白介素-1β转化酶抑制剂的高通量筛选

目的筛选具有白介素-1β转化酶(ICE)抑制活性的化合物。方法通过体外克隆ICE原酶全长基因、质粒原核表达及蛋白纯化等方式,应用酶与特异性底物的荧光反应,建立ICE抑制剂高通量筛选平台;通过紫外、质谱及核磁等理化数据分析对所筛选的化合物进行结构鉴定,同时进行了初步的药理毒理学活性验证。结果筛选得到1种具有较强ICE抑制活性的化合物LX1986,该化合物与已知化合物棕曲菌素D(Aspochalasin D)结构相同。结论 LX1986为活性较强的微生物来源ICE抑制剂,其抑制活性为首次报道。

支持向量机在构建白介素-1β转化酶抑制剂药效团模型中的应用

以24个作用于人体外围血单核细胞药理模型的白介素-1β转化酶抑制剂作为研究对象,计算了其表征分子的拓扑、电子、几何结构等物理化学性质的1209个分子描述符,用CfsSubsetEval评价方法和BestFirst-D1-N5搜索方法筛选描述符,用Kennard-Stone方法选择训练集和测试集。分别采用支持向量机、决策树、贝叶斯网络、人工神经网络等机器学习方法建立分类预测模型并使用Catalyst/HipHop系统建立药效团模型。结果表明支持向量机优于其他分类模型,正、负样本的预测正确率均达到100%。最优药效团模型具有5个特征:2个疏水基团、2个脂性氢键受体、1个氢键给体;以此药效团进行中药数据库筛选得到384个候选白介素-1β转化酶抑制剂。利用支持向量机建立的分类预测模型对候选化合物的活性进行了预测,其中高活性化合物占96.6%,表明白介素-1β转化酶抑制剂药效团模型较准确地反映了高活性化合物的公共特征。该模型的建立有助于从中草药筛选新型白介素-1β转化酶抑制剂。

5-Fu诱导Eca-109细胞凋亡过程中白介素1β转化酶的表达

用５氟尿嘧啶（５Ｆｕ）在体外诱导人食管癌Ｅｃａ１０９细胞凋亡，并用免疫细胞化学方法检测了白介素１β转化酶（ＩＣＥ）在５Ｆｕ作用前后的表达情况。结果表明：①光镜及电镜的形态学方法证实，５Ｆｕ引起细胞死亡的形式为凋亡；②未用药处理的对照细胞ＩＣＥ呈阴性表达，而５Ｆｕ作用后阳性表达的细胞数目增加，表达强度增强。结果提示：ＩＣＥ基因可能参与５Ｆｕ诱导细胞凋亡的调节，ＩＣＥ蛋白介导５Ｆｕ引起的细胞凋亡。

脑缺血再灌注后脑组织白介素-1β转化酶基因的表达

为探讨白介素 -1 β转化酶mRNA在前脑缺血再灌注后 1～ 4d被诱导表达及定位的情况 ,应用逆转录PCR方法检测沙土鼠前脑缺血再灌注模型白介素 -1 β转化酶mRNA的诱导情况 ;同时应用免疫组化方法对白介素 -1 β转化酶定位表达进行观察。结果白介素 -1 β转化酶mRNA在脑缺血再灌注后的 1～ 4d被诱导表达 ;非缺血海马区及皮层仅见锥体细胞及中间神经元白介素 -1 β转化酶的轻度表达 ;而白介素 -1 β转化酶在胶质细胞的表达在缺血后的 1～ 4d均可观察到 ,且逐渐增加 ,以第 3d最明显。结果证实了白介素 -1 β转化酶基因在脑缺血再灌注后的表达和定位 ,说明白介素 -1 β转化酶可能参与脑组织因缺血而发生的凋亡的发生过程。

大鼠急性全脑缺血再灌注细胞凋亡及白细胞介素1-β转化酶基因表达变化

目的：探讨急性全脑缺血再灌注后细胞凋亡及白细胞介素１－β转化酶（ＩＣＥ）表达变化。方法：“四血管闭法”复制大鼠全脑缺血再灌注模型，应用流式细胞术（ＦＣＭ）检测细胞凋亡，应用逆转录聚合聚链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术检测ＩＣＥｍＲＮＡ表达。结果：缺血３０ｍｉｎ再灌注，随缺血再灌注时间延长，ＤＮＡ断裂百分率增高，再灌注２４ｈ达高峰，ＩＣＥｍＲＮＡ表达呈增强趋势，再灌注６ｈ达高峰，再灌注２４ｈ表达呈下降趋势，但仍表达较高水平。结论：ＩＣＥ参与大鼠急性全脑缺血再灌注神经细胞凋亡的调控，其表达增强，促进神经细胞凋亡。

