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绿海龟α-actin基因的cDNA克隆与序列分析 被引量:1
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作者 陶翠花 刘莹莹 +2 位作者 赵丽媛 许敏 祝茜 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期98-103,共6页
为探究绿海龟(Chelonia mydas)α-actin基因序列的相关信息,作者利用RT-PCR和RACE方法从绿海龟肌肉组织中获得了α-actin基因的cDNA全长序列,共1347bp(GenBank登录号为JX073650)。所得序列包含一个1134 bp的开放阅读框,编码由377个... 为探究绿海龟(Chelonia mydas)α-actin基因序列的相关信息,作者利用RT-PCR和RACE方法从绿海龟肌肉组织中获得了α-actin基因的cDNA全长序列,共1347bp(GenBank登录号为JX073650)。所得序列包含一个1134 bp的开放阅读框,编码由377个氨基酸组成的蛋白,该蛋白7~377位为Actin结构域,14~17位有一个糖基化位点,无信号肽;预测分子量为42.0 kDa,理论等电点为5.23。将编码区序列与GenBank上同源序列进行比对发现,核苷酸序列相似性均在85.4%以上,氨基酸序列相似性均在98.9%以上,说明α-actin基因作为编码蛋白是高度保守的。 展开更多
关键词 绿海龟(Chelonia mydas) α-actin基因 RACE技术
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蛛网膜下腔出血后α-actinmRNA表达与脑血管痉挛的关系 被引量:1
2
作者 陈云祥 吴幼章 傅震 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期802-804,共3页
目的:观察蛛网膜下腔出血(SAH)后脑血管平滑肌细胞内肌动蛋白(α-actin)mRNA水平表达的动态变化规律,探讨收缩蛋白mRNA表达改变在脑血管痉挛(CVS)中的作用,阐明脑血管痉挛发生的分子机制。方法:采用二次注血法建立蛛网膜下腔出血后脑血... 目的:观察蛛网膜下腔出血(SAH)后脑血管平滑肌细胞内肌动蛋白(α-actin)mRNA水平表达的动态变化规律,探讨收缩蛋白mRNA表达改变在脑血管痉挛(CVS)中的作用,阐明脑血管痉挛发生的分子机制。方法:采用二次注血法建立蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的兔动物模型,用逆转录—多聚酶链反应(RT-PCR)方法检测α-actinmRNA表达变化。结果:在SHA后第1天α-actinmRNA表达,与对照组相比,有明显上升(P<0.01);第4天α-actinmRNA表达,与对照组相比,有明显上升(P<0.001);第7天α-actinmRNA表达,与对照组相比,无明显差异性(P>0.05);第14天α-actinmRNA表达,与对照组相比,有明显下降(P<0.001)。结论:SAH后早期α-actinmRNA水平表达上升,能够导致平滑肌收缩蛋白合成上升,增强平滑肌细胞的收缩能力,与CVS的发生、发展有关。持续性CVS后期平滑肌细胞的代谢功能受损,导致α-actinmRNA表达下降。 展开更多
关键词 蛛网膜下腔出血 脑血管痉挛 α-actin MRNA
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人类α-actin启动子真核表达载体的构建 被引量:1
3
作者 杨玉艾 孙永科 +1 位作者 华进联 窦忠英 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2006年第4期241-245,I0002,共6页
目的利用PCR技术克隆了人类-αactin基因的启动子(约450 bp)。方法将PCR产物连接到pMD-18T载体上,酶切鉴定后测序,并进行软件分析。结果与结论序列分析表明,扩增片段虽然与GenBank里登陆的序列同源性仅为72%,但包含有完整的启动子元件... 目的利用PCR技术克隆了人类-αactin基因的启动子(约450 bp)。方法将PCR产物连接到pMD-18T载体上,酶切鉴定后测序,并进行软件分析。结果与结论序列分析表明,扩增片段虽然与GenBank里登陆的序列同源性仅为72%,但包含有完整的启动子元件和转录专一调节因子相应的识别序列。用去掉启动子的pEGFP-N1作为框架结构,尝试构建真核表达载体,并获得了含人类心肌-αactin启动子的真核表达载体pEGFP-N1--αactin-P。 展开更多
关键词 人类α-actin启动子 PCR 真核表达载体
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血栓消融与溶栓或取栓后犬股静脉壁α-Actin表达的对比研究 被引量:1
4
作者 周为民 李晓强 +3 位作者 桑宏飞 余朝文 高峰 聂中林 《实用全科医学》 2005年第6期473-474,共2页
