小鼠α_2-HS糖蛋白基因表达的研究

为了研究α_2—HS糖蛋白(AHSG)基因的发育调节,我们用Northem Blot分析法,以小鼠AHSG cDNA为探针,对小鼠发育各阶段多种组织的AHSG mRNA进行研究.结果发现①在发育的某些阶级,胚鼠的肢芽和脑有AHSG mRNA存在,②12天胚鼠肝脏AHSG mRNA浓度最低,然后逐渐上升至出生后1～3个月达高峰,出生4个月后维持在1个月时的50%的水平.③胚鼠和成年鼠的多种组织都有AHSG mRNA表达,证实了肝外组织也是AHSG的合成场所.

食管鳞状细胞癌患者血浆α-2-HS-糖蛋白和S100A9蛋白水平及意义

目的评估食管鳞状细胞癌(ESCC)血浆外泌体中表达上调的α-2-HS-糖蛋白(AHSG)和S100A9蛋白是否有潜力作为ESCC早期诊断的血浆外泌体肿瘤标志物。方法通过对46例ESCC血浆标本及46例健康对照组血浆标本差异蛋白进行Western印迹验证,如果结果与蛋白质组学结果一致,接着再利用酶联免疫吸附(ELISA)实验进行大样本的蛋白定量验证。结果 Western印迹实验结果表明,AHSG和S100A9在ESCC患者血浆外泌体中表达量与对照组相比明显升高。ELISA验证结果表明,ESCC组和对照组血浆外泌体中AGSH和S100A9浓度存在显著差异。结论两种蛋白可以作为ESCC早期诊断的血浆外泌体肿瘤标志物,但尚需进行更大批次临床样本的实验验证,同时还需要对这两种蛋白的特异性进行分析。

重组α2-HS糖蛋白的原核表达、纯化及免疫学活性分析

目的:原核表达并纯化具有生物学活性的重组α2-HS糖蛋白(AHSG)。方法:提取人肝癌细胞株HepG2细胞总RNA,逆转录得cDNA,PCR扩增出目的基因,与pMD18-T载体连接后,转化至大肠杆菌DH5α中,大量扩增后提取克隆质粒,连接至原核表达载体pEP-30a(+)中,转化BL21(DE3),经IPTG诱导蛋白表达,通过镍离子亲和层析的方法纯化重组蛋白,采用SDS-PAGE电泳、免疫印迹杂交法对纯化产物进行分析鉴定。结果:成功构建了AHSG原核表达系统BL21(pET30a-AHSG),最佳诱导条件为80μmol/LIPTG诱导3h;诱导表达的蛋白相对分子质量约54600,主要以不溶性的包涵体形式存在,纯化后的重组蛋白质量浓度最高达2.3g/L,经免疫印迹杂交鉴定有抗原性。结论:成功构建了AHSG原核表达系统,该系统可高效表达重组AHSG蛋白,该蛋白具有良好的抗原性。

Alpha-2-HS糖蛋白遗传多态性的研究进展

Heremans最早发现人类α2-HS-糖蛋白（α2-HS-glycoprotein）,称为α2-Z-球蛋白（α2-Z-globulin）。Schmid及Burg继续研究,将其命名为Baα2-糖蛋白（Baα2-glycoprotein）。Schultze等根据这种蛋白质的电泳迁移率（α2）将其命名为α2-HS-糖蛋白。H与S分别是Heremans与Schmid姓氏的第一个字母。α2HS的分子量是49000道尔顿,由A、B两条多肽链组成,两链以二硫链共价结合。A链含282个氨基酸,有4个连接糖的部位,B链含27个氨基酸,只有1个连接糖的部位,即第6个氨基酸残基丝氨酸;与B链连接的糖侧链由涎酸、半乳糖及N-乙酰胺基半乳糖组成,用神经氨酸酶（ncuraminidase,NANA）脱涎酸,可使α2HS的等电点由pH4.5～5.0提高至pH5.5,最近才报道。α2HS的分离与纯化及其生化特征。

