β-内酰胺酶抑制剂联合不同β-内酰胺类抗生素对耐多药结核分枝杆菌临床菌株体外活性研究

目的体外评估5种β-内酰胺类抗生素和不同β-内酰胺酶抑制剂组合对耐多药结核分枝杆菌(MDR-TB)活性的影响,以期发现针对耐多药结核病最有效的β-内酰胺类抗生素和β-内酰胺酶抑制剂组合。方法选取2021年河南省耐药监测项目收集的MDR-TB菌株,使用最小抑菌浓度(MIC)法测定5种β-内酰胺类抗生素或联合β-内酰胺酶抑制剂对临床MDR-TB的MIC值,并采用聚合酶链式反应(PCR)和DNA测序法分析菌株的bla C突变情况。结果共纳入105株MDR-TB,MIC检测结果显示,多尼培南对MDR-TB抗菌活性最高,其MIC 50值为16μg/mL。与β-内酰胺酶抑制剂联合后,大部分β-内酰胺类抗生素的MIC值明显下降。共有13.33%(14株)的菌株存在bla C基因的突变,主要为3种核苷酸替代突变,分别为AGT333AGG、AAC638ACC、ATC786ATT。BlaC蛋白Ser111Arg和Asn213Thr与同义单核苷酸突变相比,增强了克拉维酸/舒巴坦与美罗培南对MDR-TB的协同作用。结论多尼培南和舒巴坦组合对MDR-TB具有最强的抗菌活性。而BlaC蛋白Ser111Arg和Asn213Thr的替代突变使MDR-TB对美罗培南的敏感性在克拉维酸/舒巴坦协同时增强。

β-内酰胺类抗生素/β-内酰胺酶抑制剂复方制剂点评标准的建立及应用分析

目的建立β-内酰胺类抗生素/β-内酰胺酶抑制剂复方制剂的点评标准,结合临床应用情况,分析其应用效果,促进临床合理使用β-内酰胺类抗生素/β-内酰胺酶抑制剂复方制剂。方法参照相关指南及专家共识,制订β-内酰胺类抗生素/β-内酰胺酶抑制剂复方制剂的药物利用评价(DUE)标准。通过建立的DUE标准,采用回顾性研究方法,评价2019年7—12月南华大学附属第二医院使用头孢哌酮/舒巴坦和哌拉西林/他唑巴坦的894例病例的用药合理性。结果894例病例中,适应证合理率为93.62%,给药剂量合理率为90.49%,用药疗程合理率为89.37%,微生物送检合理率为75.84%。结论建立的头孢哌酮/舒巴坦和哌拉西林/他唑巴坦DUE标准能够作为临床合理用药的重要参考,该院头孢哌酮/舒巴坦和哌拉西林/他唑巴坦使用基本合理。

β-内酰胺酶抑制剂的稳定性与降解反应特性

β-内酰胺酶抑制剂与广谱β-内酰胺抗生素的联合使用是一种有效解决细菌耐药的策略之一。目前上市的β-内酰胺酶抑制剂按其化学结构主要包括氧青霉烯类(克拉维酸)、青霉烷砜类(舒巴坦和他唑巴坦)和二氮杂二环辛烷类化合物(阿维巴坦),本文对临床常见的β-内酰胺酶抑制剂的稳定性与降解反应特性进行综述,并结合当前药典标准中的有关物质检查项,探讨上述β-内酰胺酶抑制剂的杂质谱控制策略。

β-内酰胺酶抑制剂关键中间体的微通道技术合成

为了优化二氮杂双环辛烷(DBO)类新型β-内酰胺酶抑制剂的关键中间体(2S,5R)-6-苄氧基-7-氧代-1,6-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-2-羧酸(Ⅰ)的合成工艺,采用微通道技术,通过对反应溶剂、温度、停留时间和碱的优化,以加快反应速率,提高反应产率。结果表明:采用连续流微通道技术,以(2S,5R)-6-苄氧基-7-氧代-1,6-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-2-羧酸苄酯(Ⅱ)为原料,在氢氧化锂的丙酮水溶液中,温度45℃,反应时间20 min,水解制备得到DBO类新型β-内酰胺酶抑制剂的关键中间体(Ⅰ),经氢谱、碳谱、高分辨质谱鉴定,产物与目标化合物一致,目标产物的收率可达95%。该微通道合成方法显著加快反应速率的同时提高了反应收率,对DBO类新型β-内酰胺酶抑制剂的工业化生产具有应用前景。

