大肠杆菌β-内酰胺酶耐药基因bla_(TEM),bla_(SHV),bla_(CTX-M)三重PCR检测方法建立

本研究以我国大肠杆菌中常见的3种β-内酰胺酶耐药基因(bla,TEMblaSHV和blaCTX-M)作为目的基因,设计3对特异性引物,建立了blaTEM,blaSHV和blaCTX-M耐药基因三重PCR检测方法。三重PCR反应体系为:10×PCR缓冲液2.5μL,MgCl2(25mmol/L)2.5μL,dNTP(2.5mmol/L)4μL,blaTEM,blaSHV和blaCTX-M上下游引物(25μmol/L)分别为0.25μL、0.5μL、1.0μL,Taq DNA聚合酶(2.5U/μL)0.4μL,模板2.5μL,反应总体积为25μL。反应参数为:94℃5min,94℃50s,55℃55s,72℃1min,32个循环,72℃延伸5min。本方法的建立为大肠杆菌中β-内酰胺酶耐药基因的快速检测及分子流行病学调查提供了新的手段。

食源性产超广谱β-内酰胺酶的致泻性大肠埃希菌的毒力基因分型及耐药分析

目的分析食源性产超广谱β-内酰胺酶(ultraspectrumβ-lactamase,ESBLs)的致泻性大肠埃希菌(diarrheagenic Escherichia coli,DEC)的毒力基因分型特征及耐药情况。方法以苏州市食源性疾病监测中通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)进行毒力基因检测并分型的285株DEC为研究对象,采用微量肉汤法对29种抗菌药进行药敏试验,其中头孢噻肟/克拉维酸(CTX/C)及头孢他啶/克拉维酸(CAZ/C)用于检测其是否产ESBLs,其余27种抗生素根据其最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)判定敏感(S)、中介(I)及耐药(R)。采用χ^(2)检验或Fisher精确概率法比较产ESBLs的DEC与非产ESBLs的DEC间的耐药差异。结果苏州市检出的285株DEC中,产ESBLs的DEC为47株,占比16.49%(47/285),毒力基因型以肠道聚集性大肠埃希菌(enteroaggregative Escherichia coli,EAEC)为主(38.30%,18/47)。总耐药率为97.87%(46/47),对23种抗生素产生耐药,对氨苄西林(ampicillin,AMP)、头孢唑啉(cefazolin,CFZ)、头孢呋辛(cefuroxime,CXM)、头孢噻肟(cefotaxime,CTX)、头孢噻呋(ceftiofur,CEF)、四环素(tetracycline,TET)、萘啶酸(nalidixic acid,NAL)、甲氧苄氨嘧啶/磺胺甲噁唑(trimethoprim/sulfamethoxazole,SXT)的耐药率较高,对头孢他啶/阿维巴坦(CZA)、碳青霉烯类药物(IPM、MEM、ETP)及替加环素(tigacycline,TIG)不耐药;在与非产ESBLs的DEC比较中发现对AMP、氨苄西林/舒巴坦(ampicillin/sulbactam,AMS)、头孢唑啉(cefazoline,CFZ)等13种抗菌药的耐药率存在统计学差异(P<0.05)。产ESBLs的DEC多重耐药率为89.36%(42/47),远高于非产ESBLs的DEC的48.74%(116/238)。产ESBLs的DEC最多见是耐6种抗生素(MDR6),最常见的多重耐药谱为AMP-CFZ-CXM-CTX-CEF-NAL。结论食源性产ESBLs的DEC耐药情况及多重耐药形势均较严峻,应引起公共卫生监测的重视。