2型糖尿病患者血浆α2-HS糖蛋白水平与下肢血管硬化的关系

目的探讨2型糖尿病患者血浆α2-HS糖蛋白水平与下肢血管硬化的关系及其影响因素。方法 2型糖尿病患者245例,正常对照者88例,ELISA检测血浆α2-HS糖蛋白水平,彩色超声多普勒检测下肢血管硬化程度,同时测定总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、肌酐、尿素氮及空腹血糖水平。比较两组间的差异,逐步回归分析探讨影响α2-HS糖蛋白水平的因素。结果糖尿病组α2-HS糖蛋白水平、收缩压、舒张压、尿素氮、肌酐、空腹血糖、总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白及低密度脂蛋白水平以及体质指数、血管硬化评分均高于正常对照组,协方差分析校正这些因素对α2-HS糖蛋白的影响后,两组间α2-HS糖蛋白水平仍有统计学意义(P<0.01)。逐步回归分析显示,α2-HS糖蛋白水平与年龄负相关(P=0.011),与血管硬化正相关(P=0.001)。结论糖尿病组血浆α2-HS糖蛋白水平升高,其原因与胰岛素抵抗有关。血浆α2-HS糖蛋白水平与血管硬化评分正相关,与年龄负相关。

α2-HS糖蛋白基因与中国人群的髋部骨大小的相关性研究(英文)

骨大小是一种独立于骨密度(BMD)的骨质疏松性骨折的重要风险因子。由于其高遗传率,充分了解控制骨大小的遗传因素有很重要的临床意义。文章研究目的为检测中国人群中α2-HS糖蛋白基因(AHSG)多态性和腰椎及髋部骨大小变异之间的关联。我们总共征集了来自中国401个核心家庭(包括父母亲及至少一个女儿)的1 260个研究样本,并且分型了AHSG基因第7个外显子的SacI位点多态性。该位点核苷酸的替换(C→G)引起第238号丝氨酸被苏氨酸取代,因此可能对基因功能有影响。在任何骨骼位点,没有发现显著的群体分层。发现AHSG基因Sac I位点多态性和转子间(P=0·019)以及全髋的(P=0·035)骨大小呈显著性相关。该多态性位点能分别解释转子间和全髋3·74%和3·16%的骨大小变异。连锁分析没有检测到显著性结果,可能的主要原因是样本中同胞对的数目较少,统计效力较低,以及SacⅠ位点多态相对于微卫星标记对连锁分析提供的信息量少。结果表明,AHSG基因多态性可能和中国人群中髋部骨大小变异有关。

α2-HS糖蛋白与妊娠期糖尿病关系的研究

目的观察不同程度糖代谢异常孕妇血清α2-HS糖蛋白(AHSG)浓度的变化并探讨其与血糖、血脂代谢及胰岛素抵抗的关系。方法根据75 g口服葡萄糖耐量(OGTT)结果将135名孕周为36～41周的孕妇分为3组:妊娠期糖尿病(GDM)组(45例)、糖耐量异常(GIGT)组(45例)、正常糖耐量(NGT)组(45例)。检测各组血清AHSG、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、空腹血脂([总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)]水平并计算体重指数(BMI)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)。结果 GDM组、GIGT组、NGT组的AHSG浓度分别为150.2±20.0、131.9±16.0(、124.0±15.0)μg/L,3组之间差异均有统计学意义(P<0.05)。GDM组FPG、TG、LDL-C、FINS水平均高于NGT组(P<0.05、P<0.01),HDL-C水平低于NGT组(P<0.05);GDM组TG、FINS水平高于GIGT组(P均<0.05、P<0.01);GIGT组TG、LDL-C、FINS高于NGT组(P<0.05、P<0.01);3组之间TC水平差异无统计学意义(P>0.05)。NGT组、GIGT组、GDM组HOMA-IR逐渐升高、HOMA-β逐渐下降3,组之间差异均有统计学意义(P<0.05)。AHSG浓度与BMI、TG、FINS、HOMA-IR呈正相关[相关系数(r)分别为0.406、0.503、0.533、0.612,P均<0.05],与HDL-C、HOMA-β呈负相关(r分别为-0.321、-0.589,P均<0.05),与FPG、TC无相关性(r分别为0.0580、.095,P均>0.05)。结论 AHSG在GDM患者的血糖、血脂代谢中发挥重要作用。AHSG参与了胰岛素抵抗、加重了β细胞损害,与GDM的发病关系密切。

