规模化猪场大肠杆菌β-内酰胺类药物耐药性检测及其超广谱β-内酰胺酶调查

为阐明我国规模化猪场大肠杆菌(E.coli)对抗菌药物的耐药现状和耐药机制,本研究于2006年2月至2008年12月从19个省市97个规模化猪场分离鉴定602株E.coli,进行了4大类16种抗菌药物耐药性检测和产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株的筛选,采用PCR方法检测了9种常见β-内酰胺酶耐药基因,对产ESLBs菌株进行了脉冲电场凝胶电泳(PFGE)分析。结果显示:E.coli分离株对抗菌药物产生了不同程度的耐药性,602株E.coli中共有57株产ESBLs,产ESBLs菌株普遍耐受第二及第三代头孢药物。分别有35株和20株E.coli为blaCTX-M型和blaSHV型ESBLs,尚未发现blaOXA型和blaKPC型。PFGE结果显示,产ESBLs菌株间同源性低,推测我国猪源E.coli产ESBLs多为零星发生或以质粒介导的形式传播。本研究为了解我国猪源E.coli对β-内酰胺类药物的耐药现状和ESBLs变化趋势提供了实验依据。

新型β-内酰胺类/β-内酰胺酶抑制剂复合制剂头孢吡肟-他尼硼巴坦钠的研究进展

细菌耐药是一个全球性的公共卫生问题,尤其是碳青霉烯类耐药的革兰阴性菌(carbapenem-resistant Gram-negative bacteria,CR-GNB)的危害尤为严重。临床对CR-GNB感染的防治手段非常有限,故迫切需要新型抗菌药物。头孢吡肟-他尼硼巴坦钠是由第4代头孢菌素头孢吡肟和新型广谱β-内酰胺酶抑制剂他尼硼巴坦钠组成的复方制剂,其对A、B、C和D 4类β-内酰胺酶都具有直接的抑制活性,因而可能对CR-GNB等耐药菌具有较好的抗菌作用。该文从头孢吡肟和他尼硼巴坦钠的作用机理、药学特性、抗菌活性、临床研究、抑酶/抑菌谱等方面进行了综述,从而为头孢吡肟-他尼硼巴坦钠的临床合理应用提供参考。

产超广谱β-内酰胺酶的肠杆菌科细菌对喹诺酮类药物的耐药性分析

目的 分析从临床老年患者分离的产 ESBL s肠杆菌科细菌对喹诺酮类药物的耐药性。方法 利用法国 Bio- Merieux公司生产的全自动细菌分析系统 VITEK- 6 0和革兰氏阴性杆菌鉴定卡 GNI+及药敏卡 GNS- 5 0 6、GNS- 12 0对老年患者各种标本分离得到的 12 70株肠杆菌科细菌进行喹诺酮类抗菌药物耐药试验及 ESBL s检测 ,ESBL s产酶率为 2 0 .6 %。分析其中 ESBL s阳性的 2 4 1株菌株对喹诺酮抗菌药物环丙沙星、左氧氟沙星、培氟沙星和萘啶酸的耐药特性。结果 产 ESBL s的大肠埃希氏菌对这四种抗菌药物均高度耐药 ,耐药率在 92 .4 %以上。同时 ,喹诺酮类药物对肺炎克雷伯氏菌的体外抗菌活性亦不高 :左氧氟沙星、环丙沙星耐药率为 6 1.8% ,培氟沙星、萘啶酸的耐药率超过 70 %。而其它产 ESBL s的肠杆菌科细菌对左氧氟沙星、环丙沙星有较高的敏感性 ,敏感率为 77.4 % ,但培氟沙星、萘啶酸的耐药程度较高 ,耐药率为 75 .0 %。结论 应避免使用喹诺酮抗菌药物治疗 ESBL s阳性的大肠埃希氏菌感染。对肺炎克雷伯氏菌的 ESBL s产酶株 ,喹诺酮抗菌药物有一定的体外抗菌活性 ,临床使用时应以体外药敏试验结果为依据谨慎使用。除大肠埃希氏菌、肺炎克雷伯氏菌以外的 ESBL s阳性肠杆菌科细菌的感染 ,左氧氟沙星。

