多黏菌素B联合新型β-内酰胺酶抑制剂复方制剂对耐多黏菌素B细菌生物膜的影响

目的探讨多黏菌素B联合新型β-内酰胺酶抑制剂复方制剂对耐多黏菌素B铜绿假单胞菌和肺炎克雷伯菌生物膜的活性及机制。方法采用微量肉汤稀释法和卡尔加里生物膜装置测定所有抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC)、最低生物膜抑制浓度(MBIC)和最低生物膜根除浓度(MBEC);采用结晶紫染色法评估亚MIC剂量下多黏菌素B联合头孢吡肟/阿维巴坦、头孢他啶/阿维巴坦、美罗培南/阿维巴坦、氨曲南/阿维巴坦、美罗培南/法硼巴坦及亚胺培南/雷利巴坦抑制生物膜形成和根除成熟生物膜的效果;筛选出抗生物膜活性最佳的联合方案,采用硫酸苯酚法、细菌运动试验以及群体感应抑制试验初步探讨该联合方案的抗生物膜机制。结果所有抗菌药物的MBIC和MBEC均高于MIC,基于多黏菌素B的联合方案均能抑制铜绿假单胞菌和肺炎克雷伯菌生物膜形成并根除成熟的生物膜,其中多黏菌素B联合头孢吡肟/阿维巴坦抑制率和根除率最高,分别为67.99%~90.16%、58.26%~63.86%。多黏菌素B联合头孢吡肟/阿维巴坦可抑制肺炎克雷伯菌的胞外多糖,抑制率为34.04%~61.10%,该组合还能减小细菌的泳动和蹭行运动直径。头孢吡肟/阿维巴坦单药对群体感应信号分子的抑制作用呈浓度依赖性,与多黏菌素B联合后,抑制作用与单药效果一致。结论多黏菌素B和头孢吡肟/阿维巴坦可能是临床治疗多黏菌素B耐药菌株生物膜相关严重感染的潜在方案,其作用机制可能与抑制细菌胞外多糖和运动能力有关。

β-内酰胺酶抑制剂联合不同β-内酰胺类抗生素对耐多药结核分枝杆菌临床菌株体外活性研究

目的体外评估5种β-内酰胺类抗生素和不同β-内酰胺酶抑制剂组合对耐多药结核分枝杆菌(MDR-TB)活性的影响,以期发现针对耐多药结核病最有效的β-内酰胺类抗生素和β-内酰胺酶抑制剂组合。方法选取2021年河南省耐药监测项目收集的MDR-TB菌株,使用最小抑菌浓度(MIC)法测定5种β-内酰胺类抗生素或联合β-内酰胺酶抑制剂对临床MDR-TB的MIC值,并采用聚合酶链式反应(PCR)和DNA测序法分析菌株的bla C突变情况。结果共纳入105株MDR-TB,MIC检测结果显示,多尼培南对MDR-TB抗菌活性最高,其MIC 50值为16μg/mL。与β-内酰胺酶抑制剂联合后,大部分β-内酰胺类抗生素的MIC值明显下降。共有13.33%(14株)的菌株存在bla C基因的突变,主要为3种核苷酸替代突变,分别为AGT333AGG、AAC638ACC、ATC786ATT。BlaC蛋白Ser111Arg和Asn213Thr与同义单核苷酸突变相比,增强了克拉维酸/舒巴坦与美罗培南对MDR-TB的协同作用。结论多尼培南和舒巴坦组合对MDR-TB具有最强的抗菌活性。而BlaC蛋白Ser111Arg和Asn213Thr的替代突变使MDR-TB对美罗培南的敏感性在克拉维酸/舒巴坦协同时增强。

β-内酰胺酶抑制剂的稳定性与降解反应特性

β-内酰胺酶抑制剂与广谱β-内酰胺抗生素的联合使用是一种有效解决细菌耐药的策略之一。目前上市的β-内酰胺酶抑制剂按其化学结构主要包括氧青霉烯类(克拉维酸)、青霉烷砜类(舒巴坦和他唑巴坦)和二氮杂二环辛烷类化合物(阿维巴坦),本文对临床常见的β-内酰胺酶抑制剂的稳定性与降解反应特性进行综述,并结合当前药典标准中的有关物质检查项,探讨上述β-内酰胺酶抑制剂的杂质谱控制策略。