α2-Heremans-Schimid糖蛋白基因多态性与脑梗死相关性的探讨

目的探讨α2-Heremans-Schimid-糖蛋白（AHSG）的5个单核苷酸多态性位点（rs4917、rs4918、rs1071592、rs2070633、rs2070635）与脑梗死的相关性。方法采用直接测序法对200例脑梗死患者及100例健康对照者进行5个多态性位点检测，检测结果以Hardy-Weinberg平衡检验观察样本是否具有群体代表性。χ2检验对计量资料、基因型和等位基因频率分布进行检验。基因型和等位基因风险率采用相对危险度（OR）表示。结果AHSG基因的rs4917位点的CC、CT、TT基因型在脑梗死组和对照组间比较差异无统计学意义（χ2＝5．243，P＝0．079）。CC基因型频率在脑梗死组显著高于对照组（χ2＝5．230，P＝0．027），CC基因型患脑梗死风险较CT＋TT基因型高（OR＝1．758，95％CI1．082-2．856）。C等位基因频率在两组间比较差异有统计学意义（χ2＝4．758，P＝0．032，OR＝1．492，95％CI1．040-2．139）。rs4918位点的CC、CG、GG基因型在脑梗死组和对照组间比较差异有统计学意义（χ2＝7．335，P＝0．024）。GG基因型频率在脑梗死组显著高于对照组（χ2＝5．055，P＝0．028），GG基因型患脑梗死风险较CG＋CC基因型高（OR＝2．965，95％CI1．106-7．953）。G等位基因在脑梗死组中的频率高于对照组，但差异无统计学意义（χ2＝0．408，P＝0．566）。rs1071592位点的CC、AC、AA基因型在脑梗死组和对照组间比较差异无统计学意义（χ2＝5．375，P＝0．065）。AA基因型频率在脑梗死组显著高于对照组（χ2＝4．615，P＝0．037），AA基因型患脑梗死风险较AC＋CC基因型高（OR＝3．593，95％CI1．041-12．394）。A等位基因在脑梗死组中的频率高于对照组，但差异无统计学意义（χ2＝0.942，P＝0．351，OR＝1．229，95％CI0．810-1．864）。两组rs2070633、rs2070635位点基因型及等位基因频率分布及相对风险分析比较差异无统计学意义（P＞0．05）。结论AHSG基因rs4917位点CC基因型与C等位基因、rs4918位点GG基因型、rs1071592位点AA基因型可能增加人群患脑梗死的风险，其中rs4917位点C等位基因可能是脑梗死的易感基因。

当归对自发性高血压大鼠脑组织Tnfaip8l2、Ahsg及Tlr3基因表达的影响

目的探讨当归对自发性高血压(SHR)大鼠脑组织肿瘤坏死因子α诱导蛋白8样蛋白(Tnfaip8l2)、α2-HS糖蛋白(Ahsg)及Toll样受体3(Tlr3)基因表达谱的影响。方法将SHR大鼠分为当归组、模型组,并将同周龄的Wistar大鼠作为对照组。测定用药前后各组尾动脉收缩压;分组灌胃给药4周后,取大鼠脑组织,提取RNA进行表达谱的测定。结果当归可降低SHR大鼠的血压水平;同时基因表达谱分析显示当归可导致Tnfaip8l2、Ahsg及TLR3基因表达上调,且为差异表达上调基因,而这三个基因均为动脉粥样硬化抑制因子。结论当归具有一定的降压作用,并对SHR脑组织基因表达谱产生影响,通过抑制动脉粥样硬化的发生发挥作用。

