基于新疆紫草中β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁含量变化的浓缩工艺研究

目的探索新疆紫草中以β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁为指标的制剂浓缩工艺的稳定性研究。方法采用动态平行取样,HPLC检测法,以β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁为考察指标,系统考察其热稳定性规律,用于浓缩过程中工艺参数的确定。结果当温度在60~80℃时,随加热温度升高,紫草提取液中阿卡宁的保留率降低;在固定温度下,随加热时间的延长,阿卡宁的保留率降低;当乙醇浓度为10%~80%时,在含醇量一定的条件下,随加热时间的延长,阿卡宁的保留率降低;当乙醇浓度低于30%时,阿卡宁在溶液中极不稳定。结论紫草药材提取后进行浓缩时,温度应控制在65℃以下,采用少量、短时间的方式进行浓缩。

反相高效液相色谱法测定肝宁片中β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量

目的建立高效液相色谱法测定肝宁片中β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁含量的方法。方法采用Shimadzu VP-ODS C18色谱柱,以乙腈-水-甲酸=67∶33∶0.03为流动相,检测波长:275nm,流速:1.0mL·min-1。结果β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁在0.101 6～1.016μg与峰面积线性关系良好(r=0.999 6);平均加样回收率99.5%(n=6)。结论本方法操作简便,测定结果准确可靠,专属性强,可作为该产品的质量控制方法。

丙烯酰胺/丙烯酰氧乙基二甲基苄基氯化铵共聚水分散体的制备

以丙烯酰胺(AM)、丙烯酰氧乙基二甲基苄基氯化铵(DMBC)为共聚单体,过硫酸铵为引发剂,自制聚甲基丙烯酰氧乙基三甲基氯化铵(PDMC)为分散剂,在硫酸铵水溶液中采用水分散聚合法,制备了丙烯酰胺/丙烯酰氧乙基二甲基苄基氯化铵共聚水分散体。考察了反应温度、硫酸铵浓度、单体配比、链转移剂浓度、分散剂用量、引发剂用量对共聚物黏度、相对分子质量、颗粒尺寸的影响。实验发现,制备丙烯酰胺/丙烯酰氧乙基二甲基苄基氯化铵共聚水分散体较优配方为:温度65℃,硫酸铵质量分数为27.6%,AM、DMBC总单体质量分数为15%,DMBC∶AM(质量比)=(0.297~0.363)∶1,链转移剂用量为0.078 g/L,分散剂质量分数2.7%~3.6%,过硫酸铵质量分数范围为4.38×10^(-4)~5.84×10^(-4)mol/L。

秀珍菇3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶基因的克隆及表达分析

为获得秀珍菇3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR)全长基因,并分析该基因在秀珍菇正常状态及热胁迫处理下的表达差异,对秀珍菇进行RNA测序(RNA-seq),经生物信息学分析筛选获得HMGR全长基因(命名为Pphg1),并利用荧光定量PCR(qRT-PCR)的方法,分析该基因在秀珍菇不同温度处理下的表达情况。结果表明,获得的Pphg1全长由4059个核苷酸组成,编码1352个氨基酸,其蛋白分子质量约144.04 kDa。经qRT-PCR检测,该基因在秀珍菇受热胁迫后表达量升高。本研究中首次克隆并获得秀珍菇HMGR基因全长cDNA,推测其与秀珍菇热胁迫应答相关,为阐明秀珍菇体内次生代谢产物合成的分子机制及其分子育种提供科学依据。

高效液相色谱法测定紫草油中β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量

目的：建立紫草油中β，β′-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量测定方法。方法：采用高效液相色谱（HPLc）法，色谱柱为迪马C18钻石色谱柱（250mm×4．6mm，5μm）；流动相为乙腈．水-甲酸（75：25：0．2）；检测波长为275nm；柱温为室温。结果：在80．6～564．5ng范围内，β，β′-二甲基丙烯酰阿卡宁进样量和峰面积具有良好的线性关系，线性回归方程为C=1．0279×10^-6A＋2．3589×10^-2，r=0．9999。测得紫草油中β，β′-二甲基丙烯酰阿卡宁平均含量为0．8692mg/ml。结论：该方法简便可行，重现性好，可作为紫草油的质量控制方法。

