白介素-22诱导肺泡上皮2型人β防御素表达的初步研究

目的:初步探讨对于直接或间接引起的肺内感染,炎症反应产生的白介素(IL)-22能否刺激肺泡Ⅱ型上皮细胞,并且诱导其生成、释放2型人β防御素(humanβ-defensin-2,HBD-2)发挥抗感染作用。方法:流式细胞术检测肺泡Ⅱ型上皮细胞细胞膜表面IL-22R表达水平。重组人IL-22(20 ng/ml)刺激肺泡Ⅱ型上皮细胞,RT-PCR检测不同时间(0、2、4、8、16、24 h)HBD-2表达情况。不同浓度的重组人IL-22(0、4、20、100、500 ng/ml)刺激肺泡Ⅱ型上皮细胞,RT-PCR检测HBD-2表达情况。结果:肺泡Ⅱ型上皮细胞膜表面IL-22R表达呈强阳性,阳性率达(99.90±0.13)%。比较6个时间点HBD-2表达差异,发现HBD-2表达具有时间依赖性。比较不同浓度IL-22处理下HBD-2表达差异,IL-22 100 ng/ml为最佳干预浓度,且HBD-2表达与IL-22浓度具有依赖关系。结论:IL-22能显著诱导肺泡上皮细胞生成并释放HBD-2,且具有时间和剂量依赖性。

BD2增强巨细胞病毒DNA疫苗的免疫效果研究

表达巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)即刻早期蛋白(IE-1)的DNA疫苗能抵抗巨细胞病毒的感染。β防御素2型(BD2)能激活未成熟的树突状细胞,调节机体免疫反应。以小鼠为动物模型,探讨小鼠BD2(m BD2)增强鼠巨细胞病毒(murine cytomegalovirus,MCMV)IE-1 DNA疫苗的佐剂效果。将表达IE-1的质粒(p IE-1)与表达m BD2的质粒(p BD2)混合免疫小鼠,2周后用致死量的同源MCMV攻击小鼠。通过检测发现,混合免疫p IE-1和p BD2的小鼠与单独免疫IE-1相比,血清中IE-1特异性抗体含量升高,脾脏CD8+T细胞所分泌的IFN-γ水平上升,小鼠体重丢失明显下降,病毒攻击后小鼠存活率也有所提高。这些结果表明,BD2可以作为一种分子佐剂增强IE-1 DNA疫苗的免疫效果。