不同肾功能2型糖尿病患者血浆α2-HS-糖蛋白与下肢动脉粥样硬化的相关性研究

目的探讨不同肾功能状态下T2DM患者血浆α2-HS-糖蛋白(AHSG)水平与下肢动脉粥样硬化(AS)程度的关系及其相关因素分析。方法 T2DM患者226例,按肾小球滤过率估计值(eGFR)分为肾功能正常组(A组),肾功能轻度下降组(B组),肾功能中重度下降组(C组)。所有患者采用彩色多普勒超声仪进行双下肢AS检查,并通过ELISA法进行血浆AHSG水平检测,分析不同肾功能状态下二者的关系。结果 (1)C组下肢AS发生率和评分高于A、B组,血浆AHSG水平低于A、B组,差异均有统计学意义(P<0.01)。(2)A、B组血浆AHSG水平与下肢AS评分无相关性(P>0.05),C组中二者呈正相关(r=0.592,P<0.01)。(3)逐步回归分析显示C组HbA1c、TC、TG、eGFR、AHSG是下肢动脉硬化程度的影响因素(P<0.05或P<0.01)。结论在肾功能中、重度下降时血浆AHSG水平是衡量T2DM下肢AS严重性的指标之一。

老年男性动脉硬化及骨质疏松症与AHSG基因多态性的关系

目的探讨老年男性α2-HS糖蛋白（AHSG）基因多态性与动脉硬化、骨质疏松、血脂以及血清骨相关生化指标的关系。方法用ELISA法测定208名老年男性患者的骨特异性碱性磷酸酶（BAP）、I型胶原羧基末端肽、I型胶原氨基末端肽和护骨素及瘦素的浓度；对患者基因组的DNA样品作限制性内切酶SacI的PCR-RFLP检测以确定其基因型，全自动生化仪酶法测定血清TC、TG、HDL-C、LDL—C，电极法测定血钙，DXA测定腰椎正位、仰卧侧位腰椎和股骨颈的骨密度（BMD）。GG基因型患者做骨组织病理活检，彩色超声诊断仪测定颈动脉内中膜厚度（IMT）。结果（1）老年男性患者AHSG基因CC型，CG型和GG型分布频率分别为60．2％，26．2％和13．6％。不同基因型血脂、血钙和骨生化指标有明显差异；（2）协方差分析显示老年男性不同AHSG基因型在正侧位腰椎、股骨颈的BMD和IMT差异有显著统计学意义；（3）GG型老年男性患者骨组织病理切片和彩超验证了AHSG多态性基因变异与动脉硬化、骨质疏松发生发展的相关性。结论AHSG基因多态性变异与老年男性血脂、血钙、血清骨生化指标差异，以及动脉硬化和骨质疏松的发病密切相关。

子宫内膜异位症、子宫肌瘤患者AHSG基因多态性的研究

目的:研究α2-HS糖蛋白(AHSG)基因第七个外显子中Sac I位点多态性在子宫内膜异位症、子宫肌瘤患者及正常人中的分布。方法:应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术检测98名子宫内膜异位症患者与97名子宫肌瘤患者及99名健康成年女性的AHSG基因第七个外显子中Sac I位点多态性,比较三组AHSG基因型和等位基因的分布频率。结果:GG、GC和CC基因型在子宫内膜异位症患者中分别为32.65%、57.14%、10.20%,在子宫肌瘤患者中分别为75.26%、22.68%、2.06%,在健康成年女性中分别为74.75%、23.23%、2.02%。子宫内膜异位症组与子宫肌瘤组及健康成年女性组基因型的分布频率差异有显著性,而子宫肌瘤组与健康成年女性组无显著性差异。结论:AHSG基因第七个外显子中Sac I位点多态性分布与子宫内膜异位症的发病具有一定程度的相关性,而与子宫肌瘤的发病无相关性。

AHSG和IL-6基因多态性与子宫内膜异位症相关性的研究

目的:研究α2-HS糖蛋白(AHSG)基因第七个外显子中SacI位点和白细胞介素-6(IL-6)基因调控区-572位点的多态性与育龄妇女子宫内膜异位症遗传易感性的关系。方法:采用病例对照研究的方法,以98例子宫内膜异位症患者与99名健康成年女性外周血白细胞为样本,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术检测两组的AHSG基因第七个外显子中SacI和白细胞介素-6基因启动子-572位点多态性,比较两组各自的基因型和等位基因的分布频率。结果:IL-6基因调控区-572位点的CC、CG和GG基因型在子宫内膜异位症患者中分别为55·10%、42·86%、2·04%,在健康成年女性中分别为70·71%、28·28%、1·01%。两组的分布频率差异有显著性。AHSG基因第七个外显子SacI位点的GG、GC和CC基因型在子宫内膜异位症患者中分别为32·65%、57·14%、10·20%,在健康成年女性中分别为74·75%、23·23%、2·02%。两组的分布频率差异有显著性。结论:①IL-6基因调控区及AHSG基因第七个外显子中SacI位点的基因多态性与子宫内膜异位症的发病具有一定程度的相关性;②IL-6中C/C及AHSG中G/G均为子宫内膜异位症的保护基因;③两基因变异在子宫内膜异位症的发病中可能有协同作用。