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌blaCTX-M基因型及耐药性检测

目的 了解我院产超广谱13，内酰胺酶（extended-spectrumβ-lactamascs，ESBLs）大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中CTX-M型耐药基因的分布及其耐药情况。方法 用针对SHV、TEM、CTX-M基因的特异性引物进行PCR扩增确定超广谱β--内酰胺酶基因型，对扩增到的CTX-M基因进行DNA序列分析；采用三维实验检测菌株产AmpC酶；采用K—B琼脂扩散法进行菌株的药物敏感性测定。结果34株产CTX-M酶菌中有28株同时产2种或2种以上的B．内酰胺酶，并且其中有一株同时产两种CTX-M酶。序列分析证实35份CTX-M的扩增产物中有17份为CTX-M-14，占48．6％；11份为CTX-M-3，占31．4％；4份为CTX-M-9，占11．4％；2份为CTX—M．19，占5．7％；1份为CTX-M-13，占2．9％。产CTX-M酶菌株对氨苄西林、头孢唑啉、头孢噻肟、头孢曲松、头孢呋辛钠、哌拉西林、环丙沙星、头孢吡肟、头孢哌酮，舒巴坦、头孢他啶、头孢西丁、庆大霉素、哌拉西林，他唑巴坦、氨曲南、亚胺培南和美洛培南的耐药率分别是100％、100％、100％、100％、100％、100％、97．1％、52．5％、53．1％、32．4％、38．2％、75．8％、23．5％、63．6％、0、0。产其它亚型ESBLs的菌株对上述药物的耐药率分别是100％、92．9％。78．6％、71．4％、92．9％、92_3％、57．1％、21．4％、7．1％、78．6％、64．3％、64-3％、38．5％、78．6％、0、0。结论 产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中CTX-M型耐药基因主要是CTX-M-14、CTX-M-3、CTX-M-9、CTX-M-19和CTX—M．13；产CTX-M酶菌株绝大多数同时产其它多种β-内酰胺酶，其对头孢唑啉、头孢噻肟、头孢曲松、头孢呋辛钠、哌拉西林、环丙沙星、头孢吡肟、头孢哌酮，舒巴坦的耐药水平高于不产CTX-M型ESBLs株（P〈0．05）；耐药表型呈多样性，亚胺培南或美洛培南是临床治疗产CTX-M酶菌株感染的首选药物。

阴沟肠杆菌中发现β-内酰胺酶基因新亚型blaLAP-2

目的了解本院临床分离的HZB9055号阴沟肠杆菌中常见耐药相关基因存在状况。方法2004年5月从住院病人分离到HZB9055号菌株,采用聚合酶链反应及序列分析方法分析41种(群)耐药基因。结果HZB9055号菌株共检出3种基因,分别为blaLAP、blaMIR、qnrS,其余38种基因均阴性。blaLAP基因扩增序列全长含858个核苷酸,与窄谱β-内酰胺酶LAP-1(GenBank注册号:EF026092)相比,第193位氨基酸有不同,被命名为LAP-2(GenBank注册号:EU159120)。结论HZB9055号阴沟肠杆菌中至少存在3种耐药基因,其中blaLAP-2基因为一种新发现的β-内酰胺酶基因亚型。

对比黏液型肺克超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)表达和毒力基因分布的相关性并对其耐药性进行分析

目的分析黏液型肺克(MT-KPN)的超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)表达、耐药性、毒力基因分布情况。方法收集郑州市第一人民医院2021年3月至2022年3月非重复性KPN 725株,黏液丝试验分离出123株MT-KPN,对其ESBLs表达、耐药性使用CITEK 2 Compact系统分析,毒力基因分布情况使用聚合酶链式反应(PCR)实验分析。结果肺炎克雷伯菌(KPN)检出率最高的科室是重症医学科;同一科室检出KPN类型差异较大的是重症医学科、全科医学科、神经外科,肾内科只检出cKPN;123株MT-KPN包括ESBLs阳性菌34株、ESBLs阴性菌89株。ESBLs阳性菌耐药性高达100.00%的7种药物(头孢呋辛、头孢噻肟、头孢他啶、头孢吡肟、头孢西丁、氨曲南、阿莫西林/克拉维酸),ESBLs阴性菌对上述药物耐药性显著低于ESBLs阳性菌(P<0.05);妥布霉素、亚胺培南、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦耐药性ESBLs阳性菌>ESBLs阴性菌(P<0.05);庆大霉素、美罗培南、环丙沙星、左氧氟沙星耐药性ESBLs阳性菌>ESBLs阴性菌(P>0.05);MT-KPN的荚膜血清型基因检出率wzyK2最高;荚膜血清型基因检出率ESBLs阳性菌、ESBLs阴性菌相比差异无统计学意义(P>0.05);MT-KPN毒力基因检出率最高的是mrkD;aerobactin、iroN、wcaG检出率相比ESBLs阳性菌<ESBLs阴性菌(P<0.05);其他毒力基因检出率ESBLs阳性菌、ESBLs阴性菌相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论MT-KPN携带毒力基因检出率较高,临床需结合其耐药性和毒力基因分布情况合理用药。

