广东汉族人α1-抗糜蛋白酶信号肽基因的多态性

目的 了解广东汉族人α1-抗糜蛋白酶信号肽基因的分布特点 ,并与其它地区人群进行比较。方法 应用聚合酶链反应技术对正常人α1-抗糜蛋白酶信号肽基因进行扩增以BstNI进行限制性酶切图谱分析。结果 广东汉族人α1-抗糜蛋白酶信号肽基因中 ,表现型T/T频率是 5 0 0 % ,表现型T/A是 37 2 % ,表现型AA是 12 8%。α1-抗糜蛋白酶信号肽基因T频率是 0 6 2 2 ,基因A频率是 0 378。结论 广东汉族人α1-抗糜蛋白酶信号肽基因的分布与其它地区及人种有不同。

α1-抗糜蛋白酶信号肽基因与阿尔茨海默病相关性初步探讨

目的 探讨阿尔茨海默病 (Alzheimer’sdisease ,AD)患者中的α1-抗糜蛋白酶基因多态性及其与AD的相关性 .方法 利用聚合酶链式反应 -限制性片段长度多态性 (PCR -RFLP)技术对 48例AD患者及 89例对照者的α1-抗糜蛋白酶信号肽基因进行分型 ,进而进行AD与α1-抗糜蛋白酶信号肽基因多态性的相关分析 .结果 ①AD病人α1-抗糜蛋白酶基因中 ,基因型A/T占 2 7.1% ,明显低于对照组的 5 1.7% (p <0 .0 1,RR =0 .3 5 5 ) ,T/T占 60 .4% ,明显高于对照组的 3 7.1% (p <0 .0 1,RR =2 .5 76) ,A/A占 12 .5 % ,与对照组 11.2 %无明显差异 (p >0 .0 5 ,RR =1.0 86) .②AD病人中α1-抗糜蛋白酶信号肽基因等位基因A的频率为 2 6.0 %、相对危险率 (RR)为 0 .5 94,T的频率为 74.0 %、RR为 1.683与对照组的A为 3 7.1%、T为 62 .9%差异无显著性意义 (p >0 .0 5 ) .结论 AD病人中α1-抗糜蛋白酶信号肽基因基因型T/T(AACT T/T)频率明显高于正常人 ,与AD存在正相关 ;而AACT A/T频率则明显低于正常人 。

α1-抗糜蛋白酶信号肽基因及载脂蛋白E基因多态性与帕金森病的关系

目的 探讨α1 抗糜蛋白酶 (AACT)信号肽基因多态、载脂蛋白E(ApoE)基因多态与帕金森病 (PD)发病风险间的关系。方法 采用聚合酶链式反应限制性片断长度多态性方法 (PCR RFLP) ,在 6 4例PD患者、10 1例健康老人对照中观察AACT信号肽基因多态、ApoE基因多态的分布 ,并通过比值比 (OR)对AACT多态、ApoE多态与PD作相关分析。结果 (1)PD患者与正常老人间不存在AACT各等位基因多态分布的差异 (χ2 =0 83P =0 36 3>0 0 5 ) ,但PD患者AACT AA纯合子基因型与PD正关联 (OR =2 6 8,χ2 =4 31P =0 0 38<0 0 5 )。 (2 )ApoE基因多态性与PD之间不存在任何关联(等位基因 :χ2 =2 85P =0 2 41>0 0 5 ;基因型 :χ2 =9 2 5P =0 0 99>0 0 5 )。 (3)非ApoEε4型AACT AT杂合子基因型与PD负关联 (OR =0 47,χ2 =4 10P =0 0 43 <0 0 5 )。 (4)AACT AT杂合子型PD与ApoEε4等位基因正关联 (OR =3 2 6 ,χ2 =5 5 3P =0 0 19<0 0 5 )。结论 AACT AA纯合子基因型、ApoEε4型AACT AT杂合子基因型均可能是PD发病的风险因子。

100例重庆市汉族儿童哮喘α_1-抗糜蛋白酶基因突变初探

目的 :了解儿童哮喘α1 抗糜蛋白酶(α1 antichymotrypsin,α1 ACT)基因点突变情况。方法 :应用聚合酶链反应(PCR)和限制性酶切图谱分析技术 ,对100例重庆市汉族儿童哮喘α1 ACT基因外显子(exon)Ⅱ和Ⅲ进行检测。结果 :所有研究对象均未发现Bonn 1及Bochum 1变异体。结论 :Bonn 1和Bochum 1变异体与100例重庆市汉族儿童哮喘发病无平行关系。

