p，p’-DDE、β-BHC对大鼠支持细胞FasL mRNA表达及NF-κB活性的影响

[目的]研究有机氯农药DDT和六六六的代谢产物(p,p’-DDE)和β-BHC及联合染毒对离体培养大鼠支持细胞(sertoli cell)FasL mRNA表达及NF-κB活性的影响。[方法]分离大鼠睾丸支持细胞进行原代培养2d,以DMSO为溶剂对照,分别以终浓度为10、30、50μmol/L的p,p’-DDE、β-BHC及联合染毒支持细胞24h,应用RT-PCR法研究支持细胞FasL mRNA的表达;用激光共聚焦显微镜检测NF-κB的转位激活状况。[结果]10、30、50μmol/L的p,p’-DDE、β-BHC及其联合染毒支持细胞后,FasL mRNA表达升高,50μmol/L剂量组与对照组差异有统计学意义(P<0.05),各组内低、中剂量组与高剂量组差异有统计学意义(P<0.05);NF-κB活性明显增强。[结论]支持细胞经p,p’-DDE、β-BHC及其联合染毒后,FasL mRNA表达明显升高,NF-κB的活性随染毒剂量的增加而增强,且联合作用比单独作用更加明显。

p,p’-DDE和β-BHC联合染毒对大鼠离体支持细胞脂质过氧化的影响

目的研究p,p’-DDE和β-BHC联合染毒对大鼠离体支持细胞脂质过氧化的影响。方法通过离体培养SD大鼠支持细胞的四甲基偶氮唑盐(MTT)实验,确定后续实验的染毒剂量,p,p’-DDE和β-BHC的染毒浓度均为10、30、50μmol/L,p,p’-DDE+β-BHC联合染毒浓度为10μmol/Lp,p’-DDE+10μmol/Lβ-BHC,30μmol/Lp,p’-DDE+30μmol/Lβ-BHC,50μmol/Lp,p’-DDE+50μmol/Lβ-BHC,检测染毒后支持细胞乳酸脱氢酶(LDH)的漏出率、总超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量的变化。结果50μmol/L的p,p’-DDE、β-BHC均可使支持细胞的吸光度(A)值显著下降(P<0.05)。睾丸支持细胞LDH的漏出率随染毒浓度的增加而明显增加(P<0.05),二者以不同浓度联合染毒时支持细胞LDH的漏出率均显著高于对应浓度的单独染毒(P<0.05)。不同浓度的p,p’-DDE、β-BHC及二者联合染毒均可使细胞内总SOD活力显著降低(P<0.05)、MDA的含量增加(P<0.05),且联合染毒时MDA的含量与二者单独染毒时相比均有显著增加(P<0.05)。结论p,p’-DDE、β-BHC单独和联合作用均可以引发睾丸支持细胞脂质过氧化,p,p’-DDE和β-BHC对支持细胞的联合毒性作用具有一定的协同效应。

p,p’-DDE和β-BHC联合染毒对孕小鼠生殖及其胎仔发育的影响

目的研究p,p＇-DDE和β-BHC联合染毒对孕小鼠生殖和胎仔发育的影响.方法对孕12～14天小鼠每天联合灌胃不同剂量的p,p＇-DDE和β-BHC（各1、5、10mg/kg bw）,并设植物油溶剂对照组,采用磁性分离酶联免疫法检测孕鼠血清雌二醇（E2）和孕酮（P）含量,RT-PCR检测小鼠胎盘组织中雌激素受体（α-ER）、促性腺激素释放激素（GnRH）和β-内啡肽（β-EP）mRNA表达水平.结果①生殖影响：随染毒剂量加大母鼠子宫剥离重和子宫腔内液增加,子宫着床数减少,胎仔肛殖距和雌雄比增加,孕鼠血清中雌二醇和孕酮水平上升,胎盘组织α-ER和GnRH mRNA表达上调而β-EP mRNA表达下调,且均呈现剂量依赖性关系,差异有显著性（P＜0.05）.②发育影响：随染毒剂量增加孕鼠体重增长减少,肝脏的脏器系数增加,活胎数下降,不良妊娠结局（死胎、吸收胎和畸形数）增多,雌胎数所占比例加大,均呈剂量效应关系,差异有显著性（P＜0.05）.结论p,p＇-DDE和β-BHC可干扰孕小鼠生殖功能,导致生殖和发育障碍,造成雌雄比例失衡.