产β-内酰胺酶伤寒杆菌与痢疾杆菌blaTEM耐药基因研究

目的:研究新余市产β-内酰胺酶伤寒杆菌与痢疾杆菌blaTEM-1D型耐药基因流行特征。方法:收集新余新钢中心医院、新余市人民医院、新余市中医院、新余市妇幼保健院2008年1月—2010年6月分离出的伤寒杆菌产酶株6株和痢疾杆菌产酶株13株共19株,用头孢哨噻吩滤纸片法做β-内酰胺酶的定性检测,确定为产酶株后,采用PCR技术扩增质粒blaTEM-1D耐药基因,用Mark标记量出扩增子的大小(bp),统计blaTEM-1D耐药基因阳性率。结果:伤寒杆菌、痢疾杆菌产酶株blaTEM-1D耐药基因阳性率分别为66.7%(4/6)、76.9%(10/13)。结论:blaTEM-1D型耐药基因在本地区各家医院间存在水平传播和医院内垂直传播。

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌blaCTX-M基因的检测

目的了解产CTXM型超广谱β内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌在深圳市人民医院的分布情况。方法应用美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的表型确证试验,从2000年6月～2003年8月该院临床标本分离株中筛选出不重复的产ESBLs菌株215株,其中大肠埃希菌151株,肺炎克雷伯菌64株,应用聚合酶链反应(PCR)检测所有产ESBLs株的bla(CTXM)基因。结果PCR结果显示,大肠埃希菌bla(CTXM)基因阳性率为92.1%(139/151),肺炎克雷伯菌的阳性率为65.6%(42/64)。bla(CTXM)基因阳性菌株主要来源于临床送检尿和痰标本,并广泛分布于20多个临床科室。结论该院临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产生的ESBL大多数为CTXM型,该类酶广泛分布于各临床科室,需引起重视。

广州地区革兰阴性杆菌CTX-M和OXA型广谱β-内酰胺酶基因分型研究

目的调查广州地区临床分离的革兰阴性杆菌中CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和OXA型广谱β-内酰胺酶(beta-lactamase,Bla)的主要基因型别及其流行情况。方法按照NCCLS 2001年标准筛选广州地区临床分离菌株的ESBLs表型;用聚合酶链反应(PCR)扩增法和DNA测序法进行ESBLs基因序列分析。结果PCR扩增结果显示,CTX-M1、CTX-M2、CTX-M9群和OXA的总阳性率在本地区临床分离的临床检测ESBLs阳性的革兰阴性杆菌中分别为9.96%、0、35.5%和1.6%,同时检出≥两种ESBLs基因的菌株数64株,阳性率为5.9%;序列分析进一步证实了CTX-M型ESBLs的具体型别,包括CTX-M-3、CTX-M-22、CTX-M-9、CTX-M-14、CTX-M-17、CTX-M-18、CTX-M-21、CTX-M-24、TOHO-2和TOHO-3,其比例分别为3.23%、3.7%、4.99%、3.32%、2.21%、3.69%、2.95%、4.43%、1.85%和1.48%;其中以CTX-M-9和CTX-M-24阳性率较高;在本地区只检出1种OXA型Bla-OXA-2/PSE-2(1.38%,15/1084);另外,还检出了8株无法具体归类的CTX-M-9型ESBLs,占0.74%;CTX-M型基因主要分布于大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中,分别占42.8%和36.3%,而OXA基因则主要分布于铜绿假单胞菌中,占80%。结论本地区CTX-M类ESBLs也较为常见,其中尤以CTX-M-9和CTX-M-24为主,暂无CTX-M2群ESBLs,可能存在1种或多种新的CTX-M型ESBLs。