α_1-抗糜蛋白酶基因多态性与阿尔茨海默病相关性探讨

目的 :探讨阿尔茨海默病 (AlzheimerDisease,AD)患者中α1 抗糜蛋白酶 (AACT)基因的多态性及其与AD的相关性。方法 :利用聚合酶链反应 (PCR) 限制性片段长度多态性 (RFLP)技术 ,对 4 8例AD患者及 86例对照者的AACT信号肽基因进行分型 ,并进行AD与AACT信号肽基因多态性的相关分析。结果 :①AD病人AACT信号肽A/T基因型占 2 7 1% ,明显低于对照组的 5 1 2 % (P <0 0 1,RR =0 35 5 ) ,T/T占 6 0 4 % ,明显高于对照组的 37 2 % (P <0 0 1,RR =2 5 76 ) ,A/A占 12 5 % ,与对照组 11 6 %无显著性差异 (P >0 0 5 ,RR =1 0 86 )。②AD病人中AACT信号肽等位基因A的频率为 2 6 0 % ,T的频率为 74 0 % ,与对照组 (A37 2 %、T 6 2 8% )无显著性差异 (P >0 0 5 )。结论 :AD病人的AACT T/T可能与AD存在正相关 ;而AACT

哮喘患儿的α_1-抗糜蛋白酶基因exonⅢ Pro229→Ala突变的初步调查

目的了解α1-抗糜蛋白酶基因exonⅢPro229→Ala突变在广东籍儿童中发生的情况。方法用PCR-RFLP方法检测100例广东籍正常儿童和52例支气管哮喘患儿α1-抗糜蛋白酶基因exonⅢPro229→Ala突变情况。结果所有样本均未检出α1-抗糜蛋白酶基因exonⅢPro229→Ala突变。结论从目前调查的例数,广东籍支气管哮喘患儿中尚未发现α1-抗糜蛋白酶基因exonⅢPro229→Ala突变。

α_1-抗糜蛋白酶基因Isehara-1、Isehara-2突变型与儿童哮喘相关性研究

目的 了解α1-抗糜蛋白酶 (AACT)基因Isehara - 1、Isehara - 2突变型与昆明儿童哮喘发生是否具有相关性。方法 应用聚合酶链反应 (PCR)技术、基因测序方法 ,对 30例昆明市汉族哮喘儿童及 2 0例正常儿童α1-抗糜蛋白酶基因外显子 (exon)V进行检测。结果 所有研究对象均未发现α1-抗糜蛋白酶基因Isehara - 1、Isehara - 2突变型。结论 α1-抗糜蛋白酶基因Isehara- 1、Isehara - 2突变型与 30例昆明市汉族儿童哮喘发病无相关关系。

儿童哮喘α_1-抗糜蛋白酶杂合缺失研究

目的探讨α1 抗糜蛋白酶(α1 antichymotrypsin,α1 ACT)杂合缺失是否为儿童哮喘发病的遗传因素。方法应用火箭免疫电泳技术检测90例哮喘儿童、180例健康儿童及200例健康成人血浆α1 ACT含量 ,家系调查确定α1 ACT杂合缺失 ,统计学方法分析α1 ACT杂合缺失和非缺失患儿的有关临床资料。结果哮喘组、儿童对照组以及成人对照组α1 ACT杂合缺失频率依次为4.4 %、0、0.05 % ,哮喘组较成人对照组明显增高[Prevalenceradio(PR)=8.89, 2MH =5.68,95 %置信区间(1.47,53.60) ,P<0.05] ;且α1 ACT杂合缺失患儿哮喘初发年龄早、住院次数多、放射性过敏原吸附试验阳性率显著增高[PR=3.91, 2MH=10.190,95 %置信区间(1.69,9.03) ,P<0.01]。结论α1 ACT杂合缺失与儿童哮喘发病及其严重性存在一定的联系。

α1-抗糜蛋白酶基因、早老素1基因与阿尔茨海默病的相关分析

目的探讨中国汉族人中α１抗糜蛋白酶（ＡＡＣＴ）基因、早老素１（ＰＳ１）基因多态性与阿尔茨海默病（Ａｌｚｈｅｉｍｅｒｓｄｉｓｅａｓｅ，ＡＤ）的相关情况。方法应用ＰＣＲＲＦＬＰ方法，在１２３例患者和１４０例正常人中观察ＡＡＣＴ信号肽和ＰＳ１基因多态性的分布，进行关联分析。结果１ＡＤ患者与ＰＳ１基因等位基因１正关联，与等位基因２和基因型２／２负关联，但与１／１基因型无关；２ＡＡＣＴ信号肽基因多态性与ＡＤ无关联；３在三种ＰＳ１基因型中，ＡＡＣＴ信号肽基因多态性与ＡＤ均无关；４在ＡＡＣＴ基因ＡＡ、ＴＴ基因型中，ＰＳ１基因多态性与ＡＤ负关联，而ＴＡ型中ＰＳ１基因与ＡＤ无显著相关。结论中国人群中，ＡＤ与ＰＳ１基因２／２型负关联，而与ＡＡＣＴ信号肽基因多态性无关；ＡＡＣＴ信号肽和ＰＳ１基因多态性之间也无明显的相互影响。

