大鼠脊髓缺血损伤后β管蛋白及其mRNA的表达变化

目的：研究大鼠脊髓缺血损伤后β管蛋白及其ｍＲＮＡ的表达变化。方法：利用β管蛋白的单抗及地高辛标记ｃＤＮＡ探针，借助于免疫组化、原位杂交、图像分析等方法，对腹主动脉阻断（肾动脉上）３０ｍｉｎ后再灌流不同时间点大鼠缺血损伤脊髓神经元β管蛋白及其ｍＲＮＡ的变化进行了定性定量研究。结果：ＳＣＩ后β管蛋白及ｍＲＮＡ均明显降低，３ｄ达最低水平，７ｄ有所恢复，到１４ｄβ管蛋白ｍＲＮＡ恢复到伤前，而β管蛋白仍维持低水平。结论：β管蛋白破坏，可能与Ｃａ２＋激活的中性蛋白酶有关；β管蛋白与其ｍＲＮＡ的分离，提示β管蛋白的减少，除转录水平减少所致翻译产物降低外，破坏增多亦是可能的原因。

神经再生过程中脊髓运动神经元β管蛋白基因表达的变化

损伤大鼠右侧坐骨神经后,SDS—PAGE电泳分析双侧腹角细胞中蛋白含量变化,发现损伤侧的管蛋白相对含量较对照侧增加了17％—121％。损伤后3—14d损伤侧腹角运动神经元中β管蛋白mRNA的原位杂交信号增强了27％—70％,β管蛋白mRNA的Northern杂交分析也显示基因表达的增强。

腺病毒介导脑源性神经营养因子基因转移对神经根损伤后再生相关基因的影响

目的观察腺病毒介导的脑源性神经营养因子(BDNF)基因脊髓内转移对神经根损伤后再生相关基因表达的影响。方法在大鼠神经根切断吻合模型基础上,通过显微注射法在立体定位仪上将2μl复制缺陷型重组腺病毒载体(AxCA-BDNF)直接注入大鼠神经根损伤部相应的脊髓腹角。损伤组注射病毒缓冲液2μl。术后1、3、7、14、28d,利用免疫组化、原位杂交,观察β管蛋白和GAP-43mRNA表达的改变。结果与损伤组比较,注射AxCA-BDNF组动物β微管蛋白和GAP-43 mRNA表达在术后3、7、14、28d间差异有统计学意义(P＜0．05)。结论AxCA-BDNF治疗能促进神经根损伤后神经元β管蛋白的合成,促进轴突的延伸；同时发现AxCA-BDNF治疗,能上调GAP-43表达,增加损伤神经元发芽的潜能。