鸡大肠杆菌TEM和CTX-M型超广谱β-内酰胺酶基因分型研究

【目的】检测鸡大肠杆菌超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的基因型和基因亚型,了解河南省产酶鸡大肠杆菌ESBLs基因型分布。【方法】对河南省7个地区不同鸡场临床分离28株产ESBLs鸡大肠杆菌分别用TEM、SHV和CTX-M等3种通用引物进行PCR扩增及测序分析,确定其基因型和基因亚型。【结果】21株鸡大肠杆菌检出TEM型基因,2株检出CTX-M型基因,5株检出TEM型和CTX-M型两种基因,未检出SHV型。TEM基因亚型以TEM-1变异型为主,与AY293072(TEM-1)相比同源性为98%—99%,核苷酸序列除发生18T→C沉默突变外,尚有3株分别有另一处碱基发生变化:783G→A(C3菌,序列号为FJ405207)、21T→A(X2菌,序列号为FJ405208)和269G→A(F4菌,序列号为FJ405211),其中前两处为沉默突变,F4菌的碱基突变引起92甘氨酸变为天冬氨酸,为TEM-57型。CTX-M基因亚型包括两种:CTX-M-65亚型4株(C2、C3、C4和K1,序列号分别为FJ405191,FJ405192,FJ405212和FJ405214)和CTX-M-14亚型3株(F2、X3和B5,其中F2菌的相关序列已上传至GenBank,获序列号为FJ405213)。【结论】目前河南省产ESBL鸡大肠杆菌基因亚型以TEM-1变异型为主,CTX-M-65和CTX-M-14型次之。

产超广谱β-内酰胺酶表型及基因型分布

目的 了解淮北地区 3 所医院,临床分离产超广谱β 内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中ESBLs表型和基因分布。方法 用1999年NCCLS推荐的初筛试验,从 147 株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中筛选出可疑产ESBLs细菌,并用确证试验加以确认,然后用 PCR的方法扩增其基因型。结果 116 株大肠埃希菌和31株肺炎克雷伯菌中,共检出69株产ESBLs(46 9%),其中大肠埃希菌 51 株(42 2%),肺炎克雷伯菌 18 株(58 1%);将初筛得到的可疑菌株用纸片扩散确证法,头孢噻肟和头孢噻肟/克拉维酸测定,检出 69 株产 ESBLs细菌,而用头孢他啶和头孢他啶/克拉维酸检测ESBLs阳性菌为32株;PCR扩增基因型阳性结果为TEM型 119株、SHV型10株、CTX M型68株、OXA型 18 株。结论 淮北地区 ESBLs的检出率为 46 9%,头孢噻肟检测ESBLs的敏感性明显高于头孢他啶;基因型以CTX M型为主,有些菌株同时携带≥2种耐药基因。

鲍氏不动杆菌耐药性和氨基糖苷类修饰酶、β-内酰胺酶基因研究

目的 了解我国浙江湖州地区鲍氏不动杆菌 (ABA)耐药性和氨基糖苷类修饰酶、β-内酰胺酶基因存在状况。方法 收集 2 0 0 0年 7月～ 2 0 0 2年 12月分离自浙江湖州地区住院患者 6 0株鲍氏不动杆菌进行耐药性和 9种氨基糖苷类修饰酶基因、2种β-内酰胺酶基因检测。结果 该 6 0株菌已呈多重耐药 ;4 9株检出氨基糖苷类修饰酶基因 (81.7% ) ;9种基因由高到低的检出率分别为 :ant(3″) - (6 0 .0 % )、aac(6′) - (5 5 .0 % )、aac(3) - (5 1.7% )、ant(2″) - (2 0 .0 % )、aac(3) - (15 .0 % )、aac(3) - (11.7% )、 aac(6′) - (10 .0 % )、aph (3′) - (3.3% )、 aac(3) - (0 ) ;本研究 ant(3″) - (AY5 5 14 38)、aac(6′) - (AY5 36 0 6 3)、aac(3) - (AY5 2 910 3)序列已登录 Gen Bank;β内酰胺酶基因检出率分别为 :TEM 10 0 %、SHV 30 .0 % ;本研究 TEM- 1(AY2 6 3331)、TEM- 12 8(AY35 92 87)、SHV- 12 (AY2 5 916 3)、SHV - 4 8(AY 2 5 916 4 )、SHV- 5 6 (AY35 2 5 99)序列已登录 Gen Bank。结论 我国浙江湖州地区 ABA菌已呈多重耐药 ;氨基糖苷类修饰酶基因。

多重耐药铜绿假单胞菌产超广谱β-内酰胺酶基因研究

目的调查多重耐药铜绿假单胞菌(PAE)产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因的流行状况。方法采用琼脂稀释法对35株临床分离的PAE进行抗菌药物敏感试验,PCR方法检测7种ESBLs基因。结果35株PAETEM、OXA、PER、GES的阳性率分别为51.4%、42.8%、31.4%、22.9%,而SHV、VEB、CTX-M-1基因均阴性。结论我院临床分离PAETEM、OXA、PER、GES基因携带率高,检出GES基因为国内首次报道。

