αSMA、MMP-13及VEGF在应用口服枸杞多糖预防动脉粥样硬化家兔动脉中的表达及临床意义

目的探讨αSMA、MMP-13及VEGF在应用枸杞多糖治疗动脉粥样硬化家兔动脉中的表达及临床意义。方法将24只雄性新西兰白兔随机分成3组:空白对照组、模型组、预防组,每组8只。空白对照组喂饲普通饲料,模型组喂饲含2%胆固醇的饲料,预防组喂饲含2%胆固醇的饲料,并在每天早晨饲料中按体重加入枸杞多糖(LBP)20mg/kg。第16周末空气栓塞处死所有动物并观察主动脉形态学变化及应用免疫组织化学染色进行指标的检测及分析。结果与空白对照组相比,模型组全部形成动脉粥样硬化模型,预防组也形成了动脉粥样硬化,但是斑块厚度明显低于模型组。通过免疫组织化学染色发现:预防组与模型组比较,主动脉斑块厚度和斑块内平滑肌细胞明显减少;血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达降低,预防组与模型组相比,VEGF的阳性表达率显著减小(P<0.05);MMP-13(Matrix metalloproteinase 13)的表达降低,预防组与模型组相比,MMP-13的阳性表达率显著减小(P<0.05)。结论 1.口服枸杞多糖能明显抑制高脂血症所诱发的VSMC增殖,促进已经增殖的VSMC凋亡;2.枸杞多糖能够降低动脉斑块内MMP-13和VEGF的表达,从而抑制动脉粥样硬化的发生与发展;3.口服枸杞多糖能有效预防高脂饲料诱发的家兔主动脉AS斑块的形成。

氯沙坦对日本血吸虫病肝纤维化小鼠αSMA及TGFβ1的影响

目的探讨氯沙坦影响日本血吸虫病鼠早期肝纤维化的部分相关机制。方法将36只昆明小鼠随机分为正常对照组,感染对照组及氯沙坦组,采用日本血吸虫尾蚴35条/只鼠攻击感染小鼠建立血吸虫性肝纤维化模型,氯沙坦10 mg/(kg.d),灌胃,1次/d,连续6周,HE染色观察肝组织病理学改变;放射免疫法检测血清中透明脂酸(HA)含量,SP法检测α平滑机动蛋白(SMA),金属蛋白酸因子(TIMP)-1在肝组织中的表达;实时荧光定量法检测AT1R mRNA及转化生长因子β1(TGFβ1)mRNA的含量。结果氯沙坦组小鼠肝组织病理学改善明显;与感染组相比,氯沙坦组小鼠血清中HA含量降低,肝组织αSMA、TIMP-1的水平和AT1R mRNA、TGF1βmRNA的相对量均显著下降(P<0.05)。结论研究结果显示,氯沙坦改善肝组织病理学改变,降低血清中HA含量,与其能减少αSMA、TIMP-1的表达,下调AT1R mRNA、TGFβ1mRNA的水平有关。

猪血清攻击后肝纤维化大鼠α-SMA、TIMP-1在肝组织内持续表达

目的猪血清法肝纤维化模型中,致纤维化因子停止作用于肝脏后α-SMA、TIMP-1阳性HSCs表型与组织中I型胶原表达的相关性。方法猪血清10周法制作大鼠肝纤维化模型,于造模6周、10周、14周和20周,免疫组织化学观察α-SMA、I型胶原,肝组织原位杂交法检测TIMP-1阳性表型HSCs在肝组织中的分布,计算机图像分析系统测定阳性比率,SPSS11.0分析各参数在肝纤维化进程中相关性。结果α-SMA于造模第6周、10周即有表达,主要分布于汇管区血管或中央静脉内膜下。于造模第14周、20周时持续表达。TIMP-1于造成模第6周时,表达也限于汇管区血管和中央静脉内膜下。造模第10周、14周时阳性表达率明显增加,向肝组织内伸展,并持续维持高阳性表达至造模第20周。α-SMA和TIMP-1在造模过程中随肝纤维化的进程呈显著正相关(r=0.989,P=0.000),二者分别与Ⅰ型胶原呈显著正相关(r=0.893,P=0.000;r=0.923,P=0.000)。结论猪血清攻击法肝纤维化大鼠模型中,致纤维化因子启动肝纤维化进程,但不随致纤维化因子的终止而终止。所以,抗肝纤维化治疗成为治疗本病的关键。