中国汉族人群α_1-抗糜蛋白酶表型分析研究

目的了解中国汉族人群 α1 -抗糜蛋白酶表型的分布情况。方法建立测定 α1 -抗糜蛋白酶表型的聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦免疫固定技术并应用这种方法对居住在重庆市汉族群体的 2 0 0例个体的 α1 -抗糜蛋白酶表型进行分析。结果发现中国汉族人群 α1 -抗糜蛋白酶具有 3种表型。结论据此推测 α1 -抗糜蛋白酶有希望成为人类遗传学新的遗传标记 ,同时为进一步开展α1 -抗糜蛋白酶遗传多态性与疾病的相互关系研究拓宽了视野。

广州市汉族哮喘儿童α_1-抗糜蛋白酶杂合缺失分析

目的探讨α1 -抗糜蛋白酶 (α1-antichymotrypsin,α1-ACT )杂合缺失是否为广州市儿童哮喘发病的遗传机制以及地理环境是否影响α1-ACT杂合缺失在儿童哮喘中的分布。方法应用火箭免疫电泳技术对广州市50例哮喘儿童、50例健康儿童及100例健康成人血浆α1 -ACT含量进行检测 ;经家系调查确定3组α1-ACT杂合缺失频率 ;比较了哮喘组α1-ACT杂合缺失及非缺失患儿的临床资料。结果α1-ACT杂合缺失频率哮喘组、儿童对照组以及成人对照组依次为14 %、2 %、1 % ,哮喘组较儿童对照组明显增高 (χ2=4.891,P<0.05) ;广州市哮喘儿童α1-ACT杂合缺失频率 (14 % )明显高于重庆市哮喘儿童 (4.4 % ) ,χ2 =4.054,P<0.05 ;哮喘组α1 -ACT杂合缺失与非缺失患儿比较 ,前者哮喘住院次数多 ,放射性过敏原吸附试验阳性率显著增高。结论α1-ACT杂合缺失与儿童哮喘发病存在一定的联系 ;地理环境影响α1 -ACT杂合缺失频率分布。

广州市汉族人群α_1-抗糜蛋白酶表型分析

目的了解广州市汉族人群α1-抗糜蛋白酶(α1-ACT)表型的分布情况,探讨地理环境是否影响α1-ACT的表型分布。方法建立测定α1-ACT的等电聚焦免疫固定技术,并应用此方法对居住在广州市的200例汉族个体的α1-ACT蛋白表型进行分析。结果广州市汉族人群α1-ACT具有3种表型,且此3种表型与重庆市汉族人群相同,但各型的分布频率不同于重庆市汉族人群。结论地理环境影响α1-ACT的表型频率分布,α1-ACT有希望成为人类遗传学新的遗传标记。

儿童哮喘α_1-抗糜蛋白酶遗传缺陷探索性研究

目的 评估儿童哮喘α1 抗糜蛋白酶 (α1 ACT)杂合缺失频率及基因突变类型。方法 应用火箭免疫电泳技术对 90例哮喘儿童、195例健康儿童及 198例健康成人血浆α1 ACT含量进行检测 ;经家系调查确定 3组α1 ACT杂合缺失频率 ;分析了哮喘组α1 ACT杂合缺失和非杂合缺失患儿的有关临床资料 ;应用聚合酶链反应和限制性酶切图谱分析技术对 5例α1 ACT杂合缺失个体的α1 ACT基因外显子Ⅱ和Ⅲ进行了检测。结果 哮喘组、儿童对照组以及成人对照组α1 ACT杂合缺失频率依次为 4 .4 % ,0 ,0 .5 % ,哮喘组较儿童及成人对照组明显增高(P <0 .0 5 ) ;α1 ACT杂合缺失哮喘患儿初发年龄早、住院次数多、放射性过敏原吸附试验阳性率显著增高 (P <0 .0 1或 0 .0 5 )。基因分析未找到Bonn 1和Bochum 1变异体。结论 α1 ACT杂合缺失与儿童哮喘发病及其严重性存在一定的联系 ;Bonn 1和Bochum