胶束电动毛细管色谱法测定含β-内酰胺酶抑制剂的青霉素类药物

目的 :采用胶束电动毛细管色谱法使 3种青霉素类药物 (氨苄西林、阿莫西林、替卡西林 )及两种 β 内酰胺酶抑制剂(克拉维酸、舒巴坦 )的混合物得到分离测定。方法 :选用硼酸钠 磷酸盐缓冲液 (pH8.5 ) ;恒定电压 2 0kV ,运行电流 110 μA,检测波长 2 14nm。选择苯巴比妥为内标。结果 :各组分在 5～ 8min之间得到完全分离 ,浓度与峰面积比间呈良好的线性 ,线性范围为 0 .0 5～ 3g·L-1,RSD <2 % (n =10 ) ,回收率为 93.30 %～ 10 1.1% ,RSD <2 % (n =10 ) ,结论 :该法分离效率高 ,试剂用量少 ,准确 ,简便 ,快速。

β-内酰胺酶抑制剂复合抗菌药物的使用量与产ESBLs细菌分离率关系研究

目的 探讨临床上产超广谱 β 内酰胺酶 (ESBLs)细菌分离率的增加 ,是否与含 β 内酰胺酶抑制剂的复合β 内 酰胺类抗菌药物使用量有关 ,为抗菌药物的规范合理使用提供依据。方法 用SPSS10 0统计软件包 ,统计分析 1998～ 2 0 0 2年 ,每年含β 内酰胺酶抑制剂的复合 β 内酰胺类抗菌药物使用量与产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分离率间的相关性关系。结果 5年来含 β 内酰胺酶抑制剂的复合 β 内酰胺类抗菌药物使用总量从16 5 4kg/年增加到 15 6 86 8kg/年 ,增加了 84 8 4 % ;培养总样本数从 10 897份增加到 185 6 7份 ,增加了 70 4 % ;两者间相关系数r =0 884 ,P <0 0 5 ;抗菌药物使用总量与细菌分离株数间的相关系数r =0 4 4 9,P >0 0 5 ,与产ESBLs细菌总分离率间的相关系数r =0 933,P <0 0 5 ;年平均每份送检样本中此类抗菌药物的使用量与细菌分离株数间的相关系数r =0 389,P >0 0 5 ,与产ESBLs细菌总分离率间的相关系数r =0 889,P <0 0 5。结论 产ESBLs细菌分离率的增加与含 β 内酰胺酶抑制剂的复合 β 内酰胺类抗菌药物使用总量及年平均每份送检样本中此类抗菌药物的使用量呈正相关 ,提示临床使用抗菌药物应更具合理性。

2017—2020年南京地区β-内酰胺类抗菌药物/β-内酰胺酶抑制剂复方制剂的使用现状调查与分析

目的:了解南京地区β-内酰胺类抗菌药物/β-内酰胺酶抑制剂复方制剂的使用情况,为合理用药提供依据。方法:对2017—2020年南京地区67家医院β-内酰胺类抗菌药物/β-内酰胺酶抑制剂复方制剂的销售金额、用药频度(DDDs)等数据进行统计分析。结果:2017—2020年,南京地区β-内酰胺类抗菌药物/β-内酰胺酶抑制剂复方制剂中,销售金额最高的药品为头孢哌酮舒巴坦(2∶1),DDDs排序居前2位的药品为阿莫西林克拉维酸(7∶1)、阿莫西林克拉维酸(4∶1);含舒巴坦的复方制剂的销售金额及DDDs逐年升高,同时整体占比也较高;阿维巴坦作为新的β-内酰胺酶抑制剂,2017年和2018年未在我国使用,2019年开始头孢他啶阿维巴坦的销售金额占比和DDDs占比均较小,虽然该药价格较高,但其销售金额及DDDs仍显示出明显增长趋势;临床非主流品种如头孢噻肟舒巴坦(2∶1)、头孢曲松舒巴坦(2∶1)和美洛西林舒巴坦(4∶1)等仍占据一定的使用量。结论:南京地区β-内酰胺类抗菌药物/β-内酰胺酶抑制剂复方制剂的临床使用基本能遵循相关指南要求,但是使用过程中应注意抗菌药物使用指征及选择合适配比的复方制剂,应继续加强含β-内酰胺酶抑制剂复方制剂的临床合理使用监测,促进用药合理及延缓细菌耐药性。

