ERβ及p-ERβ在小鼠发情周期卵巢内的表达

应用免疫组织化学和Western blot技术对雌激素受体β(Estrogen Receptor β,ERβ)及其磷酸化形式p-ERβ进行定位和半定量的研究,探讨ERβ和p-ERβ在小鼠发情周期卵巢中的表达规律。Western bolt检测结果表明,在小鼠发情周期卵巢中,ERβ和p-ERβ均在小鼠发情期卵巢中高水平表达,而在其他时期的表达量差异不显著。同时,免疫组织化学结果显示,ERβ及p-ERβ在小鼠卵巢的卵泡和黄体中,随发情周期的变化而有规律的分布。ERβ及p-ERβ在小鼠卵巢中的分布和表达量的变化与卵巢中卵泡和黄体的发育过程基本一致,揭示ERβ对小鼠卵巢发情周期的周期变化具有调节作用。

中药更年春方通过ERβ及PI3K/Akt信号通路对Aβ25-35致大鼠胎鼠海马神经元损伤的保护作用

目的观察中药更年春方(Gengnianchun formula,GNC)通过雌激素受体β(estrogen receptorβ,ERβ)及PI3K/Akt信号通路对β淀粉样蛋白25-35片段(Aβ25-35)致大鼠胎鼠海马神经元细胞损伤的保护作用。方法采用Aβ25-35作用人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞系,通过CCK-8法检测细胞活力摸索Aβ25-35及GNC含药血清(GNC serum,GS)处理神经细胞的合适浓度及时间。采用Aβ25-35作用大鼠胎鼠海马神经元构建阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的体外模型,分为无血清对照组、模型组、GS组、空白血清对照(normal saline serum,NS)组和PHTPP(选择性ERβ拮抗剂)组。利用正置显微镜观察细胞形态、CCK-8法检测细胞活力及LDH释放法检测细胞损伤。利用Hoest33258/PI双重荧光染色实验、qRT-PCR及Western blot实验检测细胞凋亡相关指标。结果与无血清对照组相比,模型组大鼠胎鼠海马神经元胞体及突触出现明显的收缩崩解和细胞碎片、细胞活力下降、LDH释放升高。与模型组和NS组相比,GS组大鼠胎鼠海马神经元胞体及突触的收缩崩解和细胞碎片减少、细胞活力上升、LDH释放减少、PI阳性神经元细胞数目下降、神经元bax/bcl-2mRNA、cyt-c mRNA水平及bax/bcl-2、cleaved-caspase 3、cyt-c蛋白表达水平下降、p-Akt蛋白表达水平上升。与GS组相比,PHTPP组大鼠胎鼠海马神经元bax/bcl-2 mRNA、cyt-c mRNA水平及bax/bcl-2、cleaved-caspase3、cyt-c蛋白表达水平上升、p-Akt蛋白表达水平下降。结论GNC对Aβ25-35致大鼠胎鼠海马神经元的损伤具有保护作用,此作用是通过ERβ及PI3K/Akt信号通路介导的。

ERβ在乳腺癌组织中的表达及与临床病理因素的关系

目的 探讨ERβ在乳腺癌组织中的表达及其与临床病理因素的关系。 方法 采用免疫组化S -P法测定 97例原发性乳腺癌组织中ERα、ERβ和PR的表达 ,并与生化法测得的ER、PR及临床病理指标作对比分析。 结果 ERβ在原发性乳腺癌组织中阳性表达率为 62 .9% ( 61/ 97)。ERβ与ERα的表达无相关性 (P >0 .0 5 )。ERα、生化ER、PR及免疫组化PR均阴性表达的乳腺癌组织内ERβ阳性表达率为 83 .3 % ( 10 / 12 )。ERβ阳性表达与组织学分级呈负相关 (P <0 .0 1)。无腋淋巴结转移者的ERβ阳性表达率为 81.6% ( 3 1/ 3 8) ,有腋淋巴结转移者的ERβ阳性表达率为 5 0 .8% ( 3 0 / 5 9) ,两者具有非常显著性差异 (P <0 .0 1) ,且ERβ阳性表达与腋淋巴结转移呈负相关。ERβ表达与患者年龄、肿瘤大小、临床分期、月经状况和病理类型无明显相关 (P >0 .0 5 )。结论 ERβ与ERα、PR一样也为细胞核受体。原发性乳腺癌组织内亦有ERβ表达。在原发性乳腺癌组织内ERβ阳性表达与组织学分级和腋淋巴结转移呈负相关。ERβ与ERα的表达无相关性 ,不能通过ER、PR及ERα联合测定来取代ERβ的检测。

