延长肝癌肝移植术后肿瘤的复发时间,较单用胸腺法新或者槐耳颗粒有良好的临床效果,术后定期监测Treg细胞、IL-10、TGF-β表达,可作为肝癌肝移植术后肿瘤复发的辅助指标.

通宣理肺丸溶出高效液相色谱指纹图谱研究

目的建立通宣理肺丸(Tongxuan Lifei Pills,TXLFPs)溶出HPLC指纹图谱。方法以Boltzmann分布方程建立中药丸剂溶出动力模型,考察TXLFPs体外溶出情况。采用反相HPLC法,以280 nm为检测波长和梯度洗脱建立TXLFPs的HPLC指纹图谱,以系统指纹定量法评价TXLFPs质量。选择3批宏定性相似度Sm和宏定量相似度Pm均很好的TXLFPs,测定其在0、6、12、20、35、65、90和120 min的溶出HPLC指纹图谱。以120min溶出HPLC指纹图谱作标准,计算各时间点溶出液的Sm和Pm,其中Pm即为各时间点的相对累积溶出度。结果以Pm对溶出时间t构建中药丸剂溶出动力模型为Pm=P0-k[1+e(t-α)/β]-1,研究表明S3和S4的溶出行为基本一致,但S5因溶出速率常数k很大和阻滞参数β较小导致其溶出速度较快,表明三批TXLFPs工艺有差异。在对整体化学成分溶出规律有明确性认识后,把考察的重点转移至3批TXLFPs的五强峰即第7、32、33、36和53号峰化学指纹溶出动力学研究,以实现对重点单元指纹溶出规律的清晰认识。结论本文用HPLC指纹图谱研究TXLFPs体外溶出情况,可实现从整体和单一化学指纹角度清晰了解其溶出动力学过程,对中药生产工艺控制和质量提高能提供具有指导意义的信息。

喘可治注射液治疗哮喘-慢性阻塞性肺疾病重叠的临床研究

目的:观察喘可治注射液治疗哮喘-慢性阻塞性肺疾病重叠的临床疗效并探讨对NF-κB调控下炎性反应因子的表达水平及细胞免疫功能的影响。方法:选取2018年10月至2019年7月广州中医药大学附属东莞市中医院收治的ACO急性加重期肾虚不纳型患者60例作为研究对象,按照随机数字表法随机分为对照组和观察组,每组30例。对照组予常规西医治疗,观察组在对照组基础上加用喘可治注射液。观察2组的总有效率,治疗前后中医证侯积分、外周血WBC、EOS、血气分析指标、NF-κB、IL-6、TNF-α、sICAM-1、细胞免疫功能指标的变化。结果:观察组总有效率显著高于对照组(P<0.05),2组治疗后中医证侯积分,外周血WBC、EOS、PaO2及PaCO2较前显著改善(P<0.05),且观察组的改善更为明显(P<0.05);治疗后2组NF-κB、IL-6、TNF-α、sICAM-1均较前显著降低(P<0.05),且观察组显著低于对照组(P<0.05);治疗后观察组能显著改善外周血T淋巴细胞亚群指标(P<0.05),而对照组治疗前后外周血T淋巴细胞亚群指标比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:喘可治注射液符合ACO肾虚不纳型的病机,通过抑制NF-κB信号水平,调控TNF-α、IL-6以及sICAM-1的表达,减轻ACO患者炎性反应并改善患者细胞免疫功能。

胸腺肽类药物对体外诱导ES细胞分化为T细胞的作用

【目的】研究目前临床常用的增强细胞免疫功能的胸腺肽,胸腺5肽和胸腺素α-1在小鼠胚胎干细胞向T淋巴细胞分化过程中的作用。【方法】借助小鼠胚胎干细胞(ESC)体外自然分化形成的类胚体(EB)中含有三胚层细胞的独特细胞环境,加入多种细胞因子和胸腺多肽,体外诱导小鼠ESC向T淋巴细胞分化。利用流式细胞仪检测在三种不同胸腺多肽的诱导下,不同时间点的小鼠ESC来源的细胞表面CD3分子的表达水平。并在相应时间点通过RT-PCR检测与T淋巴细胞发育密切相关的Notch信号分子的转录水平。【结果】在加入胸腺肽和胸腺素α1诱导的实验组,均有细胞表达CD3分子,CD3+细胞的百分比随诱导时间的增加而增多;而加入胸腺五肽的实验组无CD3+细胞出现。加入胸腺素α1和胸腺肽的实验组,有Notch1及其配体delta-like-1和delta-like-4的转录;而加入胸腺五肽的实验组的细胞无Notch1及其配体转录。【结论】胸腺素α1或胸腺肽可能通过影响Notch1信号途径支持ES细胞向T细胞分化,而胸腺五肽无此作用。