长期甜味暴露对小鼠肠道G蛋白α-gustducin表达及血糖水平影响研究

以8周龄ICR小鼠为试验对象,采用不同浓度蔗糖溶液对小鼠进行长期甜味暴露,然后氮气致死解剖小鼠获取十二指肠,固定、包埋、切片。应用HE染色、免疫组织化学染色技术研究长期甜味暴露对十二指肠绒毛形态及G蛋白α-gustducin表达水平的影响,同时定期测定小鼠灌胃前后血糖变化。结果表明,小鼠经过长期蔗糖暴露,十二指肠绒腺比会随着糖浓度的增加而上升;肠道中G蛋白α-gustducin表达量无明显变化;血糖跟踪结果表明,随着刺激时间的延长,小鼠血糖耐受能力增强。

味觉受体偶联G蛋白Gγ13和α-gustducin在小鼠雌性生殖系统的表达

为了检测味觉受体偶联G蛋白Gγ13和α-gustducin基因在雌性生殖系统的表达,探讨2种G蛋白在雌性生殖机能中可能发挥的作用及其在生殖医学方面的潜在应用。用RT-PCR和超敏ABC免疫组化方法,检测Gγ13和α-gustducin在6周龄间情期小鼠卵巢、子宫、输卵管组织中的基因表达和蛋白分布。结果表明,在小鼠雌性生殖系统中均发现Gγ13和α-gustducin基因的转录子,免疫组化研究进一步证实了Gγ13和α-gustducin确实在小鼠卵巢颗粒黄体细胞、卵母细胞、子宫外膜、子宫内膜腺体、子宫肌层、输卵管浆膜和输卵管黏膜处存在阳性分布。本试验表明味觉受体偶联G蛋白Gγ13和α-gustducin在雌性小鼠生殖系统中广泛分布,预示着雌性生殖系统也可能对味觉物质进行感知,为进一步研究味觉受体在雌性生理机能中可能发挥的调控功能奠定初步的研究基础,同时也为味觉的细胞生物学研究提供新方向。

小鼠味蕾细胞分离及体外培养方法

以ICR小鼠的味觉上皮为材料,优化味觉上皮及味蕾细胞分离方法,将分离的味细胞置于Ⅰ型鼠尾胶原包被的含有IMDM培养基的培养板上培养,相差显微镜下观察味蕾细胞形态变化。免疫组织化染色和荧光染色用于鉴定味蕾细胞。结果显示味蕾细胞离体培养一段时间后形态异于体内,但仍具味蕾细胞特有的与细胞骨架和细胞内信号相关的分子标记如:α-gustducin、细胞角蛋白8。由此证明这是一种有效的小鼠的味蕾细胞分离及体外培养方法,为离体研究味蕾细胞生理生化特性提供了更好的途径。

黄颡鱼口须味蕾分布模式及味蛋白α-味导素的表达

为探讨黄颡鱼口须味蕾的分布模式及其α味导素的表达,应用连续石蜡切片和环境扫描电镜对口须味蕾的数量、形态和分布进行了研究,并用整体包埋免疫荧光组化方法检测了黄颡鱼4种口须味蕾中α味导素的表达。结果显示:黄颡鱼口须味蕾主要分布在口须中间2/3区域,存在三种类型的味蕾:Ⅰ型与Ⅱ型味蕾突起于上皮表面,Ⅲ型味蕾平齐于周围上皮;味蕾细胞中有α味导素的强表达。结果提示,黄颡鱼口须味蕾的数量、形态及其分布模式是其适应底栖生活习性的结果;α味导素在各种口须味蕾中的强烈表达说明α味导素在黄颡鱼味觉感知与信息传导过程中有重要意义。

小鼠生后发育过程中轮廓乳头味蕾形态及其α-味蛋白表达

应用组织学与免疫荧光组织化学手段从不同侧面系统研究了小鼠生后早期发育过程中轮廓乳头味蕾数量、形态及α-味蛋白表达的变化规律;结果表明:出生当天小鼠轮廓乳头内尚未有味蕾存在,但在生后早期迅速发育,在出生后最初4周内味蕾的数量、大小迅速显著地增长(P<0.001),味蕾的形态也从幼年期的椭圆形到成年期的长椭圆形,味蕾细胞明显延长;发育过程中离体味蕾的形态大小同组织学研究结果具有一致性;α-味蛋白阳性味蕾与阳性细胞在出生后最初2周内显著增长(P<0.001)。结果表明,味蕾发育过程是一个结构与功能相适应的过程。

α-味蛋白与味觉感受

α-参兜鞍是一种transducins样味觉特异性G蛋白,它在从鱼到人类的多种脊椎动物物种的味细胞内均有表达,是脊椎动物味觉感受中重要的调控因子之一。多方面研究显示,α-参兜鞍在苦、甜、鲜味信号转导中发挥着作用。敲除了α-参兜鞍的小鼠对苦、甜、鲜味刺激的行为学和电生理反应都有下降;分子生物学研究也发现,α-参兜鞍与介导苦、甜、鲜味信号转导的G蛋白偶联受体(G protein-coupledreceptors,GPCRs)存在不同程度地共表达。α-参兜鞍参与的信号转导途径中仍存在许多问题,这些均需要更加深入细致地研究。文章综述了α-参兜鞍在味觉信号转导中的研究进展。