重组人干扰素α2a联合微波治疗慢性宫颈炎合并人乳头瘤病毒感染患者的效果

目的:观察重组人干扰素α2a联合微波治疗慢性宫颈炎合并人乳头瘤病毒(HPV)感染患者的效果。方法:回顾性分析2022年11月至2023年11月该院收治的126例慢性宫颈炎合并HPV感染患者的临床资料,按照治疗方法不同将其分为对照组和观察组各63例。对照组采用微波治疗,观察组在对照组基础上联合重组人干扰素α2a栓治疗,两组均连续治疗3个月。比较两组临床疗效,症状相关指标(创面愈合时间、排尿正常时间、阴道分泌物正常时间)水平,治疗前后阴道微生态指标(阴道pH值、乳酸杆菌异常率)、炎性因子[白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-12(IL-12)、γ干扰素(IFN-γ)]水平,HPV转阴率,以及不良反应发生率。结果:观察组治疗总有效率为95.24%(60/63),高于对照组的77.78%(49/63),差异有统计学意义(P<0.05);观察组创面愈合时间、排尿正常时间、阴道分泌物正常时间均短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,观察组阴道pH值、乳酸杆菌异常率均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,观察组IL-4水平低于对照组,IL-12、IFN-γ水平高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组HPV转阴率为65.08%(41/63),高于对照组的34.92%(22/63),差异有统计学意义(P<0.05);两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:重组人干扰素α2a联合微波治疗慢性宫颈炎合并HPV感染患者可提高治疗总有效率和HPV转阴率,改善症状相关指标、炎性因子水平,降低阴道微生态指标水平,效果优于单纯微波治疗。

重组人干扰素-α2a(IFN-α2a)的圆二色谱分析

目的:研究测量温度和蛋白质浓度对重组人干扰素-α 2a(rhIFN-α 2a)圆二色谱的影响,进而研究对 rhIFN-α 2a 二级结构比例的影响。方法:分别研究了测量温度和蛋白质浓度对 rhIFN-α 2a 圆二色谱的影响,另外还对不同厂家、不同批次的4批 rhIFN-α 2a 的圆二色谱进行了比较。结果:测量温度在60～95℃之间,rhIFN-α 2a 圆二色谱的形状发生改变,三级结构遭到破坏,二级结构发生改变;在5～60℃温度区间,二级结构相对稳定。rhIFN-α2a 的各二级结构比例在1.5～0.006nag·mL^(-1)范围内相对稳定。不同厂家、不同批次的4批 rhIFN-α 2a 的圆二色谱形状基本一致,4种二级结构的比例相近。结论:在一定的温度和浓度范围内,rhIFN-α 2a 的圆二色谱相对稳定,且不同批次的测量结果具有很好的一致性。圆二色谱可用于蛋白质类药物的质量控制。

基因工程人干扰素α2b和α2a亚型抗病毒效应的实验研究

本文采用鸡胚接种法和微量细胞病变抑制法研究了不同亚型α干扰素（α２ａＩＦＮ和α２ｂＩＦＮ）抗流感病毒、脊髓灰质炎病毒以及麻疹病毒的作用。结果表明：两种亚型α干扰素均显示明显的抗病毒效应，其中（１）α２ｂＩＦＮ抗流感病毒作用略强于α２ａＩＦＮ，（２）两亚型α干扰素抗脊髓灰质炎和麻疹病毒作用相似。

siRNA沉默SOCS1表达增强IFN-α2a-NGR的抗肿瘤效应

目的:研究肿瘤血管导向性干扰素IFN-α2a-NGR抗肿瘤效应的分子机制,发现影响干扰素敏感性的关键信号分子,提高耐药肿瘤细胞敏感性。方法:培养IFNAR高表达细胞株A549、IFNAR低表达细胞株MKN-45,通过MTT检测IFN-α2a-NGR的抗细胞增殖活性,流式细胞术(FCM)、Western blot检测IFN-α2a-NGR处理前后STAT1、p-STAT1、p53、OAS与SOCS1的表达变化,合成siRNA靶向干涉SOCS1。结果:IFN-α2a-NGR刺激后,A549中,p-STAT1、p53、OAS与SOCS1表达上调;MKN-45中P53、OAS无显著变化,SOCS1显著上调。靶向干涉SOCS1后,MKN-45对IFN-α2a-NGR的敏感性增加[抑制率从(14.69±1.05)%提高到(36.97±2.05)%]。结论:IFN-α2a-NGR与IFN-α2a在细胞和分子水平的效应基本一致,p-STAT1、p53与SOCS1可影响细胞对干扰素的敏感性,通过siRNA沉默技术可提高耐药细胞株敏感性,为IFN-α2a-NGR的进一步研发奠定了基础。

