(1-3)-β-D葡聚糖联合降钙素原、CD4^(+)T淋巴细胞多指标在艾滋病患者马尔尼菲篮状菌感染早期诊断临床研究

目的探讨(1-3)-β-D葡聚糖联合降钙素原(procalcitonin,PCT)、CD4^(+)T淋巴细胞多指标在艾滋病患者马尔尼菲篮状菌感染早期诊断临床研究。方法回顾性选取我院2020年1月—2022年6月住院的120例艾滋病患者为研究对象。依据实验室结果,将其分为马尔尼菲篮状菌感染确诊组(血或组织液培育养出马尔尼菲篮状菌),简称A组(62例),及马尔尼菲篮状菌感染临床诊断组[根据临床症状、体征、血常规及(1-3)-β-D葡聚糖、PCT、CD4^(+)T淋巴细胞多指标诊断],简称B组(58例)。检测患者(1-3)-β-D葡聚糖、PCT、CD4^(+)T淋巴细胞的表达水平,采用受试者工作特征(receiver-operating characteristic,ROC)曲线下面积(area under the curve,AUC)评估上述指标联合检测对艾滋病患者感染马尔尼菲篮状菌的诊断效能。结果A组的(1-3)-β-D葡聚糖和PCT水平均高于B组,CD4^(+)T淋巴细胞个数低于B组(P<0.05);(1-3)-β-D葡聚糖、PCT、CD4^(+)T淋巴细胞联合检测的AUC为0.933,(1-3)-β-D葡聚糖单独检测的AUC是0.812,PCT单独检测的AUC为0.883,CD4^(+)T淋巴细胞单独检测的AUC是0.810,(1-3)-β-D葡聚糖、PCT和CD4^(+)T淋巴细胞联合检测的AUC皆优于三项单独检测,表明(1-3)-β-D葡聚糖、PCT和CD4^(+)T淋巴细胞联合检测的诊断价值皆优于单一指标诊断,且联合检测的特异度、约登指数分别为92.43%和0.580,均高于三项单独检测。结论(1-3)-β-D葡聚糖联合PCT和CD4^(+)T淋巴细胞多指标对艾滋病马尔尼菲篮状菌感染具有非常高的临床诊断价值,能够帮助医生分析出高危风险患者,及时制定治疗方案,同时也承担预后效果的判断依据,对治疗艾滋病马尔尼菲篮状菌感染具有非常重要的研究价值。

COPD急性加重期患者外周血单个核细胞SOCS-1、TLR4 mRNA及血清cTnT、尿酸水平变化分析

目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重期患者外周血单个核细胞中细胞因子信号抑制蛋白-1(SOCS-1)、Toll样受体4(TLR4)mRNA水平及血清心肌肌钙蛋白T(cTnT)、尿酸水平变化。方法收集COPD急性加重期(组)患者70例,COPD稳定期(组)患者40例,对照组健康志愿者40名。检测外周血单个核细胞SOCS-1、TLR4 mRNA水平及血清cTnT、尿酸浓度;行肺功能检查并记录相关指标(FEV1、FEV1%、FEV1/FVC%)。对COPD急性加重期患者进行1 a随访,分为预后不良组和预后良好组。对外周血单个核细胞SOCS-1、TLR4 mRNA水平、血清cTnT、尿酸浓度行Pearson相关性分析,并对COPD急性加重期患者预后评估价值进行ROC曲线分析。结果COPD急性加重期组SOCS-1 mRNA表达水平明显低于COPD稳定期组、对照组,TLR4 mRNA水平及血清cTnT、尿酸浓度明显高于COPD稳定期组和对照组(均P<0.01)。COPD急性加重期组FEV1、FEV1%、FEV1/FVC%明显低于COPD稳定期组和对照组(P<0.05)。COPD急性加重期患者FEV1/FVC%与外周血单个核细胞SOCS-1 mRNA表达水平呈正相关关系(P<0.01),与外周血单个核细胞TLR4 mRNA水平及血清cTnT、尿酸浓度呈负相关关系(P<0.01)。预后不良组SOCS-1 mRNA水平明显低于预后良好组,TLR4 mRNA水平及血清cTnT、尿酸浓度明显高于预后良好组(P<0.05)。外周血单个核细胞SOCS-1、TLR4 mRNA水平及血清cTnT、尿酸联合检测对COPD急性加重期患者预后具有较高的评估价值。结论COPD急性加重期患者SOCS-1低表达,TLR4、cTnT、尿酸高表达,且与肺功能水平密切相关,联合检测对患者预后具有较高的评估价值。

慢性阻塞性肺病稳定期患者外周血Treg细胞与细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4的表达及意义

