黄精多糖对β淀粉样蛋白诱导细胞损伤的保护作用及机制研究

目的探讨黄精多糖(Polygonatum sibiricum polysaccharides,PSP)对β淀粉样蛋白(25-35)[βamyloid protein(25-35),Aβ_(25-35)]诱导的SH-SY5Y细胞氧化损伤及凋亡的神经保护作用及其机制。方法通过CCK-8实验确定Aβ_(25-35)和PSP的干预浓度和时间,并将细胞分为对照组、模型组、低、中、高剂量组。检测细胞的凋亡、线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)水平、细胞色素C(cytochrome C,Cyt C)含量、胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量以及多种抗氧化酶活性变化。采用蛋白质印迹法(western blot,WB)实验检测Nrf2/HO-1和JAK2/STAT3信号通路相关蛋白表达。结果与模型组相比,PSP能够显著恢复细胞活力,清除胞内ROS,升高细胞MMP,减少线粒体Cyt C释放,抑制凋亡蛋白的生成。同时能够逆转Aβ_(25-35)对Nrf2/HO-1信号通路的抑制,降低JAK2/STAT3通路的磷酸化程度。结论PSP可通过上调Nrf2/HO-1信号通路相关蛋白分子的表达,逆转JAK2/STAT3信号通路的磷酸化,减轻氧化损伤,改善线粒体功能并最终抑制细胞凋亡。

缺血性脑血管病患者血清β淀粉样蛋白和壳多糖酶3样蛋白1水平与颈动脉病变的关系

目的探讨缺血性脑血管病(ICD)患者血清β淀粉样蛋白(Aβ)和壳多糖酶3样蛋白1(CHI3L1)水平与颈动脉病变的关系。方法选取2019年1月—2023年5月沧州市中心医院ICD患者298例(ICD组)、健康体检者300名(对照组)。根据颈动脉内膜中层厚度(ITM)、斑块积分和颈动脉狭窄程度分别分组。收集所有研究对象一般资料,并检测血清Aβ、CHI3L1、糖化血红蛋白(Hb A1c)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平。采用偏相关分析评估血清Aβ、CHI3L1水平与颈动脉病变的相关性。结果ICD组血清TG、TC、LDL-C、Aβ和CHI3L1水平均高于对照组(P<0.01),其他指标2个组之间差异均无统计学意义(P>0.05)。内膜正常组、内膜增厚组、斑块形成组血清Aβ和CHI3L1水平依次升高(P<0.001)。轻度硬化组、中度硬化组和重度硬化组血清Aβ和CHI3L1水平依次升高(P<0.001)。轻度狭窄组、中度狭窄组和重度狭窄组血清Aβ、CHI3L1水平依次升高(P<0.001)。血清Aβ和CHI3L1水平与ITM、斑块积分和颈动脉狭窄程度均呈正相关(P<0.001)。结论ICD患者血清Aβ和CHI3L1水平升高,且与颈动脉病变密切相关,或可作为反映ICD患者颈动脉病变程度的指标。