枸杞槲皮素对金黄色葡萄球菌产β-内酰胺酶的抑制作用

【目的】探讨枸杞槲皮素对金黄色葡萄球菌产生的β-内酰胺酶的抑制作用机制,为临床研发β-内酰胺酶抑制剂提供基础依据。【方法】通过青霉素抑菌圈边缘试验筛选产β-内酰胺酶阳性菌株,通过药敏纸片法检测阳性菌株在32、64、128μg/mL枸杞槲皮素作用下对青霉素的敏感性变化;借助多功能酶标仪检测在32、64、128、256μg/mL枸杞槲皮素处理下青霉素含量的变化,并以此来评估枸杞槲皮素对β-内酰胺酶合成及在64、128、256μg/mL枸杞槲皮素作用下对β-内酰胺酶活性的影响。通过AutoDockTools 1.5.6软件对枸杞槲皮素与BlaZ蛋白进行分子对接,采用Discovery Studio 2019 Client软件对分子对接结果进行可视化分析。【结果】从36株金黄色葡萄球菌中共筛选出23株产β-内酰胺酶阳性菌株。药敏纸片结果表明,随着枸杞槲皮素浓度的升高,阳性菌株对青霉素的敏感性增加。多功能酶标仪检测结果表明,枸杞槲皮素可以抑制β-内酰胺酶的合成,并显著抑制β-内酰胺酶的活性(P<0.05)。分子对接结果表明,枸杞槲皮素通过与BlaZ蛋白Ω-loop区域内的保守残基Asn161以氢键结合,影响BlaZ蛋白与β-内酰胺类抗生素的结合。【结论】枸杞槲皮素可以减少β-内酰胺酶的合成,还可通过降低β-内酰胺酶的活性增强青霉素的抑菌作用,具有作为β-内酰胺酶抑制剂的潜在活性,为后续开发新型β-内酰胺酶抑制剂提供了参考依据。

回顾性分析头孢菌素皮试原则用于头孢菌素类+β-内酰胺酶抑制剂的适用性

目的分析头孢菌素皮试原则对头孢菌素类+β-内酰胺酶抑制剂(CBI)的适用性。方法收集广州市番禺区中心医院2019年1月至2021年7月使用CBI患者的病历资料,回顾性分析患者年龄、性别、既往过敏史、CBI皮试情况和结果、过敏情况。根据研究目的对患者进行分组,分别比较3大组别(①皮试阴性组和未皮试组;②既往有过敏史组和既往无过敏史组;③既往青霉素、头孢过敏史组和既往非青霉素、头孢过敏史组)使用CBI后过敏反应发生率的差异。结果纳入病例7771例,共用5种CBI,皮试率81.09%(6302/7771)。皮试阳性率0.11%(7/6302),既往青霉素皮试阳性或过敏患者皮试阳性率85.71%(6/7)。过敏20例(17例为速发型过敏反应,3例为迟发型过敏反应),主要症状均为皮疹和瘙痒,停药及对症处理后好转,后期改用其他种类抗菌药物,均未发生过敏反应;过敏患者中既往有过敏史患者8例(含青霉素、头孢过敏5例);皮试阴性组过敏率0.25%(16/6295),未皮试组过敏率0.27%(4/1469),2组过敏率比较差异无统计学意义(P>0.05)。既往有过敏史组过敏率均比既往无过敏史组高,差异均有统计学意义(P<0.05)。而既往青霉素、头孢过敏史组和既往非青霉素、头孢过敏史组过敏发生率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论常规皮试对CBI过敏反应无明显的预测价值,但对既往有过敏史患者有参考价值。既往有过敏史的患者,使用CBI发生过敏的风险比既往无过敏史的患者高,其他过敏原导致过敏的风险并不亚于青霉素类或头孢菌素类。头孢菌素皮试原则总体适用于CBI,但最适皮试液浓度及过敏原风险评估标准仍需进一步研究。