目的比较Amplatz血栓消融术(ATD)、溶栓(TL)及手术取栓(TX)治疗急性犬股静脉血栓形成后血管壁α-Actin表达的变化。方法将36只成年杂种犬的股静脉做成血栓模型分为ATD组(n=12)经皮将6-F ATD导管置入血栓内以100000rpm行机械性血栓消融... 目的比较Amplatz血栓消融术(ATD)、溶栓(TL)及手术取栓(TX)治疗急性犬股静脉血栓形成后血管壁α-Actin表达的变化。方法将36只成年杂种犬的股静脉做成血栓模型分为ATD组(n=12)经皮将6-F ATD导管置入血栓内以100000rpm行机械性血栓消融。TL组(n=12)经皮导管介入溶栓,以尿激酶4000U/min注入血栓中。TX组(n=12)以4F Fogarty导管取栓1次。另4只假手术(SH)作对照组。分别于1周及4周后行组织学检查了解股静脉壁α-Ac-tin表达情况。扫描电镜观察股静脉内皮层情况。结果1周和4周时ATD组股静脉壁α-Actin染色面积百分比较少(P<0.01)。1周时ATD及TL组内皮损伤较TX组轻(P<0.05)。结论ATD对犬股静脉壁损伤较轻。 展开更多
关键词 血栓消融 溶栓疗法 动物实验 股静脉壁 α-actin 基因表达 手术取栓 深静脉血栓形成
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Expression Patterns of Sarcomeric α-Actin, α-Actinin and UCP_2 in the Myocardium of Kunming Mice after Exposure to C-Terminal Polypeptide of Cardiotrophin-1
5
作者 陈淑芬 饶利亚 +2 位作者 魏桃枝 许闽广 董战玲 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2014年第6期796-800,共5页
Cardiotrophin-1 (CT-1) activates a distinct form of cardiac muscle cell hypertrophy in which the sarcomeric units are assembled in series. The aim of the study was to determine the expres- sion pattern of sarcomeric... Cardiotrophin-1 (CT-1) activates a distinct form of cardiac muscle cell hypertrophy in which the sarcomeric units are assembled in series. The aim of the study was to determine the expres- sion pattern of sarcomeric contractile protein α-actin, specialized eytoskeletal protein α-actinin and mitochondrial uncoupling protein-2 (UCP2) in myocardial remodeling induced by chronic exposure to CT-1. Kunming mice were intraperitoneally injected with carboxy-terminal polypeptide (CP) of CT-1 (CT-1-CP, 500 μg·kg-1·day^-1) for 1, 2, 3 and 4 week (s), respectively (4 groups obtained according to the injection time, n=10 each, with 5 males and 5 females in each group), Those injected with physiological saline for 4 weeks served as controls (n=10, with 5 males and 5 females). The heart tissues of mice were harvested at 1, 2, 3 or 4 week (s). Immunohistochemistry (IHC) and Western blotting (WB) were used to detect the distribution and expression of sarcomeric α-actin, α-aetinin and mitoehondrial UCP2 in myocardial tissues. IHC showed that α-actin was mainly distributed around the nuclei of cardiomyo- cytes, α-actinin concentrated around the striae and UCP2 scattered rather evenly in the plasma. The ex- pression of α-actin was slightly greater than that of