薄层扫描法测定新疆不同产地新疆紫草中β,β’-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量

目的测定新疆不同产地新疆紫草中β,β’-二甲基丙烯酰阿卡宁含量,对药材质量进行初步评价。方法样品经超声提取,点样于高效硅胶G薄层板上,以环己烷-甲苯-乙酸乙酯-甲酸(6∶4∶0.5∶0.4)为展开剂上行展开,在520nm波长进行扫描检测。结果 14个产地新疆紫草中β,β’-二甲基丙烯酰阿卡宁含量为8.215~33.65mg/g,博乐产新疆紫草中β,β’-二甲基丙烯酰阿卡宁含量最高(33.65mg/g),塔什库尔干产新疆紫草中β,β’-二甲基丙烯酰阿卡宁含量最低(8.215mg/g),含量均大于《中国药典》规定。结论采用薄层扫描法测定新疆紫草中β,β’-二甲基丙烯酰阿卡宁含量灵敏度高,准确性好,简便,快速。

β,β-二甲基丙烯酰阿卡宁的电化学行为及其测定

研究β,β-二甲基丙烯酰阿卡宁(β,β-dimethyl-acry-lalkannin,简称β,β-DAL)的电化学行为并由差示脉冲伏安法测定其含量.实验表明:β,β-DAL在玻碳电极上具有明显的吸附性,其电极反应是一可逆的双电子双质子过程.在pH4.6的磷酸盐缓冲溶液中,+0.8～-0.4V电位区间内,β,β-DAL的差示脉冲还原峰电流(Ip)与其浓度(C)呈良好的线性关系,浓度范围1.3×10-7～-1.7×10-6mol/L(r=0.9996),检出限4.0×10-8mol/L.本方法灵敏度高、重现性好,用于中药紫草中β,β-DAL的含量测定,结果满意.

紫草中β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁提取和含量测定及其稳定性研究

目的测定不同产地的紫草中β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁(以下简称阿卡宁)的含量,比较不同溶剂对紫草中阿卡宁的提取率,并对阿卡宁的乙醇溶液稳定性进行考察。方法采用高效液相色谱法测定阿卡宁的含量,色谱柱为Dikma Diamonsil C18柱(200mm×4.6mm,5μm),以乙腈-水-甲酸(700:300:0.5)为流动相,流速1mL·min-1,检测波长275nm。测定了内蒙紫草、新疆紫草和云南紫草中阿卡宁的含量,考察了75%乙醇、乙醇、石油醚和液体石蜡对紫草中阿卡宁的提取率;将阿卡宁0.1mg·mL-1乙醇溶液于冰箱4℃存放,定期进样测定,并与新配制时测定的峰面积比较。结果测定的三种紫草中,以新疆紫草含量最高;乙醇和石油醚对阿卡宁的提取率高而75%乙醇和液体石蜡的提取率低;阿卡宁的乙醇溶液随存放时间的增加而峰面积变小。结论提取溶剂对紫草中阿卡宁提取率影响较大;由于阿卡宁溶液的不稳定性,选择阿卡宁作为评价含紫草药材制剂的指标成分并不合适。

HPLC法测定“化腐生肤”渗滤液中β,β-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量

目的建立用高效液相色谱法测定“化腐生肤”渗滤液中β，β-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量，为其制定质量标准提供依据。方法色谱柱为DiamonsilC18（250mm×4．6mm，5μm），流动相为乙腈一甲酸水（78：22），流速为1．0mL／min，检测波长为275nm，柱温30℃结果β，β-二甲基丙烯酰阿卡宁在0．02-76～0．1935mg／mL范围内线性良好（r=0．9998），平均回收率均在95％～105％，RSD为2．223％，“化腐生肤”渗滤液中β，β-二甲基丙烯酰阿卡宁含量为0．3866mg／mL。结论该方法准确，简便灵敏，可用于“化腐生肤”渗滤液的质量控制。

HPLC法测定紫草药材中β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁含量的不确定度分析

目的:分析HPLC法测定紫草药材中β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁含量的不确定度。方法:通过HPLC测定β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁含量的方法,对流程进行分析计算,得出扩展不确定度结果:HPLC法测定黄麦合剂中淫羊藿苷含量紫草药材中β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁含量的扩展不确定度为0.134μg·ml^(-1),测定结果表示为(66.137±0.134)μg·ml^(-1),k=2。结论:该评定方法可作为HPLC法测度报告该类成分的不确定度评定的参考。

