某三甲医院细菌耐药健康及经济负担研究——以产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌为例

目的 细菌耐药是全世界共同面对的公共健康难题,产生了严重的健康及经济威胁。本研究从医院视角进一步明确产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌感染导致的健康及经济负担,以期为细菌耐药相关政策干预的评估与优化提供实证依据。方法 选取江西省某三甲医院出院时间在2018—2019年的170,819住院人次样本为研究对象,并设置了ESBLs阳性感染组、ESBLs阴性感染组和无感染及定植组。采用倾向得分匹配(propensity score matching, PSM)对3个组进行1:1:100匹配,并采用Cox比例风险回归模型、多状态模型分别测算ESBLs阳性感染组相对于两对照组的死亡风险比(hazard ratio, HR)和额外床日数,最终基于医院视角测算额外住院成本。结果 经匹配后纳入分析的ESBLs阳性感染组、ESBLs阴性感染组和无感染及定植组的样本分别为885、885和81,245住院人次。ESBLs阳性感染组的死亡风险是无感染及定植组的2.58倍(P<0.001),同ESBLs阴性感染者相比并未显著增大患者的死亡风险(P=0.25)。ESBLs阳性感染组相较于其无感染及定植组和ESBLs阴性感染组产生的额外床日数分别为每例3.69 d和1.92 d,对应的额外住院成本为每例6,570.12元和3,418.60元。结论 产ESBLs大肠埃希菌感染会增加患者死亡风险,延长住院时间并加重患者的经济负担,应采取措施进行防控。

肿瘤患者感染产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌的变化趋势与耐药情况(2016~2021年)

目的了解肿瘤患者感染产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌(ESBL E.coli)和产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌(ESBL K.pneumoniae)的变化趋势与耐药情况。方法选取2016年1月至2021年12月广西医科大学附属肿瘤医院1285例E.coli和641例K.pneumoniae感染的住院肿瘤患者,分析产ESBL E.coli和产ESBL K.pneumoniae的检出率及其对主要抗生素的耐药情况。结果2016年1月至2021年12月,共筛选出769株产ESBL E.coli、168株产ESBL K.pneumoniae,检出率分别为59.8%、26.2%。产ESBL E.coli主要源于妇瘤外科、胃肠外科、泌尿外科、重症医学科和肝胆外科;产ESBL K.pneumoniae主要源于重症医学科、泌尿外科、妇瘤外科、综合内科和胃肠外科。2016~2021年,产ESBL E.coli检出率分别为68.57%、74.06%、60.50%、61.38%、55.92%、42.97%,产ESBL K.pneumoniae检出率分别为24.69%、25.93%、27.78%、27.45%、33.64%、20.13%。分离出的产ESBL E.coli对阿米卡星、亚胺培南、美罗培南的耐药率分别为3.6%、3.3%、3.1%;产ESBL K.pneumoniae对阿米卡星、亚胺培南、美罗培南的耐药率分别为7.7%、6.1%、2.4%。结论2016~2021年广西医科大学附属肿瘤医院肿瘤患者产ESBL E.coli检出率总体呈下降趋势,产ESBL K.pneumoniae控制情况良好;二者对碳青霉烯类药物的耐药率均较低,但对阿米卡星、亚胺培南、美罗培南的耐药率有升高趋势,应重点监控。