β-内酰胺酶抑制剂关键中间体的微通道技术合成

为了优化二氮杂双环辛烷(DBO)类新型β-内酰胺酶抑制剂的关键中间体(2S,5R)-6-苄氧基-7-氧代-1,6-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-2-羧酸(Ⅰ)的合成工艺,采用微通道技术,通过对反应溶剂、温度、停留时间和碱的优化,以加快反应速率,提高反应产率。结果表明:采用连续流微通道技术,以(2S,5R)-6-苄氧基-7-氧代-1,6-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-2-羧酸苄酯(Ⅱ)为原料,在氢氧化锂的丙酮水溶液中,温度45℃,反应时间20 min,水解制备得到DBO类新型β-内酰胺酶抑制剂的关键中间体(Ⅰ),经氢谱、碳谱、高分辨质谱鉴定,产物与目标化合物一致,目标产物的收率可达95%。该微通道合成方法显著加快反应速率的同时提高了反应收率,对DBO类新型β-内酰胺酶抑制剂的工业化生产具有应用前景。

β-内酰胺类抗生素/β-内酰胺酶抑制剂复方制剂点评标准的建立及应用分析

目的建立β-内酰胺类抗生素/β-内酰胺酶抑制剂复方制剂的点评标准,结合临床应用情况,分析其应用效果,促进临床合理使用β-内酰胺类抗生素/β-内酰胺酶抑制剂复方制剂。方法参照相关指南及专家共识,制订β-内酰胺类抗生素/β-内酰胺酶抑制剂复方制剂的药物利用评价(DUE)标准。通过建立的DUE标准,采用回顾性研究方法,评价2019年7—12月南华大学附属第二医院使用头孢哌酮/舒巴坦和哌拉西林/他唑巴坦的894例病例的用药合理性。结果894例病例中,适应证合理率为93.62%,给药剂量合理率为90.49%,用药疗程合理率为89.37%,微生物送检合理率为75.84%。结论建立的头孢哌酮/舒巴坦和哌拉西林/他唑巴坦DUE标准能够作为临床合理用药的重要参考,该院头孢哌酮/舒巴坦和哌拉西林/他唑巴坦使用基本合理。

新型β-内酰胺类/β-内酰胺酶抑制剂复合制剂头孢吡肟-他尼硼巴坦钠的研究进展

细菌耐药是一个全球性的公共卫生问题,尤其是碳青霉烯类耐药的革兰阴性菌(carbapenem-resistant Gram-negative bacteria,CR-GNB)的危害尤为严重。临床对CR-GNB感染的防治手段非常有限,故迫切需要新型抗菌药物。头孢吡肟-他尼硼巴坦钠是由第4代头孢菌素头孢吡肟和新型广谱β-内酰胺酶抑制剂他尼硼巴坦钠组成的复方制剂,其对A、B、C和D 4类β-内酰胺酶都具有直接的抑制活性,因而可能对CR-GNB等耐药菌具有较好的抗菌作用。该文从头孢吡肟和他尼硼巴坦钠的作用机理、药学特性、抗菌活性、临床研究、抑酶/抑菌谱等方面进行了综述,从而为头孢吡肟-他尼硼巴坦钠的临床合理应用提供参考。

新型β-内酰胺酶抑制剂关键中间体在连续流微反应器中的高收率工艺研究

连续流微型反应器是近年来兴起的新型反应器,具有温和、高效、安全的特点.为解决细菌耐药性问题,优化新型β-内酰胺酶抑制剂制备工艺,该文以N-叔丁氧羰基-L-焦谷氨酸苄酯(2)为原料,在微通道反应器中通过硫叶立德增碳反应合成了β-内酰胺酶抑制剂关键中间体(S)-5-氧代-2-叔丁氧羰基氨基-6-二甲基亚砜基-5-己烯酸苄酯(1),经氢谱、碳谱及高分辨质谱鉴定,产物与目标物一致.考察了不同碱、温度、流速、当量比对反应的影响,结果显示在恒定室温条件下以DMSO为溶剂、t-BuONa为碱、n(化合物2):n(TMSOI):n(t-BuONa)=1.0∶1.2∶1.2、两氟化乙烯-丙烯盘管内径均为0.8 mm、泵A、B、C流速均为50μL·min^(-1)、总保留时间为26.67 min时,目标产物的收率可达95%.优化后的工艺条件,显著加快反应速率的同时提高了反应收率,使得该技术能更好地应用于工业生产中.