迟发性神经元坏死过程中白介素β转化酶mRNA转录水平动态变化研究

目的探讨白细胞介素β转化酶(ICE)在实验性血管性痴呆小鼠迟发性神经元坏死过程中额叶皮层及海马区转录水平变化。方法利用血管性痴呆模型,RTPCR技术检测全脑重复缺血再灌(IR)后ICEmRNA的表达。结果额叶皮层重复缺血再罐注3h时ICEmRNA表达增多,6h后呈下降趋势,再灌注14d时再次形成高峰。海马区神经细胞转录水平略迟于皮层,3h已有较高表达,7d达高峰,28d下降至对照组水平结论在细胞凋亡与迟发性神经元坏死发生、发展过程中,ICE伴随着全过程,ICEmRNA表达的增多使细胞凋亡增加。

人和小鼠肾脏中白介素1β转化酶基因表达的研究

人和小鼠肾脏中白介素１β转化酶基因表达的研究△叶一舟廖洪军陈香美王建中（解放军总医院肾内科，解放军肾脏病研究重点实验室北京１００８５３）白介素１β转化酶（ＩＬ－１βｃｏｎｖｅｒｔｉｎｇｅｎｙｚｍｅ，ＩＣＥ）是ＩＬ－１β前体转化成有生物活性、成熟ＩＬ－...

白细胞介素-1β转化酶与脑缺血损伤

综述近年来凋亡相关基因白细胞介素 1β转化酶 (ICE)在脑缺血损伤机制中的作用及其机制 ,认为ICE参与脑缺血后神经细胞凋亡的发生。ICE可能主要通过调节IL 1β发挥其凋亡调节作用 ,也可能通过其直接作用调节凋亡。应用ICE抑制剂可能是治疗卒中的一种有效方法。

IL-1β转化酶研究进展

IL－1β转化酶（ICE）是一种ASP-特异性的半胱氨酸蛋白酶，它经过蛋白裂解作用而活化，通过形成（P20）2／（P10）2四聚体而发挥功能。ICE具有5种异构体，其活性可受到多种蛋白的调节。ICE与某些炎性疾病和恶性肿瘤的发生有关，并在Fas介导的凋亡中发挥一定作用。

IL-1β转化酶与细胞凋亡

近年发现，ＩＬ－１β转化酶（ＩＣＥ）与细胞凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）之间存在着密切的关系。ＩＣＥ不仅在细胞凋亡中的作用日益受人关注，而且在治疗人动脉粥样硬化、白血病及肾损伤中展现出应用前景。

白细胞介素-1β转化酶与细胞凋亡

白细胞介素┐１β转化酶与细胞凋亡＊曹慧敏周明华吴玺印罗达德＊＊（香港大学医学院解剖学系，＊＊生理学系，香港）自从７０年代初Ｋｅｒｒ等提出细胞凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）的概念以来，大量的研究表明，在脊椎动物或无脊椎动物的个体发生、生长发育、成熟和老化及...

白细胞介素1β转化酶家庭与细胞凋亡

白细胞介素1β转化酶(interleukin-1β-converting enzyme,ICE)家族在细胞凋亡过程中起关键作用,迄今已发现5个成员:ICE、CPP32、Nedd-2/Ich-1、Ich-2/ICErel Ⅱ和ICErel Ⅲ,它们的高表达能引起细胞凋亡,同时也受一些物质的调控。本文即对ICE家族及与细胞凋亡关系作一综述,以阐明ICE家族作用机制。

脓毒症大鼠海马白细胞介素-1β转化酶的表达及其意义

目的探讨白细胞介素-1β转化酶在腹腔感染脓毒症致神经元损伤中的机制。方法建立Wistar大鼠腹腔感染脓毒症模型，研究脓毒症后不同时间内海马组织ICE的活性，IL-1β含量变化及海马CA1区神经元计数的变化，同时观察用Ac-YVAD-FMK治疗后对上述指标的影响。结果随着发生脓毒症时间的延长，脑海马组织中ICE活性和IL-1β含量显著升高（P〈0．05和P〈0．01），海马CA1区神经元计数显著降低（P〈0．05和P〈0．01）。使用Ac-YVAD-FMK治疗后上述各指标的异常变化明显减轻，与模型组比差异具有统计学意义（P〈0．05和P〈0．01）。结论脓毒症后ICE主要通过炎症机制介导神经元的损伤，Ac-YVAD-FMK对脓毒症后神经元的损伤具有保护作用。

白细胞介素1β转化酶抑制剂对胰腺炎大鼠胰腺细胞凋亡的诱导

目的探讨白细胞介素(IL)1β转化酶(ICE)抑制剂诱导急性胰腺炎腺泡细胞凋亡的作用。方法120只SD大鼠随机分为假手术对照组(S)、胰腺炎组(P)和ICE抑制剂干预组(I),每组40只。各组造模后在2、6、12和24h4个时间点分别检测10只大鼠。I组于制模前48h开始腹腔注射ICE抑制剂0.25mg/100mg体质量,间隔12h注射一次。P组仅同时注射等量生理盐水。应用ELISA方法、细胞凋亡原位标记(TUNEL)染色等检测血清中淀粉酶、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-1β和胰腺细胞凋亡。结果HE染色见胰腺组织中典型的细胞核固缩及凋亡小体形成。I组各个时间点病理学评分和血淀粉酶、TNF-α、IL-1β浓度均明显低于P组,胰腺细胞凋亡指数显著高于P组(P<0.01)。结论ICE抑制剂能减轻急性胰腺炎严重程度,其机制可能与其对炎症介质的抑制和诱导胰腺腺泡细胞的凋亡有关。

