伐仑克林靶向α-syn蛋白对帕金森病大鼠的机制研究

目的研究伐仑克林靶向α-syn蛋白对帕金森病(PD)大鼠的机制。方法选取SPF级30只SD健康大鼠,将30只大鼠随机分为空白组、模型组、用药组各10只,模型组和用药组建立PD大鼠模型。建模成功后,用药组使用1mg·kg-1的伐仑克林灌胃,空白组和模型组不做任何处理。在大鼠给药1w后对三组大鼠行为学、线粒体活性(State3、State4、RCR)、α-syn(α-突触核蛋白)、LPO(过氧化脂)、MDA(丙二醛)水平及对大脑组织中Beclin1、LC3B、APP合成酶活力、p-mTOR、IRE1α、ASK1、P-JNK蛋白表达量进行检测。结果模型组大鼠悬尾静止时间、IRE1α、ASK1、P-JNK蛋白表达量、α-syn、LPO、MDA水平均高于空白组,且糖水测试、Beclin1、LC3B蛋白表达量、线粒体活性、APP合成酶活力、p-mTOR均低于空白组,(P<0.05);用药组大鼠悬尾静止时间、IRE1α、ASK1、P-JNK蛋白表达量、α-syn、LPO、MDA水平均高于空白组,且糖水测试、Beclin1、LC3B蛋白表达量、线粒体活性、APP合成酶活力、p-mTOR均低于空白组,(P<0.05);用药组大鼠悬尾静止时间、IRE1α、ASK1、P-JNK蛋白表达量、α-syn、LPO、MDA水平均低于模型组,且糖水测试、Beclin1、LC3B蛋白表达量、线粒体活性、APP合成酶活力、p-mTOR均高于模型组(P<0.05)。结论伐仑克林通过靶向α-syn蛋白,作用于其线粒体功能及内质网应激机制,提高其行为学能力,效果显著。

鱼藤酮帕金森病大鼠模型的建立与评价研究

运用长期低剂量在颈背部皮下注射鱼藤酮试剂的给药方式建立帕金森病大鼠模型。方法 将18只SPF级雄性SD大鼠通过丢色子随机分组法分成三组,即溶剂组、模型组、正常组。正常组任其正常生活,模型组的大鼠在其颈背部皮下注射鱼藤酮葵花油乳化液试剂,建立PD模型,溶剂组皮下注射等量的葵花油液(不含鱼藤酮试剂)。观察各组大鼠的一般行为学的变化,进行悬挂试验并进行评分,HE染色法观察中脑黑质部位神经元细胞的变化,免疫组化法观察黑质内的酪氨酸羟化酶(TH)的表达,蛋白免疫印迹(Westernblot)技术观察大鼠纹状体内α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)表达。结果 (1)模型组大鼠出现变黄、变脏、行走困难、向一侧偏瘫等改变。模型组内大鼠行为异常评分明显降低(P<0.01),悬挂测试结果显示模型组大鼠在金属丝上悬挂时间明显减少(P<0.01)。(2)HE染色结果显示模型组大鼠中脑黑质致密部神经元细胞数量减少,稀疏,轮廓不清,可见路易小体的形成,正常组与溶剂组之间无明显变化。(3)免疫组化法观察,与正常组和溶剂组比,模型组黑质内(TH)阳性细胞明显减少(P<0.01)。(4)蛋白免疫印迹(Westernblot)技术检测结果显示模型组大鼠纹状体内α-syn表达比正常组和溶剂组显著增高(P<0.01)。结论 通过皮下注射鱼藤酮试剂的方式可建立与人类帕金森病临床病理状态、慢性病理过程相似的疾病模型,为PD实验的研究探讨提供理论支持。

探讨蛋白酶体功能障碍对散发性帕金森病发病机制的影响

目的探讨蛋白酶体功能障碍对散发性帕金森病的发病机制。方法收集本院2013年7月~2015年7月病例,将存在蛋白酶体功能障碍的帕金森病患者50例作为观察组,未存在蛋白酶体功能障碍的帕金森病患者50例作为对照组,观察2组患者的行为学改变情况,通过RT-PCR、Western blotting分子生物学方法检测患者血液中α-突触核蛋白(α-Syn)表达水平。结果观察组患者血清的α-突触核蛋白表达水平显著高于对照组(P<0.05)。结论蛋白酶体功能障碍可能导致散发性帕金森病患者血液中α-突触核蛋白(α-Syn)水平升高,考虑该因素可能是散发性帕金森疾病的危险因素。