新型β-内酰胺酶抑制剂药物研究进展

多重耐药革兰阴性菌的不断出现及流行严重限制了抗感染治疗用抗菌药物的选择,β-内酰胺酶的产生是其耐药的主要机制。因此,针对β-内酰胺酶开发的抑制剂也成为研究热点。近年来,已有多种新型β-内酰胺酶抑制剂药物问世或已投入临床使用。这些抑制剂的研发不仅为治疗多重耐药革兰阴性菌感染提供了新的希望,而且也为抗菌药物的再利用和研发提供了重要思路。本文将对这些抑制剂的化学结构、抗菌机制以及临床应用进行深入探讨,以期为临床用药提供更可靠的依据。

β-内酰胺酶抑制剂复方制剂致ADR影响因素的多因素Logistic回归分析

目的分析医院β-内酰胺酶抑制剂复方制剂致药品不良反应(ADR)发生的影响因素,提出相应的用药注意事项,促进临床合理用药。方法从中国医院药物警戒系统医院端中收集2018年2月—2023年6月广州医科大学附属惠州医院/惠州市第三人民医院上报的β-内酰胺酶抑制剂复方制剂致ADR报告410份(包含患者410例),统计患者使用β-内酰胺酶抑制剂复方制剂的临床特点及ADR相关因素,并对ADR影响因素进行多因素Logistic回归分析。结果410例患者中男246例,女164例;发生ADR的患者年龄<1个月~97岁,>60岁患者ADR发生率最高,共222例(占54.15%)。ADR报告涉及医院使用的9种β-内酰胺酶抑制剂复方制剂,其中注射用头孢哌酮钠舒巴坦钠(2∶1)是ADR发生率最高的抗菌药物品种,共142例(占34.63%),>60岁患者使用注射用头孢哌酮钠舒巴坦钠(2∶1)发生严重ADR 65例。发生的ADR类型为一般和新的一般分别为239例和5例;出现严重和新的严重ADR分别为159例和7例,其不良反应主要累及系统/器官为血液系统和皮肤及其附件损伤。多因素Logistic回归分析结果,年龄是全身性反应、血液系统及泌尿系统相关ADR的影响因素(P<0.05或P<0.01);用药疗程是消化系统、呼吸系统、心血管系统及血液系统相关ADR的影响因素(P<0.05或P<0.01);性别是泌尿系统相关ADR的影响因素(P<0.01)。结论临床使用β-内酰胺酶抑制剂复方制剂时应严格把握适应证,医护人员在用药过程中应充分了解其致ADR的影响因素,加强ADR监测并及时处理,同时对患者进行用药教育,加强用药监护,从而减少ADR发生,保障临床用药安全。

β-内酰胺/β-内酰胺酶抑制剂对双歧杆菌和乳酸杆菌敏感性分析

目的分析儿童肠道双歧杆菌和乳酸杆菌对β-内酰胺/β-内酰胺酶抑制剂复合物(β-lactam/β-lactamase inhibitors)的药敏情况。方法按照伯杰细菌鉴定手册的方法从36例健康儿童大便标本中分离出45株双歧杆菌和39株乳酸杆菌,依据2015年临床和实验室标准协会(CLSI)的标准,采用E-test方法实施双歧杆菌和乳酸杆菌对氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、氨苄西林/舒巴坦、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、替卡西林、替卡西林/克拉维酸、头孢哌酮、头孢哌酮/舒巴坦的药敏试验,并进行统计分析。结果 45株双歧杆菌对氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、氨苄西林/舒巴坦、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、替卡西林、替卡西林/克拉维酸、头孢哌酮敏感百分率分别为77.78%、95.56%、88.89%、73.33%、91.11%、68.89%、84.44%、82.22%,39株乳酸杆菌对上述抗生素敏感百分率分别为74.36%、94.87%、92.31%、71.79%、92.31%、69.23%、89.74%、79.49%。除头孢哌酮/舒巴坦没有CLSI药敏MIC解释标准而无法判断外,其他β-lactam/β-lactamase inhibitor均比单一β-lactam抗生素敏感百分率升高,双歧杆菌氨苄西林与阿莫西林/克拉维酸、哌拉西林与哌拉西林/他唑巴坦的敏感数P值分别为0.01、0.03,乳酸杆菌氨苄西林与阿莫西林/克拉维酸、氨苄西林与氨苄西林/舒巴坦、哌拉西林与哌拉西林/他唑巴坦、替卡西林与替卡西林/克拉维酸的敏感数P值分别为0.01、0.03、0.02、0.03。结论β-lactam/β-lactamase inhibitor比单一β-lactam抗生素抑制儿童肠道双歧杆菌和乳酸杆菌作用更强。