目的检测吸烟者及慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4(CTLA4)/B7及Treg细胞的表达,观察免疫指标在COPD外周血中的变化及临床意义。方法选择8名健康志愿者为A组(正常对照组)、8名吸烟但肺功能正常者为B组、8名轻中度慢性阻塞性肺疾病患者为C组,收集3组研究对象的外周血标本,采用流式细胞术分析方法检测各组外周血单个核细胞CD11c^(+)树突状细胞(DCs)的比例、CD11c^(+)DCs表面CD80及CD86的表达,Treg细胞(CD4^(+)CD25^(+)FOXP3^(+))及CD4^(+)CD25^(+)CTLA4^(+)的表达。结果与A组比较,B组及C组的CD11^(+)DCs、CD80(B7-1)和CD86(B7-2)表达均显著增多,差异均有统计学意义(均P<0.05)。在Treg细胞表达上,与A组相比,B组及C组的Treg细胞减少(均P<0.05),而B组与C组间比较无统计学意义(P>0.05)。与A组相比,B组及C组的CTLA4^(+)细胞表达增多,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论吸烟者及COPD患者外周血中CTLA4/B7呈高表达,Treg细胞比例减少,提示吸烟所致免疫细胞异常可能参与COPD全身炎症进展过程。

隔药饼灸对环磷酰胺诱导免疫抑制兔共刺激分子CTLA-4、4-1BB、CD28的影响

目的探讨隔药饼灸对环磷酰胺诱导免疫抑制兔共刺激分子细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)、4-1BB、CD28的影响。方法选择大耳白兔32只,随机分为空白组、模型组、艾条灸组和隔药饼灸组,每组8只。模型组、艾条灸组和隔药饼灸组予环磷酰胺诱导免疫抑制模型。模型制备成功次日,艾条灸组和隔药饼灸组分别予艾条灸和隔药饼灸,隔日1次,共10次。空白组和模型组不予艾灸。艾条灸组和隔药饼灸组末次干预次日,空白组和模型组同时间,采集腹腔静脉血,离心留取血清,采用ELISA法检测血清CTLA-4、4-1BB、CD28;腹腔静脉取血后,摘取脾脏和肝脏,免疫组化法检测脾脏和肝脏组织CTLA-4、4-1BB蛋白表达。结果模型组血清CTLA-4、CD28水平均高于空白组,血清4-1BB水平低于空白组(P均<0.05);与模型组比较,艾条灸组和隔药饼灸组血清CTLA-4、CD28水平均降低,血清4-1BB水平均升高(P均<0.05);与艾条灸组比较,隔药饼灸组血清CTLA-4、CD28水平均降低,血清4-1BB水平升高(P均<0.05)。模型组脾脏和肝脏组织CTLA-4阳性表达均高于空白组,4-1BB阳性表达均低于空白组(P均<0.05)。与模型组比较,艾条灸组脾脏和肝脏组织CTLA-4阳性表达均降低(P均<0.05),肝脏组织4-1BB阳性表达升高(P<0.05),而脾脏组织4-1BB阳性表达升高不明显(P>0.05);隔药饼灸组脾脏和肝脏组织CTLA-4阳性表达均降低(P均<0.05),4-1BB阳性表达均升高(P均<0.05)。艾条灸组与隔药饼灸组脾脏和肝脏组织CTLA-4、4-1BB阳性表达比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论隔药饼灸能够通过调节共刺激分子CTLA-4、4-1BB、CD28而改善环磷酰胺诱导免疫抑制兔的免疫功能,其效果优于艾条灸。