螯合剂类金属β-内酰胺酶抑制剂的研究综述

金属β-内酰胺酶为β-内酰胺酶中的B亚群,如果细菌带有此酶,即会对青霉素类、碳青霉烯类以及头孢菌素类抗生素产生耐药性,细菌产生耐药性并发生转移,导致出现自然界中的细菌出现广泛耐药,单一品种的抗生素难以达到原有效果。螯合剂类金属β-内酰胺酶抑制剂,是与金属酶活性中心Zn2+离子结合或者螯合,从而抑制金属β-内酰胺酶活性。本文在针对金属β-内酰胺酶分类及其分子结构实施分析基础上,综述几种螯合剂类金属β-内酰胺酶抑制剂,以为之后螯合剂类金属β-内酰胺酶抑制剂的研究以及开发提供相关依据。

β-内酰胺酶抑制剂复方制剂非临床研究技术指南

内酰胺酶抑制剂复方制剂在临床上被广泛应用于治疗耐药菌所致感染,由于早期β-内酰胺酶抑制剂的抑酶谱较窄,抑酶谱更广泛的酶抑制剂在不断研发之中。与一般抗菌药物临床前研究不同,β-内酰胺酶抑制剂复方制剂的临床前研究需明确β-内酰胺类药物或酶抑制剂本身的抗菌谱与抗菌活性,尤其是明确酶抑制剂是否具有抗菌活性。需要确定合适的β-内酰胺类药物与酶抑制剂复方制剂,以及适用的不同酶型的目标病原菌。本文主要介绍新型β-内酰胺酶抑制剂复方制剂临床前研究方法。临床前研究阶段的β-内酰胺酶抑制剂复方制剂研究包括体外研究和体内研究两部分,前者主要为体外药效学研究和体外药动学/药效学(pharmacokinetic/pharmacodynamic,PK/PD)研究,常用研究方法包括β-内酰胺类药物和β-内酰胺酶抑制剂复方制剂最低抑菌浓度测定、最低杀菌浓度测定、抗生素后效应测定及时间杀菌曲线。后者主要为动物药动学研究、感染动物药效学研究和感染动物药动学/药效学研究。在动物药动学/药效学研究中,需考虑β-内酰胺类药物与酶抑制剂的相互影响。这些研究方法的应用旨在阐明β-内酰胺酶抑制剂复方制剂两组分药效学特点、药动学相似与否、PK/PD指数及其临床前PK/PD靶值,为进入临床试验阶段目标适应症及剂量选择提供依据。

β内酰胺类/β内酰胺酶抑制剂的体外抗菌活性研究

目的比较不同β内酰胺类/β内酰胺酶抑制剂对肠杆菌科细菌的体外抗菌活性。方法收集临床分离肠杆菌科细菌,用平皿二倍稀释法测定抗菌药最低抑菌浓度(MIC),根据2014版美国临床实验室标准化委员会(CLSI)折点判读结果,用SPSS17.0统计软件处理数据。结果共收集到2166株肠杆菌科细菌。哌拉西林对大肠埃希菌的MIC50和MIC90分别是256,512μg·m L-1,加用他唑巴坦后MIC50和MIC90则分别为2,8μg·m L-1。对产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,哌拉西林/他唑巴坦敏感率最高为93.7%和86.1%,头孢哌酮/他唑巴坦为91.59%和82.59%,头孢哌酮/舒巴坦为74.4%和58.37%。复方制剂对非产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的敏感率与单用β内酰胺类相差不大。β内酰胺类抗菌药对普通变形杆菌的敏感率比奇异变形杆菌高,但加用β内酰胺酶抑制剂后两者敏感率差不多。美洛西林/舒巴坦对摩根菌属敏感率为97.4%,明显高于单用美洛西林的76.3%。头孢噻肟/他唑巴坦和头孢曲松/他唑巴坦对肠杆菌科细菌的MIC90比单用头孢噻肟和头孢曲松低。结论β内酰胺类/β内酰胺酶抑制剂对肠杆菌科细菌的抗菌活性比单用β内酰胺类抗菌药强,尤其对产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌差异更为明显,其中以哌拉西林/他唑巴坦的抗菌活性最强。