β淀粉样蛋白42寡聚体诱导神经元毒性和阿尔茨海默病病理形成

目的探究β淀粉样蛋白(Aβ)42寡聚体对神经元毒性的作用及诱导产生类似阿尔茨海默病(AD)病理的机制。方法采用Western blot检测和透射电子显微镜对合成的Aβ_(42)寡聚体进行鉴定。为评估Aβ_(42)寡聚体的影响,使用2,5-二苯基四氮唑溴盐检测细胞活性,将10μmol/L的Aβ_(42)寡聚体与人神经母细胞瘤系(SH-SY5Y)细胞共孵育12h和24h,与人胚胎干细胞(hESC)衍生的谷氨酸能神经元共孵育24h、48h和96h,同时设立相应对照组。原位末端标记法检测谷氨酸能神经元凋亡情况;免疫荧光染色法检测AD相关病理Aβ斑块及p-tau病理变化。结果Western blot显示,Aβ_(42)寡聚体样品中观察到单体和小分子量聚集体(<30000)。透射电子显微镜成像显示,Aβ_(42)寡聚体主要呈圆球形颗粒状。10μmol/L的Aβ_(42)寡聚体与SH-SY5Y细胞共孵育12h、24h,细胞存活率显著低于其对照组[(70.89±2.54)%vs(100.00±2.02)%,(52.63±3.37)%vs(100.00±2.80)%,P<0.05]。10μmol/L的Aβ_(42)寡聚体与谷氨酸能神经元共孵育24h、48h和96h,细胞存活率显著低于其对照组(P<0.05)。10μmol/L的Aβ_(42)寡聚体与谷氨酸能神经元共孵育48h、96h,凋亡率显著高于其对照组[(1.44±0.31)%vs(1.00±0.38)%,(1.75±0.64)%vs(1.00±0.31)%,P<0.05]。10μmol/L的Aβ_(42)寡聚体与谷氨酸能神经元共孵育24h、48h、96h,均产生呈圆形颗粒状的Aβ斑块阳性信号,其对照组均无Aβ斑块阳性信号。10μmol/L的Aβ_(42)寡聚体与谷氨酸能神经元共孵育24h,细胞在Thr231位点处产生tau过度磷酸化,Aβ_(42)寡聚体组平均荧光强度显著高于其对照组(P<0.05)。结论Aβ_(42)寡聚体对SH-SY5Y细胞和谷氨酸能神经元均具有毒性,可以诱导谷氨酸能神经元产生AD样病理。

TLR-7对阿尔茨海默病细胞模型β淀粉样蛋白表达及炎症反应的调控作用及机制

目的探究Toll样受体7(TLR-7)在阿尔茨海默病人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)模型中对β淀粉样蛋白表达及神经炎症反应的调控作用及机制。方法构建稳定表达β淀粉样前体蛋白瑞典型突变(APPswe)的阿尔茨海默病模型细胞SH-SY5Y/APPswe,将细胞分为SH-SY5Y组、SH-SY5Y/APPswe组、TLR-7敲低SH-SY5Y/APPswe(SH-SY5Y/APPswe+sh-TLR-7)组、敲低对照SH-SY5Y/APPswe(SH-SY5Y/APPswe+sh-NC)组、TLR-7敲低+miR-15b抑制SH-SY5Y/APPswe(SH-SY5Y/APPswe+sh-TLR-7+miR-15b inhibitor)组和TLR-7敲低+微小RNA-15b(miR-15b)抑制对照SH-SY5Y/APPswe(SH-SY5Y/APPswe+sh-TLR-7+inhibitor NC)组。蛋白质印迹法检测β淀粉样前体蛋白(APP)的表达;实时荧光定量PCR实验检测TLR-7、miR-15b、β淀粉样前体蛋白裂解酶1(BACE1)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA的表达;酶联免疫吸附实验检测β淀粉样蛋白42(Aβ42)以及IL-1β、IL-6和TNF-α的分泌;荧光素酶报告基因实验检测核因子κB(NF-κB)活性。结果与SH-SY5Y组比较,SH-SY5Y/APPswe组细胞APP表达水平上调,Aβ42分泌水平增加[(11.24±0.76)ng/mL比(2.09±0.17)ng/mL,P<0.01)];与SH-SY5Y/APPswe+sh-NC组比较,SH-SY5Y/APPswe+sh-TLR-7组miR-15b表达水平上调[(2.98±0.21)比(1.10±0.05),P<0.01],BACE1 mRNA表达水平下降[(0.72±0.06)比(1.02±0.03),P<0.01],Aβ42分泌水平下降[(6.09±0.42)ng/mL比(10.52±0.67)ng/mL,P<0.01],IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA表达水平下降[IL-1β:(3.34±0.25)比(4.62±0.41),P<0.01;IL-6:(3.75±0.34)比(5.43±0.31),P<0.01;TNF-α:(1.25±0.11)比(2.07±0.18),P<0.01],IL-1β、IL-6和TNF-α分泌水平下降[IL-1β:(61.40±7.76)pg/mL比(101.76±7.95)pg/mL,P<0.01;IL-6:(547.29±39.11)pg/mL比(893.35±101.43)pg/mL,P<0.01;TNF-α:(256.17±24.32)pg/mL比(375.28±33.99)pg/mL,P<0.01],NF-κB活性下降[(3.25±0.31)比(5.01±0.52),P<0.01]。与SH-SY5Y/APPswe+sh-TLR-7+inhibitor NC组比较,SH-SY5Y/APPswe+sh-TLR-7+miR-15b inhibitor组miR-15b表达水平下降[(0.67±0.13)比(2.96±0.35),P<0.01],BACE1 mRNA表达水平升高[(1.39±0.42)比(0.71±0.05),P<0.05],Aβ42分泌水平升高[(19.54±3.01)ng/mL比(7.47±1.58)ng/mL,P<0.01],IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA表达水平升高[IL-1β:(6.07±0.43)比(3.55±0.33),P<0.01;IL-6:(5.98±0.28)比(4.02±0.22),P<0.01;TNF-α:(1.88±0.21)比(1.36±0.20),P<0.01],IL-1β、IL-6、TNF-α分泌水平升高[IL-1β:(155.32±13.67)pg/mL比(68.62±5.41)pg/mL,P<0.05;IL-6:(1255.49±119.79)pg/mL比(439.73±60.01)pg/mL,P<0.05;TNF-α:(423.66±34.32)pg/mL比(227.82±26.53)pg/mL,P<0.05],NF-κB活性升高[(5.91±0.66)比(3.58±0.27),P<0.01]。结论TLR-7可能通过miR-15b调控NF-κB信号通路,并影响阿尔茨海默病模型细胞β淀粉样蛋白的分泌及神经炎症反应。