α-actinin and UCP2 in the control group (IHC: χ^2=6.125; WB: F=0.249, P〉0.05) and it gradually decreased after exposure to CT-1-CP. There was no significant difference in the expression of α-actin between the control group and the CT-1-CP-treated groups (χ^2=7.386, P〉0.05). But Western blotting revealed significant difference in the expression of α-actin between the control group and the 4-week CT-1-CP-treated group (F=2.912; q=4.203, P〈0.05). Moreover, it was found that the expression of α-actinin increased stepwise with the exposure time in CT-1-CP-treated groups and differed significantly between CT-1-CP-treated groups and the control group (ICH: χ^2=21.977; WB: F=50.388; P〈0.01). The expression of UCP2 was initially increased (WB: control group vs. 1- or 2-week group, q values: 5.603 and 9.995, respectively, P〈0.01) and then de- creased (WB: control group vs. 3-week group, q=4.742, P〈0.01; control group vs. 4-week group, q=0.558, P〉0.05). It was suggested that long-term exposure to CT-1-CP could lead to the alteration in the expression of sarcomeric α-actin, α-actinin and mitochonclrial UCP2. The different expressions of sarcomeric structure proteins and mitochondrial UCP2 may be involved in myocardial remodeling. 展开更多
关键词 carboxy-terminal polypeptide of cardiotrophin-1 sarcomaric α-actin α-actinin mitochon-drial uncoupling protein-2
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未知病变类型脑血管中β-amyloid、α-actin、collagen Ⅳ的含量
6
作者 张珉 官大威 +4 位作者 赵锐 胡更奕 韩阳 侯震寰 单亚明 《法医学杂志》 CAS CSCD 2006年第6期413-416,F0004,共5页
目的研究未知病变类型脑血管病变的结构特征。方法通过刚果红染色、免疫组织化学染色、计算机图像分析技术对未知病变类型脑血管病变的β-amyloid、α-actin、collagenⅣ的含量进行研究。结果未知病变类型脑血管壁α-actin、collagenⅣ... 目的研究未知病变类型脑血管病变的结构特征。方法通过刚果红染色、免疫组织化学染色、计算机图像分析技术对未知病变类型脑血管病变的β-amyloid、α-actin、collagenⅣ的含量进行研究。结果未知病变类型脑血管壁α-actin、collagenⅣ呈少量阳性染色,与正常脑血管存在显著差异(P<0.05);β-amyloid染色呈阴性,与正常脑血管无差异(P>0.05)。病变血管壁中上述三种蛋白的表达特点与脑血管淀粉样变(cerebralamyloidangiopathy,CAA)及小动脉硬化玻璃样变不同。结论未知病变类型脑血管病变具有不同于CAA的病变特征。 展开更多
关键词 未知病变类型 脑小血管 免疫组织化学 β-amyloid、α-actin、collagen
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人类α-actin启动子真核表达载体的构建及应用 被引量:3
7
作者 杨玉艾 孙永科 +1 位作者 华进联 窦忠英 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1093-1098,共6页