多重耐药铜绿假单胞菌β-内酰胺酶耐药基因分析

目的了解临床下呼吸道标本分离多重耐药铜绿假单胞菌(MDRPA)β-内酰胺酶及OprD2耐药基因存在状况,指导临床合理用药。方法收集39株下呼吸道分离MDRPA,采用聚合酶链反应(PCR)技术检测β-内酰胺酶、OprD2基因并进行测序分析。结果 39株MDRPA中OXA-10阳性7株(18%),VIM-2阳性2株(5%),34株OprD2基因缺失(87%)。结论携带OXA-10、VIM-2及OprD2基因缺失是导致MDRPA对β-内酰胺类抗生素耐药的重要机制。

痰热清对产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的体外抑制作用研究

呼吸道感染是临床常见疾病,致病菌包括肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌（Kpn）等[1]。近年来,关于Kpn导致的院内感染的报道越来越多,β-内酰胺酶类广谱抗生素在临床的广泛应用使Kpn的耐药也在增加,会使Kpn产生ESBLs,限制了青霉素及头孢类抗生素的临床应用,使病情迁延不愈。

水解碳青霉烯类OXA型β-内酰胺酶的研究进展

苯唑西林酶(OXA酶)属于D类β-内酰胺酶,因其对苯唑西林具有较高的水解活性而得名。OXA型β-内酰胺酶定位于染色体或质粒,并由质粒、转座子等可移动元件介导其在菌株间的水平转移,现已衍生出一千余种变体。近年来,水解碳青霉烯类药物的OXA酶出现并在菌株间传播,给临床抗感染治疗带来巨大挑战。2001年土耳其从1株肺炎克雷伯菌中发现了OXA-48酶,这是在肠杆菌目菌株中第一次发现可水解碳青霉烯类药物的OXA酶。随后,又发现了OXA-48酶多种变体,统称为OXA-48-like酶,其不仅水解青霉素类药物能力强,还可以水解厄他培南、美罗培南等碳青霉烯类药物,介导对包括碳青霉烯类在内的多种β-内酰胺类药物耐药。希瓦氏菌被认为是blaOXA-48-like基因的起源,现已报道12个起源于希瓦氏菌的OXA-48-like。为全面掌握可水解碳青霉烯类OXA酶的特征和分布,本文就水解碳青霉烯类药物的OXA酶的来源、分布现状、流行特点及发展趋势进行综述。

中药水煎剂与β-内酰胺类抗菌药物联合使用对常见致病菌的抗菌作用研究

目的观察中药水煎剂与β-内酰胺类抗菌药物联合使用对常见致病菌的抗菌作用。方法 30株首次临床分离株,其中金黄色葡萄球菌(Sa)、肺炎链球菌(Sp)、大肠埃希菌(E.coli)、铜绿假单胞菌(Pa)、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)分离株各6株,使用纸片扩散法分别对使用含苯唑西林、头孢唑啉、头孢呋辛或头孢他啶等β-内酰胺类抗菌药物的纸片,以及使用中药水煎剂(连翘、金银花、黄芩、鱼腥草)分别合用苯唑西林、头孢唑啉、头孢呋辛和头孢他啶等β-内酰胺类抗菌药物的纸片测量抑菌环直径。结果单用苯唑西林、头孢唑啉、头孢呋辛或头孢他啶等β-内酰胺类抗菌药物的抑菌环平均直径分别为23.8、24.2、25.4、27.8 mm,中药水煎剂分别合用苯唑西林、头孢唑啉、头孢呋辛和头孢他啶等β-内酰胺类抗菌药物的抑菌环平均直径分别为42.4、42.0、45.8、52.2 mm,分别增加18.6、17.8、20.4、24.4 mm。结论中药水煎剂与β-内酰胺类抗菌药物联合使用可增强对金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌等常见致病菌的抗菌作用。

