靶向CD151-整合素α6β1结合域的多克隆抗体的制备及初步应用

目的:制备CD151-整合素α6β1结合域的多克隆抗体,探讨其免疫学特性。方法:化学合成CD151-整合素α6β1结合域的多肽CGQRDHASNIYKVEG-KLH,以此多肽免疫BALB/c小鼠,制备多克隆抗体。采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定该抗体的效价,采用Western blotting、细胞免疫荧光染色、免疫组织化学染色的方法鉴定抗体+++。结果:成功获得抗CD151-整合素α6β1结合域的多克隆抗体,ELISA试验显示该抗体效价为1:64000,Western blotting结果显示该抗体有较好的特异性,细胞免疫荧光染色和免疫组织化学染色显示阳性染色定位于肝癌细胞膜和细胞浆。结论:制备的抗CD151-整合素α6β1结合域的多克隆抗体具有较高的效价和特异性,可用于Western blotting、细胞免疫荧光染色和免疫组织化学染色等试验,该多克隆抗体对肝癌抗复发的治疗具有重要意义,值得进一步研究。

整合素α6β1与Ang-1/Tie-2对脑缺血血管神经再生的研究

临床研究结果表明,脑缺血后的血管新生可改善缺血组织的血供,也可明显促进神经功能的恢复,但神经血管再生相互联系的调控机制亟待进一步的深入研究。整合素α6β1可通过介导细胞粘附影响内皮细胞迁移、血管管型结构的生成及维持血管稳定性等来调控血管及神经再生;Ang-1/Tie2信号通路参与血管生成的最后阶段,促进损伤神经功能的恢复,在血管新生、神经再生中发挥重要的作用。活血化瘀类中药通过血管生成素和整合素通路干预可促进血管生成,提高脑血流量,改善神经功能。通过查阅近年来国内外有关的文献,分析整合素α6β1与Ang-1/Tie2通路在脑卒中后血管及神经再生中的作用及中医药的干预,旨在为临床脑缺血性疾病的治疗提供新的思路和靶点。

以“dominant negative”策略消除人肝癌细胞表面层粘连蛋白受体α6β1的功能

选用高表达 α6β1并主要借其介导细胞在层粘连蛋白 ( laminin,LN)基质上粘附和铺展的肝癌细胞系 Bel740 2 ,采用“dominant negative”策略消除细胞表面 α6β1受体的功能 ,以研究 α6β1在人肝癌细胞生物学行为中的作用 .用缺失胞质功能域的 β4亚单位 c DNA( β4- tr)转染细胞 ,其表达产物β4- TR可以和α6高亲和性竞争性地结合 ,形成因β4- TR缺失胞质功能域而无生物学功能的α6β4- TR二聚体 ,取代α6β1 .结果显示在转染β4- tr的 Bel740 2细胞表面可以检测到大量的β4- TR,与内源性α6结合形成α6β4- TR二聚体 ,而细胞表面α6β1受体降至极低水平 .细胞在 LN基质上的铺展率降低 ,表明

整合素α6β1与CD151在宫颈癌病理组织中的表达及意义

目的:探讨整合素α6β1和CD151蛋白在宫颈癌组织中的表达情况及其与临床资料的关系。方法:利用免疫组化法检测宫颈癌病理组织中整合素α6β1和CD151的表达,并分析与肿瘤组织分化及淋巴转移的关系。结果:整合素α6β1和CD151在癌变组织中的表达明显高于癌旁组织(P<0.05);且随着宫颈癌组织分化程度的增高而降低(P<0.05)。此外,整合素α6β1和CD151在伴发淋巴转移组织中的表达明显高于无淋巴转移组织(P<0.05)。结论:整合素α6β1和CD151蛋白参与了宫颈癌的发生发展,对分化程度和淋巴结转移的诊断有一定的参考意义。