新疆地区鲍曼不动杆菌β-内酰胺酶基因研究

目的了解20株鲍曼不动杆菌(A.baumannii,AB)β-内酰胺酶基因存在状况。方法用PCR方法对20株AB菌的9种β-内酰胺酶基因进行检测。结果20株AB菌中blaTEM阳性13株(65%)、blaADC阳性12株(60%)、blaSHV阳性1株(5%),其余β-内酰胺酶基因均阴性;1株blaSHV测得序列经比对为blaSHV-36型;1株blaADC作全长基因测序,测得序列经比对与美国核酸库已登录的blaADC DNA序列均不同,为新亚型。结论该20株AB菌对β-内酰胺类抗生素耐药与产β-内酰胺酶密切相关。

肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶基因型研究

目的探讨我院肺炎克雷伯菌中超广谱β-内酰胺酶(ESBL s)基因分布规律。方法对20株经双纸片试验确证为ESBL s表型阳性的肺炎克雷伯菌进行blaTEM-1、blaSHV-1、CTX-M-1组、TOHO-1组等4种基因PCR扩增,并对16株blaSHV-1基因PCR扩增阳性的菌株进行基因序列测定,在In ternet网上与G enB ank中的已知序列进行核苷酸相似性分析,并进行编码基因对位和氨基酸序列对比分析。结果产ESBL s肺炎克雷伯菌中blaTEM-1、blaSHV-1、CTX-M-1组等3种基因扩增阳性率分别是50.0%、95.0%、20.0%。16株肺炎克雷伯菌中有4株序列与SHV-1a(序列号:X 98101,74→934)氨基酸序列完全相同;有3株序列与SHV-2(序列号:AY 570959,42→812)100%相同;有2株序列与SHV-11(序列号:AY 293069,41→817)100%相同;有4株序列与SHV-27(序列号:AF 293345,2→821)氨基酸序列完全相同;有1株序列与SHV-28(序列号:AF 538324,12→823)100%相同;有2株序列在G enB ank中未找到与之完全相同的序列。结论本地肺炎克雷伯菌中有SHV-1a、SHV-11、SHV-28广谱β-内酰胺酶基因和SHV-2、SHV-27 ESBL s基因存在。

70株鲍曼不动杆菌耐药性及β-内酰胺酶基因型检测

目的调查和研究南京地区70株鲍曼不动杆菌耐药性及β-内酰胺酶基因型。方法用KB法测定临床分离的70株鲍曼不动杆菌对5种抗生素的耐药性,采用PCR法检测β-内酰胺酶耐药基因型。结果70株鲍曼不动杆菌对头孢哌酮/舒巴坦耐药率为7·1%,头孢吡肟和头孢他啶的耐药率分别为61·4%和64·3%,头孢唑啉和头孢呋肟的耐药率均在80·0%以上;有40株菌检测到TEM型β-内酰胺酶基因,且均对头孢吡肟等抗生素耐药,2株为GES型,1株是VEB型,未检出CARB、DHA和PER基因。结论南京地区鲍曼不动杆菌以TEM型为主,其对β-内酰胺类的高耐药率与TEM型基因有直接的关系。

大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶基因型研究

目的了解医院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的基因型和耐药性。方法收集产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的临床菌株30株,应用PCR基因扩增技术及DNA测序方法,分别对其TEM、SHV、CTX-M、VEB、PER编码基因进行分析。结果在30株菌株中有26株为CTX-M型,占86.67%;其中CTX-M-9型共计16株占61.5%,CTX-M-1型8株占30.8%,CTX-M-2型7株占26.9%;同时产CTX-M-1型及CTX-M-2型共4株占15.4%,产CTX-M-2型及CTX-M-9型1株占3.8%,产CTX-M-1型及CTX-M-9型1株占3.8%。结论产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的主要临床流行基因型是CTX-M-9型。