血液病房产超广谱β-内酰胺酶菌分布情况及药物敏感性分析

目的分析2020年1月至2021年11月江西省九江市第一人民医院(以下简称“本院”)血液病房产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌分布情况及药物敏感性。方法选取2020年1月至2021年11月江西省九江市第一人民医院血液病房138例患者作为研究对象,收集患者的分泌物进行病原菌培养,并对产ESBLs菌分布情况和药物敏感性进行分析。结果革兰氏阴性菌居多,共分离出160株,占比80.00%,其次是真菌和革兰氏阳性菌,各分离出22株和18株。其中以铜绿假单胞菌、大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌最为常见。本院血液病房病原菌共检出200株,检出情况主要以痰、中段尿、咽拭子居多,以肛拭子、大便检出较少;200株病原菌共检出产ESBLs菌56株,占比28.00%,以中段尿、咽拭子检出居多,脓液、肛拭子、大便中未检出。本院血液病房产ESBLs菌除对亚胺培南、美罗培南耐药率较低外,对大部分抗菌药物的耐药率均较高。结论本院血液病原菌以革兰氏阴性菌为主,且对抗菌药物的耐药率较高,临床应重点关注此类菌株感染,需引起重视,加强院感的防控,避免发生耐药菌的暴发和流行。

枸杞槲皮素对金黄色葡萄球菌产β-内酰胺酶的抑制作用

【目的】探讨枸杞槲皮素对金黄色葡萄球菌产生的β-内酰胺酶的抑制作用机制,为临床研发β-内酰胺酶抑制剂提供基础依据。【方法】通过青霉素抑菌圈边缘试验筛选产β-内酰胺酶阳性菌株,通过药敏纸片法检测阳性菌株在32、64、128μg/mL枸杞槲皮素作用下对青霉素的敏感性变化;借助多功能酶标仪检测在32、64、128、256μg/mL枸杞槲皮素处理下青霉素含量的变化,并以此来评估枸杞槲皮素对β-内酰胺酶合成及在64、128、256μg/mL枸杞槲皮素作用下对β-内酰胺酶活性的影响。通过AutoDockTools 1.5.6软件对枸杞槲皮素与BlaZ蛋白进行分子对接,采用Discovery Studio 2019 Client软件对分子对接结果进行可视化分析。【结果】从36株金黄色葡萄球菌中共筛选出23株产β-内酰胺酶阳性菌株。药敏纸片结果表明,随着枸杞槲皮素浓度的升高,阳性菌株对青霉素的敏感性增加。多功能酶标仪检测结果表明,枸杞槲皮素可以抑制β-内酰胺酶的合成,并显著抑制β-内酰胺酶的活性(P<0.05)。分子对接结果表明,枸杞槲皮素通过与BlaZ蛋白Ω-loop区域内的保守残基Asn161以氢键结合,影响BlaZ蛋白与β-内酰胺类抗生素的结合。【结论】枸杞槲皮素可以减少β-内酰胺酶的合成,还可通过降低β-内酰胺酶的活性增强青霉素的抑菌作用,具有作为β-内酰胺酶抑制剂的潜在活性,为后续开发新型β-内酰胺酶抑制剂提供了参考依据。

β-内酰胺酶抑制剂复合抗菌药物的使用量与产ESBLs细菌分离率关系研究

目的 探讨临床上产超广谱 β 内酰胺酶 (ESBLs)细菌分离率的增加 ,是否与含 β 内酰胺酶抑制剂的复合β 内 酰胺类抗菌药物使用量有关 ,为抗菌药物的规范合理使用提供依据。方法 用SPSS10 0统计软件包 ,统计分析 1998～ 2 0 0 2年 ,每年含β 内酰胺酶抑制剂的复合 β 内酰胺类抗菌药物使用量与产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分离率间的相关性关系。结果 5年来含 β 内酰胺酶抑制剂的复合 β 内酰胺类抗菌药物使用总量从16 5 4kg/年增加到 15 6 86 8kg/年 ,增加了 84 8 4 % ;培养总样本数从 10 897份增加到 185 6 7份 ,增加了 70 4 % ;两者间相关系数r =0 884 ,P <0 0 5 ;抗菌药物使用总量与细菌分离株数间的相关系数r =0 4 4 9,P >0 0 5 ,与产ESBLs细菌总分离率间的相关系数r =0 933,P <0 0 5 ;年平均每份送检样本中此类抗菌药物的使用量与细菌分离株数间的相关系数r =0 389,P >0 0 5 ,与产ESBLs细菌总分离率间的相关系数r =0 889,P <0 0 5。结论 产ESBLs细菌分离率的增加与含 β 内酰胺酶抑制剂的复合 β 内酰胺类抗菌药物使用总量及年平均每份送检样本中此类抗菌药物的使用量呈正相关 ,提示临床使用抗菌药物应更具合理性。