哮喘患儿血浆α_1-抗糜蛋白酶检测及其临床意义

目的 探讨α1 抗糜蛋白酶 (α1 antichymotrypsin ,α1 ACT)在哮喘发病中的作用 ,为哮喘防治提供理论参考。方法 应用火箭免疫电泳技术检测 30例哮喘患儿和 30例健康儿童血浆α1 ACT水平。结果 哮喘急性发作期患儿血浆α1 ACT水平显著高于对照组 [( 0 .41 78± 0 .0 81 5 )比 ( 0 .2 876± 0 .0 496 ) ,t=7.474,P <0 .0 0 1 ],也显著高于缓解期 [( 0 .41 78± 0 .0 81 5 )比 ( 0 .2 86 5± 0 .0 799) ,t=6 .30 1 ,P <0 .0 0 1 ],缓解期患儿血浆α1 ACT水平与对照组差异不显著 [( 0 .2 86 5± 0 .0 799)比 ( 0 .2 876± 0 .0 496 ) ,t=0 .0 6 4 ,P >0 .0 5 ]。哮喘中重度发作期患儿血浆α1 ACT水平显著高于轻度发作期患儿 [( 0 .45 5 3± 0 .0 75 8)比 ( 0 .32 49± 0 .0 92 6 ) ,t=4.1 87,P <0 .0 0 1 ],也显著高于对照组 [( 0 .45 5 3± 0 .0 75 8)比 ( 0 .2 86 5± 0 .0 799) ,t=9.38,P <0 .0 0 1 ]。结论 α1 ACT参与了哮喘的发生、发展 ,血浆α1

草鱼TAB2与TAK1蛋白互作鉴定及其对两种抗菌肽基因表达的影响

为了探究草鱼TAB2(Ci TAB2)与Ci TAK1能否互作及其对2种草鱼抗菌肽基因(Cihepcidin与Ciβ-defensin1)表达的影响,实验首先采用实时荧光定量PCR(qPCR)方法分析拟态弧菌感染后Citab2和Citak1在草鱼免疫相关组织中的时空表达模式。然后利用荧光共定位、免疫共沉淀及Western blot技术鉴定Ci TAB2与Ci TAK1在细胞内共定位及相互作用情况。最后将过表达质粒pEGFP-N1-Citak1与pEGFP-N1-Citab2共同转染草鱼肾细胞(CIK细胞),检测Cihepcidin与Ciβ-defensin1的相对mRNA表达水平。结果显示,拟态弧菌感染能够显著改变Citab2和Citak1的相对表达水平,前者于感染后不同时间在各检测组织中表现出不同的时空表达模式,而后者均呈现先上调后下调的表达模式;荧光显微镜下观察到Ci TAB2与Ci TAK1共定位于转染后的HEK293T和CIK细胞的胞质中,且在HEK293T细胞内能够形成Ci TAB2-Ci TAK1蛋白复合物;共同过表达Ci TAB2与Ci TAK1后,CIK细胞内Cihepcidin与Ciβ-defensin1的相对mRNA表达水平在各检测时间点均显著上调。结果表明,Ci TAB2与Ci TAK1存在互作关系且二者互作能够促进上述两种抗菌肽的转录表达。本研究从蛋白互作调控抗菌肽表达的角度为防治鱼类弧菌病提供了新策略。

α_1-抗胰蛋白酶基因多态性与焦炉工慢性阻塞性肺疾病的关系

[目的 ]探讨α1 抗胰蛋白酶 (α1 AT)基因多态性对焦炉逸散物致慢性阻塞性肺疾病 (COPD)的影响。 [方法 ]通过对 45 8名焦炉逸散物接触和非接触工人肺功能测定 ,筛查到 5 2名COPD患者 ,按 1∶1配对进行研究。应用PCR RFLP技术检测α1 AT基因多态性。 [结果 ]病例组见 2例纯合子ZZ基因型 ,同时为SS基因型 ,对照组未见ZZ和SS基因型。MS或SS基因型频率在两组间无显著性差异 ,病例组MZ和ZZ基因型频率分别为 11 5 %和 3 8% ,明显高于对照组( 3 8%和 0 0 % ,P <0 0 5 )。携带MZ或ZZ基因型和焦炉逸散物累积接触指数≥ 3 8 2的个体 ,发生COPD的危险性 ,是携带MM基因型和焦炉逸散物累积接触指数 <3 8 2的个体的 2 4.0 5倍 ( 95 %CI :1 2 9～ 44 8 46)。 [结论 ]α1 AT外显子V的MZ或ZZ基因型对焦炉逸散物致COPD有交互或修饰作用。