转甲状腺素蛋白抑制β淀粉样蛋白聚集的分子机制研究

目的转甲状腺素蛋白(transthyretin,TTR)对阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)具有神经保护作用,这种保护作用表现在TTR能抑制β淀粉样蛋白(amyloid beta protein,Aβ)的病理性聚集。本工作将从分子层面上探究TTR与Aβ的作用机制,揭示TTR对AD的神经保护作用。方法蛋白质-蛋白质对接用于探究不同结构形式的TTR与Aβ的作用模式,并运用分子动力学模拟方法来探究二者相互作用的动态过程。结果TTR四聚体及单体均能与Aβ单体作用,TTR四聚体的甲状腺素结合通道是Aβ单体的主要结合部位。此外,TTR四聚体的EF螺旋、EF loop同样能够结合Aβ单体。当TTR四聚体解离后,TTR单体的内部片层疏水部位暴露,该部位对Aβ单体具有较强的亲和力。TTR与Aβ聚集体作用,由于TTR单体与Aβ聚集体均为富含β折叠的结构,使得二者能够共聚集形成聚合度更高的聚集体,从而降低Aβ聚集体的细胞毒性。结论TTR四聚体和单体通过“扣押”Aβ单体来抑制Aβ的聚集,TTR单体与Aβ聚集体形成高聚合度复合物来降低Aβ聚集体的细胞毒性。本工作为基于TTR神经保护作用的抗AD药物设计和发现提供了重要的理论依据。