孕晚期阴道大肠埃希菌耐药性及产超广谱β-内酰胺酶菌株耐药基因分析

目的:分析孕晚期孕妇阴道大肠埃希菌耐药性及产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株耐药基因检测。方法:收集2022年1-9月本院产前检查的孕晚期孕妇阴道分泌物标本,检测大肠埃希菌菌株并分析对临床常用抗生素的耐药性以及耐药基因型。结果:获得的298株孕晚期孕妇阴道大肠埃希菌,对碳青霉烯类和β-内酰胺酶抑制剂以及氨基糖苷类(阿米卡星)的敏感率达98.0%~100.0%,对青霉素、头孢菌素、磺胺类和喹诺酮类的耐药性较高,依次为72.8%~38.9%;产ESBLs阳性检出率为47.7%(142/298例),ESBLs阳性菌株对青霉素类、头孢菌素、单酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类和磺胺类等多种抗生素耐药率高于产ESBLs阴性菌株(P<0.05)。142株(47.7%)产ESBLs大肠埃希菌的耐药基因型分布为CTX-M(81.7%)、TEM-1(59.2%)、SHV(21.1%)和OXA(2.1%)。基因型组合以CTXM-15+TEM-1(21.8%)、CTXM-15+TEM-1(20.4%)和CTXM-15(13.4%)等为主,CTX-M型的产ESBL大肠埃希菌对头孢噻肟(CTX)耐药率高于TEM和SHV型,对头孢他啶(CAZ)的耐药率低于TEM和SHV型(均P<0.05),3种耐药基因型的产ESBL大肠埃希菌对其他抗生素耐药率无差异(P>0.05)。结论:孕晚期阴道大肠埃希菌的产ESBLs菌株耐药基因型以TEM-1、CTX-M-15、CTX-M-14为主,临床应慎用青霉素、头孢菌素、磺胺类和喹诺酮类药物治疗。

耐氨苄西林流感嗜血杆菌产β-内酰胺酶机制研究

目的：探讨耐氨苄西林的流感嗜血杆菌产生β－内酰胺酶的机制。方法：对临床分离的１１２株流感嗜血杆菌耐药菌用纸片法作β－内酰胺酶测定，用ＰＣＲ法检测产酶流感嗜血杆菌中的β－内酰胺酶基因的存在。结果：纸片法测得产酶菌株３２株，产酶率２８．６％ （３２／１１２）；３２株产酶菌中ＰＣＲ法测β－内酰胺酶基因阳性菌株２９株，阳性率为９０．６％ （２９／３２），其中质粒ＤＮＡ 模板组阳性为２５株，基因组ＤＮＡ模板组阳性为４例。结论：（１）流感嗜血杆菌耐氨苄西林主要由质粒介导产生β－内酰胺酶所造成。（２）ＰＣＲ法是研究流感嗜血杆菌是否携带β－内酰胺酶基因及该基因所在位置的简便而有效的方法。

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希氏菌耐药现状及传播模式

大肠埃希氏菌对维持肠道菌群环境起重要作用,但当其发生紊乱时也可以引起腹泻、泌尿系感染甚至菌血症等感染。治疗大肠埃希氏菌感染的首选药物为β-内酰胺类抗生素,但随着近年来抗生素的不合理使用,已经有越来越多的大肠埃希氏菌表现出对β-内酰胺类抗生素的耐药性,并且总体呈上升趋势,其主要机制为产生超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)。因此,非常有必要探讨一下产ESBLs大肠埃希氏菌的耐药现状和研究进展。

多重耐药革兰阴性杆菌产β-内酰胺酶的表型及基因型研究

目的了解革兰阴性杆菌产β-内酰胺酶表型及基因分型,并分析其耐药特性。方法以纸片扩散初筛法、扩散确证法、头孢西丁三维试验、MBL的协同试验了解β-内酰胺酶的表型,用PCR技术进行扩增并进行DNA测序;药敏试验采用K-B法,分析其耐药特性。结果多重耐药革兰阴性杆菌β-内酰胺酶的表型总检出率为26.49%,主要由产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)引起,占16.56%;其次为ESBLs+头霉素酶(AmpC)引起,占6.62%;ESBLs+AmpC+金属酶(MOL)引起,占1.66%,单独由AmpC引起的仅占0.66%,有3株未能定型0.99%;β-内酰胺酶的基因型总检出率为24.83%,单产ESBLs的多重耐药革兰阴性杆菌株占17.55%,同时产ESBLs与AmpC的菌株占6.95%,产ESBLs、MBL与AmpC的菌株占0.33%,单产AmpC的菌株占0.33%;多重耐药革兰阴性杆菌对临床常用抗菌药物的总体耐药率最低为阿米卡星(18.75%)、最高为氨苄西林(97.50%),大部分细菌呈多重耐药性。结论多重耐药革兰阴性杆菌携带多种β-内酰胺酶,具有多重耐药性。