乳酸/白蛋白比值、白细胞介素-6、CD4^(+)T淋巴细胞计数对重症肺炎并脓毒症患者短期预后的预测价值

目的探讨乳酸/白蛋白比值(LAR)、白细胞介素-6(IL-6)、CD4^(+)T淋巴细胞计数对重症肺炎并脓毒症患者28 d死亡的预测价值。方法选择2022年1月至2023年6月郑州大学附属郑州中心医院呼吸重症医学科(RICU)收治的73例重症肺炎并脓毒症患者为研究对象,依据患者28 d生存结局将其分为生存组(n=43)和死亡组(n=30)。通过查阅电子病历收集患者的临床资料,包括:年龄、性别及合并高血压、糖尿病、冠状动脉性心脏病(CHD)情况,入住RICU治疗时的序贯器官衰竭评分(SOFA)、急性生理与慢性健康状态评价系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分、平均动脉压(MAP)、英国胸科协会改良肺炎评分(CURB-65)、总胆红素(Tbil)、血肌酐(Scr)、血小板计数(PLT)、白细胞(WBC)计数、降钙素原(PCT)、C-反应蛋白(CRP)。入住RICU后第1、3、7天,抽取患者动脉血,应用全自动血气分析仪检测乳酸水平;抽取患者外周静脉血,应用酶联免疫吸附试验检测患者血清中白蛋白和白细胞介素-6(IL-6)水平,流式细胞仪检测CD4^(+)T淋巴细胞亚群计数;计算2组患者第1、3、7天的LAR。比较2组患者的临床资料及第1、3、7天的LAR、IL-6及CD4^(+)T淋巴细胞计数水平,应用logistic回归分析重症肺炎并脓毒症患者28 d死亡的影响因素,受试者操作特征(ROC)曲线评估各影响因素对重症肺炎并脓毒症患者28 d死亡的预测价值。结果2组患者的性别、年龄、合并高血压占比、合并糖尿病占比、合并CHD占比、RICU住院时间以及入住RICU时的Tbil、MAP、PLT、Scr、WBC、PCT、CRP比较差异均无统计学意义(P>0.05);死亡组患者的APACHEⅡ评分、CURB-65评分显著高于生存组(P<0.05)。第1、3、7天,死亡组患者的CD4^(+)T淋巴细胞计数显著低于生存组,SOFA评分显著高于生存组(P<0.05)。第1天,死亡组与生存组患者的LAR、IL-6水平比较差异无统计学意义(P>0.05);第3、7天,死亡组患者的LAR及IL-6水平显著高于生存组(P<0.05)。生存组患者第3、7天的LAR、IL-6、SOFA评分显著低于第1天,第7天的LAR、IL-6、SOFA显著低于第3天(P<0.05);生存组患者第3、7天的CD4^(+)T淋巴细胞计数显著高于第1天(P<0.05);生存组患者第7天与第3天的CD4^(+)T淋巴细胞计数比较差异无统计学意义(P>0.05)。死亡组患者第7天的IL-6水平显著低于第1、3天(P<0.05),第1天的IL-6水平与第3天比较差异无统计学意义(P>0.05);LAR、CD4^(+)T淋巴细胞计数、SOFA评分各时间点间比较差异无统计学意义(P>0.05)。Pearson相关性分析显示,第3天,重症肺炎并脓毒症患者LAR、IL-6水平与SOFA评分呈显著正相关(r=0.385、0.394,P<0.05);第7天,LAR、IL-6与SOFA评分亦呈显著正相关(r=0.418、0.402,P<0.05);第3、7天,CD4^(+)T淋巴细胞计数与SOFA评分均呈显著负相关(r=-0.451、-0.454,P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,APACHEⅡ评分、第3天的LAR、IL-6、CD4^(+)T淋巴细胞计数及第7天的IL-6、CD4^(+)T淋巴细胞计数是重症肺炎并脓毒症28 d死亡的影响因素(P<0.05)。ROC曲线显示,APACHEⅡ评分,第3天的LAR、IL-6、CD4^(+)T淋巴细胞计数及三者联合,第7天的IL-6、CD4^(+)T淋巴细胞计数及二者联合对重症肺炎并脓毒症患者的28 d死亡均有一定预测价值(P<0.05);第3天的LAR、IL-6和CD4^(+)T淋巴细胞计数联合预测重症肺炎并脓毒症患者28 d死亡的ROC曲线下面积(AUC)为0.891,APACHEⅡ评分预测重症肺炎并脓毒症患者28 d死亡的AUC值为0.769,第3天的LAR、IL-6、CD4^(+)T淋巴细胞计数预测重症肺炎并脓毒症28 d死亡的AUC值分别为0.795、0.757、0.770,第7天的IL-6、CD4^(+)T淋巴细胞计数及二者联合预测重症肺炎并脓毒症28 d死亡的AUC值分别为0.743、0.802、0.888。结论入院3 d LAR、3 d IL-6、3 d CD4^(+)T淋巴细胞计数以及7 d IL-6、7 d CD4^(+)T淋巴细胞计数是影响重症肺炎并脓毒症患者28 d死亡的相关因素;联合检测第3天的LAR、IL-6、CD4^(+)T淋巴细胞计数能够更好地评估患者病情严重程度及预后。