β-内酰胺酶抑制剂复方制剂临床应用分析

目的分析β-内酰胺酶抑制剂复方制剂在兰州大学第二医院的临床应用情况,为合理用药提供参考。方法通过兰州大学第二医院信息管理系统调取2017—2020年β-内酰胺酶抑制剂复方制剂的使用信息,包括药物名称、规格、销售总量及销售总金额。结果2017—2020年,大部分β-内酰胺酶抑制剂复方制剂用药频度总体呈下降趋势,限定日费用均逐渐下降。医院大部分β-内酰胺酶抑制剂复方制剂的使用较合理,而注射用头孢哌酮钠他唑巴坦钠(1.125 g/支)及注射用哌拉西林钠舒巴坦钠(1.5 g/支)的销售金额排序与用药频度排序的比值(B/A值)在一定时期内均偏离1。结论医院需进一步加强β-内酰胺酶抑制剂复方制剂合理使用与规范化管理。

β－内酰胺类抗生素与β－内酰胺酶抑制剂复方制剂的体外抗菌作用

用琼脂稀释法测定Ａｕｇｍｅｎｔｉｎ（ＡＵＧ）、Ｔｉｍｅｎｔｉｎ（ＴＩＭ）和Ｕｎａｓｙｎ（ＵＮＡ）对６８５株临床分离菌的体外抗菌作用，并与其他抗菌药物进行比较。６８５株细菌中４５９株细菌产β－内酰胺酶。产酶菌对阿莫西林，替卡西林和氨苄西林的耐药率均很高，ＡＵＧ、ＴＩＭ和ＵＮＡ与上述抗生素相比有明显的增效作用，抗菌谱亦有扩大。３种复方制剂对大肠杆菌、肺炎克雷伯氏菌、变形杆菌属和志贺菌属的抗菌作用与哌拉西林、庆大霉素和诺氟沙星相似或略强；对葡萄球菌中甲氧西林敏感株的作用与苯唑西林、头孢唑林相仿，明显优于红霉素、青霉素；对脆弱类杆菌的抗菌作用与甲硝唑相仿。

β-内酰胺酶抑制剂与β-内酰胺类抗生素联合应用的抗菌作用评价

β－内酰胺类抗生素是临床上应用最广，抗感染效果最好的一类抗菌药物，但目前细菌对这一类药物耐药已成为一个严重的问题。细菌耐药机制中最主要的机制是细菌通过产生β－内酰胺酶破坏β－内酰胺类抗生素。解决细菌产酶耐药问题的方法之一是开发β－内酰胺酶抑制剂，与β－内酰胺类抗生素联合应用，通过酶抑制剂灭活β－内酰胺酶，从而使不耐酶的抗生素发挥它们原有的抗菌作用。现有的酶抑制剂ＢＲＬ４２７１５、克拉维酸、他唑巴坦和舒巴坦均有较好的抑酶作用，并能增强不耐酶抗菌药物对产酶耐药菌的抗菌作用。体外抗菌试验结果证明ＢＲＬ４２７１５与抗菌药物联合，增强原抗菌药物的抗菌作用效果最明显，他唑巴坦和克拉维酸次之、舒巴坦稍弱。它们与抗菌药物联合的临床试验结果也证明了这一点。

喹诺酮类与β-内酰胺类/β-内酰胺酶抑制剂复方联合对嗜麦芽寡养单胞菌的抗菌活性

目的 了解嗜麦芽寡养单胞菌 (Strenotrophomonasmaltophilia)在延时培养时对喹诺酮类与 β 内酰胺 /酶抑制剂复方的MIC影响及联合应用抗菌活性。方法 微量肉汤稀释法测定MIC ,时间杀菌试验进行联合药敏试验并与棋盘法比较 ,并作耐药频率测定。结果 五种抗生素 48h测得MIC较 2 4h的MIC高 1～ 3倍 ;2 4h棋盘法测得头孢哌酮 /舒巴坦、替卡西林 /克拉维酸分别与左氧氟沙星、洛美沙星、环丙沙星联合用药对嗜麦芽寡养单胞菌的协同作用为 73 %～ 80 % ,48h则较 2 4h低 1 0 %～ 2 0 %。与时间杀菌试验测得的协同作用 50 %～ 66 %相近。联合用药的耐药频率明显低于单独用药。结论 48h判定MIC值可能更准确地反映嗜麦芽寡养单胞菌对抗生素的敏感性。时间杀菌试验较棋盘法更能真实反映出联合用药的效果。联合用药能减少细菌的耐药频率。