ERβ与其变异体对三阴性乳腺癌细胞株生长的影响

目的通过对三阴性乳腺癌细胞转染雌激素受体β(ERβ)及其5-8外显子缺失异构体ERβ△5-8(文中简称ERβ△),试图了解ERβ单独表达对癌细胞生长的影响,及对雌激素、三苯氧胺(tamoxifen)作用的反应性;探讨ERβ是否有可能成为三阴性乳腺癌内分泌治疗的预测因子和新的治疗靶点。方法①构建真核细胞表达克隆pReceiver-M72-ERβ及其剪切体pReceiver-M72-ERβ△。②脂质体法转染人三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231,设ERβ组、ERβ△组、空载体组及空白对照四组。③转染后荧光显微镜检,免疫荧光、免疫细胞化学、WesternBlot等方法验证蛋白表达。按实验设计分别加入不同药物浓度的三苯氧胺、雌激素。④流式细胞术观察细胞周期情况。MTT法检测细胞相对活性。结果①以IRES2-EGFP为蓝本改造的pReceiver-M72-ERβ及其剪切体pReceiver-M72-ERβ△成功构建。②转染ERβ后细胞生长速度加快,细胞周期中G1期比例减少,S期比例增加,克隆形成能力增强;转染ERβ△后细胞系相对活性及细胞周期未见明显改变;雌激素及tamoxifen对转染ERβ及其剪切体ERβ△的细胞生长无明显影响。结论 ERβ单独表达促进MDA-MB-231细胞生长,增加细胞相对活性及克隆形成能力;转染ERβ的三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231中对雌激素及雌激素抑制剂tamoxifen无明显反应。

基于明确靶标及分子对接验证技术探究五味子醇甲对阿尔茨海默病的作用机制

目的:明确五味子醇甲对阿尔茨海默病的作用机制。方法:选取24只大鼠按体质量随机分为空白组、模型组和给药组,每组8只。采用对大鼠海马CA1区注射Aβ1-40的方法制备阿尔茨海默病大鼠模型,造模1 d后灌胃给予30 mg/kg的五味子醇甲溶液,造模7 d后,进行Morris水迷宫行为学测试。在此基础上,对与阿尔茨海默病明确相关的β-分泌酶、雌激素受体β(ERβ)、谷氨酸受体1(NMDAR1)等蛋白进行验证,以蛋白表达量及药物成分与靶标作用的分子对接能进行评价,并通过分子对接技术计算五味子醇甲与各蛋白的对接能,达到理论验证的目的。结果:与空白组比较,模型组大鼠海马组织匀浆中β-分泌酶的活性含量明显增加(P<0.01),大鼠海马组织中ERβ表达显著降低(P<0.01),P-P38/P38表达明显升高(P<0.01),BACE1表达显著升高(P<0.01),NMDAR1表达明显降低(P<0.01);与模型组比较,给药组大鼠海马组织匀浆中β-分泌酶的活性含量明显减少(P<0.01),给药组大鼠海马组织中ERβ表达显著升高(P<0.01),P-P38/P38表达显著降低(P<0.01),BACE1表达显著降低(P<0.01),NMDAR1表达显著升高(P<0.01)。分子对接结果显示五味子醇甲与各靶蛋白对接的分子对接能稳定,从理论验证结果的可靠性。结论:基于已知靶点的五味子醇甲成分验证结果可知,五味子醇甲治疗阿尔茨海默病具有多成分、多靶点及多途径的作用特点,其作用机制可能与已知的阿尔茨海默病代谢通路直接相关,且通过对Beta-Secretase 1、ERβ、P-P38/P38、BACE1和NMDAR1蛋白的靶向调控实现。