产超广谱β-内酰胺酶肠杆菌科细菌引起的肺部感染:抗菌药物选择及优化

产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)肠杆菌科细菌感染已成临床感染治疗的重大问题,一方面产ESBL肠杆菌科细菌流行率高且广泛的存在于医疗环境和自然环境中,当机体抵抗力下降时,这些细菌就会侵入机体引起感染;另一方面,治疗这类细菌感染的药物十分有限,碳青霉烯类药物虽然对其治疗效果确切,但长期使用碳青霉烯类药物所导致的碳青霉烯类耐药正曰益严重。如何合理使用抗菌药物治疗这类感染,同时避免细菌耐药的进一步发展是临床十分关心的问题。

乳及乳制品中舒巴坦敏感β—内酰胺酶类药物检验方法及探讨

由于目前乳品行业出现个别掺杂使假现象，生鲜牛乳中加β-内酰胺酶类药物来分解牛乳中残留青霉素，使有抗奶无法正常检出。为了测出此种不合格牛乳，有关检测部门新开展了此类检测项目，基本上采用β-内酰胺酶的试剂盒检测法与舒巴坦敏感β-内酰胺酶类药物检验方法来确认。本文主要研究乳及乳制品中舒巴坦敏感β-内酰胺酶类药物的检验方法，探讨检测过程中的具体步骤，以及时、准确地确认乳及乳制品中是否含有β-内酰胺酶类药物，达到最佳检测效果。

β-内酰胺类抗菌药物及其复合制剂对医院感染菌株体外抗菌活性研究

目的对比研究临床常用13种β-内酰胺类抗菌药物及其复合制剂对84株肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌的体外抗菌活性。方法采用微量稀释法测定13种β-内酰胺类抗菌药物及其复合制剂对产β-内酰胺酶和产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌的最低抑菌浓度(MIC)。结果β-内酰胺类抗菌药物与酶抑制剂复合剂的体外抗菌活性均高于等剂量抗菌药物单剂(P<0.01);ESBLs的抗菌活性,亚胺培南、美罗培南最好,β-内酰胺类抗菌药物复合制剂和头霉素类次之,氨基糖苷和喹诺酮类也具有一定的抗菌活性,β-内酰胺类抗菌药物单剂无效。结论β-内酰胺类抗菌药物与酶抑制剂联合应用对医院感染菌的抗菌活性优于其单剂,提高临床治愈率,有可能延缓医院感染菌耐药性的产生。

肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶检测及耐药性分析

目的:了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的表型和基因分布及对常用抗生素的耐药情况.方法:用1999年NCCLS推荐的初筛试验从77株肺炎克雷伯菌中筛选出可疑产ESBLs细菌,并用确证试验加以确认;用PCR的方法扩增其基因型;用微量液体稀释法做药敏实验.结果:将初筛得到的可疑菌株用纸片扩散法确证,用头孢噻肟和头孢噻肟/克拉维酸测定,77株肺炎克雷伯菌中共检出45株产ESBLs(58.1%);而用头孢他啶和头孢他啶/克拉维酸检测ESBLs阳性菌为27株.PCR扩增基因型阳性结果为TEM型19株、SHV型8株、CTX-M型36株、OXA型11株.结论:近年来肺炎克雷伯菌产ESBLs率显著升高;基因型以CTX-M型为主,有些菌株同时携带多种耐药基因;亚胺培南仍为首选药物,头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦为候选药物.