人α_1抗胰蛋白酶基因的克隆及在COS-7细胞中的表达

目的 克隆人α1 抗胰蛋白酶 (α1 -AT)基因并在真核细胞中表达。方法 以人α1 抗胰蛋白酶(α1 -AT)基因的总RNA为模板,采用反转录PCR法得到α1 -AT的编码区cDNA,构建真核表达载体pcD NA3. 1( +) -α1 -AT,在脂质体介导下转染非洲绿猴肾细胞系COS-7,经G418压力筛选建立稳定转染人α1 -AT的细胞系,用Western印迹检测其在COS-7细胞中的表达。结果 获得的人α1 -ATcDNA序列与文献报道的核苷酸序列一致,Western印迹证实稳定转染人α1 -AT的COS-7细胞系中有α1 -AT的表达。结论 构建了人α1 抗胰蛋白酶的真核表达载体,并在COS-7细胞中获得稳定表达。

α_1-抗糜蛋白酶的研究进展

α－抗糜蛋白酶（α１－ａｎｔｉｃｈｙｍｏｔｒｙｐｓｉｎ，α１－ＡＣＴ）是丝氨酸蛋白酶抑制剂超家族成员之一，特异性地灭活丝氨酸蛋白水解酶，控制来自吞噬细胞（中性粒细胞、碱性粒细胞、肥大细胞）的糜蛋白酶类蛋白水解酶的活性，包括组织蛋白酶Ｇ、肥大细胞食糜酶...

淀粉样蛋白Aβ_(1-42)与α_1-抗糜蛋白酶反应的体外研究

目的研究淀粉样蛋白Aβ1-42与α1-抗糜蛋白酶(α1-antichymotrypsin,ACT)在体外动态反应的性质,为阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)发病机制的研究探索新的领域。方法Aβ1-42、ACT以10:1的摩尔比溶解于Tris缓冲液中,37℃下孵育7h形成复合物。SDS-PAGE及糜蛋白酶(chymotrypsin,CHY)干扰实验探索Aβ1-42/ACT复合物的性质;采用ACT蛋白酶抑制剂活性的化学计量法研究和荧光标记Aβ1-42的解离追踪计算Aβ1-42与ACT的结合速率和解离速率;定量分析Aβ1-42浓度对ACT活性的影响。结果Aβ1-42与ACT反应7h形成的复合物在SDS-PAGE电泳条件下不稳定,ACT仍具有蛋白酶抑制剂活性。Aβ1-42与ACT结合后,后者的蛋白酶抑制剂活性减弱约10倍(SI=1.1vsSI=10.5),并且在一定范围内ACT的活性随Aβ1-42浓度的增高而减弱。Aβ1-42/ACT的结合速率常数为1.7(M.s)-1,解离速率常数为1.4×10-5s-1,即37℃、PH值7.4条件下Aβ1-42与ACT的结合速率远远高于解离速率。结论体外定量实验证实Aβ1-42、ACT之间的动态反应可形成稳定复合物并最终使ACT丧失蛋白酶抑制剂活性,提示ACT在AD的发病中可能发挥着与Aβ1-42相关的重要作用。

α_1-抗胰蛋白酶基因突变致家族性出血倾向

目的探讨一出血倾向家系的临床和实验室特点与α1-抗胰蛋白酶(α1-antitrypsin,α1-AT)基因Pitts-burgh突变(α1-AT-P)以及抗凝蛋白C(PC)缺乏的关系。方法采用凝固法或发色法进行凝血项目的检测;比浊法测定血小板聚集功能(PAgT);血清蛋白电泳采用毛细管电泳法;PCR扩增产物DNA片段直接测序检测α1-AT-P突变。结果家系中女性先证者和其父亲均有阳性的出血史,且有相似的凝血检查结果 :aPTT、PT、TT明显延长,不为1:1正常混和血浆所纠正;凝血因子Ⅹ、Ⅺ、Ⅻ水平降低;PC活性水平0;PAgT:ADP诱导正常,对终浓度为1u/ml凝血酶无反应,但升至4u/ml时,PAgT恢复正常;DNA测序结果显示两患者系α1-AT-P的杂合子;其余7位家系成员凝血相正常,基因测序未发现有α1-AT-P突变,证实患者的出血倾向系α1-AT-P突变所致。结论α1-AT-P突变是罕见的出血原因。本文系世界首个α1-AT-P家系和女性α1-AT-P患者报道,证实该病系按常染色体显性的方式进行遗传;继发性蛋白C缺乏在体内起到平衡止血的作用。