用单克隆抗体3F1亲和层析纯化rHuIFN-α2a的研究

采用淋巴细胞杂交瘤技术，制备了针对ｒＨｕＩＦＮα２ａ的单克隆抗体（ｍＡｂ）杂交瘤细胞系３Ｆ１，对ｍＡｂ３Ｆ１识别ｒＨｕＩＦＮα２ａ表位、中和活性等特点进行了研究，并与ＣｅｌＴｅｃｈ公司的ｍＡｂＮＫ２做了平行比较。发现ｍＡｂ３Ｆ１与ｍＡｂＮＫ２均具有中和ｒＨｕＩＦＮα２ａ活性的作用，但二者识别ｒＨｕＩＦＮα２ａ分子的表位不同，表明在ｒＨｕＩＦＮα２ａ分子上至少有２个中和性表位。进一步研究发现，ｍＡｂ３Ｆ１具有良好的用于亲和层析纯化ｒＨｕＩＦＮα２ａ的性能，每毫升湿胶可回收０．８ｍｇ１．０ｍｇｒＨｕＩＦＮα２ａ，纯度达９５％以上，生物学活性达２×１０１１ｕ／ｇ，且ｍＡｂ３Ｆ１有助于ｒＨｕＩＦＮα２ａ的复性。提示ｒＨｕＩＦＮα２ａ分子上的中和性表位，在与ｍＡｂ３Ｆ１的结合和解离过程中。

重组人干扰素α2a注射剂评价性抽验结果与质量分析

目的:评价国产重组人干扰素α2a注射剂的质量现状及存在问题。方法:采用法定检验方法结合探索性研究进行样品检验,统计分析检验结果,对国产重组人干扰素α2a注射剂的质量现状进行评价。结果:法定检验显示28批成品全部合格,7批原液全部合格(部分检验)。探索性研究显示若在成品中增加比活性测定,则合格率为87.0%,若在原液中增加相关蛋白含量测定,则合格率为57.1%。结论:该品种总体质量状况良好,现行检验标准基本可行,但有待提高,建议在成品中增加比活性检测,在原液中增加相关蛋白含量检测。

双黄连对α2a-干扰素抗柯萨奇病毒的协同作用

目的 :探讨双黄连对rIFN α2a抗柯萨奇病毒的影响。方法 :采用微量细胞病变抑制法在Wish和Vero细胞上进行双黄连、rIFN α2a及两者联用抗柯萨奇病毒 (CVB3 )的实验研究。结果 :两药联用抗柯萨奇病毒呈明显协同作用 ;0 .12 5mg·ml-1的双黄连可使干扰素 (rIFN α2a)在Wish和Vero细胞上抗柯萨奇病毒的效价提高 2 .5 8倍左右。结论 :该结果为临床中西医结合治疗柯萨奇病毒感染提供新的配伍。

恩替卡韦联合聚乙二醇干扰素α2a治疗乙型病毒性肝炎的效果及对患者血清YKL-40、CEA水平的影响

目的探讨恩替卡韦联合聚乙二醇干扰素α2a治疗乙型病毒性肝炎的效果及对患者血清人软骨糖蛋白-39(YKL-40)、癌胚抗原(CEA)水平的影响。方法选取2016年5月至2017年4宜宾市第二人民医院传染一科收治的慢性乙型病毒性肝炎患者82例,采用随机数表法分为对照组和观察组,每组41例,对照组患者予以聚乙二醇干扰素α2a治疗,观察组患者在此基础上加用恩替卡韦治疗,两组均连续治疗12个月。比较两组患者的临床疗效、HBVDNA转阴情况和并发症发生率,以及治疗前后两组患者的血清YKL-40、CEA、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及肝功能水平。结果观察组患者的治疗总有效率为95.13%,明显高于对照组的56.10%,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗后,观察组和对照组患者的血清YKL-40[(26.62±19.51)ng/mLvs(36.55±20.61)ng/mL]、CEA[(1.13±0.07)μg/Lvs(1.20±0.09)μg/L]、TNF-α[(59.18±7.38)ng/Lvs(80.37±10.06)ng/L]、ALT[(60.07±8.38)U/Lvs(72.48±9.08)U/L]、AST[(52.09±6.48)U/Lvs(73.28±9.19)U/L]水平比较,观察组均明显低于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05);治疗后,观察组患者的HBVDNA转阴率为43.9%,明显高于对照组的4.88%,差异具有统计学意义(P<0.05);两组患者的腹水、肺部感染、自发性腹膜炎、肝性脑病、肝肾综合征及胆囊炎发生率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论恩替卡韦联合聚乙二醇干扰素α2a治疗乙肝可提升治疗效果,同时抑制患者YKL-40、CEA、TNF-α的表达,可能是改善肝功提高患者转阴率的关键所在。