12株产β-内酰胺酶革兰阴性杆菌的耐药基因检测

目的研究革兰阴性杆菌产β-内酰胺酶的基因型。方法收集北京大学人民医院12株革兰阴性杆菌,用VITEK-2系统进行鉴定和药敏检测,对多种β内酰胺酶基因进行聚合酶链反应(PCR)扩增,耐药基因与pGEM-3zf载体连接转化至大肠埃希菌DH5α,筛选、鉴定阳性克隆后进行序列分析。结果12株菌检测出CTX-M型、TEM型、SHV型、OXA型、PER型和IMP型耐药基因,其中1株鲍曼不动杆菌同时携带OXA型和PER型耐药基因。2株大肠埃希菌的耐药基因分别在CTX-M-14的基础上发生了1个位点的突变。结论细菌携带一种或多种耐药基因导致多重耐药,基因突变可导致新的基因型产生。鲍曼不动杆菌产金属碳青霉烯酶或丝氨酸碳青霉烯酶对亚胺培南耐药。

革兰阴性杆菌产超广谱β-内酰胺酶的检测及其耐药性

目的 了解本院最近的革兰阴性杆菌中产超广谱 β-内酰胺酶 (ESBL)菌株的发生率及其耐药性情况。方法 双纸片法筛选 ,然后用头孢噻肟 /棒酸 ,头孢他啶 /棒酸进行确证。结果 174株革兰阴性杆菌中有 46株是 ESBL 菌株 ,包括大肠埃希菌 2 7株 ,肺炎克雷伯菌 13株 ,阴沟肠杆菌 4株 ,铜绿假单胞菌 1株 ,枸橼酸杆菌 1株。本院 ESBL 株以肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌多见 ,各占该种菌中的 33%、42 %。ESBL菌株对亚胺培南、哌拉西林 /他唑巴坦的敏感率分别是 10 0 %、72 %。结论 本院 ESBL菌株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌多见 ,亚胺培南和哌拉西 /他唑巴坦是治疗

肺部感染革兰阴性杆菌产超广谱β-内酰胺酶的耐药性分析

目的了解下呼吸道感染社区获得性肺炎与医院获得性肺炎感染革兰阴性杆菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况及其对常用抗菌药物的耐药性分析。方法收集医院2005年5月-2006年12月自痰标本中分离出的革兰阴性杆菌,采用标准纸片扩散法检测ESBLs,采用K-B纸片扩散法进行药物敏感检测,试验数据处理使用χ2检验。结果社区获得性肺炎感染革兰阴性杆菌产ESBLs的阳性率为13.3%,医院获得性肺炎感染革兰阴性杆菌产ESBLs阳性率为28.37%,社区获得性肺炎感染革兰阴性杆菌产ESBLs的阳性率显著低于医院感染(P<0.05);社区获得性肺炎与医院获得性肺炎中分离革兰阴性杆菌对亚胺培南的耐药率分别为2.18%和3.54%,两者相比差异无统计学意义(P>0.05);社区获得性肺炎感染革兰阴性杆菌产ESBLs菌株除庆大霉素外,对其他抗菌药物耐药率与医院获得性肺炎感染菌株耐药率差异无统计学意义(P>0.05);两者感染革兰阴性杆菌非产ESBLs菌株除亚胺培南、氨苄西林外,对其他11种抗菌药物相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论医院获得性肺炎感染革兰阴性杆菌产ESBLs率显著高于社区获得性肺炎感染株,尤以ICU显著,应加强抗菌药物的管理及病原菌的检测,规范经验性抗菌药物治疗。