氧化苦参碱对单侧输尿管梗阻大鼠模型肾间质纤维化的作用及机制研究

目的观察氧化苦参碱对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达水平的影响。探讨氧化苦参碱对大鼠肾间质纤维化的干预作用,并阐明其可能的机制。方法将48只雄性SD大鼠随机分为假手术(SOR)组、UUO组、血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂氯沙坦组(LOS组)和氧化苦参碱组(OM组)。检测血肌酐,肾组织行苏木精-伊红和Masson染色,免疫组化检测TGF-β1、α-SMA在肾组织中的表达,实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测肾组织中TGF-β1和α-SMA的mRNA水平。结果LOS组和OM组大鼠的血肌酐与UUO组相比差异有统计学意义(P<0.05),但LOS组和OM组间无统计学意义(P>0.05);OM组和LOS组中各时间点TGF-β1、α-SMA的表达均分别低于UUO组(P<0.05),但高于SOR组(P<0.05),两治疗组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论氧化苦参碱可从一定程度上减轻UUO大鼠肾间质纤维化程度,其作用机制可能为下调TGF-β1和α-SMA表达,从而减少细胞外基质的沉积,延缓肾间质纤维化。

肾衰冲剂对大鼠残余肾系膜细胞重塑的影响

目的 :研究 5 / 6肾切除大鼠残余肾系膜细胞重塑时α SMA的变化 ,进一步探讨肾衰冲剂治疗“慢肾衰”的作用机制。方法 :应用免疫组化技术检测大鼠残余肾系膜细胞内α SMA的表达情况和细胞外基质 (ECM )的变化。结果 :残余肾未硬化区肾小球系膜细胞内α SMA表达明显增强 (2 45± 0 36 ) ,硬化区肾小球α SMA表达降低(0 37± 0 0 8) ,经肾衰冲剂治疗后增高的α SMA表达下调 (1 92± 0 31) ,细胞外基质fibronectin、collagen Ⅳ含量减少 ,肾小球硬化指数下降 (2 5 7± 0 35→ 1 6 3± 0 2 4)。结论 :α SMA可作为系膜细胞重塑的标志 。

荷包牡丹碱对哮喘小鼠肺组织α-SMA及气道重构的影响

目的通过观察鼻内注射γ-氨基丁酸受体(GABAR)特异性拮抗剂荷包牡丹碱对慢性哮喘模型小鼠肺组织α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin,α-SMA)在转录水平及蛋白水平表达及气道重构的影响,探讨拮抗剂在哮喘气道重构中的治疗作用。方法将BALB/c小鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组、拮抗剂干预组和激素干预组,用卵蛋白(OVA)致敏激发建立小鼠哮喘模型,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)与免疫组化的方法研究肺组织α-SMA的表达及气道形态学参数的改变。结果①与正常对照组比较,在激发哮喘后哮喘模型组肺组织α-SMA的表达升高(P<0.05);与哮喘模型组相比较,各药物干预组α-SMA的表达均降低(P<0.01);拮抗剂干预组和激素干预组比较,小鼠肺组织α-SMA表达无明显差异(P>0.05);②与正常组比较,哮喘模型组支气管基底膜周径(Pbm)、管壁总面积(WAt)、内壁面积(WAi)及平滑肌面积(WAm)均增高(P<0.05);与哮喘模型组比较,激素干预组气道形态学参数均下降(P<0.01),拮抗剂组气道平滑肌面积和管壁总面积下降(P<0.05),各药物干预组比较无明显差异(P>0.05)。结论哮喘小鼠肺组织α-SMA过量表达与哮喘发生密切相关,荷包牡丹碱可以抑制慢性哮喘模型小鼠α-SMA的表达及气道形态结构改变,作用与吸入性皮质激素相似。提示GABAR通过上调α-SMA表达,促进气道平滑肌收缩及增生,参与气道重构的调节。