α2A-肾上腺素受体的同源模建及与Yohimbine的对接研究

通过对比多个与α2A-肾上腺素受体同属G-蛋白偶联受体的视紫红质蛋白序列,选择以相似性最大的牛视紫红质蛋白为模板,同源模建了α2A-肾上腺素受体的跨膜结构,并在结构中找到了体积为0.090nm3,已被报导的活性残基包围的活性位点.运用分子力学与动力学方法研究了此结构突变前后与抑制剂Yohimbine的对接情况,得到了与文献报道相吻合的结果.同时对接研究结果发现,在α2A-肾上腺素受体的结合位点周围的一个由色氨酸和两个苯丙氨酸组成的局部疏水区对抑制剂有稳定作用,并且天冬氨酸113作为氢键受体也对稳定抑制剂有重要作用.

用生物传感器测定重组人α2a-干扰素单克隆抗体的亲和力及抗原识别表位

目的 :测定抗重组人α2a 干扰素单克隆抗体的抗原识别表位及其亲和常数。方法 :借助于生物传感器技术进行抗原抗体相互作用的动力学分析。结果 :抗体的亲和常数介于 10 -5～ 10 -7之间 ,5株抗体识别干扰素分子上 4种不同的抗原表位。结论 :生物传感器在研究抗原抗体相互作用中确为一个理想的工具 。

人α2a干扰素酵母工程菌高产培养条件的研究

研究了摇瓶培养条件对人α2 a干扰素酵母工程菌生长及表达的影响 ,结果表明 ,当基础料中腺嘌呤含量为 2 0μg/m L,在发酵进行至 1 2 h时再加入 2 0μg/m L腺嘌呤时 ,IFN-α2 a生物活性及比活分别达到了 7.3× 1 0 6IU/m L及 6 .77× 1 0 7IU/mg。发酵过程中后期补入适量葡萄糖 ,且维持低糖水平 ,有利表达。维持总碳源含量不变 ,使培养基中葡萄糖与蔗糖比例为 1∶ 0 .1 ,结果 IFN- α2 a生物活性及比活分别比对照增加了一倍以上。在发酵进行至 1 2 h时 ,加入 2 g/L谷氨酸 ,IFN-α2 a生物活性及比活分别比对照提高了 1 .76倍及 1 .94倍 ,而添加 0 .2 5～ 1 .0 g/L赖氨酸也能显著提高表达水平。培养基初始 p H对产物表达有较大影响 ,初始 p H为 6 .5时 ,对表达最有利。利用上述摇瓶培养优化条件 ,在 2 .6 L 生物反应器中进行补料分批培养 ,人 α2 a干扰素生物活性达到了1 .3× 1 0 7IU/m L,为原工艺的 3倍。

重组人干扰素α2a栓联合黄芪生脉饮治疗子宫颈HPV感染疗效观察

目的观察重组人干扰素α2a栓联合黄芪生脉饮治疗子宫颈人乳头瘤病毒(HPV)感染的临床疗效。方法将80例子宫颈HPV感染患者随机分为治疗组与对照组各40例,2组均常规给予西药重组人干扰素α2a栓置入阴道内治疗,隔日1次;治疗组在此基础上给予中药黄芪生脉饮口服,3次/d。2组均以连续治疗2周为1个疗程,治疗3个疗程后评价临床疗效。结果治疗后2组各项中医症候积分均明显降低(P均<0.05),且治疗组较对照组降低更明显(P<0.05);治疗组中医症候疗效愈显率及综合疗效愈显率均明显高于对照组(P均<0.05);2组治疗期间不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论重组人干扰素α2a栓联合黄芪生脉饮治疗子宫颈HPV感染疗效理想,可有效缓解临床症状体征,促进HPV转阴,安全性高,值得推广应用。