UPLC-MS/MS法分析β淀粉样蛋白中Asp残基的外消旋化

目的:建立β淀粉样蛋白中Asp外消旋化的LC-MS/MS分析方法。方法:采用胰蛋白酶和Glu-C酶两步酶解β淀粉样蛋白,酶解产物LC-MS/MS分析的色谱条件:分离柱为InfinityLab Poroshell 120 EC-C18色谱柱(2.7μm,3.0×150 mm Agilent),流动相A为5%乙腈-0.1%甲酸水,流动相B为75%乙腈-水,梯度洗脱(0~30 min,0~28%B;30~30.01 min,28%~100%B;30.01~35 min,100%~100%B;35.0~35.01 min,100%~0%B;35.01~40 min,0%B),流速为0.3 mL/min。质谱条件:采用电喷雾离子源及正离子多反应监测模式(SRM)定量。结果:在L型多肽存在下,D型多肽的质量浓度在1~250 ng/mL内,其峰面积与多肽的质量浓度之间线性良好(r>0.999),最低定量限(LLOQ)为1 ng/mL;LLOQ、低(LQC)、中(MQC)、高浓度(HQC)日内和日间精密度RSD值均小于15%,加样回收率为85.3%~107.3%。建立的方法对D/(D+L)型淀粉样蛋白为2%~50%的混合样本中Asp1,Asp23外消旋化测定结果准确,准确度在95.35%~117%之间。联合胰蛋白酶与Glu-C成功鉴定了淀粉样蛋白中Asp7残基的外消旋化。结论:所建立的方法可用于淀粉样蛋白中Asp残基外消旋化的分析,该方法操作简便,结果准确,灵敏度高。

阿尔茨海默病风险人群的超早期β淀粉样蛋白沉积与默认网络模式的关联研究

目的 探讨阿尔茨海默病风险人群的超早期脑脊液β淀粉样蛋白(Aβ)沉积与默认网络(DMN)功能连通性的关系。方法 纳入阿尔茨海默病神经影像学计划从2010年7月至2018年12月在北美地区招募的轻度认知障碍受试者,根据36个月随访期脑脊液Aβ的变化将受试者分为Aβ下降组(25例)和稳定组(19例)。运用脑功能MRI技术研究脑脊液Aβ下降、DMN功能连通性和认知功能变化的关系。结果 相较于Aβ稳定组,Aβ下降组在随访过程中连线测试-B(TMT-B)时间延长(P<0.05)。在双侧枕中回和左侧颞中回,Aβ下降组DMN功能连通性低于Aβ稳定组(P<0.01);其中,左侧颞中回的功能连通性与TMT-B时间呈负相关(r<0,P<0.05)。结论 超早期Aβ沉积与颞枕叶DMN功能连通性下降密切相关,且导致了执行功能损害。

阿尔茨海默病患者血清中人β淀粉样蛋白1-42和人磷酸化tau-181蛋白的临床检测意义

目的探讨阿尔茨海默病(AD)患者血清中人β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)和人磷酸化tau-181蛋白(p-tau-181)的临床检测意义。方法选取60例AD患者作为AD组,依据简易智力状态检查表(MMSE)评分不同分为轻度AD组(20例)、中度及以上AD组(40例);选择同期进行体检的75例健康受试者作为健康对照组。对两组血清Aβ1-42和p-tau-181水平进行检测。比较AD组与健康对照组不同性别血清Aβ1-42和p-tau-18水平;AD组与健康对照组血清Aβ1-42和p-tau-18水平;AD组不同严重程度血清Aβ1-42和p-tau-18水平。结果健康对照组中男性受试者血清Aβ1-42和p-tau-18水平与女性比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。AD组中男性患者血清Aβ1-42和p-tau-18水平与女性比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。AD组血清Aβ1-42和p-tau-18水平分别为(102.0±12.3)、(22.1±6.9)pg/ml,显著高于健康对照组的(33.7±10.6)、(10.9±7.1)pg/ml,差异有统计学意义(P<0.05)。中度及以上AD组血清Aβ1-42和p-tau-18水平分别为(108.2±11.1)、(25.3±7.3)pg/ml,高于轻度AD组的(89.6±9.8)、(15.7±8.6)pg/ml,差异有统计学意义(P<0.05)。结论AD患者中血清Aβ1-42和p-tau-181均呈高表达,且其浓度与AD患者病情严重程度呈正相关。