产β-内酰胺酶革兰阴性杆菌的筛选和耐药性分析

目的以多重耐药革兰阴性菌为对象,检测β-内酰胺酶表型,了解其耐药特性和分布特点。方法采用纸片扩散初筛法、扩散确证法、头孢西丁三维试验、甘露聚糖结合凝集素(MBL)的协同试验进行确证;采用法国梅里埃API生化鉴定试条或经VITEK-2鉴定系统将细胞鉴定到种;药敏试验用琼脂纸片扩散(K-B)法,经WHO-NET5.0软件进行统计学分析,分析其耐药特性。结果多重耐药革兰阴性杆菌β-内酰胺酶总检出率为26.4%(80/302),主要由产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)引起,占16.56%(50/302);其次为ESBLs+AmpC引起,占6.62%(20/302);ESBLs+AmpC+MOL引起,占1.66%(5/302),单独由AmpC引起的仅占0.66%(2/302),有3株未能定型占0.99%(3/302)。多重耐药革兰阴性杆菌对临床常用抗生素的总体耐药率最低的为阿米卡星(18.99%)、其次为亚胺培南(20.0%),头孢哌酮/舒巴坦(21.7%)、哌拉西林/他唑巴坦(21.89%);最高的为氨苄西林(98.33%),其次为氨苄西林/舒巴坦(83.33%)、头孢曲松(76.25%)、头孢西丁(63.64%)及头孢噻肟(60.50%)等,大部分细菌呈多重耐药性。结论产多种β-内酰胺酶的革兰阴性菌具有多重耐药。

携带新德里金属β-内酰胺酶的猪源大肠杆菌全基因组测序及植物提取物药物筛选

为了解大肠杆菌携带新德里金属β-内酰胺酶(New Delhi metallo-β-lactamase,NDM)NDM耐药基因情况及筛选敏感植物提取物。采用16S rRNA菌种鉴定,PCR筛查菌耐药基因,bla NDM、bla TEM和AmpC酶耐药基因的确认,全基因组测序,BLAST和MEGA软件对序列进行生物信息学分析、系统进化树分析、NDM亚型鉴定和6种植物提取物药敏药物筛选研究。结果表明,从2021年(1-12月)临床猪腹泻病例中分离鉴定的91株大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)中鉴定出1株同时携带新德里金属β-内酰胺酶NDM4、NDM5和β内酰胺酶blaTEM、AmpC酶的大肠杆菌(HN2187)。对其进行11种抗生素和6种植物提取物药物敏感性测试,结果显示HN2187菌株对其均耐药。而HN2187对血根碱、贯叶连翘提取物敏感,对黄芩、姜黄素、千里光和大蒜提取物耐药。HN2187产B类酶,携带NDM4、NDM5、bla TEM、AmpC酶耐药基因,其中bla NDM-4位于质粒pNDM4-HN2187(Plasmid B)上,bla NDM-5位于质粒pNDM5-HN2187(Plasmid A)上,bla TEM1位于质粒pTEM1-HN2187(Plasmid B)上,AmpC酶耐药基因位于染色体上,分别介导bla NDM-4、bla NDM-5、bla TEM和AmpC耐药基因,是耐药菌传播的重要载体。以上研究表明,携带NDM4和NDM5的多重耐药菌已在养殖场传播和流行,应加强该类耐药基因的流行调查、监测和新药物研究,为临床超级细菌和多重耐药菌感染的流行和防治提供理论基础。

沈阳地区儿科产超广谱β-内酰胺酶革兰阴性菌的耐药性与基因型研究

目的研究沈阳地区儿科产超广谱β-内酰胺酶(ex tended-spectrum-βlactam ases,ESBL s)革兰阴性菌的耐药性及ESBL s基因型分布,初步探讨其多重耐药性传播的分子机制。方法KB法药敏试验,按照CLS I/NCCLS 2005年标准筛选确认ESBL s表型,PCR法进行ESBL s基因型别分析,扩增I类整合子全可变区,分析产ESBL s菌株中整合子的存在情况。结果在分离出的180株革兰阴性菌中,有62株经表型确证试验证实为产ESBL s菌株,检出率34.4%。产ESBL s菌株对各种抗菌药物的耐药率明显高于非产ESBL s菌株。基因分型结果表明,blaTEM基因阳性48株(77.4%),blaSHV阳性32株(51.6%),blaCTX-M 9组阳性31株(50%),blaCTX-M 3组阳性12株(19.4%)。62株ESBL s菌株中26株整合子全可变区PCR扩增阳性,阳性率41.9%。结论沈阳地区儿科革兰阴性菌中ESBL s菌株检出率较高,多数菌株同时携带两种或两种以上不同型别的β-内酰胺酶,且为多重耐药菌株,整合子机制参与其多重耐药性的形成与传播。