重组IFN-α2a与HSV-tk/GCV系统协同作用增强对于卵巢癌细胞系SKOV3杀伤作用的体外研究

目的 :观察应用重组IFN α2a能否增强单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激酶基因 (HSV tk) /丙氧鸟苷 (GCV)系统对卵巢癌细胞系SKOV3的杀伤效应。方法 :利用逆转录病毒载体将潮霉素磷酸转移酶和HSV tk的融合基因 (hytk)导入SKOV3细胞 ,测定GCV对SKOV3/hytk细胞的杀伤作用和旁观者效应。观察IFN α2a与HSV tk/GCV协同作用对旁观者效应的影响 ,并且在联合应用GCV和IFN α2a后 ,进行细胞周期分析。结果 :GCV对SKOV3/hytk细胞有明显的杀伤作用 ,并且可以同时杀伤周围未转基因的细胞 ,联合应用IFN α2a与HSV tk/GCV可以明显增强旁观者效应 (P <0 .0 5 ) ,使处于S期的SKOV3/hytk细胞较对照组和使用单药组明显增多 (P <0 .0 1)。结论 :IFN α2a与HSV tk/GCV联合应用可以产生协同作用 ,增强HSV tk/GCV系统在体外对卵巢癌细胞系SKOV3的杀伤效应 。

电针预处理联合α2AR激动剂对围手术期心率变异性的影响

目的观察电针预处理联合α2肾上腺素能受体(α2AR)激动剂对围手术期患者心率变异性的影响。方法将择期行下肢骨科手术患者120例,采用查随机数字表法随机均分为4组,对照组(A组)、电针组(C组)、α2AR组(D组)和针药复合组(N组),每组30例。记录4组术前1 d、术后1 d HRV各项指标,具体为SDNN、SDANN、rMSSD、pNN50、LF、HF、LF/HF及TP;同时记录插管前(T0)、插管后即刻(T1)、插管后5 min(T2)、拔管后即刻(T3)、拔管后5 min(T4)、拔管后60 min(T5)、拔管后180 min(T6)患者平均动脉压(MAP)、心率(HR)的变化情况。结果N组各时点HR、MAP与T0比较差异无统计学意义(P>0.05),A组T1~T6时点HR、MAP较T0明显升高(P<0.05),C组、D组T1~T4时点HR、MAP较同组T0明显升高(P<0.05);N组T1~T6时点HR、MAP明显低于A组(P<0.05),T1~T4时点HR、MAP明显低于C、D组(P<0.05);C组、D组T5、T6时点HR、MAP明显低于A组(P<0.05)。与术前1 d比较,A组术后1 d LF、HF、LF/TF、TP均明显增高(P<0.05),A组、D组术后1 dSDDN、SDANN、rMSSD、pNN50明显降低(P<0.05);C组、D组、N组术后1 dLF、HF、LF/TF、TP较A组均显著降低(P<0.05);C组、N组术后1 dSDDN、SDANN、rMSSD、pNN50较A组、D组均显著升高(P<0.05)。结论电针预处理联合α2AR激动剂改善心脏交感/迷走神经的平衡状态,更好地维持围手术期血流动力学稳定。

重组人干扰素α2a栓剂与微波治疗慢性宫颈炎合并HPV效果

目的观察慢性宫颈炎合并高危型HPV感染患者采取重组人干扰素α2a栓剂联合微波治疗效果。方法本次实验对象为2017年1月—2018年12月本院接收的89例慢性宫颈炎合并高危型HPV患者,随机划分为两组,对照组(n=44)开展单一的微波治疗方案,研究组(n=45)实施重组人干扰素α2a栓剂联合微波治疗方案,统计各组治疗效果、生活质量及HPV阳性状况。结果在治疗总有效率及HPV阳性率方面,对照组分别是77.27%和15.91%;研究组分别是95.56%和2.22%,研究组相比于对照组更优,差异有统计学意义(P <0.05);在社会功能、情感职能、生理功能、生理职能、总体健康、躯体疼痛、活力、精神健康评分方面,相比于对照组,研究组更高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论慢性宫颈炎合并高危型HPV感染疾病治疗期间,应用重组人干扰素α2a栓剂联合微波治疗效果更为明显,其有助于患者临床病症及早改善,促进其生活质量的提高。

肿瘤血管导向性干扰素IFN-α2a-NGR与5-氟尿嘧啶联合应用对A549细胞增殖的影响

目的:观察重组蛋白肿瘤血管导向性干扰素IFN-α2a-NGR与化疗药物5-氟尿嘧啶联合使用在体外对人非小细胞肺癌细胞株A549的作用,为IFN-α2a-NGR的临床实验设计提供实验依据。方法:不同浓度的肿瘤血管导向性干扰素IFN-α2a-NGR、5-氟尿嘧啶单独及联合作用于细胞株A549,通过MTT法检测单药及联合用药对细胞增殖的影响,经AnnexinⅤ-FITC细胞凋亡检测试剂盒染色、流式细胞术检测细胞凋亡情况,荧光显微镜观察药物作用的细胞形态。结果:IFN-α2a-NGR与5-氟尿嘧啶联合作用于A549细胞株时,其细胞增殖抑制率、细胞凋亡率均较单独作用时高,具有统计学显著性差异(P<0.05);荧光显微镜观察可见药物作用后细胞形态改变。结论:肿瘤血管导向性干扰素IFN-α2a-NGR与5-氟尿嘧啶联合使用具有协同抑制肿瘤细胞增殖的作用。