利用PCR技术克隆了人类α-actin基因的启动子(约450bp),尝试用去掉启动子的pEGFP—N1作为框架结构,成功构建了真核表达载体pEGFP-N1-α-actin—P。应用Lipofectamine 2000将所构建的pEGFP-N1-α-actin-P转染入小鼠ES细胞。通过比较... 利用PCR技术克隆了人类α-actin基因的启动子(约450bp),尝试用去掉启动子的pEGFP—N1作为框架结构,成功构建了真核表达载体pEGFP-N1-α-actin—P。应用Lipofectamine 2000将所构建的pEGFP-N1-α-actin-P转染入小鼠ES细胞。通过比较,发现在本实验室条件下,质粒DNA浓度以3.0~5.0μg/mL,转染时间约在2~3h最佳。200μg/mL的G418较适宜于靶细胞的转染与筛选。得到表达心肌a—actin和GFP的小鼠ES细胞,基本维持小鼠ES细胞的形态。PCNA染色结果表明,转染后的小鼠ES细胞具有增殖能力。α—actin抗体免疫组化染色结果表明,转染后细胞表达α-actin和GFP,揭示构建的真核表达载体pEGFP-N1-α-actin-P转染小鼠ES细胞,可能促进其向心肌细胞分化并对其筛选。 展开更多
关键词 人类ractin启动子 真核表达载体 小鼠ES细胞 心肌细胞
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血府逐瘀汤含药血清体外诱导骨髓基质干细胞表达Desmin和α-actin的实验研究 被引量:2
8
作者 马月香 刘黎青 +2 位作者 秦厉梅 左广民 王媛 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期1252-1255,共4页
目的观察血府逐瘀汤含药血清能否诱导骨髓基质干细胞(MSCs)分化为心肌样细胞,以寻找安全有效诱导MSCs向心肌细胞分化的诱导剂。方法采用血清药理学方法进行诱导,制备血府逐瘀汤大鼠含药血清,分离培养大鼠MSCs,MTT法检测血清细胞毒性,选... 目的观察血府逐瘀汤含药血清能否诱导骨髓基质干细胞(MSCs)分化为心肌样细胞,以寻找安全有效诱导MSCs向心肌细胞分化的诱导剂。方法采用血清药理学方法进行诱导,制备血府逐瘀汤大鼠含药血清,分离培养大鼠MSCs,MTT法检测血清细胞毒性,选用生长良好的P3细胞进行实验,将实验细胞分为3组,即空白对照组、血府逐瘀汤大鼠含药血清诱导组、5-氮胞苷诱导组。免疫细胞化学染色法检测心肌结蛋白(Desmin),α型心肌肌动蛋白(α-actin)的表达情况。结果诱导前各组MSCs细胞Desmin和α-actin表达阴性,个别弱阳性;其弱阳性表达率各组比较差异无统计学意义(P>0.05)。诱导后空白对照组MSCs细胞Desmin和α-actin表达阴性,个别弱阳性;血府逐瘀汤含药血清组和5-氮胞苷体外培养诱导组,MSCs细胞Desmin和α-actin表达阳性,其阳性表达率与空白对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论血府逐瘀汤含药血清具有体外诱导大鼠骨髓基质干细胞分化为心肌样细胞的趋势,其作用可能参与了Desmin和α-actin的表达。 展开更多
关键词 血府逐瘀汤含药血清 骨髓基质干细胞 心肌结蛋白 α型心肌肌动蛋白
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心肌特异性α-actin启动子重组腺病毒的构建及其鉴定 被引量:2
9
作者 杨玉艾 孙永科 +1 位作者 华进联 窦忠英 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2007年第8期1-5,10,共6页
为了探讨心肌肌动蛋白(α-actin)基因启动子的心肌组织特异性及其表达活性,构建了心肌组织靶向性表达的基因载体,应用PCR从pEGFP-N1-α-actin-P质粒中克隆出α-actin启动子片段,将其插入到切除CMV启动子的腺病毒穿梭载体pAdTrack中,构建... 为了探讨心肌肌动蛋白(α-actin)基因启动子的心肌组织特异性及其表达活性,构建了心肌组织靶向性表达的基因载体,应用PCR从pEGFP-N1-α-actin-P质粒中克隆出α-actin启动子片段,将其插入到切除CMV启动子的腺病毒穿梭载体pAdTrack中,构建出pAdTrack-actin重组穿梭载体,经酶切和测序鉴定正确后用PmeI线性化,与含有腺病毒骨架DNA的pAdEasy-1质粒在BJ5183大肠杆菌细胞中同源重组成新的重组体pAd-easy-actin,抽提重组体DNA,经PacI酶切回收后以脂质体法转染人胚肾细胞株HEK293,包装出完整腺病毒pAd-actin进行PCR检测,并应用蚀斑形成试验测定病毒滴度。结果显示,重组腺病毒中含有α-actin启动子片段,病毒滴度为7×107pfu/mL。表明含心肌α-actin启动子的重组腺病毒pAd-actin构建成功。 展开更多
关键词 腺病毒载体 α-肌动蛋白启动子 胚胎干细胞
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中药对大鼠急性骨骼肌拉伤后骨骼肌α-actinmRNA表达的影响 被引量:3
10
作者 宋济昊 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期174-176,共3页