β淀粉样蛋白_(1-42)质粒的构建及其与钙调蛋白的结合作用

目的探讨β淀粉样蛋白_(1-42)(Aβ_(1-42))与钙调蛋白(CaM)的结合作用。方法采用生物信息学方法获取阿尔茨海默病(AD)异常表达的核心基因,预测AD防治的潜在靶蛋白;通过基因重组的方法构建GST-Aβ_(1-42)重组质粒并进行DNA测序;琼脂糖凝胶电泳进行重组质粒的酶切鉴定;提取纯化GST-Aβ_(1-42)融合蛋白,SDS-PAGE凝胶电泳鉴定是否纯化成功;GST pull-down检测质粒表达的GST-Aβ_(1-42)蛋白与CaM的结合作用。结果获取连接度排名前20的核心基因,将CaM作为靶蛋白;质粒的DNA测序结果证明重组质粒构建成功,琼脂糖凝胶电泳结果显示,酶切后的片段与Aβ_(1-42)片段分子量大小理论值符合,进一步证明重组质粒构建成功;SDS-PAGE凝胶电泳结果显示GST-Aβ_(1-42)蛋白能够与CaM结合,并具有浓度依赖性。结论Aβ_(1-42)重组质粒构建成功,且与CaM具有结合作用。

阿尔茨海默病中β淀粉样蛋白神经毒性机制及其在新药研发中的意义

随着人类医疗卫生事业的发展,人们的平均寿命不断延长。然而,寿命的延长使人更多时间处在衰老阶段,这就会增加罹患各种疾病的风险。科学研究表明,高龄是阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)的最大危险因素。AD是一种典型的神经系统退行性疾病。流行病学调查表明,从65岁开始,也就是到了我国大多数人退休的年龄,AD发病率就开始呈现指数型增长,几乎是每五年增加一倍。因此,科学认识和有效控制AD对于提高老年人生活质量至关重要。

凋亡相关斑点样蛋白不同表位抗体对β淀粉样蛋白聚集及神经毒性作用的研究

目的 探讨凋亡相关斑点样蛋白(ASC)不同表位抗体对β淀粉样蛋白(Aβ)聚集和神经毒性的作用。方法 SH-SY5Y-APP695细胞培养体系培育按实验目的分组:A组(25μmol/L Aβ)、B组(2μmol/L ASC)、C组(2μmol/L ASC+25μmol/L Aβ+10μg/ml AL177)、D组(2μmol/L ASC+25μmo/L Aβ+10μg/ml ab155970)、E组(25μmol/L Aβ+2μmol/L ASC)用于探讨重组ASC蛋白与Aβ蛋白结合。对照组[磷酸盐吐温缓冲液(PBST)]、Aβ组(10μmol/L Aβ)、Aβ+N端组(10μmol/L Aβ+10μg/ml AL177)、Aβ+C端组(10μmo/L Aβ+10μg/ml ab155970)用于探讨细胞炎性反应。Ⅰ组(PBST)、Ⅱ组(10μmol/L Aβ)、Ⅲ组(10μmol/L Aβ+10μg/ml AL177)、Ⅳ组(10μmol/L Aβ+10μg/ml ab155970)用于细胞毒性检测。N端组[10μg/ml AL177+10μg/ml异硫氰酸荧光素(FITC)-Aβ_(42)]、C端组(10μg/ml ab155970+10μg/ml FITC-Aβ_(42))、空白组(PBST)用于免疫荧光染色。结果与A组比较,C组细胞中Aβ聚集减少,D组Aβ聚集增多(P<0.01)。与对照组比较,Aβ+C端组Aβ引起的核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1含量明显增高,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。噻唑蓝法检测结果显示,Ⅱ组细胞活性低于Ⅰ组,差异有统计学意义(1.12±4.25 vs 0.73±5.68,P<0.01);Ⅲ组细胞活性明显高于Ⅱ组,差异有统计学意义(1.28±2.21 vs 0.73±5.68,P<0.05)。结论 ASC蛋白N端抗体AL177抑制Aβ聚集,ASC蛋白C端抗体ab155970促进Aβ聚集,并具有时间依赖性。C端抗体刺激Aβ引起炎性反应,N端抗体拮抗对Aβ神经细胞毒性。表明ASC不同表位抗体对Aβ聚集及神经毒性具有不同作用,对阿尔茨海默病防治有一定的应用前景。