急性胰腺炎与分子水平标志物研究进展

目前临床上主要通过血尿淀粉酶、血清脂肪酶、炎症指标等实验室检测结果和腹部B超、CT等影像学检查诊断评估急性胰腺炎。与传统的诊断评估方法相比,分子生物学的快速发展为急性胰腺炎早期诊断和病情评估提供了新的思路途径。本文对国内外急性胰腺炎的新型生物分子标志物的研究进展进行综述。

子宫内膜异位症患者AHSG基因突变及芳香酶P450表达的相关性研究

目的：探讨子宫内膜异位症患者α2-Hs-糖蛋白（AHSG）基因突变及芳香酶P450在子宫内膜异位症患者内膜的表达。方法：以50例Ⅳ期子宫内膜异位症患者（评分〉40）及62例非子宫内膜异位症对照者的外周血白细胞为样本，利用聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PER）技术分析了α2-Hs-糖蛋白（AHSG）基因突变。取对照组在位子宫内膜及Ⅳ期子宫内膜异位症患者在位及异位子宫内膜为标本，采用免疫组织化学方法测定各组内膜组织腺细胞中芳香酶P450的表达，根据阳性率和表达强度进行量化评分（组织化学评分）。结果：Ⅳ期子宫内膜异位症组中AHSG基因的三种基因型野生型（wide—type，W）、杂合型（wide—mutation，WM）、突变型（mutate—type，M）各占44％；46％、10％，而对照组则分别为71％、25．8％、3．2％。将突变型与杂合型合并与野生型比较，两组间差异有显著性（Χ^2=8．317，P=0．004），其OR为3．111（95％CI为1．422—6．805），携带变异基因的患病风险率高。AHSG＊1、AHSG＊2等位基因频率总体分布差异有显著性（Χ^2=8．723，P=0．003），携带AHSG＊2等位基因患病危险度高，OR为2．561（95％CI为1．358—4．831）。Ⅳ期子宫内膜异位症组在位子宫内膜腺胞芳香酶P450的表达为（2．1±1．2）分，显著高于对照组为（0．9±1．1）分，两组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。Ⅳ期子宫内膜异位症组异位内膜腺胞芳香酶P450的表达为（1．5±1．0）分，显著低于在位子宫内膜组，两组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：AHSG＊2基因可使患Ⅳ期卵巢子宫内膜异位囊肿的遗传易感性升高。子宫内膜异位症患者在位、异位内膜腺细胞芳香酶P450表达增加，可促进异位病灶的生长，表达不同反映了不同类型的子宫内膜异位症组织雌激素调节水平不同。

B7-H4在肾癌组织中表达的意义及其机制研究

目的探究B7-H4在肾癌组织中表达的意义及其机制。方法选择初诊肾细胞癌患者50例设为研究组，取10例健康人肾脏组织做对照组，构建人B7-H4重组逆转录病毒（pEGZHA-Term）载体，将载体转染L929细胞。将转基因细胞与T细胞共同培养，用空白T细胞做对照。用流式细胞仪检测B7-H4对T细胞增殖和凋亡的影响；研究B7-H4在正常肾脏与肾癌中的差异。结果研究组白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素IL-4、白细胞介素IL-10和干扰素-α（IFN-α）分别为（65．16±8．18）、（96．57±25．56）、（57．35±4．58）、（66．48±13．25）ng／L，对照组分另1为（82．88±9．75）、（73．82±22．92）、（53．84±9．10）、（92．25±18．45）ng／L，两组差异均有统计学意义（均P〈0．01）。结论B7-H4的过分表达可能是决定肿瘤发生和预后的重要因素，B7-H4是T细胞的一个强有力的减弱因子。