聚乙二醇干扰素α2a联合替诺福韦对耐药性乙肝患者肝功能及HBV-DNA转阴率的影响

目的探讨聚乙二醇干扰素α2a联合替诺福韦对耐药性乙肝患者肝功能及乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBVDNA)转阴率的影响。方法方便选取该院2015年3月—2017年8月收治的76例耐药性乙肝患者以随机数字表法分组,观察组与对照组各38例,对照组采用替诺福韦治疗,观察组采用聚乙二醇干扰素α2a联合替诺福韦治疗,对两组疗效、肝功能、HBV-DNA转阴率、不良反应发生率进行观察。结果观察组与对照组治疗总有效率分别为89.47%、68.42%,两组差异有统计学意义(χ~2=5.067,P<0.05);观察组治疗后的各肝功能指标均优于对照组,差异有统计学意义(t=10.058、10.401、10.453,P<0.05),;观察组患者HBV-DNA转阴率为76.32%,明显较对照组52.63%高,差异有统计学意义(χ~2=4.653,P<0.05),两组不良反应发生率差异无统计学意义(χ~2=0.350,P>0.05)。结论聚乙二醇干扰素α2a联合替诺福韦治疗耐药性乙肝能改善患者肝功能,提高HBV-DNA转阴率,值得推广。

阿德福韦酯联合干扰素α2a治疗乙型肝炎病毒临床观察

目的了解阿德福韦酯联合干扰素α2a抗乙型肝炎病毒的治疗效果。方法选择52例慢性乙型肝炎患者(联合治疗组),口服阿德福韦酯10mg/d,疗程12个月,同时肌注干扰素α2a500万u/d,连用20天后改为隔日肌注1次,疗程6个月。25例乙型肝炎患者单服阿德福韦酯;26例乙型肝炎患者单用干扰素α2a,疗程、用法、用量同联合治疗组。乙型肝炎病毒标志采用酶联免疫吸附法检测,HBVDNA采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测。结果联合治疗组HBV DNA、HBeAg、HBsAg、ALT阴转率均高于单用阿德福韦酯或干扰素α2a(P<0.05或0.01)。结论阿德福韦酯联合干扰素α2a抗乙型肝炎病毒优于单一用药。

替诺福韦联合聚乙二醇干扰素α2a治疗慢性乙型肝炎大三阳的疗效及转阴率

目的:观察替诺福韦联合聚乙二醇干扰素α2a治疗慢性乙型肝炎(简称乙肝)大三阳的疗效及转阴率。方法:选取100例慢性乙型肝炎大三阳患者为研究对象,并采用双盲法将其分为单一组与联合组各50例。单一组采用单一替诺福韦治疗,联合组采用替诺福韦联合聚乙二醇干扰素α2a治疗,比较两组的临床疗效、治疗前后血清肝功能指标和大三阳三项转阴率。结果:治疗后,联合组的临床总有效率(84.00%)明显高于单一组(66.00%),差异有统计学意义(P<0.05);联合组的天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、总胆红素(TBIL)水平明显低于单一组,差异有统计学意义(P<0.05);且联合组的乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝e抗原(HBeAg)、乙肝核心抗体(抗HBC)转阴率均明显高于单一组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在慢性乙型肝炎大三阳患者中采用替诺福韦联合聚乙二醇干扰素α2a治疗,能有效改善其肝功能,提高临床疗效,并促进大三阳三项转阴。

酿酒酵母重组人α2a干扰素补料分批培养

在 2 .6L全自动发酵罐中对人 α2 a干扰素重组酵母的补料分批培养过程作了初步研究。结果表明 ,培养过程中待葡萄糖耗尽时流加葡萄糖 ,并维持低糖浓度 ;在培养 1 0 h～ 2 0 h时 ,恒速流加 2 0 mg/L的腺嘌呤 ,能较大幅度提高表达水平 ,生物活性从原工艺的 3.1× 1 0 9IU/L提高至1 .3× 1 0 10 IU/L。表达期 p H值对生产水平有很大影响 ,宜控制在 5.0～ 5.