NPL4靶向抑制剂双硫仑对T细胞肿瘤泛素-蛋白酶体通路相关基因表达的影响

目的我们前期的研究表明,双硫仑(disulfiram,DSF)通过核蛋白定位蛋白4同源物(nuclear protein localization protein 4 homolog,NPL4)介导的泛素-蛋白酶体通路发挥抗T细胞肿瘤[主要包括急性T淋巴白血病(T-cell acute lymphoblastic leukemia,T-ALL)和T细胞淋巴瘤(T-cell lymphoma,TCL)]的作用。本研究旨在探讨双硫仑对T细胞肿瘤中泛素-蛋白酶体通路相关基因表达的调节作用,为T细胞肿瘤的精准靶向治疗提供依据。方法应用0.4μM双硫仑处理T-ALL细胞株Jurkat 48 h,采用转录组测序分析显著性差异表达的基因,并采用10例T细胞肿瘤样本(GZFPH数据集)进行实时荧光定量PCR验证差异基因相对表达水平。最后,从TARGET和GSE58445数据库中下载262例T-ALL和140例TCL的转录组测序数据进行生存分析。结果0.4μM双硫仑处理Jurkat细胞48 h后,在泛素-蛋白酶体通路中,有86个下调和35个上调的基因;其中,单因素Cox回归和生存曲线分析发现,仅有泛素结合酶E2 J1(ubiquitin conjugating enzyme E2 J1,UBE2J1)基因的低表达与TARGET和GSE58445数据集中T-ALL和TCL患者的不良预后相关(P<0.05)。将UBE2J1的表达水平、年龄和性别纳入单因素和多因素Cox回归分析,结果提示UBE2J1的低表达是T-ALL和TCL患者的独立预后影响因子(P<0.05)。结论双硫仑可调控UBE2J1基因的表达,其低表达与T细胞肿瘤患者的不良预后相关,为进一步阐明双硫仑的抗肿瘤作用及其调控的UBE2J1基因作为T细胞肿瘤的危险分层的分子标志物提供理论依据。

血清IL-25、IL-17RB、TIM4水平变化与过敏性哮喘患儿肺功能的关系及临床意义

目的:探讨血清白细胞介素-25(IL-25)、白细胞介素-17受体B(IL-17RB)、T细胞免疫球蛋白及黏蛋白域4(TIM4)与过敏性哮喘患儿肺功能的相关性及在临床中的联合检测价值。方法:选取2020年5月-2023年1月我院收治的87例过敏性哮喘患儿,另选取100例同期健康儿童作为对照组,比较两组血清IL-25、IL-17RB、TIM4水平,比较不同哮喘程度、肺功能患儿血清IL-25、IL-17RB、TIM4水平,分析血清IL-25、IL-17RB、TIM4与哮喘程度、第1秒用力呼气量(FEV)1、最大呼吸流速(PEF)的相关性,分析血清IL-25、IL-17RB、TIM4联合诊断过敏性哮喘价值。结果:过敏性哮喘组血清IL-25、IL-17RB、TIM4水平均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。轻度哮喘患儿血清IL-25、IL-17RB、TIM4水平<中度哮喘<重度哮喘(P<0.05)。肺功能轻度下降患儿血清IL-25、IL-17RB、TIM4水平<中度下降<重度下降(P<0.05)。血清IL-25、IL-17RB、TIM4与哮喘程度呈正强相关,与FEV_(1)、PEF均呈负强相关(P<0.05)。血清IL-25、IL-17RB、TIM4单独诊断过敏性哮喘的AUC为0.751、0.780、0.789,cut-off值分别为>307.21pg/mL、>32.45pg/mL、>2.17%,联合预测的AUC为0.938,明显优于各血清指标单独诊断。结论:血清IL-25、IL-17RB、TIM4水平变化与过敏性哮喘患儿病情程度及肺功能明显相关,联合检测可作为诊断过敏性哮喘的重要辅助指标。

口腔扁平苔藓组织中IL-35表达水平与外周血CD4^(+)CD25^(+)Treg的相关性

目的探究口腔扁平苔藓(OLP)组织中白介素-35(IL-35)表达水平与外周血CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞(Treg)的相关性。方法收集2016年9月至2018年9月期间我院口腔科收治的口腔扁平苔藓患者38例,设为OLP组,另选同期来我院体检的健康人群20例作为对照组。取两组外周静脉血,荧光定量PCR检测外周血单个核细胞内IL-35两个亚基EB病毒诱导蛋白3(EBI3)、IL-12 p35和CD4^(+)CD25^(+)Treg标志物叉状头转录因子P3(FOXP3)的表达,酶联免疫吸附法检测血清IL-35、白介素-10(IL-10)、白介素-17(IL-17)和转化生长因子β1(TGF-β1)的含量,流式细胞仪检测外周血CD4^(+)CD25^(+)Treg细胞水平,分析IL-35和CD4^(+)CD25^(+)Treg水平与OLP患者临床病理特征之间的关系,Pearson法分析EBI3、IL-35与CD4^(+)CD25^(+)Treg的相关性。结果与对照组相比,OLP组外周血单个核细胞内EBI3、IL-12 p35、FOXP3的mRNA均显著上调(P<0.05)。与对照组相比,OLP组患者血清IL-35、IL-10、IL17、TGF-β1含量显著均上调,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,OLP组患者外周血CD4^(+)T细胞和CD4^(+)CD25^(+)Treg细胞水平均显著下降,差异有统计学意义(P<0.05);IL-35和CD4^(+)CD25^(+)Treg水平与患者基底细胞变性程度有关(P<0.05),而与性别、年龄、病程、疾病类型和淋巴细胞浸润无关(P>0.05)。OLP中IL-35与外周血CD4^(+)CD25^(+)Treg的水平呈正相关(r=0.3644,P<0.05)。结论OLP中IL-35与CD4^(+)CD25^(+)Treg表达均显著升高,且二者具有正相关关系。