本研究建立了急性骨骼肌拉伤的动物实验模型 ,观察了不同治疗措施对拉伤后动物骨骼肌α -actinmRNA表达的影响。结果表明 :(1)急性拉伤后即刻 ,动物骨骼肌α-actinmRNA表达量显著增高 ,伤后第 1天、第 2天保持显著性高水平 ,至第 5天恢... 本研究建立了急性骨骼肌拉伤的动物实验模型 ,观察了不同治疗措施对拉伤后动物骨骼肌α -actinmRNA表达的影响。结果表明 :(1)急性拉伤后即刻 ,动物骨骼肌α-actinmRNA表达量显著增高 ,伤后第 1天、第 2天保持显著性高水平 ,至第 5天恢复至正常水平 ,但第 14天又显著增高 ;(2 )舒筋活血类中药抑制骨骼肌拉伤后α -actinmRNA表达的第 2次升高。研究提示 ,舒筋活血类中药能更有效地促进急性骨骼肌拉伤后α -actinmRNA表达的恢复。 展开更多
关键词 中药 α-actin MRNA 急性骨骼肌拉伤 骨骼肌 实验研究
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负重训练和补肽对衰老大鼠骨骼肌α-actin mRNA和MHC异形体mRNA表达影响的研究 被引量:1
11
作者 刘丰彬 王洪丹 贾华 《天津体育学院学报》 CAS CSSCI 北大核心 2010年第5期388-391,共4页
目的:探讨负重训练和补充大豆多肽对D-半乳糖衰老大鼠骨骼肌α-actin mRNA和MHC异形体mRNA表达的影响。方法:56只3月龄雄性SD大鼠随机分为7组、每组8只、成年组、模型组、小负重组、大负重组、补肽组、补肽小负重组、补肽大负重组。除... 目的:探讨负重训练和补充大豆多肽对D-半乳糖衰老大鼠骨骼肌α-actin mRNA和MHC异形体mRNA表达的影响。方法:56只3月龄雄性SD大鼠随机分为7组、每组8只、成年组、模型组、小负重组、大负重组、补肽组、补肽小负重组、补肽大负重组。除成年组外,其余各组进行6周D-半乳糖造模同时施加相应大、小负重的跑台训练和补肽干预,6周后处死大鼠,测试各项指标。结果:与成年组相比,模型组大鼠骨骼肌α-actin、MHC-I、MHC-IIa、MHC-IIxmRNA表达量显著下降(P<0.01),MHC-IIbmRNA的表达量显著升高(P<0.01),负重训练或补肽干预均可以有效缓解这种骨骼肌衰老性的表现,两种方法具有显著的交互作用(P<0.01或P<0.05)。结论:负重训练或补充大豆多肽均可以有效缓解衰老大鼠骨骼肌α-actin和MHC异形体mRNA表达量的衰老性表现,并且两种方法联合应用效果好于单一干预因素。 展开更多
关键词 负重训练 大豆多肽 骨骼肌 Α-肌动蛋白 肌球蛋白重链异形体
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杜仲对糖尿病大鼠阴茎组织SOD活性和α-actin表达的影响 被引量:6
12
作者 张万宏 刘子龙 +3 位作者 柳朝栋 朱长虹 熊承良 董汉生 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2005年第4期309-313,共5页
目的:研究杜仲水提物对培养糖尿病(DM)模型大鼠阴茎组织超氧化物歧化酶(SOD)和α平滑肌肌动蛋白(αactin)的作用。方法:采用四氧嘧啶两次给药法建立DM模型;随机选取10只DM大鼠和10只正常大鼠,每只大鼠的阴茎组织块均分为4等份,分配到杜... 目的:研究杜仲水提物对培养糖尿病(DM)模型大鼠阴茎组织超氧化物歧化酶(SOD)和α平滑肌肌动蛋白(αactin)的作用。方法:采用四氧嘧啶两次给药法建立DM模型;随机选取10只DM大鼠和10只正常大鼠,每只大鼠的阴茎组织块均分为4等份,分配到杜仲共培养组(A组:1μg/ml组、10μg/ml组、100μg/ml组)和空白对照组(B组)进行培养。7d后,用比色法测定培养液中SOD活性,用免疫组化技术检测αactin的表达。结果:10、100μg/ml组的正常大鼠和DM大鼠阴茎组织培养液中SOD活性与B组比较显著升高(P<0.01),培养阴茎组织中αactin免疫反应阳性细胞数与B组比较显著增多(P<0.01)。结论:杜仲可增强DM大鼠阴茎组织中SOD活性和αactin表达。 展开更多
关键词 杜仲 超氧化物歧化酶 Α肌动蛋白 阴茎 糖尿病 大鼠
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糖尿病足中α-actin表达与中医辨证分型及部位的相关性
13
作者 代阿秋 张庚扬 +1 位作者 李晓军 常柏 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2008年第11期1625-1626,共2页
目的:研究糖尿病足截肢标本肌肉内α-肌动蛋白(α-actin)的表达与糖尿病足中医辨证分型的相关性。方法:对100例糖尿病患者按照中医辨证分为气血两虚瘀阻证,气阴两虚瘀阻证,脉络热毒证3型,对3型进行肌肉α-actin的免疫组化研究。结果:在... 目的:研究糖尿病足截肢标本肌肉内α-肌动蛋白(α-actin)的表达与糖尿病足中医辨证分型的相关性。方法:对100例糖尿病患者按照中医辨证分为气血两虚瘀阻证,气阴两虚瘀阻证,脉络热毒证3型,对3型进行肌肉α-actin的免疫组化研究。结果:在肌肉组织中脉络热毒证表达最强,气血两虚瘀阻证表达最弱。各证型之间α-actin表达具有显著性差异(P<0.01)。各部位间无显著差异。结论:糖尿病足中医辨证分型与α-actin的表达具有较高的相关性。各部位之间差异不明显。 展开更多