β内酰胺类/β内酰胺酶抑制剂复方抗菌药的药代动力学/药效学研究进展

β内酰胺类/β内酰胺酶抑制剂复方制剂是治疗产β内酰胺酶耐药菌感染的药物之一。β内酰胺类药物的T>MIC用于确定给药方法、给药剂量,预测药物临床治疗效果。其与β内酰胺酶抑制剂组成的复方抗菌药物,仍是时间依赖性抗菌药物;复方制剂的抗菌药需T>MIC超过给药间隔的40%～50%。需注意复方制剂两组分间的药代动力学应具备良好的同步性。

胶束电动毛细管色谱法测定含β-内酰胺酶抑制剂的青霉素类药物

目的 :采用胶束电动毛细管色谱法使 3种青霉素类药物 (氨苄西林、阿莫西林、替卡西林 )及两种 β 内酰胺酶抑制剂(克拉维酸、舒巴坦 )的混合物得到分离测定。方法 :选用硼酸钠 磷酸盐缓冲液 (pH8.5 ) ;恒定电压 2 0kV ,运行电流 110 μA,检测波长 2 14nm。选择苯巴比妥为内标。结果 :各组分在 5～ 8min之间得到完全分离 ,浓度与峰面积比间呈良好的线性 ,线性范围为 0 .0 5～ 3g·L-1,RSD <2 % (n =10 ) ,回收率为 93.30 %～ 10 1.1% ,RSD <2 % (n =10 ) ,结论 :该法分离效率高 ,试剂用量少 ,准确 ,简便 ,快速。

青霉烷砜类β-内酰胺酶抑制剂的研究进展

青霉烷砜类衍生物是一类重要的β－内酰胺酶抑制剂。本文从２－位和６－位取代青霉烷砜两个方面，分别综述了近几年来化学合成青霉烷砜类衍生物的研究进展，并对这类化合物的抑酶活性及其与β－内酰胺类抗生素联用后产生的抗菌协同作用进行了介绍。

β-内酰胺类抗生素与β-内酰胺酶抑制剂不同配比复方制剂的体外体内抗菌作用研究

β-内酰胺类抗生素与β-内酰胺酶抑制剂联合使用是减少β-内酰胺类抗生素产生耐药性的有效方法。本文综述了β-内酰胺类抗生素与β-内酰胺酶抑制剂不同配比复方制剂体外体内抗菌作用的研究概况和最新进展,为进一步开发复方制剂提供依据。

β-内酰胺酶抑制剂与β-内酰胺类抗生素联用在兽医学上的应用

20世纪40年代,第一个β-内酰胺类抗生素青霉素的研制和应用,开创了抗生素治疗细菌性疾病的光辉时代。但细菌的耐药性也因抗生素的广泛应用而变得日益普遍,细菌对β-内酰胺类抗生素最主要的耐药机制是产生β-内酰胺酶,破坏β-内酰胺环使抗生素失活。β-内酰胺酶抑制剂的研制应用,恢复了β-内酰胺类抗生素的有效性,使β-内酰胺类抗生素得以继续发挥其在临床上强大的治疗作用。本文主要综述了β-内酰抑制剂的作用机制及其与β-内酰胺类抗生素联用的抗菌活性,以及在兽医临床上的应用概况。为有效地应用β-内酰胺类抗生素控制耐药菌感染提供参考。

β内酰胺类与β内酰胺酶抑制剂对耐多药肺结核病的广泛应用

目的结核病是由结核分枝杆菌引起的慢性传染性疾病[1],临床上主要以咳嗽、咳血、盗汗、乏力为主要表现。多因体质虚弱、机体抵抗力下降所致,随着科学的发展,经过合理的化疗,大多数患者得到了治愈。但仍有部分患者由于单一长期的用药,而成为了耐多药肺结核病人。给社会和家庭带来了很大的经济负担。方法将2000例肺结核病人,随机分为两组,一组为含β-内酰胺类和β内酰胺酶抑制剂混合制剂的化疗药物组称联用组,另一组为未联用组进行观察。结果联合用药可缓解结核病的中毒症状,使其治愈率明显提高。结论表明两组关于治愈率的比较差别很大,说明联用组治愈肺结核的整体效果优于未联用组,提示β-内酰胺类和β内酰胺酶抑制剂混合在一起可提高治愈肺结核的整体治愈率。