帕米膦酸二钠联合复方苦参注射液对非小细胞肺癌患者外周血CEA、CA125、IL-2、IL-4和T淋巴细胞亚群的影响

目的探讨帕米膦酸二钠单药及联合复方苦参注射液治疗非小细胞肺癌,对其外周血癌胚抗原(CEA)、糖类抗原125(CA125)、血清细胞因子白介素-2(IL-2)、白介素-4(IL-4)及T淋巴细胞亚群的影响。方法选取2018年1月至2022年3月句容市人民医院收治的非小细胞肺癌患者50例。采取分别抽样法分组,即单药帕米膦酸二钠干预的单药组(n=25)和帕米膦酸二钠联合复方苦参注射液干预的联合治疗组(n=25)。观察两组临床指标。结果联合治疗组的客观缓解率、临床获益率及生活质量均高于单药组,差异有统计学意义(P<0.05);联合治疗组的CEA、CA125水平低于单药组,差异有统计学意义(P<0.05);联合治疗组IL-2水平高于单药组、IL-4水平低于单药组,差异有统计学意义(P<0.05);联合治疗组CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平高于单药组,差异有统计学意义(P<0.05);联合治疗组的不良反应总发生率低于单药组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论帕米膦酸二钠联合复方苦参注射液治疗非小细胞肺癌,可调节炎性因子水平,增强抗肿瘤活性及免疫功能,减轻炎性反应,不良反应发生率低。

基于TLR4/NF-κB研究苗药黑骨藤对AGA大鼠Th17/Treg及相关细胞因子的影响

目的探究基于Toll样受体(TLR)4/核转录因子(NF)-κB研究苗药黑骨藤对急性痛风性关节炎(AGA)大鼠辅助性T细胞(Th)17/调节性T细胞(Treg)及相关细胞因子的影响。方法在90只SPF级雄性健康大鼠中选取15只作为正常组,其余大鼠建立AGA模型,模成功后将大鼠随机分为模型组、秋水仙碱组、低剂量组、中剂量组、高剂量组各15只。低剂量组、中剂量组、高剂量组分别给予25、50、100 mg/kg苗药黑骨藤灌胃,秋水仙碱组使用0.1 mg/kg的秋水仙碱灌胃,正常组、模型组给予相同体积的生理盐水灌胃,持续给药7 d。观察各组Th17/Treg及相关细胞因子水平及TLR4、NF-κB蛋白表达量。结果与秋水仙碱组、中剂量组、低剂量组相比,高剂量组Th17、Th17/Treg及相关细胞因子水平及TLR4、NF-κB蛋白表达量明显较低,Treg明显较高(P<0.05)。结论苗药黑骨藤可通过下调TLR4、NF-κB蛋白表达量,抑制TLR4/NF-κB信号通路,减轻AGA炎症反应,降低Th17/Treg及相关细胞因子水平,起到治疗作用。

白蛋白结合型紫杉醇联合CTLA-4抑制剂治疗非小细胞肺癌的效果

目的研究白蛋白结合型紫杉醇联合细胞毒T淋巴细胞相关抗原(CTLA)-4抑制剂治疗非小细胞肺癌(NSCLC)的效果。方法回顾性分析60例老年NSCLC患者,按照临床方案进行分组,单用白蛋白结合型紫杉醇患者为对照组(n=30),白蛋白结合型紫杉醇联合CTLA-4抑制剂患者为研究组(n=30)。观察两组一定疗程治疗后临床疗效、细胞免疫指标、肿瘤标志物指标、血清炎性因子水平及不良反应。结果研究组治疗总有效率明显高于对照组(P<0.05);用药前,两组免疫指标、肿瘤标志物指标、血清炎性因子水平差异均无统计学意义(P>0.05),用药后,两组上述指标水平均明显改善,且研究组改善更明显(均P<0.05);研究组毒副反应发生率低于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论联合使用白蛋白结合型紫杉醇和CTLA-4抑制剂,对于NSCLC患者的治疗效果显著,总体疗效优异,具有较高安全性。