事件相关电位或能有助于诊断阿尔兹海默病的β淀粉样蛋白斑块存在

据Marin A(J Alzheimers Dis,2024 Jul 6.Doi:10.3233/JAD-231038.)报道,美国波士顿大学等机构的研究人员通过研究发现,事件相关电位(ERP)或能帮助在临床环境下进行阿尔兹海默病的诊断,并有望作为一种特殊的疾病生物标志物,这是研究人员首次在现实世界的临床环境中探索利用ERP作为阿尔兹海默病的体内生物标志物在不同患者群体中效用的研究。

七氟烷对β淀粉样蛋白_(1-40)诱导的大鼠认知功能障碍影响及机制

目的 探讨七氟烷吸入对β淀粉样蛋白(Aβ)_(1-40)诱发的大鼠认知功能障碍影响及其可能的机制。方法 于2021年8月至2022年8月,将32只成年雄性Sprague-Dawley大鼠以随机数字表法分为生理盐水(NS)+氧气组、NS+七氟烷组、Aβ+氧气组和Aβ+七氟烷组,每组8只,分别给予双侧海马内注射NS或Aβ_(1-40)。吸入30%氧气或2.5%七氟烷过程中监测生命体征,采用Morris水迷宫实验检测大鼠认知功能;酶联免疫吸附测定检测海马Aβ_(1-40)水平;免疫组织化学法检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和离子钙接头蛋白分子1(IBA1)的表达;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测白细胞介素-1β(IL-1β)、核因子-κB(NF-κB)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的mRNA表达;蛋白质印迹法检测B淋巴细胞瘤-xL(Bcl-xL)、胱天蛋白酶-9(caspase-9)、脑源性神经营养因子(BDNF)和晚期糖基化终末产物受体(RAGE)的蛋白表达。结果 维持吸入2.5%七氟烷在4个不同时间点(1、2、3和4 h)对大鼠生命体征无影响。与NS+氧气组比较,Aβ+氧气组大鼠原始平台探索时间减少,逃逸潜伏期增加;与Aβ+氧气组相比,Aβ+七氟烷组大鼠原始平台探索时间减少,逃逸潜伏期增加(P<0.05)。Aβ+七氟烷组大鼠海马区Aβ_(1-40)水平[(42.18±5.72)ng/L],GFAP和IBA1阳性细胞数[(24.33±1.21)个和(37.82±3.23)个],caspase-9和RAGE蛋白表达(0.74±0.11和0.81±0.07),IL-1β、NF-κB和iNOS mRNA表达(28.98±12.32、25.91±12.31和43.92±17.21)均高于NS+七氟烷组[(18.13±2.89)ng/L、(10.51±0.96)个、(17.17±1.77)个、0.23±0.02、0.29±0.03、1.35±0.04、1.37±0.05、1.42±0.06]和Aβ+氧气组[(32.61±4.82)ng/L、(15.76±1.25)个、(24.76±2.31)个、0.45±0.08、0.68±0.08、10.23±6.56、6.51±2.34、13.23±4.81];Bcl-xL和BDNF蛋白表达(0.13±0.04和0.18±0.04)低于NS+七氟烷组(1.07±0.31和0.58±0.07)和Aβ+氧气组(0.46±0.11和0.33±0.04)(P<0.05)。而NS+氧气组和NS+七氟烷组之间各指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论 七氟烷通过启动大鼠海马的神经毒性、神经炎症和神经元凋亡,加剧了Aβ_(1-40)诱发的大鼠认知功能障碍。