棕色田鼠和沼泽田鼠雄性社会行为与嗅觉相关脑区性激素受体表达之间的关系

应用行为聚焦取样观察和免疫组织化学相结合的方法 ,比较研究了棕色田鼠 (Microtusmandarinus)(n =15 )和沼泽田鼠 (M .fostis) (n =15 )在同种雄雄交往中的行为差异 ,及在雄雄交往前后雌激素 β受体(ERβ)和雄激素受体 (AR)表达的差异。在 2h的雄雄交往中 ,前 1h棕色田鼠对同性入侵者有较多的攻击和防御行为 ,后 1h攻击行为较少 ,沼泽田鼠前后 1h差异不大 ,整个 2h期间 ,棕色田鼠较沼泽田鼠对同性入侵者有较多的攻击、防御行为 ,较少的非社会行为。经过免疫组织化学检测 ,没有社会交往时棕色田鼠主嗅球系统投射区和犁鼻系统投射区ERβ免疫阳性细胞 (ERβ IRs)明显少于沼泽田鼠 ,且显色淡 ,AR免疫阳性细胞(AR IRs)在两种鼠间差异不大 ,且都明显少于各自的ERβ IRs。 2h交往后 ,棕色田鼠主嗅球投射区和犁鼻系统投射区的ERβ IRs细胞数明显少于交往前 ,AR IRs细胞数明显多于交往前 ;沼泽田鼠交往前与交往后ERβ IRs和AR IRs细胞数均无显著差异 ,且显著多于交往后棕色田鼠ERβ IRs细胞数 ,显著少于交往后棕色田鼠AR IRs细胞数。以上结果表明 :两种田鼠在社会交往中社会行为不同 ;ERβ的减少和AR的增多可能在社会识别及攻击行为中均起一定的作用 。

山羊β雌激素受体多克隆抗体的制备及免疫组化方法的建立

本研究旨在克隆济宁青山羊雌激素受体β(ERβ)基因,进行原核表达,制备多克隆抗体,建立免疫组化分析方法,检测济宁青山羊卵巢和子宫内ERβ分布。根据GenBank发布的绵羊ERβ基因序列设计一对引物,应用RT-PCR方法从济宁青山羊卵巢组织中扩增ERβ部分基因。经双酶切和测序分析后,连接到原核表达载体pET32a(+),构建重组表达载体pET32a(+)-ERβ,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE和Western blotting分析鉴定;经Ni-NTA纯化融合蛋白后免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体,并检测抗体效价及特异性;使用该抗体检测济宁青山羊卵巢和子宫组织细胞中的ERβ分布。结果表明,成功扩增出ERβ部分基因,并构建原核表达质粒,转化至大肠杆菌中表达出相对分子质量约为53ku的融合蛋白;Western blotting证明该融合蛋白能与兔抗人的ERβ多克隆抗体特异性反应。制备的多克隆抗体经ELISA检测效价达到1∶213,以此抗体代替购置的标准兔抗人ERβ抗体,进行Western blotting反应,特异性良好;使用该抗体建立免疫组化方法检测结果表明济宁青山羊卵巢颗粒细胞和子宫内膜上皮细胞、平滑肌细胞存在ERβ的分布。本研究获得特异性兔抗山羊ERβ多克隆抗体,使用该抗体建立免疫组化方法首次报道了济宁青山羊卵巢和子宫ERβ的分布表达,为进一步研究β雌激素受体的生物学功能奠定了方法学和形态学基础。

雌激素受体β表达对于乳腺癌细胞生长特性及内分泌治疗的影响

目的通过脂质体转染技术,将ERβ转染给ERα+的MCF-7细胞和ERα-的MDA-MB-231细胞,研究在ERα+和ERα-的不同条件下ERβ的功能。方法利用脂质体转染试剂Lipofectmine LTX将质粒pReveicer-M72-ERβ对MCF-7细胞和MDA-MB-231进行转染,并将细胞分为MCF-7组(ERα+ERβ-)、MCF-7ERβ组(ERα+ERβ+)、MCF-7空组(ERα+ERβ-)、MDA-MB-231组(ERα-ERβ-)、MDA-MB-231 ERβ组(ERα-ERβ+)、MDA-MB-231空组(ERα-ERβ-),对各组细胞进行雌二醇、他莫昔芬处理,并同时设置未处理组作为对照。用MTT法绘制各组细胞在不同处理因子作用下的生长曲线。结果①与MDA-MB-231组和MDA-MB-231空组相比,MDA-MB-231 ERβ组细胞生长速度加快(P<0.05),三组细胞对于雌二醇、他莫昔芬的反应差异无显著性;②与MCF-7组和MCF-7空组对比,MCF-7ERβ组细胞生长速度减慢(P<0.05);在雌二醇的作用下,MCF-7ERβ组细胞的生长速度比其他两组细胞减慢(P<0.05),三组细胞对于他莫昔芬的反应差异无显著性。结论①在ERα表达的条件下,ERβ的表达能够抑制细胞的生长,并且能够使细胞对于雌激素的敏感性下降;②在无ERα表达的条件下,ERβ的表达能够促进细胞的生长。