油炸工艺对薯条中丙烯酰胺和5-羟甲基糠醛形成的影响

本研究基于Pearson相关性分析和主成分分析(principal component analysis,PCA)研究薯条油炸过程中丙烯酰胺(acrylamide,AA)和5-羟甲基糠醛(5-hydroxymethylfurfural,5-HMF)的形成和伴生关系,及其与中间产物α-二羰基化合物含量的相关性,并探讨薯条的感官品质、色值、水分含量和吸油量与AA和5-HMF形成的相关性。结果表明:随着油炸时间的延长和温度的升高,薯条中的AA、5-HMF和中间产物α-二羰基化合物含量均增加,水分含量逐渐减少,吸油量逐渐增加,亮度(L^(*)值)、黄色(b^(*)值)趋于降低,红色(a^(*)值)趋于增加。在不同时间和温度影响下,AA和5-HMF含量呈极显著正相关,两者与α-二羰基化合物含量、吸油量呈极显著正相关,而与水分含量、L^(*)值和b^(*)值呈极显著或显著负相关,AA含量与a^(*)值呈显著正相关。PCA模型与温度-时间变化曲线所得的结果一致。结论:170℃油炸5 min既可保证薯条感官品质最佳,又有利于减少危害物的生成。

3-羟基-3甲基戊二酰辅酶A裂解酶缺乏症临床特点及基因变异分析

目的了解3-羟基-3甲基戊二酰辅酶A裂解酶缺乏症的临床特点及基因变异情况。方法分析6例3-羟基-3甲基戊二酰辅酶A裂解酶缺乏症患儿的临床资料及基因检测结果。结果6例患儿,男性3例,女性3例。1例家族史阳性。3例患儿当地医院行新生儿筛查提示该疾病,2例患儿为发病后临床诊断,1例患儿至今未发病。5例患儿发病年龄10天~5岁。初诊年龄为1个月~7岁,发病时均有不同程度的代谢危象、低血糖和高乳酸血症等表现。2例患儿死亡。血串联质谱显示3-羟基异戊酰肉碱升高,部分患儿伴有己二酰肉碱升高;尿有机酸分析提示3-羟基-3-甲基戊二酸显著升高,伴3-甲基戊烯二酸、3-羟基异戊酸等增高。4例患儿基因检测均发现HMGCL基因变异:2例c.122G>A(p.R41Q)纯合;1例c.697C>T(p.H233Y)纯合;1例c.145-2A>G和c.590G>A(p.C197Y)复合杂合。其中,c.697C>T(p.H 233Y)、c.145-2A>G和c.590G>A(p.C 197Y)变异均为首次报道,蛋白结构预测均为可能有害,ACMG评级为可能致病。另2例患儿未行基因检测。结论3-羟基-3甲基戊二酰辅酶A裂解酶缺乏症临床表型多样,结合血串联质谱、尿有机酸分析及基因诊断可确诊。对3-羟基-3甲基戊二酰辅酶A裂解酶缺乏症的筛查有助于早期确诊及合理治疗。

HPLC同时测定紫朱软膏中左旋紫草素和β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁含量

目的 建立同时测定紫朱软膏中紫草的左旋紫草素和β,β＇-二甲基丙烯酰阿卡宁含量的高效液相色谱方法.方法 采用Welch Materials XB-C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,18.5 μm）,流动相乙腈-水-甲酸（75∶25∶0.05）,检测波长516 nm,柱温30 ℃,流速1.0 mL/min,进样量20 μL,对紫朱软膏中紫草的有效成分左旋紫草素和β,β＇-二甲基丙烯酰阿卡宁进行定量测定.结果 左旋紫草素在0.025 6～0.256 μg 范围内线性关系良好（r^2=0.999 5）,平均回收率为98.12%（RSD=1.92%）;β,β＇-二甲基丙烯酰阿卡宁在0.174 4～2.616 μg范围内线性关系良好（r^2=0.999 2）,平均回收率为100.46%（RSD=1.17%）.结论 本试验建立的方法简便,测定结果准确,可用于紫朱软膏的质量控制和评价.