β-六六六对多刺裸腹溞生命表统计学参数的影响

应用生命表统计学方法研究了不同浓度(0.001、0.01、0.1、1、10、100和1000μg/L)的β-六六六对多刺裸腹溞(Moina macrocopa)种群统计学参数的影响。结果表明,与对照组相比,浓度为1000μg/L的β-六六六显著降低了多刺裸腹溞出生时的生命期望和净生殖率,100和1000μg/L的β-六六六显著降低了多刺裸腹溞的世代时间,0.1和1μg/L的β-六六六显著提高了多刺裸腹溞的种群内禀增长率。

氧化钙活化过硫酸钠对六六六污染土壤修复的研究

用氧化钙活化过硫酸钠修复六六六污染土壤。研究了氧化钙与过硫酸钠添加配比对六六六的两种异构体(α-BHC和β-BHC)降解效率的影响。结果表明,当添加4%Ca O时,使用2. 5%Na2S2O8对α-BHC的降解效果最佳,降解率达91. 76%;β-BHC最佳的降解效果是在4. 0%Na2S2O8添加量下,降解率达54. 54%。六六六浓度影响过硫酸钠的降解效率,对于六六六污染较轻的土壤(浓度4. 12 mg/kg),Na2S2O8的添加量在2. 5%时对α-BHC具有最佳降解效率,降解率达90. 31%;对于六六六中度污染的土壤(浓度25. 51 mg/kg),Na2S2O8的添加量在4. 0%时,β-BHC具有最佳降解效率,降解率达50. 10%。在4%Ca O的用量下,随着Na2S2O8用量的增加反应体系的pH变化不明显。可见4%氧化钙活化过硫酸钠对修复后六六六污染土壤的pH影响不大,且修复效果显著,是一种经济有效、快速环保的处理方法。

固相萃取(SPE)技术在检测种植药材有机氯类农药残留量的应用

目的:采用固相萃取(SPE)技术试验研究中药材有机氯类农药残留量的前处理方法,并与药典方法进行了比较,可用于中药材有机氯类农药残留量的测定。方法:采用C18固相萃取小柱,正己烷-丙酮(5∶1)洗脱纯化样品,并采用毛细管气相色谱方法测定;色谱柱:弹性石英毛细管柱RTX-1,30m×0.32mm×0.25μm;柱温:起始温度80℃,以8℃/min升温至250℃并保持10分钟;气化温度:230℃;检测器温度:300℃;载气:氮气;线速度:1ml.1min-1;进样模式:无分流;结果:α-BHC,β-BHC,γ-BHC,δ-BHC,PP’-DDE,PP’-DDD,OP’-DDT,PP’-DDT,PCNB有机氯类农药在各自浓度范围内线性关系良好,回收率符合规定。结论:该方法准确,灵敏度高,可用于中药材有机氯类农药残留量的测定。

气相色谱法测定土壤中β-六六六不确定度评定

本文对气相色谱法测定土壤中β-六六六的不确定度进行评定。根据检测过程,分析了不确定度的来源,建立合理的数学模型,并根据数学模型计算出测定样品的扩展不确定度。根据计算,该土壤样品的β-六六六的扩展不确定度为:U95%=0.32μg/kg(k=2),结果表示为2.96±0.32μg/kg。该研究能为此类不确定分析提供借鉴。

p,p’-DDE和β-六氯化苯对青春期大鼠睾丸组织波形蛋白和N-钙粘蛋白及卵泡刺激素受体mRNA和蛋白表达的影响

目的研究p,p’-DDE、β-六氯化苯(β-benzene hexachloride,β-BHC)联合染毒对青春期大鼠睾丸组织波形蛋白(Vimentin)、N-钙粘蛋白(N-cadherin)和卵泡刺激素受体(follicle stimulating hormone receptor,FSHR)mRNA和蛋白表达的影响。方法将20只50日龄清洁级雄性SD大鼠按体重随机分为4组,分别为对照(玉米油)组和p,p’-DDE(100 mg/kg)单独染毒组、β-BHC(100 mg/kg)单独染毒组、p,p’-DDE(100 mg/kg)+β-BHC(100 mg/kg)联合染毒组,每组5只。采用腹腔注射方式进行染毒,注射容积为10 ml/kg,隔天1次,连续进行10 d。采用Real-time PCR检测大鼠睾丸组织Vimentin、N-cadherin、FSHR mRNA的表达;采用Western Blot法检测Vimentin、N-cadherin、FSHR蛋白的表达。结果与对照组相比,β-BHC单独染毒组和p,p’-DDE+β-BHC联合染毒组大鼠睾丸组织Vimentin、FSHR mRNA的表达水平均下降,差异有统计学意义(P<0.05)。与p,p’-DDE+β-BHC联合染毒组相比,p,p’-DDE和β-BHC单独染毒组大鼠睾丸组织Vimentin mRNA的表达水平均较高,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,p,p’-DDE和β-BHC单独和联合染毒组大鼠睾丸组织Vimentin、N-cadherin、FSHR蛋白的表达水平均下降,差异有统计学意义(P<0.05)。而p,p’-DDE和β-BHC单独和联合染毒组大鼠睾丸组织Vimentin、N-cadherin、FSHR mRNA和蛋白的表达水平间比较,差异均无统计学意义。结论 p,p’-DDE、β-BHC暴露可降低青春期大鼠睾丸组织中Vimentin、N-cadherin、FSHR的表达水平。