肺炎克雷伯菌AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药分析

目的:探讨本地区肺炎克雷伯菌AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的产生情况及其耐药性。方法:收集80株临床分离无重复肺炎克雷伯菌,通过改良三维试验检测肺炎克雷伯菌AmpC酶和ESBLs的产生情况,运用K-B琼脂扩散法进行药物敏感性试验。结果:从80株临床送检标本中分离的肺炎克雷伯菌中检出单产ESBLs25株,单产AmpC酶8株,同时产AmpC酶和ESBLs共4株,检出率分别为31.3%、10.0%和5.0%。单产AmpC酶、ESBLs及同时产AmpC酶和ESBLs对抗生素的耐药率均高于不产酶菌株(除哌拉西林/他巴唑)。结论:产Ampc酶及ESBLs酶的细菌的耐药性不完全相同,产酶类型不同需选用不同类型的抗生素。

变形杆菌产超广谱β-内酰胺酶的检测及其耐药现状

目的检测变形杆菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)并了解其耐药情况。方法对54株本院分离的变形杆菌进行耐药性分析、转移接合实验、ESBLs的初筛及确证实验、ESBLs的基因型检测。结果表型筛选出8株ESBLs阳性株,PCR扩增出4株阳性(3株为TEM型,1株为CTX-M-13型)。所有菌株对亚胺培南均敏感(100%),其次为阿米卡星(89.5%)和氧哌嗪青霉素/他唑巴坦(84.8%)。结论及时准确检测产ESBLs变形杆菌对指导临床合理用药、避免此类变形杆菌引起的暴发流行感染有重要意义。

β-内酰胺类抗菌药物及其临床应用评价

β-内酰胺类抗菌药物是临床应用最为广泛的一类抗感染药,其化学结构中含有β-内酰胺环。根据β-内酰胺环是否连接有其他杂环以及所连接杂环的化学结构差异,又可分为青霉素类（Penicillins）、头孢菌素类（Cephalosporins）、碳青霉烯类（Carbapenems）、头霉素和氧头孢烯类（Cephamycins）、单环β-内酰胺类（Monobactams）以及β-内酰胺酶（ESBL）抑制剂（Beta-lactamase inhibitors）。

牛奶中TEM1型β-内酰胺酶免疫胶体金试纸条的研制

牛奶中存在的抗生素残留是影响牛奶安全的重要因素之一,其来源主要是奶牛养殖过程中使用的β-内酰胺类抗生素,如青霉素簇药物。近来出现了一种声称能分解抗生素的＂抗生素分解剂＂-TEM1型β-内酰胺酶。该酶能将青霉素类药物降解。

临床分离14株高产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶的阴沟肠杆菌耐药表型研究

近年来,由于第3、4代头孢菌素、碳青霉烯类及氟喹诺酮类等超广谱抗菌药物在临床上的广泛使用,使阴沟肠杆菌在其选择性压力下不断产生耐药性,多重耐药形势日益严峻。AmpC酶的去阻遏表达和产超广谱β-内酰胺酶（EsBk）是阴沟肠杆菌对β-内酰胺类耐药的主要机制。

耐亚胺培南铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶的研究

目的检测该院2005年4～7月住院患者耐亚胺培南铜绿假单胞菌（PA）产金属β-内酰胺酶（MBL）的情况，为难治性感染治疗提供参考。方法VITEK-60鉴定细菌及测定PA对抗菌药物的耐药性；纸片法检测PA产MBL。结果共检出PA103株，耐亚胺培南PA47株，同时耐头孢他啶16株，其中产MBL的PA8株，占所分离PA的7．8％，占耐亚胺培南PA的17．0％。8株产酶菌株中除1株对左旋氧氟沙星敏感外，对羧苄青霉素、阿米卡星、替卡西林／克拉维酸、头孢哌酮、头孢他啶、头孢吡肟、奈替米星、复方增效磺胺、哌拉西林／他唑巴坦、环丙沙星等抗生素均耐药；非产酶菌株仅有2株对羧苄青霉素敏感，1株对阿米卡星敏感，对其他抗生素均耐药。结论临床感染分离的PA、产酶菌株与非产酶菌株均呈多重耐药性。产MBL是PA对头孢类及碳青酶烯类抗生素耐药的机制之一，实验室对其正确检测可帮助临床合理选用抗菌药物，并减少耐药性的扩散。