产金属β-内酰胺酶大肠埃希菌对亚胺培南的耐药性研究

目的:分析产金属β-内酰胺酶大肠埃希菌对亚胺培南和美罗培南敏感性降低的原因。方法:用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行同源性分析,采用E-test方法测定菌株及接合子和转化子的药敏情况。采用RT-PCR扩增和序列分析、碳青霉烯酶抑制剂增强实验、外膜蛋白分析(SDS-PAGE)以及羰酰氰氯苯腙(CCCP)抑制试验分析大肠埃希菌对亚胺培南耐药的原因。结果:菌株Eco1、Eco2和Eco3为非同一克隆株,对亚胺培南的MIC分别为6μg/mL、16μg/mL和16μg/mL,对美罗培南的MIC分别为6μg/mL、16μg/mL和32μg/mL,对厄他培南、哌拉西林/他唑巴坦耐药、氨曲南、头孢噻肟、头孢曲松、头孢吡肟、头孢西丁、左氧氟沙星和庆大霉素均高度耐药;菌株Eco3对阿米卡星敏感,菌株Eco1和Eco2对阿米卡星高度耐药。菌株Eco1产CTX-M-79、SHV-11、IMP-4、CMY-6和NDM-1,菌株Eco2产CTX-M-79、CTX-M-14、CMY-6和NDM-1,菌株Eco3产CTX-M-14、CMY-6和IMP-4。CCCP不能提高Eco1、Eco2和Eco3对亚胺培南的敏感性,SDS-PAGE发现菌株Ompk35和Ompk36未见缺少,3株大肠埃希菌EDTA增强实验阳性。仅菌株Eco1的NDM-1金属β-内酰胺酶通过接合试验传递到大肠埃希菌J53上,其接合子对亚胺培南和美罗培南耐药,EDTA增强实验阳性;菌株Eco2接合子和转化子不含NDM-1金属β-内酰胺酶,其接合子和转化子对亚胺培南和美罗培南敏感;菌株Eco3接合试验和转化试验未成功。结论:同时产CTX-M-79、CTX-M-14、CMY-6、NDM-1、IMP-4或CTX-M-79、CTX-M-14、CMY-6、IMP-4β-内酰胺酶的大肠埃希菌可引起亚胺培南高度耐药。

β-内酰胺酶抑制剂研究进展

β-内酰胺酶抑制剂能抑制耐药菌产生的β-内酰胺酶,常与β-内酰胺类抗生素联合使用,能使抗生素中的β-内酰胺环免遭水解,保护抗生素的抗菌作用。1976年,英国从链霉菌中发现第一个β-内酰胺酶抑制剂克拉维酸,其能抑制部分广谱和超广谱β-内酰胺酶,常与阿莫西林联合应用,可使阿莫西林对某些细菌的MIC值降低。随着抗生素的大量使用以及具有β-内酰胺酶相关的耐药性的细菌的增加,许多β-内酰胺酶抑制剂相继被发现。根据β-内酰胺酶抑制剂的结构,主要将其分为含有β-内酰胺环结构的抑制剂和不含β-内酰胺环结构的抑制剂。本文就目前国内外β-内酰胺酶抑制剂的研究现状进行综述。

β-内酰胺酶抑制剂与β-内酰胺类抗生素联合应用的抗菌作用评价

β－内酰胺类抗生素是临床上应用最广，抗感染效果最好的一类抗菌药物，但目前细菌对这一类药物耐药已成为一个严重的问题。细菌耐药机制中最主要的机制是细菌通过产生β－内酰胺酶破坏β－内酰胺类抗生素。解决细菌产酶耐药问题的方法之一是开发β－内酰胺酶抑制剂，与β－内酰胺类抗生素联合应用，通过酶抑制剂灭活β－内酰胺酶，从而使不耐酶的抗生素发挥它们原有的抗菌作用。现有的酶抑制剂ＢＲＬ４２７１５、克拉维酸、他唑巴坦和舒巴坦均有较好的抑酶作用，并能增强不耐酶抗菌药物对产酶耐药菌的抗菌作用。体外抗菌试验结果证明ＢＲＬ４２７１５与抗菌药物联合，增强原抗菌药物的抗菌作用效果最明显，他唑巴坦和克拉维酸次之、舒巴坦稍弱。它们与抗菌药物联合的临床试验结果也证明了这一点。