FLASH结合早幼粒细胞白血病蛋白Ⅳ并增强p53的SUMO修饰

FLASH/CASP8AP2为基因组中一个独特的基因,参与多个细胞调控过程,包括细胞凋亡、组蛋白基因pre-mRNA的加工、转录调控以及细胞周期进程等。临床医学研究表明,FLASH是急性淋巴细胞白血病的一种预后标志物,还是多种癌细胞存活的关键因子。因此,对FLASH功能的深入研究有望为相关疾病治疗提供新的视角。我们先前鉴定FLASH为p53的结合因子,并发现其能够增强p53的转录活性。在此基础上,本文阐述了FLASH和p53相互作用的分子机制。研究结果表明,p53 K386突变显著降低其与FLASH(aa 51~200)和FLASH-SIM(aa 1534~1806)的结合强度。然而,GST沉降分析仅能检测到SUMO与FLASH-SIM而不是FLASH(aa 51~200)之间的相互作用。在细胞中过量表达FLASH增强了整体性SUMO1修饰以及p53的SUMO1修饰,这可能是FLASH增强p53转录活性的一种作用机制。由于PML NB为细胞内SUMO的亚细胞反应器,而PMLⅣ亚型能够特异性地增强p53的SUMO修饰,我们在此分析了FLASH与PMLⅣ之间的相互作用,并鉴定了二者相互作用的结构域基础:FLASH-N3A(aa 501~802)和FLASH-C2(aa 1807~1981)均能与PMLⅣ(aa 228~633)结合。进一步的研究显示,PMLⅣ能够增强FLASH调控的整体性SUMO修饰和p53的SUMO修饰,即二者在功能上存在协同性。FLASH与肿瘤抑制因子p53和PMLⅣ之间的相互作用,丰富了对其功能的认识,有望揭示FLASH在肿瘤发生过程中的作用机制,为癌症的诊断和治疗提供新的思路。

YVAD-FMK对大鼠全脑缺血再灌注后神经元损伤的影响

目的 研究YVAD -FMK对大鼠全脑缺血再灌注后神经元的影响。方法 采用大鼠全脑缺血再灌注模型 ,动态测量脑组织中Ⅱ - 1β含量、脑水含量及海马CA1区神经元计数的变化以及YVAD -FMK对上述指标的影响。 结果 YVAD-FMK能够减少脑组织IL - 1β的含量 ,减轻脑水肿及能显著降低海马CA1区神经元减少的幅度。 结论 YVAD

大鼠局灶性脑缺血再灌注ICR mRNA表达动态变化研究

目的 探讨白细胞介素1-β转化酶(ICE)在局灶性脑缺血再灌注后的表达及作用。方法 线栓法复制大脑中动脉脑缺血再灌注模型，逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测大鼠局灶性脑缺血再灌注后ICE mRNA表达。结果 缺血3h及缺血3h再灌注，随缺血及缺血再灌注时间延长，缺血中心区与半影区ICE mRNA表达处于动态变化之中，再灌注24h、48h半影区表达持续高水平，而中心区表达下降。结论 局灶性脑缺血再灌注过程中ICE mRNA表达增强，促进神经细胞凋亡，ICE参与局灶性脑缺血再灌注神经细胞凋亡的调控。

椎体火器伤对脊髓细胞凋亡的影响

目的建立家猪L2椎体贯通火器伤实验模型,通过免疫组织化学方法观察不同弹速火器伤对伤段脊髓组织Caspase-3表达及细胞凋亡的影响。方法18只家猪,随机分为两组(L组:微型冲锋枪组,n=10;H组:狙击步枪组,n=8),在全麻状态下建立L2椎体侧方贯通伤模型,观察比较两组弹道入口及出口面积比值、脊髓损伤范围及伤段脊髓组织Caspase-3表达及细胞凋亡情况。结果两组弹道出口/入口面积比、硬膜下血肿范围、Caspase-3表达及细胞凋亡程度比较有显著差异(P<0·01)。多元线性回归分析及变量筛选显示两组细胞凋亡程度与脊髓大体损伤范围及Caspase-3的表达程度具有相关性。结论在脊髓火器伤的早期阶段,细胞凋亡程度同枪弹导致脊髓损伤程度及Caspase-3的表达程度相关。

Caspase-3与脊髓损伤的相关治疗

脊髓损伤（spinal cord injury,SCI）分为原发性损伤和继发性损伤。SCI的原发性损伤是创伤本身造成的,主要机制为不可逆性神经细胞坏死、轴索断裂。细胞凋亡是一种主动的由基因控制的细胞自然死亡,神经细胞的凋亡是继发性SCI的重要组成部分。半胱氨酸蛋白酶（caspase）亦称白细胞介素1β转化酶（interleukin-1β-converting enzyme，ICE）或死亡蛋白酶．