消乳块胶囊抑制DMBA诱发大鼠乳腺癌及其机制

目的：观察消乳块胶囊对二甲基苯蒽（DMBA）诱发SD大鼠乳腺癌的影响及其机制。方法：50天龄Sprague-Daw ley系健康雌性未孕大鼠30只随机分为3组：模型组、治疗组和对照组。模型组和治疗组大鼠均先经两次DMBA（15mg溶于1.5mL芝麻油,间隔1周）灌胃造模,同时治疗组大鼠以消乳块胶囊0.4g/（kg.d）灌胃,持续给药,在第14周处死。大鼠乳腺组织及肿瘤组织均作常规病理,免疫组化检测ERα、ERβ、PR、AhR的表达,酶联免疫吸附法测定血浆E2、P、LH、FSH水平。结果：治疗组癌变率明显低于模型组（P〈0.05）,分别是25.0%（2/8）和71.4%（5/7）。同对照组相比,ERβ、PR和AhR在治疗组和模型组中升高明显（P〈0.05～P〈0.01）,ERβ在治疗组升高更为明显,同模型组相比,差异仍有显著性（P〈0.05）。血清激素测定显示,同对照组和模型组相比,E2、FSH和LH在模型组中升高明显（P〈0.05～P〈0.01）;治疗组E2、FSH仍高于对照组（P〈0.05～P〈0.01）。结论：消乳块胶囊对DMBA诱导的大鼠乳腺恶性肿瘤有预防作用,其机制可能是通过ERβ介导的保护作用和调节体内激素水平来实现。

乳腺癌雌激素受体表达和临床病理因素的关系

目的:探讨雌激素受体β亚型(Estrogen Receptor,ERβ)在乳腺癌组织中的表达与雌激素受体ɑ亚型(ERɑ)、孕激素受体(PR)表达和临床病理因素的关系。方法:采用免疫组化显色系统二步法(EnVision系统)测定75例原发性乳腺癌组织中ERβ与ERα、PR的表达,并对临床诊断相关指标进行对比分析。结果:ERβ阳性表达率为53.33%(40/75),共同表达46.66%(35/75),ERα和ERβ共同表达,二者无相关性(P>0.05),ERβ表达与组织学分级、腋淋巴结阳性差异有统计学意义(P<0.05);与肿瘤大小、临床分期、和病理类型无相关性(P>0.05)。结论:ERβ表达与乳腺癌高危患者密切相关,与乳腺癌的发生、发展及预后有关,可作为反映乳腺癌生物学行为的指标,不能通过ER、PR及ERα联合测定来代替ERβ的检测。

雌激素受体α和β免疫反应在雄性和雌性棕色田鼠脑区分布的比较（英文）

单配制和多配制动物社会行为有差异,这些差异可能与雌激素受体类型有关(ERs)。虽然多配制大鼠和小鼠中枢神经雌激素受体α(ERα)和β(ERβ)免疫反应在大脑的分布已有报道,单配制雄性草原田鼠中枢神经ERα的分布也有报道,但单配制田鼠ERα和(或)ERβ在雌性和雄性分布差异未见报道。本研究对雄性和雌性棕色田鼠前脑区域ERα和ERβ免疫反应(IR)细胞数量进行比较。研究结果表明:(1)免疫反应主要分布在细胞核中。(2)ERα-IR和ERβ-IR细胞广泛分布于整个雌性和雄性前脑区域,在许多脑区表达有重叠。然而,不同受体在雌雄不同脑核中的分布数量不同。(3)ERα和ERβ的分布存在性别差异。例如,雌性ERα在视前核中部(MPN),终纹床核(BNST)和杏仁内侧核(Me A)比雄性多,相反雄性ERβ在MPN和BNST比雌性多。这些研究结果可能为我们理解如何通过ERα和ERβ调节动物的社会行为,及雌性和雄性社会行为的差异提供一个重要的神经解剖学基础。