加兰他敏抗β淀粉样蛋白的神经保护机制研究

目的观察加兰他敏(Gal)对β淀粉样蛋白(Aβ)损伤人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)后β淀粉样前体蛋白(APP)代谢通路的影响,探讨Gal的神经保护机制。方法采用5μMAβ_(1-40)作用于SH-SY5Y细胞制备体外细胞损伤模型,0.3μM加兰他敏对Aβ_(1-40)处理的细胞进行干预并与正常细胞进行对照研究。倒置显微镜下观察细胞形态,应用噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞活力,Western-blot技术定量检测各组APP,sAPPα,β-淀粉样前体蛋白剪切酶-1(BACE1)表达水平。结果 Aβ_(1-40)孵育细胞24h之后,细胞损伤明显,存活率从95.78.±2.5%降到62.93±2.1%,与对照组相比差异显著(P<0.01);Western-blot显示细胞内BACE1表达增加,APP表达无明显改变,细胞分泌sAPPα降低;在Aβ_(1-40)孵育之前给予加兰他敏作用24h,细胞损伤程度减轻,细胞的存活率上升(85.26±5.3%)(P<0.01),细胞内BACE1表达较Aβ组下降,APP表达无明显改变,细胞分泌sAPPα升高。结论加兰他敏通过抑制Aβ_(1-40)诱导的APP的异常代谢发挥神经保护作用。

颅内外动脉狭窄患者血清β淀粉样蛋白(1-40)、(1-42)水平的变化

目的研究颅内外动脉狭窄患者血清β淀粉样蛋白(Aβ)(1-40)、(1-42)水平的变化。方法采用酶联免疫吸附法检测34例颅内外动脉狭窄患者的血清Aβ(1-40)、Aβ(1-42)水平,计算两者的比值;并与正常对照组进行比较。结果动脉狭窄组血清Aβ(1-40)水平明显高于正常对照组(P<0.001),血清Aβ(1-42)水平明显低于正常对照组(P<0.01),Aβ(1-40)/Aβ(1-42)比值明显高于正常对照组(P<0.01);动脉狭窄组中,老年亚组血清Aβ(1-40)水平高于中年亚组(P<0.05)、血清Aβ(1-42)水平与中年亚组相比差异无统计学意义。正常对照组中,老年亚组血清Aβ(1-40)水平与中年亚组比较差异无统计学意义,血清Aβ(1-42)水平明显高于中年亚组(P<0.05)。结论颅内外动脉狭窄患者的血清Aβ(1-40)水平显著升高,老年患者更明显;血清Aβ(1-42)水平显著降低。

手术创伤对大鼠海马中β淀粉样前体蛋白和β淀粉样蛋白表达的影响

目的探讨手术创伤对大鼠海马中β淀粉样前体蛋白（App）、β淀粉样蛋白（Aβ）表达的影响。方法49只SD大鼠随机分成对照组（A组,n=7）、假手术组（B组,n=21）、肝部分切除术组（C组,n=21）,B、C组大鼠分别在术后24 h、3 d、7 d三个时间点取左侧海马（n=7）,放射免疫法测Aβ,取右侧海马热启动荧光定量PCR测AppmRNA。结果（1）肝部分切除术后24 h大鼠海马中App770（Ct）/GAPDH（Ct）为（1.39±0.05）,低于对照组和假手术组（P〈0.05）,说明此时App770mRNA的表达增加。但是手术对于App695mRNA、App751mRNA以及App770mRNA在其他时间的表达没有影响。假手术组App695 mRNA、App751mRNA、App770mRNA的表达与对照组差异无显著性（P〉0.05）。（2）肝部分切除术组大鼠海马中Aβ的表达在术后24 h、3 d、7 d分别为（58.3±2.6）pg/ml、（48.0±3.7）pg/ml、（27.2±3.6）pg/ml,明显高于对照组和假手术组,（P〈0.05）。在相应的时间点中,假手术组与对照组没有差异（P〉0.05）。结论肝部分切除术后大鼠海马中App770mRNA的表达增加,Aβ表达水平上调。

