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题名重组人降钙素基因相关肽融合表达及纯化初步研究
被引量:1
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作者
陈慧诚
李健峰
徐维明
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机构
中国医学科学院/中国协和医科大学医学生物学研究所
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出处
《生物技术》
CAS
CSCD
2006年第3期14-17,共4页
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文摘
采用大肠杆菌偏爱的密码子人工合成hαCGRP基因,构建了原核融合表达载体,对融合蛋白成功地进行了表达、纯化,Western免疫印迹验证该蛋白具有αCGRP抗原性,为下一步hαCGRP纯品的获得及动物实验的研究奠定基础。
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关键词
Self-primering
αcgrp
原核表达
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Keywords
self- primering
αcgrp
prokaryotic expression
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分类号
Q786
[生物学—分子生物学]
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题名重组人α降钙素基因相关肽的克隆与表达(英文)
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作者
赵丹丹
于晓光
班莺
徐华锋
林平
邹海峰
刘宇
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机构
哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室
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出处
《生命科学研究》
CAS
CSCD
2004年第1期22-27,共6页
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基金
黑龙江省自然科学基金项目(D01-55)
哈尔滨市学科后备带头人基金项目(0171218001)~~
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文摘
通过PCR方法从人类基因组中扩增出编码hαCGRP的片段,将该片段定向克隆到pET-32a(+)载体上,构建pET-hαCGRP重组质粒。转化E.coli JM109菌株,利用酶切和测序方法筛选后,经IPTC诱导再转化E.coli BL21trxB(DE3)pLYsS菌株。SDS-PAGE和Western Blot分析表达产物,最后通过扩张蟾蜍肠系膜微循环血管实验来检测重组hαCGRP扩张血管的活性。结果表明,重组质粒含hαCGRP成熟肽编码基因序列(111bp),符合预想结果;表达出21 kD的融合蛋白,且主要以可溶性形式存在,其粗提物具有扩张血管能力。重组hαCGRP的成功表达为下一步纯化及研制基因工程药物奠定了重要基础。
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关键词
PCR
人类基因组
hαcgrp
融合蛋白
克隆
表达
基因工程
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Keywords
hαcgrp
cloning
expression
fusion protein
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分类号
Q78
[生物学—分子生物学]
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