关键词 糖尿病足 辨证分型 各部位 肌动蛋白 相关性
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针刺对脑梗死大鼠骨骼肌α-actin mRNA表达的影响 被引量:2
14
作者 施静 刘梅芳 +4 位作者 冯斯峰 熊尤龙 张霞辉 杜福生 张懿 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期2036-2038,共3页
目的观察头针加体针对脑梗死大鼠骨骼肌α-actin m RNA表达的影响,初步探讨针刺对脑梗死偏瘫骨骼肌的作用机制。方法按时相在规定的骨骼肌部位取材并标记,采用定量法提取骨骼肌RNA、通过荧光定量qRT-PCR检测,观察大鼠患侧骨骼肌中α-act... 目的观察头针加体针对脑梗死大鼠骨骼肌α-actin m RNA表达的影响,初步探讨针刺对脑梗死偏瘫骨骼肌的作用机制。方法按时相在规定的骨骼肌部位取材并标记,采用定量法提取骨骼肌RNA、通过荧光定量qRT-PCR检测,观察大鼠患侧骨骼肌中α-actin m RNA的表达变化。结果 A、B、C三组的前肢肌、腓肠肌、腰大肌中α-actin m RNA表达与D、E组相比较均有明显的变化,且C组在0h、24h、48h时与其他组比较,基因表达均有显著差异性(P﹤0.001),B组与A、D、E比较,在0h,24h有显著性差异(P﹤0.05),A组与D、E组在48h有显著性差异(P﹤0.05),且在48h时α-actin在腰大肌中的表达最强,有显著性差异(P﹤0.01)。结论头针加体针可上调脑梗死大鼠早期骨骼肌中α-actin m RNA表达,且在48h时α-actin在腰大肌中的表达最强,这可能是针刺改善脑梗死偏瘫骨骼肌肌力的作用途径之一。 展开更多
关键词 脑梗死 针刺 骨骼肌 q RT-PCR检测 α-actin
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牛骨骼肌α-actin基因5′上游调控元件及内含子功能的初步分析 被引量:2
15
作者 胡倩 曹允考 +5 位作者 佟慧丽 张伟伟 赵丹丹 王彬 高朋 严云勤 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期1136-1142,共7页
采用PCR定点突变分析法确定牛骨骼肌α-actin启动子-361^-462bp区域的调控元件Sp1/KLFs、ZF5F和Pax3结合位点的功能;利用基因重组技术,将内含子Ⅰ和内含子Ⅱ分别连在启动子缺失片段的上游和下游,构建双荧光素酶表达载体,使其转染牛骨骼... 采用PCR定点突变分析法确定牛骨骼肌α-actin启动子-361^-462bp区域的调控元件Sp1/KLFs、ZF5F和Pax3结合位点的功能;利用基因重组技术,将内含子Ⅰ和内含子Ⅱ分别连在启动子缺失片段的上游和下游,构建双荧光素酶表达载体,使其转染牛骨骼肌卫星细胞和胎儿成纤维细胞,进行活性检测。结果显示,Sp1/KLFs降低牛骨骼肌α-actin基因启动子活性,ZF5F和Pax3均能增强启动子活性。内含子在启动子上游增强了启动子活性,在其下游降低了启动子活性,且顺式调控元件和内含子均具有肌肉特异性。结果表明,初步确定了参与牛骨骼肌α-actin基因转录调控的负顺式调控元件Sp1/KLFs,正顺式调控元件ZF5F和Pax3,发现了内含子插入启动子的位置很重要,为以后构建牛骨骼肌α-actin高活性的启动子奠定了基础。 展开更多
关键词 牛骨骼肌α-actin基因 启动子活性 调控元件 内含子 肌肉特异性
原文传递
铁死亡诱导剂RAS合成致死分子3抑制病理性瘢痕成纤维细胞的纤维化 被引量:1
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作者 沈江涌 贺茜 +6 位作者 唐玉婷 王建军 刘金毅 陈园园 王昕艺 刘彤 孙浩原 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第8期1168-1173,共6页
背景:病理性瘢痕主要表现为异常的细胞外基质积累和过度的成纤维细胞增殖,成纤维细胞过度增殖就会产生大量以胶原纤维为主的细胞外基质。因此深入探讨成纤维细胞纤维化在病理性瘢痕形成中的作用,将为揭示病理性瘢痕的机制和生物学治疗... 背景:病理性瘢痕主要表现为异常的细胞外基质积累和过度的成纤维细胞增殖,成纤维细胞过度增殖就会产生大量以胶原纤维为主的细胞外基质。因此深入探讨成纤维细胞纤维化在病理性瘢痕形成中的作用,将为揭示病理性瘢痕的机制和生物学治疗提供新思路。目的:探讨铁死亡诱导剂RAS合成致死分子3(RAS-selective lethal small molecule 3,RSL3)对人病理性瘢痕成纤维细胞纤维化的影响。方法:收集10例宁夏医科大学总医院烧伤整形美容科提供的病理性瘢痕组织和同一个体正常皮肤组织,提取人病理性瘢痕成纤维细胞和人正常皮肤成纤维细胞用于后续实验;苏木精-伊红染色观察病理性瘢痕组织和正常皮肤组织的形态;倒置显微镜观察病理性瘢痕成纤维细胞和正常皮肤成纤维细胞的外观形态;免疫荧光实验验证所提取的细胞是否为成纤维细胞;用不同浓度的RSL3(1,3,5,7,9,11,13μmol/L)干预细胞,CCK-8法检测RSL3作用于成纤维细胞的半数抑制浓度(IC_(50));设置对照组(不做处理)和RSL3干预组(用7μmol/L的RSL3干预细胞24 h),qRT-PCR和Western blot检测谷胱甘肽过氧化物酶4、Ⅰ型胶原蛋白、Ⅲ型胶原蛋白和α-平滑肌肌动蛋白的mRNA和蛋白的表达;检测细胞丙二醛浓度;划痕试验检测细胞划痕后24 h剩余划痕面积,并计算剩余划痕面积百分比。