水疱性口炎病毒对小鼠乳腺癌4T1细胞荷瘤小鼠抗肿瘤免疫、移植瘤生长与肺转移的影响

目的:探究野生型水疱性口炎病毒印第安纳株(VSV-IN)对小鼠三阴性乳腺癌4T1细胞移植模型小鼠的免疫调节及肿瘤转移的影响。方法:VSV以MOI=1、MOI=10、MOI=100感染4T1细胞12、24、48 h后,CCK-8法检测4T1细胞死亡率,划痕愈合实验检测细胞迁移能力,qPCR检测细胞中E-cadherin、MMP-2、MMP-9 mRNA的表达。于雌性BALB/c小鼠脂肪垫接种1×10^(6)个/mL的4T1细胞0.1 mL,构建4T1细胞荷瘤小鼠模型,待小鼠肿瘤体积达200 mm3,分别向移植瘤内注射PBS、紫杉醇(TAX)(15 mg/kg)、VSV-IN(1×10^(6)pfu/只),每周1次。给药4次后,处死小鼠、剥离完整移植瘤组织,测量肿瘤体积及质量,肺组织病理切片经H-E染色后观察肿瘤肺部转移结节,流式细胞术检测脾组织中T细胞亚群比例,ELISA法检测小鼠血清IL-6及TNF-α水平,利用GEPIA在线分析乳腺肿中迁移相关蛋白mRNA的表达,免疫组化法检测肿瘤中MMP-2、MMP-9与E-cadherin的表达,利用蛋白-蛋白对接技术预测VSV-IN的G蛋白、M蛋白与ERK2、E-cadherin的亲和力。结果:经MOI=10、100的VSV-IN处理48 h后,4T1细胞死亡率显著高于对照组(均P<0.01);与对照组相比,VSV-IN组(MOI=10)细胞迁移率明显降低(P<0.01),MMP-9 mRNA的相对表达量明显降低(P<0.05);与对照组小鼠相比,VSV-IN组移植瘤生长较对照组减缓且终点体积显著减小(P<0.05),VSV-IN组小鼠肺转移结节数量显著减少[(12.86±1.86)vs(24±3.67)个,P<0.01],脾内CD4^(+)T、CD8^(+)T细胞比例显著升高(均P<0.05),血清TNF-α、IL-6含量显著升高(均P<0.01);GEPIA分析发现在乳腺癌中E-cadherin、MMP-9表达水平均高于癌旁组织(P<0.05);VSV-IN组小鼠肿瘤细胞内MMP-9表达明显低于对照组(P<0.05);VSV-IN的G、M蛋白与ERK2的结合自由能分别为–11.7 kcal/mol、–6.4 kcal/mol。结论:野生型VSV-IN可抑制4T1细胞荷瘤小鼠的移植瘤生长及转移,这可能与其促进抗肿瘤免疫及调控迁移相关蛋白表达有关。

固定化c-ω-转氨酶催化合成(4S)-四氢萘酮

以T4噬菌体衣壳为载体,探索了海绵假弧菌-ω-转氨酶(P-ω-TA)的自组装固定化,以将P-ω-TA与T4噬菌体非必需小外壳蛋白(Soc)融合的方式实现了P-ω-TA在T4噬菌体衣壳上的亲和固定及较高的位点结合数。对固定化P-ω-TA的适应性、回收性能、(S)-型异构体选择性拆分及(1S,4S)-去甲基舍曲林的催化能力进行了测试。结果表明,固定化的P-ω-TA保持了完整的活性及适应性,可通过离心操作轻松地回收,并进行重复使用。在5次回收和重复使用过程中,每次酶活回收率均>91%,经5次催化,最终酶活保持率约为84%。固定化P-ω-TA保持了在底物手性中心处的(S)-型异构体选择性拆分以及对(1S,4S)-去甲基舍曲林的催化能力。

重症肺炎患者血清ANXA1、TIM-4表达水平及临床意义

目的 探讨血清膜联蛋白A1(ANXA1)、T细胞免疫球蛋白黏蛋白-4(TIM-4)在重症肺炎患者血清中表达水平及临床意义。方法 选取2019年5月至2021年12月本院收治的90例重症肺炎患者纳入重症肺炎组和90例普通肺炎患者为普通肺炎组为研究对象,另选90例健康体检者为对照组。ELISA法检测血清ANXA1、TIM-4表达水平;多分类Logistic回归分析影响重症肺炎患者预后的因素。ROC曲线分析血清ANXA1、TIM-4对预后的预测价值。Kaplan-Meier曲线分析ANXA1、TIM-4表达与预后的关系。结果 对照组、普通肺炎组、重症肺炎组患者血清ANXA1、TIM-4水平依次上调(P<0.05)。Pearson分析表明,重症肺炎患者血清ANXA1和TIM-4表达水平呈正相关(P<0.05)。与生存组相比,死亡组ANXA1、TIM-4水平明显升高(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,ANXA1、TIM-4是影响重症肺炎患者预后的危险因素(P<0.05)。ANXA1、TIM-4联合预测重症肺炎预后的AUC显著大于单独预测。Kaplan Meier生存分析显示ANXA1、TIM-4低表达组生存率显著高于高表达组。结论 重症肺炎患者血清ANXA1、TIM-4表达水平升高,两者是影响重症肺炎患者预后的危险因素,两者联合预测重症肺炎患者预后具有较高的价值。