β淀粉样前体蛋白与弥漫性轴索损伤

弥漫性轴索损伤 (diffuseaxonalinjury,DAI)后 ,β淀粉样前体蛋白 (β amyloidprecursorprotein ,β APP)在轴索内积聚 ,是轴索损伤的一个重要病理标志。许多研究通过 β APP的检测 ,对轴索损伤的程度进行评估。β APP在病理状况下分解生成 β淀粉样蛋白 (amyloidbetaprotein ,Aβ) ,后者具有多方面的神经毒性作用。笔者现对 β -APP的结构、功能、代谢和它在DAI后的表达、作用及其机制进行如下综述。

β淀粉样蛋白和超氧化物歧化酶在阿尔茨海默病中的表达与意义

目的探讨阿尔茨海默病(AD)患者血清β淀粉样蛋白40(Aβ40)、β淀粉样蛋白42(Aβ42)及超氧化物歧化酶(SOD)表达水平及其临床意义。方法选择2017年1月~2019年6月在浙江省台州市第一人民医院就诊的AD患者82例为AD组,选取同期体检健康者30例为健康组。采用酶联免疫吸附试验检测Aβ40和Aβ42表达水平,采用氧化酶法测定SOD活力。比较AD组和健康组、AD组中轻度组和中重度组Aβ40、Aβ42和SOD表达水平。结果Aβ42和SOD在AD组中的表达水平均显著低于健康组,Aβ42/Aβ40也显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05);Aβ40、Aβ42和SOD在AD患者度组和中重度组的表达Aβ42和SOD在中重度组中的表达水平显著低于轻度组,Aβ42/Aβ40也显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论Aβ42及SOD表达水平对AD的诊断和病情监测有重要意义。

组胺对β淀粉样蛋白诱导PC12细胞阿尔茨海默病体外模型的保护作用

目的:观察组胺对β淀粉样蛋白1-42(Aβ42)诱导大鼠肾上腺嗜铬瘤(PC12)细胞损伤的改善作用及其相关的受体亚型。方法:运用PC12细胞,采用Aβ42构建阿尔茨海默病体外模型,以形态学和四甲基偶氮唑盐比色法为指标,观察细胞损伤和药物的改善作用。结果:Aβ42浓度依赖性诱导细胞损伤。组胺在10-7、10-6mol/L浓度时能显著改善Aβ42(5μmol/L)作用24h引起的细胞损伤,10-6mol/L保护作用最大。组胺10-6mol/L的保护作用能被组胺H2受体拮抗剂zolantidine,H3受体拮抗剂clobenpropit所逆转,但不能被H1受体拮抗剂苯海拉明所拮抗。结论:组胺能减弱Aβ42诱发的细胞损伤,可能与组胺H2,H3受体有关。

β淀粉样蛋白在阿尔茨海默病病因学中作用研究进展

阿尔茨海默病(Alzhei mer's disease,AD)是一种中枢神经系统原发性退行性病变,是老年痴呆中最常见的类型。其特征性病理变化之一是患者脑内的神经炎性斑(老年斑),主要成分为细胞外β淀粉样蛋白(amyloid proteinβ,Aβ)的沉积,而Aβ又由淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)经序列水解而来。方法本综述主要叙述Aβ的产生、神经毒性、β淀粉样蛋白以及β淀粉样蛋白级联假说的部分新近研究进展。