结果与结论:①与正常皮肤组相比,病理性瘢痕组的谷胱甘肽过氧化物酶4高表达(mRNA:t=3.252,P<0.01;蛋白:t=5.075,P<0.01);②与正常皮肤成纤维细胞组相比,病理性瘢痕成纤维细胞组的谷胱甘肽过氧化物酶4高表达(mRNA:t=10.32,P<0.01;蛋白:t=26.22,P<0.01);③与对照组相比,RSL3干预组谷胱甘肽过氧化物酶4表达减少(mRNA:t=2.798,P<0.05;蛋白:t=4.643,P<0.01),丙二醛浓度上升(t=2.917,P<0.05),Ⅰ型胶原蛋白(mRNA:t=15.84,P<0.01;蛋白:t=4.610,P<0.01)、Ⅲ型胶原蛋白(mRNA:t=28.86,P<0.01;蛋白:t=7.713,P<0.01)和α-平滑肌肌动蛋白(mRNA:t=2.671,P<0.05;蛋白:t=7.417,P<0.01)的表达减少,迁移能力减弱(t=14.06,P<0.01);④提示RSL3通过抑制谷胱甘肽过氧化物酶4的表达,进而抑制病理性瘢痕成纤维细胞的纤维化和迁移能力。 展开更多
关键词 病理性瘢痕 成纤维细胞 RSL3 谷胱甘肽过氧化物酶4 Α-平滑肌肌动蛋白 Ⅰ型胶原蛋白 Ⅲ型胶原蛋白 铁死亡 纤维化
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益脾养肝方对肝癌前病变大鼠肝星状细胞活化的影响
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作者 鞠迪 李汨 +4 位作者 韩曼 房冰莹 闫曙光 安荣 李京涛 《陕西中医药大学学报》 2024年第2期83-88,共6页
目的探讨益脾养肝方对二乙基亚硝胺(Diethylnitrosamine,DEN)诱导的肝癌前病变中肝星状细胞活化及胶原沉积的影响。方法将26只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为空白组、模型组、益脾养肝方组和护肝片组,空白组5只,其余3组各7只。腹腔注射... 目的探讨益脾养肝方对二乙基亚硝胺(Diethylnitrosamine,DEN)诱导的肝癌前病变中肝星状细胞活化及胶原沉积的影响。方法将26只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为空白组、模型组、益脾养肝方组和护肝片组,空白组5只,其余3组各7只。腹腔注射DEN诱导肝癌前病变模型,给药14 w后处死。取肝组织观察并记录其大小、外观等变化,计算肝重比(肝脏指数),通过HE染色观察大鼠肝组织病理形态学改变,天狼星红染色观察各组胶原沉积表达,免疫组化检测α-平滑肌动蛋白(alpha smooth muscle actin,α-SMA)的表达,实时定量PCR(Real Time PCR,RT-PCR)检测Ⅰ型胶原蛋白(typeⅠcollagen,CollagenⅠ)的表达,以研究益脾养肝方对大鼠肝癌前病变模型的影响。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果与模型组相比,益脾养肝方组和护肝片组肝脏病理形态显著改善,肝脏指数、CollagenⅠ和α-SMA表达均降低(P值均<0.05);与护肝片组相比,益脾养肝方组对肝脏的保护作用更显著,其肝脏指数、CollagenⅠ和α-SMA表达均显著降低(P值均<0.05)。结论益脾养肝方可有效改善DEN诱导的大鼠肝癌前病变,其机制可能与抑制肝星状细胞活化,减少胶原沉积有关。 展开更多
关键词 肝癌前病变 益脾养肝方 肝星状细胞 Α-平滑肌动蛋白 胶原沉积
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L型钙离子通道阻滞剂非洛地平对大鼠哮喘气道重塑模型STAT6、SM-α-actin影响研究 被引量:1
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作者 白燕 熊瑛 周庆元 《中华哮喘杂志(电子版)》 CAS 2011年第6期8-10,共3页
目的通过卵蛋白致敏大鼠建立支气管哮喘(简称哮喘)气道重塑模型,探讨非洛地平对气道壁信号转导和转录激活因子6(STAT6)、α平滑肌肌动蛋白(SM-α-actin)在哮喘气道重塑模型中表达的影响与哮喘气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cell,... 目的通过卵蛋白致敏大鼠建立支气管哮喘(简称哮喘)气道重塑模型,探讨非洛地平对气道壁信号转导和转录激活因子6(STAT6)、α平滑肌肌动蛋白(SM-α-actin)在哮喘气道重塑模型中表达的影响与哮喘气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cell,ASMC)内钙稳态失衡与哮喘气道炎症的病理机制。