血清PCT、TIM-4、sTREM-1联合检测对胃肠手术后肺部感染的预测价值

目的探讨血清降钙素原(PCT)、T细胞免疫球蛋白及粘蛋白域蛋白-4(TIM-4)、可溶性髓样细胞触发受体-1(sTREM-1)联合检测对胃肠手术后肺部感染的诊断价值。方法选择在本院进行胃肠手术后发生肺部感染的67例患者作为观察对象(感染组),根据治疗结局分为治疗好转组(42例)与治疗未好转组(25例);选择同期进行胃肠手术后无感染患者70例作为无感染组。分别于胃肠手术后24 h(T1)、出现肺部感染时(T2)、肺部感染后48 h(T3)检测患者血清PCT、TIM-4、sTREM-1水平;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清PCT、TIM-4、sTREM-1对胃肠手术后肺部感染的诊断价值。结果无感染组与感染组患者年龄、性别、BMI、吸烟史、高血压史、冠心病史、合并肺气肿、合并慢性阻塞性肺疾病(COPD)及手术方式比较差异无统计学意义(P>0.05);2组患者卧床时间与留置胃管时间比较差异有统计学意义(P<0.05);感染组患者术后24 h血清PCT、TIM-4、sTREM-1水平明显高于无感染组(P<0.05);血清PCT、TIM-4、sTREM-1联合诊断胃肠手术后肺部感染的敏感度为92.54%,特异度为81.43%,曲线下面积(AUC)为0.947,诊断效能高于单项指标检测;在T1、T2、T3时点,治疗未好转组患者血清PCT、TIM-4、sTREM-1水平显著高于治疗好转组患者(P<0.05)。结论胃肠手术后肺部感染患者血清PCT、TIM-4、sTREM-1水平升高,早期检测PCT、TIM-4、sTREM-1水平对胃肠手术后肺部感染的诊断及疗效评估有一定价值。

直肠癌组织中COX-2、TCF-4、Ki67表达水平与其根治术后复发转移的关系分析

目的探讨直肠癌(RC)组织中环氧化酶-2(COX-2)、T细胞因子4(TCF-4)和肿瘤增殖抗原(Ki67)表达水平与其根治术后复发转移的关系。方法回顾性选取2014年1月~2017年06月于新疆维吾尔自治区人民医院行RC根治术的193例患者,采用免疫组织化学法检测癌组织和癌旁正常组织COX-2、TCF-4和Ki67的表达,随访观察5年,记录患者复发转移情况,并采用logistic多因素分析3种因子与其根治术后复发转移的关系,绘制Kaplan-Meier生存曲线。结果与癌旁正常组织相比,RC患者癌组织COX-2、TCF-4、Ki67阳性表达率均显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。行根治术后5年内,患者复发率为6.75%(13/193),转移率为4.15%(8/193)。COX-2、TCF-4和Ki67在复发转移患者中阳性表达率显著高于无复发转移患者的阳性表达率,差异有统计学意义(P<0.05);Logistic多因素分析结果显示,肿瘤低分化、COX-2、TCF-4和Ki67是RC患者根治术后复发的独立危险因素(P<0.05,OR>1);Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示,COX-2、TCF-4和Ki67阳性表达组的累计生存率分别为85.70%、88.70%和87.30%,阴性表达组累计生存率分别为97.70%、96.20%和96.40%,总体平均生存率为93.80%。结论RC组织的COX-2、TCF-4和Ki67的阳性表达与其根治术后复发转移密切相关,可作为临床预测指标判断患者预后。

氧化苦参碱调控CTLA-4和PD-1缓解小鼠类风湿关节炎的作用

目的 观察氧化苦参碱(oxymatrine,OMT)通过免疫负调控机制对小鼠胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)的缓解作用。方法 将DBA/1J小鼠随机分为正常组、模型组、OMT组和地塞米松组,每组9只。采用胶原和佐剂等体积混合背部皮下多点注射诱导DBA/1J小鼠,构建CIA小鼠模型。OMT组和地塞米松组分别用氧化苦参碱和地塞米松进行腹腔注射,正常组注射同等剂量的生理盐水。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测脾淋巴细胞叉头样转录因子P3(forkhead box protein3,Foxp3)、细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白-4(cytotoxic T-lymphocyte-associated protein-4,CTLA-4)和程序性死亡受体-1(programmed cell death protein-1,PD-1)的mRNA表达水平。采用苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)观察关节滑膜组织的异位生发中心。采用免疫组织化学法和Western blot检测Foxp3及CTLA-4和PD-1的表达。结果 OMT可缓解CIA小鼠关节肿胀度并降低其关节评分,增加脾淋巴细胞和关节组织Foxp3及CTLA-4的表达,降低PD-1的表达(P均<0.05),并减少炎性细胞大面积浸润。结论 OMT可能经增加调节性(Foxp3+)T细胞CTLA-4的表达但降低PD-1的表达而缓解RA。