2001年～2003年重庆市18家医院β-内酰胺酶抑制剂复合制剂利用分析

目的 :评估 β-内酰胺酶抑制剂复合制剂的利用现状及其发展趋势。方法 :调查重庆市18家医院在2001年～2003年应用β-内酰胺酶抑制剂复合制剂的组成、剂型、规格、药品名称、生产厂商、用药金额等 ,分析其临床应用情况。结果 :β-内酰胺酶抑制剂复合制剂在2001、2002、2003年的用药金额分别为2229、2937、4119万元 ,年平均增长率为26.41% ;3年中与舒巴坦、克拉维酸、他唑巴坦的复合制剂金额分别为6280、2276、729万元 ,占该类药物总金额的67.64 %、24.51%、7.85% ,年平均增长率分别为32.20%、35.93%、94.50 %。结论 :β-内酰胺酶抑制剂复合制剂的用药量逐年快速增长 ,预计其市场需求量还会进一步上升。

借助处方前置审核系统实施含β-内酰胺酶抑制剂复合制剂精细化管理

目的促进含β-内酰胺酶抑制剂复合制剂(简称“含酶抑制剂复合制剂”)的处方前置审核及临床合理使用。方法借助处方前置审核系统(MIND系统)开发自维护规则库,对含酶抑制剂复合制剂的处方权限、病原学送检、用法用量、联合用药、疗程等进行精细化设置;统计管理前后药品的使用率、会诊率、疗程,以及抽样点评中医嘱合格率,评价精细化设置的效果。结果精细化管理后,含酶抑制剂复合制剂使用率由8.25%降至5.82%,会诊率由11.43%提高至77.40%,平均疗程缩短,抽样点评医嘱不合格率由38.33%降至4.76%,适应证、用法用量、联合用药及疗程不适宜等问题均显著改善。结论对含酶抑制剂复合制剂的信息化精细设置可促进前置审方工作的开展,促进药品的合理使用。

β-内酰胺酶抑制剂舒巴坦与氨苄西林联用的体内外抗菌作用研究

试验观察了β 内酰胺酶抑制剂舒巴坦与氨苄西林联用的体内外协同抗菌作用。结果表明 :氨苄西林与舒巴坦联用对 5个标准菌株的抗菌活性与氨苄西林相似 ,对除绿脓杆菌外的 6株临床分离菌株的体外抗菌活性较显著高于氨苄西林。临床分离菌株均可产生 β 内酰胺酶并可不同程度的水解氨苄西林 ,在不加入舒巴坦时 ,β 内酰胺酶对氨苄西林的水解率为 5 7 6 4%～ 10 0 % ,加入舒巴坦时 ,β 内酰胺酶对氨苄西林的水解率降低。舒巴坦对临床分离菌株产生的 5种 β 内酰胺酶均有抑制作用 ,在 1μg/ml时的抑制率为 9 35 %～ 6 7 2 0 % ,10 μg/ml时为 5 0 %～93 19% ,显示出明显的抑酶保护作用。氨苄西林与舒巴坦联用对氨苄西林耐药菌株引起的鸡白痢有明显的治疗效果 ,按 5mg/kg肌注的治愈率为 91 18% ,显著高于氨苄西林混饮 ,与舒他西林相似。提示二者联用体内体外均有协同抗菌作用 ,值得进一步研究。

β-内酰胺酶抑制剂高通量筛选模型的建立

目的建立β-内酰胺酶抑制剂的高通量筛选模型。方法从产β-内酰胺酶菌株中提取酶液,以硝噻吩为底物,三唑巴坦作为酶抑制剂,通过检测反应体系吸光度的变化,来判断酶促反应的进行情况以及酶抑制剂的效果,建立384微孔板的高通量筛选模型,优化反应条件并对此模型进行评价。用此模型对7360个化合物组成的随机库进行筛选。结果确定反应体系条件为:最佳测定波长为482nm,反应温度为30℃,选取15min时间点检测,底物硝噻吩终浓度为0.1mmol/L,评价指标Z′因子在0.8～0.9范围内,表明此模型可以用于高通量筛选。基于此模型初筛出65个有抑制活性的化合物。结论建立的β-内酰胺酶抑制剂高通量筛选模型具有快速、稳定和微量的特点,是寻找和发现有潜在活性的β-内酰胺酶抑制剂的有效手段。