新型壳聚糖基温敏凝胶膜引导骨再生性能的体外实验研究

目的 :制备负载釉基质蛋白(enamel matrix proteins,EMPs)的壳聚糖/β甘油磷酸钠(chitosan/β-glycerophosphate salt,CS/β-GP)温敏凝胶膜,探讨其体外引导骨再生的能力。方法 :利用CS/β-GP体系的温敏相转变特性,制备新型生物膜并添加牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA),利用蛋白浓度测定试剂盒(加强型)检测不同时点的蛋白释放浓度,绘制蛋白缓释曲线。添加EMPs的CS/β-GP(1.0 g)复合膜作为A组;单纯CS/β-GP(1.0 g)复合膜作为B组;同时,设空白对照组即C组,分别与ST2细胞共培养。检测膜的理化性能,MTT法检测复合膜的生物相容性,PNPP法检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)的活性。采用SPSS16.0软件包对数据进行统计学分析。结果:不同浓度的复合膜可缓慢释放蛋白12 d以上,并且随着β-GP浓度的升高,蛋白缓释总量增大。负载蛋白后,复合膜的理化性能均未发生显著变化(P>0.05)。MTT检测A、B、C 3组的吸光度(OD)值,组间差异具有显著性,A、B组OD值均高于C组,A组OD值高于B组(P<0.05)。A、B组ALP表达高于空白对照组(P<0.05),A、B 2组之间ALP活性表达亦具有显著差异,A组高于B组(P<0.05)。结论:负载EMPs的新型壳聚糖基温敏凝胶膜在体外实验中表现出一定的引导骨再生活性,是一种具有应用潜力的新型生物膜材料。