比格犬雌激素受体β的原核表达、纯化及鉴定

目的研究比格犬雌激素受体β（Estrogenreceptorβ，ERβ）及其剪接异构体在生殖调控中的功能，构建比格犬ERβ的pMAL-p5x／ERβ 480DE3E．coli重组菌株，并进行纯化和鉴定。方法Trizol法提取发情期比格犬下丘脑总RNA，RT-PCR获得cDNA，以NCBI网站公布的比格犬ERβ基因CDS序列设计特异性引物，扩增ERβ保守区基因编码序列（16-496bp），连接原核表达载体pMAL-p5x，筛选、鉴定阳性克隆并测序。将重组质粒转化至大肠杆菌DH5α，再转化大肠杆菌BL21（DE3），用IPTG诱导表达，表达产物经经麦芽糖亲和树脂（AmylomResin）亲和层析分离纯化，并对纯化的融合蛋白进行鉴定。结果构建了pMAL-p5x／ERa480重组质粒，在DE3大肠杆菌中诱导表达出MBP-ERβ融合蛋白，SDS-PAGE显示分子量约为60000，与预期结果一致：优化了MBP-ERβ表达体系的表达条件：分别在0．2％葡萄糖，1000g／mlAmpcillin，0．1mmol／LIPTG37℃培养5h或在0．2％葡萄糖，50μg／mlAmpcillin，0．2mmol／LIPTG37℃培养3h，融合蛋白表达效果比较好。结论构建了pMAL-p5x／ERβ480原核表达重组质粒，获得了比格犬MBP—ERB融合蛋白，为犬种属特异性ERB多克隆抗体的制备及功能分析奠定了基础。

基于分子对接的雌激素类化合物与雌激素β受体的CoMSIA研究

采用分子对接方法完成了分子结构复杂多样的74个化合物的叠合,应用比较分子相似性指数分析方法(CoMSIA)研究了化合物与雌激素β受体(ERβ)之间的三维定量结构-活性关系(3D-QSAR),建立了相关性显著、预测能力强的定量模型(q2=0.533,r2=0.870,rp2re=0.787)。CoMSIA和对接结果从一个侧面揭示了影响雌激素活性的分子结构特征和可能的分子机理。

ERβ基因多态性与新疆维吾尔族和汉族女性乳腺癌相关性研究

目的雌激素受体β基因（estrogen receptorp，ERβ）为雌激素受体（estrogen receptor，ER）亚型之一，有2个常见多态位点，不同个体ERβ的表达水平和功能可能受其基因多态性的影响，本研究探讨ERβ基因RsaI多态性与新疆维吾尔族和汉族女性乳腺癌易感性的关系。方法选择2013-01-01—2014-09—30新疆医科大学附属肿瘤医院初次诊断为原发性乳腺癌的维吾尔族患者130例和汉族患者120例，选择本院同期健康体检者维吾尔族125名和汉族118名。应用聚合酶链反应一限制性内切酶片段长度多态性（polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR—RFLP）方法检测入选对象ERβ基因RsaI位点多态性，比较该位点多态性与新疆维吾尔族和汉族女性乳腺癌易感性的关系。结果维吾尔族和汉族两民族病例组、对照组基因型分布及等位基因频率差异均有统计学意义，P〈0．05。在维吾尔族中，病例组与对照组的基因型分布差异及等位基因频率差异无统计学意义，P〉0．05；在汉族中，病例组与对照组的基因型分布及等位基因频率差异均有统计学意义，P〈0．05。以rr基因型为对照，非条件Logistic回归分析发现，汉族妇女中，无多产史（OR=0．466，95％CI为0．234～0．928，P〈0．05）和无乳腺良性病史（OR=0．421，95％CI为0．204-0．869，P〈0．05）的Rr型乳腺癌发病风险降低。结论维吾尔族和汉族两民族ERβ基因RsaI基因型分布和等位基因频率差异有统计学意义。携带Rr基因型可能降低新疆汉族妇女乳腺癌易感性。