过敏性紫癜患儿外周血微小RNA-155、Toll样受体2、Toll样受体4、氧化应激指标表达水平与Th17/Treg平衡的关系

目的:探究过敏性紫癜患儿外周血微小RNA-155(miR-155)、Toll样受体2(TLR2)、TLR4、氧化应激指标表达水平与辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡的关系。方法:纳入过敏性紫癜患儿102例为观察组,另选择同期体检健康儿童120例为对照组。比较两组外周血miR-155、TLR2、TLR4表达水平,氧化应激指标[晚期氧化蛋白产物(AOPP)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)]水平,以及Th17/Treg平衡。分析外周血miR-155、TLR2、TLR4、氧化应激指标表达水平与Th17/Treg平衡的相关性。结果:观察组外周血miR-155、TLR2、TLR4、AOPP、MDA、Th17、Th17/Treg水平高于对照组,Treg和SOD水平低于对照组(均P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,miR-155、TLR2、TLR4、AOPP、MDA与Th17呈正相关,SOD与Th17呈负相关(均P<0.05);miR-155、TLR2、TLR4、AOPP、MDA与Treg呈负相关,SOD与Treg呈正相关(均P<0.05);miR-155、TLR2、TLR4、AOPP、MDA与Th17/Treg呈正相关,SOD与Th17/Treg呈负相关(均P<0.05)。结论:过敏性紫癜患儿外周血miR-155、TLR2、TLR4表达水平升高,氧化应激水平增加,且存在Th17/Treg失衡。外周血miR-155、TLR2、TLR4、氧化应激指标表达水平与Th17/Treg失衡具有相关性,可能为疾病诊治提供新的依据。

4-羟基水杨酰苯胺对T淋巴细胞白血病肿瘤增殖与凋亡的影响

目的:研究4-羟基水杨酰苯胺(4-hydroxysalicylaniline,HDS)对T淋巴细胞白血病细胞Jurkat和Hut-78的抑制效果及其机制。方法:体外实验中,梯度浓度的HDS处理Jurkat和Hut-78细胞后,以CCK-8和克隆形成实验检测细胞增殖状况;用细胞流式术检测细胞周期变化,通过Western blot检测周期相关蛋白的表达水平;用细胞流式术检测细胞凋亡水平,通过Western blot检测凋亡相关蛋白的表达水平;以γ-H2AX免疫荧光染色检测DNA损伤状况,并通过Western blot检测DNA损伤相关蛋白的表达水平。体内实验中,通过皮下注射Jurkat细胞构建小鼠肿瘤模型,处理组腹腔注射HDS,对照组给予等量溶剂,记录小鼠体重与肿瘤体积变化,13 d后,取肿瘤组织,通过HE染色观察组织形态,并通过Ki67和γ-H2AX的免疫组织化学染色,分析药物对肿瘤组织增殖与DNA损伤的影响。结果:在体内和体外,证明了HDS可通过诱导Jurkat和Hut-78细胞S期细胞周期阻滞与凋亡,并且通过CHK1/CHK2信号通路的磷酸化激活,加重DNA损伤,抑制T淋巴细胞白血病肿瘤,但HDS对小鼠无明显毒性。结论:HDS可作为潜在的抗T淋巴细胞白血病药物,可抑制细胞周期,诱导细胞凋亡,并通过CHK1/CHK2信号通路影响DNA损伤修复过程。

25-羟基胆固醇通过调控干扰素调节因子4抑制CD4^(+)T细胞IL-17的表达

目的探讨25-羟基胆固醇(25-hydroxycholesterol,25-HC)对人外周血单个核细胞(PBMCs)产生IL-17的抑制作用及其机制。方法用抗人CD3抗体联合抗CD28抗体刺激培养外周血单个核细胞(PBMCs)和纯化CD4^(+)T细胞,加或不加25-HC进行培养,ELISA、ELISPOT和PCR检测IL-17和IFN-γ的表达;流式细胞术检测T细胞转录因子(RORγt、RUNX1和IRF4)的表达、细胞表面活化分子的表达以及T细胞分裂增殖情况。通过电转染过表达IRF4,检测其对IL-17表达的影响。结果25-HC呈时间和剂量依赖的方式抑制T细胞产生IL-17,且主要抑制CD4^(+)T细胞中IL-17的表达。进一步研究发现,25-HC抑制T细胞晚期活化分子的表达和细胞分裂增殖,抑制IL-17相关转录因子IRF4的表达;过表达IRF4后,25-HC对IL-17表达的抑制作用被恢复。结论25-HC抑制Th17细胞的活化和增殖,并通过下调IRF4的表达抑制CD4^(+)T细胞产生IL-17。25-HC可能是IL-17相关炎症性疾病的一个具有前景的调控靶点。