耐亚胺培南细菌金属β-内酰胺酶IMP基因的检测

目的 :探讨并建立金属 β 内酰胺酶IMP基因的PCR方法。 方法 :临床分离的病原菌用全自动微生物分析系统鉴定 ,纸片扩散法进行抗生素敏感试验 ,采用 2 巯基丙酸络合金属离子的纸片扩散法来检测金属酶表型 ,PCR法检测金属酶IMP基因。结果 :2 7株耐亚胺培南细菌金属酶表型共检出产金属酶菌株 8株 ,其中铜绿假单胞菌 7株、嗜麦芽窄食单胞菌 1株 ;7株表型产金属酶铜绿假单胞菌IMP基因扩增阳性 ,其他扩增均阴性。结论 :该方法是一种灵敏度高。

多药耐药鲍曼不动杆菌β-内酰胺酶基因和膜孔蛋白基因研究

目的调查多药耐药鲍曼不动杆菌(MDR-ABA)β-内酰胺酶基因和膜孔蛋白carO基因情况。方法收集分离自宁波市李惠利医院2009年6月至2009年9月住院患者的MDR-ABA共20株,采用聚合酶联反应(PCR)及序列分析的方法分析21种β-内酰胺酶基因和膜孔蛋白carO基因。结果 20株MDR-ABA共检出3种β-内酰胺酶基因:TEM、SHV、ADC,阳性率分别为80.0%(16/20)、5.0%(1/20)、30.0%(6/20),其余18种β-内酰胺酶基因未检出,膜孔蛋白carO基因缺失率70.0%(14/20)。2号株ADC阳性基因测得序列经BLAST比对与已在GenBank登录的ADC型AmpC均不相同,经与GenBank登录的ADC型序列分子进化分析,确认为ADC型β-内酰胺酶新的变异型。结论本组MDR-ABA多种β-内酰胺类药物耐药与产TEM、SHV、ADC等3种β-内酰胺酶相关外,还与膜孔蛋白编码基因carO缺失有关。

多重耐药革兰阴性杆菌产β-内酰胺酶的表型及基因型研究

目的了解革兰阴性杆菌产β-内酰胺酶表型及基因分型,并分析其耐药特性。方法以纸片扩散初筛法、扩散确证法、头孢西丁三维试验、MBL的协同试验了解β-内酰胺酶的表型,用PCR技术进行扩增并进行DNA测序;药敏试验采用K-B法,分析其耐药特性。结果多重耐药革兰阴性杆菌β-内酰胺酶的表型总检出率为26.49%,主要由产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)引起,占16.56%;其次为ESBLs+头霉素酶(AmpC)引起,占6.62%;ESBLs+AmpC+金属酶(MOL)引起,占1.66%,单独由AmpC引起的仅占0.66%,有3株未能定型0.99%;β-内酰胺酶的基因型总检出率为24.83%,单产ESBLs的多重耐药革兰阴性杆菌株占17.55%,同时产ESBLs与AmpC的菌株占6.95%,产ESBLs、MBL与AmpC的菌株占0.33%,单产AmpC的菌株占0.33%;多重耐药革兰阴性杆菌对临床常用抗菌药物的总体耐药率最低为阿米卡星(18.75%)、最高为氨苄西林(97.50%),大部分细菌呈多重耐药性。结论多重耐药革兰阴性杆菌携带多种β-内酰胺酶,具有多重耐药性。

产金属β-内酰胺酶铜绿假单胞菌的基因检测及耐药性研究

目的 研究本地区铜绿假单胞菌临床分离株中产金属 β -内酰胺酶流行株的主要基因型和耐药性。 方法 用纸片扩散法进行抗生素协同敏感试验 ,检测产金属 β -内酰胺酶的铜绿假单胞菌 ,用琼脂稀释法检测其最低抑菌浓度 (MIC) ,分别用金属酶IMP - 1,IMP - 2 ,VIM - 1和VIM - 2引物进行聚合酶链反应 (PCR)并对扩增产物进行序列分析。结果 在 82株耐亚胺培南铜绿假单胞菌中 ,抗生素协同敏感试验阳性 7株 ,PCR检测金属 β -内酰胺酶阳性株也为这 7株 ,且基因型均为VIM - 2型。产酶株对亚胺培南、头孢噻肟、头孢他啶、哌拉西林 /他唑巴坦等常用抗铜绿假单胞菌 β -内酰胺类抗生素不敏感 ,对氨曲南较为敏感。结论 本地区铜绿假单胞菌所产金属 β-内酰胺酶为VIM - 2型 ,且产酶株耐药性强 ,应注意对其进行临床检测和监控。