四跨膜蛋白CD151与整合素α6β1在宫颈癌中的表达及其与淋巴结转移的相关性研究

目的研究四跨膜蛋白CD151与整合素α6β1在宫颈癌(CC)中的表达及其与淋巴结转移的相关性。方法选取2010年1月-2014年5月我院CC根治术(广泛子宫切除+盆腔淋巴结清扫术)切除标本,经病理证实为CC组织50例。采用免疫组化方法检测癌旁正常组织、CC原发灶和淋巴结转移灶中CD151及α6β1蛋白表达情况,分析其与淋巴结转移的相关性。结果 CD151、α6β1在CC原发灶和淋巴结转移灶中的阳性表达率显著高于癌旁正常组织(P<0.05),而在淋巴结转移灶的阳性表达率更高,尤其是α6β1与CC原发灶比较差异具有统计学意义(P<0.05);Spearman相关分析显示,CD151、α6β1表达与CC淋巴结转移呈正相关(P<0.05)。结论 CD151与整合素α6β1在CC原发灶和淋巴转移灶中高表达,可能参与了CC形成、侵袭和转移。

整合素α_6β_1在乳腺癌中的表达及其与淋巴结转移的相关性研究

目的分析乳腺病理组织中整合素α_6β_1的表达及其与临床病理特征的相关性。方法利用免疫组织化学法检测65例乳腺癌及40例正常乳腺组织中整合素α_6β_1的表达,结合病理组织特征进行相关性分析。结果乳腺癌变组织中整合素α_6β_1的表达水平显著高于正常乳腺组织(P<0.05);且其表达水平与乳腺癌淋巴结转移存在明显的正相关(P<0.05),与病理组织FIGO分期及病理类型无明显相关性(P>0.05)。结论整合素α_6β_1在乳腺癌的发展及淋巴结转移中有重要作用,有望成为诊断乳腺癌进展的分子标志物,同时为靶向治疗提供依据。

CD151基因对血管内皮细胞表面整合素α3β1／α6β1表达的影响

目的研究重组腺相关病毒介导的CD151基因转染人脐静脉内皮细胞（HUVECs）对整合素α3β1／α6β1表达的影响。方法包装携带CD151、CD151-QRD和CD151-ARSA的重组腺相关病毒，转染HUVECs细胞，用Western Blot和流式细胞仪检测HUVECs细胞CD151及整合素a3131／a6131的表达。结果CD-51组及其各突变体组的CD151表达均明显高于对照组（P〈0．01），但3组间互相比较CD151蛋白表达差异无统计学意义（P〉0．05）。Western Blot及流式细胞仪检测显示CDl51组α3、α6及β1的表达明显高于对照组、CD151-QRD组和CD151-ARSA组（P〈0．05），其余各组间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论CD151基因转染能促进整合素α3β1／α6β1的蛋白表达，其机制可能与CD151胞外大环QRD194-196。“及C末端囊泡运输基序YRSL”。。。有关。

整合素α_6β_1和CD44V4在卵巢上皮癌中表达及相关性分析

目的通过检测上皮癌病理组织及正常卵巢组织中整合素α_6β_1和CD44V4表达情况,探讨其表达特点与临床病理特征的相关性。方法收集2015年1月~2016年12月手术切除的20例正常卵巢组织、40例卵巢上皮良性肿瘤及65例卵巢上皮癌组织,利用免疫组织化学法检测整合素α_6β_1和CD44V4的表达水平,结合病理组织特征进行相关性分析。结果卵巢上皮癌组织中整合素α_6β_1和CD44V4的表达水平显著高于正常卵巢及上皮良性肿瘤组织,差异有统计学意义(P<0.05),且在不同病理分期及分化程度的卵巢上皮癌组织之间的差异有统计学意义(P<0.05);但在不同组织学分型病理组织中差异无统计学意义(P>0.05);α_6β_1和与CD44V4在卵巢上皮癌组织中的表达存在明显正相关(r=0.599,P<0.05)。结论整合素α_6β_1和与CD44V4在卵巢上皮癌组织中高表达且有相关性,可作为卵巢上皮癌发展的分子标志物。

整合素在胚胎发育中的表达及其作用

从精，卵结合，受精卵分裂，分化，增殖，迁移，胚层分化，组织，器官的形成，直至胎儿的发育，成熟这一过程,细胞粘附分子起着重要作用。人胚的桑椹胚期，牛胚8细胞期，鼠胚在脱透明带前即有整合素的表达，使得胚胎能够通过整合素α6β1,αvβ3与配体纤黏连蛋白（FN），整合素α6β1,αvβ3与配体层粘连蛋白（LN）及整合素αvβ3与配体玻粘连蛋白（VN）等粘附。此外，胚泡的形成、胚层的分化、组织及器官的发育等也离不开相应的整合素分子的参与作用。