成骨细胞中雌激素受体β介导雌激素对IL-6和TGF-β的调控作用

[目的]利用小鼠胚胎成骨细胞前体细胞MC3T3-E1为细胞模型,研究雌激素与IL-6和TGF-β三者在成骨细胞分化中的具体作用机制,进一步在细胞水平探讨雌激素受体ERβ在雌激素功能中的作用。[方法]17β-雌二醇处理MC3T3-E1细胞后检测碱性磷酸酶活性、骨桥蛋白、骨保护素、骨钙素等成骨细胞相关因子的表达。同时17β-雌二醇处理后检测细胞因子IL-6和TGF-β的表达是否改变。然后分别用IL-6和TGF-β单独处理后检测MC3T3-E1细胞成骨分化相关因子和破骨细胞分化因子的表达。进一步利用siRNA干扰ERβ的表达,检测在17β-雌二醇诱导下IL-6和TGF-β表达的改变。[结果]雌激素能够诱导MC3T3-E1细胞碱性磷酸酶活性、骨桥蛋白、骨保护素、骨钙素的生成。雌激素处理后细胞因子IL-6的生成受到抑制,而TGF-β的表达上调。干扰了ERβ后,17β-雌二醇处理MC3T3-E1细胞后白细胞介素6及TGF-βmRNA的表达无明显改变。[结论]雌激素通过ERβ,调控IL-6和TGF-β的表达,进而调节成骨细胞的功能和骨的形成。

醒脑益智方对T2DM痴呆小鼠性激素信号通路的影响

目的:探讨醒脑益智方对2型糖尿病痴呆小鼠血清性激素水平及雌激素受体(estrogen receptor,Er)α,ErβmRNA表达的影响及其作用机制。方法:设昆明小鼠为空白组,将KK-Ay小鼠血糖≥13.9 mmol·L-1者随机分为模型组、吡拉西坦组、醒脑益智方组。吡拉西坦组ig吡拉西坦片(150 mg·kg-1),醒脑益智方组ig醒脑益智方(7.2 g·kg-1),空白组和模型组每天用等体积生理盐水ig。给药前后行Morris水迷宫测试并记录潜伏期。小鼠麻醉后迅速取血、大脑海马及额叶皮质。酶联免疫吸附法(ELISA)测定血浆性激素水平,包括卵泡刺激素(FSH),孕酮(P),雌二醇(E2),睾酮(T)等;实时荧光定量PCR检测Erα,ErβmRNA表达水平。结果:与模型组比较,空白组、吡拉西坦组和醒脑益智方组第5天潜伏期明显减少(P<0.05);与模型组比较,空白组、醒脑益智方组促黄体生成素(LH),T水平明显下降(P<0.05),E2,P水平明显升高(P<0.05);与吡拉西坦组比较,醒脑益智方组LH水平明显下降(P<0.05)。与模型组比较,吡拉西坦组、醒脑益智方组Erβ受体mRNA表达水平明显增高(P<0.05),其他各组间差异均不明显。结论:糖尿病痴呆的出现可能与性激素通路有关,醒脑益智方对糖尿病轻度认知功能障碍有明显改善作用,这一作用可能通过提高血浆E2,P水平及雌激素受体Eβ表达水平,降低LH,T水平实现。

基于启发式变量筛选方法研究与雌激素β受体结合的化合物结构与活性之间的关系

雌激素类化合物由于其对人和野生动物健康的负面影响而受到广泛关注.雌激素受体存在两种亚型(ERα和ERβ),化合物与两种受体亚型在结合活性和化合物结构特征方面存在差异.以31种与雌激素β受体亚型(ERβ)结合的化合物为研究对象,采用启发式变量筛选方法,从1524个变量中筛选出5个与化合物活性(lgRBA)最相关的变量,然后采用多元线性回归(MLR)建立最佳预测模型.模型相关性显著,而且具有良好的稳健性和预测能力(r2=0.829,q2LOO=0.742,r2pred=0.772,q2ext=0.724,RMSEE=0.395).同时揭示了影响化合物与ERβ受体结合的配体化合物分子的结构特征,并对模型的应用域进行了研究.