方法卵蛋白诱发大鼠慢性哮喘模型:30只SD大鼠,按随机数字法分为三组,对照组(A)、哮喘组(B)、非洛地平组(C),B组和C组用10%卵蛋白氢氧化铝混合液腹腔注射致敏,1%卵蛋白雾化吸入激发,C组激发前给予非洛地平灌胃,进行4周干预。大鼠肺组织进行病理组织学图像分析,STAT6、SM-α-actin原位表达研究分析采用免疫组织化学技术。结果免疫组织化学染色:STAT6在A组气道壁有少量表达,B组主要表达在黏膜下层,IOD值测定B组和A组比较表达量显著增多(P<0.01),C组和B组比较表达量明显减少(P<0.01)。结论①卵蛋白4周激发致敏SD大鼠可建立慢性哮喘气道重塑模型。②STAT6、SM-α-actin在慢性哮喘气道黏膜下层表达明显增多。③L型钙离子通道阻滞剂非洛地平可减少哮喘气道壁STAT6、SM-α-actin的表达。 展开更多
关键词 非洛地平 慢性哮喘动物模型 STAT6 SM-α-actin
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低频脉冲电磁场诱导大鼠骨髓间充质干细胞ACTN2、α-actin和TNNT2表达 被引量:7
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作者 李凯 姜建 +5 位作者 姚晓林 邱飞远 严中琴 吴文超 刘小菁 李良 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期670-674,710,共6页
目的探讨低频脉冲电磁场(PEMFs)对大鼠骨髓间充质干细胞(rBMSCs)α-辅肌动蛋白-2(ACTN2)、α-肌动蛋白(α-actin)和肌钙蛋白T-2(TNNT2)表达的影响。方法采用差速贴壁分离方法获取rBMSCs,选用第3代rBMSCs用于实验。实验分为4组:①PEMFs... 目的探讨低频脉冲电磁场(PEMFs)对大鼠骨髓间充质干细胞(rBMSCs)α-辅肌动蛋白-2(ACTN2)、α-肌动蛋白(α-actin)和肌钙蛋白T-2(TNNT2)表达的影响。方法采用差速贴壁分离方法获取rBMSCs,选用第3代rBMSCs用于实验。实验分为4组:①PEMFs诱导组,给予50Hz、1mT低频PEMFs刺激,30min/d,分别刺激10d、15d和20d;②5-氮胞苷(5-Aza)诱导组,给予10μmol/L 5-Aza诱导1d,然后采用完全培养液培养10d、15d和20d;③PEMFs+5-Aza诱导组:采用10μmol/L 5-Aza诱导1d后,再给予PEMFs诱导组相同的处理;④对照组,采用完全培养液培养10d、15d和20d。通过倒置相差显微镜逐日连续观察细胞的生长状况和形态特征。采用实时荧光定量PCR方法检测ACTN2和TNNT2的mRNA表达,采用Western blot方法检测ACTN2、α-actin和TNNT2的蛋白表达。结果在各时间点,PEMFs诱导组、5-Aza诱导组和PEMFs+5-Aza诱导组的ACTN2、α-actin和TNNT2mRNA表达与蛋白表达明显高于对照组。结论 PEMFs可促进体外培养的rBMSCs向心肌样细胞分化。 展开更多
关键词 α-辅肌动蛋白-2 Α-肌动蛋白 肌钙蛋白T-2脉冲电磁场
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神经因素对缺血诱导的侧枝血管生长过程中Ki67和α-SM-actin表达的影响 被引量:3
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作者 罗明英 伍校琼 +4 位作者 杨宝林 朱武 罗华 罗学港 蔡维君 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2010年第6期677-679,共3页
目的探讨神经支配对侧支血管细胞增殖标记物Ki67和平滑肌细胞肌动蛋白(α-SM-actin)表达的影响。方法 10只新西兰大白兔,左侧行股动脉结扎,右侧行股动脉结扎伴坐骨神经和股神经切除,7d后处死动物,免疫荧光组织化学技术,观察单纯结扎和... 目的探讨神经支配对侧支血管细胞增殖标记物Ki67和平滑肌细胞肌动蛋白(α-SM-actin)表达的影响。方法 10只新西兰大白兔,左侧行股动脉结扎,右侧行股动脉结扎伴坐骨神经和股神经切除,7d后处死动物,免疫荧光组织化学技术,观察单纯结扎和结扎伴去神经侧Ki67和α-SM-actin在侧支血管的表达变化,兔前肢大小相似的正常血管用作正常对照。结果正常血管没有Ki67的免疫阳性细胞,α-SM-actin在平滑肌细胞中均匀表达;单纯股动脉结扎侧,在血管壁的各层结构均可见Ki67阳性细胞,α-SM-actin在中膜呈强阳性,内膜表达较中膜低;股动脉结扎加去神经侧,仅在管腔内近细胞内皮处可见少量Ki67的免疫阳性细胞,α-SM-actin在内膜和中膜的表达下降,其中Ki67免疫阳性细胞计数和α-SM-actin免疫荧光强度差异有显著性。结论在缺血诱导的兔后肢侧支血管生长模型中,去除血管壁的神经导致细胞增殖减少,平滑肌细胞的表达发生变化,表明血管壁的神经对Ki67和α-SM-actin的表达调节有重要影响。 展开更多
关键词 侧支血管 神经支配 细胞增殖 平滑肌细胞肌动蛋白
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