紫草中β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量测定及不同来源药材质量评价的初步研究

目的:建立HPLC法测定紫草中β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量,并对药材质量进行初步评价方法:色谱柱:Cosmosil 5C_(18)-MS-II(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-水-甲酸(430:570:0.5);检测波长:275nm;流速:1.0 ml·min对8批紫草药材进行定量测定,并提取特征图谱信息,进行聚类分析和主成分分析。结果:各紫草样品中β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量均大于3 mg·g^(-1),符合现行标准规定,但成分谱存在一定的差异。通过多变量统计分析,试验样品可分为新疆紫草、未知品种的进口紫草与滇紫草;除β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁外,其他成分对其质量评价也起着重要作用。结论:目前市售紫草药材的基原与质量均有较大差异,本方法准确、可靠,可用于其综合评价研究。

甲基丙烯酰明胶水凝胶作为细胞三维培养支架在骨组织工程中的应用

背景:骨缺损的治疗一直是临床医生亟待解决的临床难题,用甲基丙烯酰明胶进行细胞体外3D培养,可以为大面积骨缺损的治疗提供新的方向。目的:文章综述了甲基丙烯酰明胶作为3D细胞培养支架在骨组织工程中的研究进展,以期为临床骨缺损修复提供进一步的参考。方法:应用计算机检索中国知网及PubMed数据库1986年1月至2023年8月收录的文献,中英文检索词分别为“骨缺损,骨组织工程,生物支架材料,水凝胶,光交联水凝胶,甲基丙烯酰明胶,三维培养,细胞培养”和“Bone defect,Bone tissue engineering,Biomaterial scaffold,Hydrogel,Methylacrylyl photocrosslinked hydrogel,Three-dimensional culture;Cell culture”,最终纳入68篇文献进行综述分析。结果与结论:①同二维培养相比,3D培养可以在无菌条件下,构建立体三维空间,更好地模拟体内环境,为细胞提供合适的温度、酸碱度及足够的营养,使细胞能够在体外正常生长增殖并保持其正常结构与功能,具有独特优势。②在骨组织工程生物支架材料的选择中,水凝胶因其良好的生物相容性、可降解性及具有立体三维网络结构等优点,已被广泛应用于骨再生的研究。③甲基丙烯酰明胶的物理及生物性能受到浓度、光照时间及光引发剂种类以及反应体系等因素的影响,而这些性能均能对细胞的黏附、生长及增殖,甚至细胞形态及功能产生一定的影响。④甲基丙烯酰明胶因具有良好的生物相容性、物理可调节性、可注射性及光敏性能,已被广泛应用于3D细胞封装、3D生物打印及基于数字光处理的立体光刻技术等细胞3D培养体系中。⑤应用各类复合甲基丙烯酰明胶进行细胞的3D培养,可以更好地促进血管形成及骨再生,为临床骨缺损的治疗提供更多可能。⑥目前甲基丙烯酰明胶的来源、合成的方法以及安全性尚没有健全的标准,需要进一步加强研究,对甲基丙烯酰明胶在3D细胞培养领域的应用进行更深入的完善。

运动抑制3-羟甲基戊二酰-CoA合成酶2表达减轻阿霉素所致小鼠心肌病的作用

目的:探讨运动防止阿霉素处理后心肌萎缩和心脏功能紊乱的作用。方法:小鼠分为3组,静养对照组、阿霉素组、运动+阿霉素组,每组6只。运动+阿霉素组游泳30 d,每天40 min,另2组小鼠正常饲养,运动结束后造模。阿霉素组和运动+阿霉素组小鼠腹腔注射20 mg/kg阿霉素。4 d后,应用小动物超声仪VEVO2100检测小鼠心脏功能,随后取心肌组织用于分析。应用qRT-PCR检测心肌中萎缩标志物Atrogin-1、MuRF-1和3-羟甲基戊二酰-CoA合成酶2(HMGCS2)mRNA的表达。采用蛋白免疫印迹(Western blot)检测HMGCS2蛋白表达。结果:阿霉素导致小鼠出现心肌萎缩和心功能降低(P<0.05);阿霉素注射后小鼠心肌中HMGCS2蛋白和HMGCS2 mRNA表达增加(P<0.05);运动能够防止阿霉素所致心脏功能降低和心肌萎缩(P<0.05)。运动抑制了阿霉素心肌病小鼠HMGCS2的表达(P<0.05)。培养的心肌细胞中抑制HMGCS2能够阻止阿霉素引起的心肌细胞凋亡(P<0.05)。结论:运动通过抑制HMGCS2而发挥保护阿霉素所致心肌病小鼠心脏功能和心肌萎缩的作用。

SPE-HPLC法测定复方紫草油中β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量

目的:建立测定复方紫草油中β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁含量的方法。方法:采用Zorbax Eclipse XDB-C_(18)(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相:乙腈-水-甲酸(700:300:0.5),流速:1.0 ml·min^(-1),检测波长:275 nm,柱温:25℃,进样量:10μl。结果:β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁在5.2~104.0μg·ml^(-1)浓度范围内有良好的线性关系(r=0.999 8),平均加样回收率为100.2%,RSD为1.23%(n=6)。结论:此方法操作简便、专属性强、灵敏度高、重复性好,可用于该制剂的质量控制。

不同产地蒙紫草中左旋紫草素和β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁含量测定及质量标准研究

目的建立测定蒙药蒙紫草中左旋紫草素和β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁含量的方法,并制订其质量标准。方法采用显微鉴别法,对药材样品的横切面和粉末进行鉴别;采用薄层色谱法对药材样品中左旋紫草素和β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁进行定性分析;测定药材样品中水分、灰分、浸出物的含量;采用紫外分光光度法测定药材样品中左旋紫草素的含量,检测波长为516 nm;采用高效液相色谱法测定药材样品中β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量,色谱柱为Thermo Hypersil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.5%甲酸水溶液(70∶30,V/V),流速为1.0 m L/min,检测波长为275 nm,柱温为25℃,进样量为10μL。结果药材样品横切面和粉末显微特征明显;薄层色谱图中可见左旋紫草素和β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁的特征斑点,且斑点分离清晰。左旋紫草素质量浓度在5~50μg/m L(R^(2)=0.9999)范围内与吸光度线性关系良好,β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁的质量浓度在10~200μg/m L(R^(2)=0.9996)范围内与峰面积线性关系良好;精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于2.00%;左旋紫草素和β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁的平均加样回收率分别为101.23%和100.16%,RSD分别为2.01%和2.88%(n=9)。根据1-7号批次药材拟订蒙紫草的质量标准,羟基蒽醌总色素(以左旋紫草素计)含量不得低于1.00%,β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁含量不得低于0.15%;蒙紫草中水分含量不得超过12.00%,总灰分含量不得超过8.00%,酸不溶性灰分含量不得超过2.00%,水溶性浸出物含量不得低于30.00%,醇溶性浸出物含量不得低于10.00%。结论该方法操作简便,结果准确,重复性高,稳定性好,可用于蒙药蒙紫草中左旋紫草素和β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量测定和质量控制。

常温下1-甲基环丙烯和月桂酰精氨酸乙酯盐酸盐对板栗贮藏保鲜的影响研究

以1-甲基环丙烯(1-MCP)和月桂酰精氨酸乙酯盐酸盐(LAE)为防腐剂,以板栗的质量损失率、腐烂率、干瘪率、硬度、淀粉含量及综合评分为指标,研究2种防腐剂对板栗的保鲜效果。结果表明:1-MCP、LAE均能抑制板栗质量损失、腐烂、干瘪,提高板栗的保鲜效果。在25℃下,1-MCP用于板栗保鲜的最优质量浓度为0.70 g/m^(3),LAE用于板栗保鲜的最优质量浓度为0.50 g/L。将2种防腐剂的最优剂量联合对板栗进行处理,经过96 d的贮藏之后,质量损失率、腐烂率、干瘪率分别比对照组低3.89%、5.00%、8.33%,硬度和淀粉含量分别高出3.69 HA、0.01g/g。

RP-HPLC法同时测定紫草中紫草素、异丁酰紫草素和β，β-二甲基丙烯酰紫草素的含量

目的:建立同时测定紫草中紫草素、异丁酰紫草素和β,β-二甲基丙烯酰紫草素含量的方法。方法:采用 RP-HPLC法,Zorbax Eclipse XDB-C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为含0.5%冰醋酸及0.3%三乙胺的乙腈溶液(A)和含0.5%冰醋酸及0.3%三乙胺的水溶液(B),梯度洗脱,洗脱程序为:0 min(67%A),5 min(70%A),15 min(75%A),30 min(75%A);流速1.0 mL·min^(-1);检测波长516 nm,柱温30 ℃。结果:紫草素、异丁酰紫草素和β,β-二甲基丙烯酰紫草素浓度分别在1.2～12.2μg·mL^(-1)(r=0.9999)、2.5～24.8μg·mL^(-1)(r=0.9998)、11.3～112.8μg·mL^(-1)(r=0.9998)范围内与峰面积呈良好线性关系(n=5)。方法回收率(n=9)分别为100.3%,98.6%,98.4%。结论:该方法简便、快速、准确,重复性好,可用于紫草中紫草素、异丁酰紫草素和β,β-二甲基丙烯酰紫草素含量的同时测定。