耐第三代头孢菌素革兰阴性杆菌超广谱β-内酰胺酶及耐药基因分析

目的了解革兰阴性杆菌对第三代头孢菌素耐药的分子机制。方法采用常规琼脂2倍稀释法测定11株(CR01-CR11)临床分离革兰阴性杆菌,对13种β-内酰胺类抗菌药物的敏感性,纸片扩散法检测耐药菌的ESBLs表型,通过PCR扩增检测其耐药基因。结果MIC结果表明,11株病原菌对几种常见的第三代头孢菌素具有明显的耐药性;表型确证实验表明,除CR07外,其余10株均为产ESBLs菌株;酶的水解底物轮廓实验表明,10株产ESBLs株菌所产生的β-内酰胺酶均能高效水解头孢哌酮和头孢孟多,而对头孢他啶水解活性较低。结论10株产ESBLs革兰阴性杆菌的酶活性、等电点及耐药基因在一定程度上揭示了病原菌产ESBLs与其耐药性之间的关系。

产超广谱β-内酰胺酶革兰阴性菌的耐药性分析

近年来,随着广谱β-内酰胺酶类药物特别是第三代头孢菌素的广泛应用,对β-内酰胺酶类药物耐药现象增多呈严重趋势,产超广谱β内酰胺酶（ESBLs）细菌引起的感染也越来越多,其中产ESBLs大肠埃希菌的感染有明显上升趋势,给临床治疗带来了很大的困难。

多重耐药铜绿假单胞菌产β-内酰胺酶耐药机制研究

目的对多重耐药铜绿假单胞菌所产β内酰胺酶(ESBLs)进行分析。方法采用KB法进行药物敏感试验,筛选多重耐药铜绿假单胞菌;再进行改良三维试验,对多重耐药菌所产β内酰胺酶进行分析。结果在66株多重耐药铜绿假单胞菌中产ESBLs有15株(22.7%),26株高产AmpCβ内酰胺酶(39.4%),14株为SSBLs(21.2%),有43株菌(65.2%)显示碳青酶烯酶活性。结论产ESBLs、高产AmpCβ内酰胺酶和(或)

多重耐药铜绿假单胞菌产超广谱β-内酰胺酶基因研究

目的调查多重耐药铜绿假单胞菌(PAE)产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因的流行状况。方法采用琼脂稀释法对35株临床分离的PAE进行抗菌药物敏感试验,PCR方法检测7种ESBLs基因。结果35株PAETEM、OXA、PER、GES的阳性率分别为51.4%、42.8%、31.4%、22.9%,而SHV、VEB、CTX-M-1基因均阴性。结论我院临床分离PAETEM、OXA、PER、GES基因携带率高,检出GES基因为国内首次报道。

大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶菌株的耐药性监测

目的 了解医院临床分离出的产超广谱β-内酰胺酶 (ESBL s)的主要细菌 ,大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产 ESBL s菌株的构成比和耐药特征 ,为临床抗感染治疗提供参考。方法 2 0 0 2年 1～ 12月从本院住院患者的各类临床标本 ,采用 Kirby- Bauer(K- B)琼脂扩散法和 ESBL s确证试验进行 ESBL s的检测。结果 大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产 ESBL s菌株的检出率分别为 4 3.7%和 35 .3% ;产 ESBL s菌株较不产 ESBL s菌株表现为对抗菌药物明显高的耐药率 ,除个别抗菌药物外 ,两者差异具有显著性 P值 <0 .0 5 ,以及高多重耐药率 ;产 ESBL s的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对亚胺培南耐药率最低 ,分别是 4 .5 %和 2 .1% ,其次是阿米卡星、头孢哌酮 /舒巴坦 ,对其他抗菌药物的耐药率均 >70 %。结论 产 ESBL s菌株感染给临床治疗带来较大困难 ,遏制产 ESBL s菌株的产生 ,要加强细菌耐药性监测、合理应用抗菌药物。

亚胺培南耐药铜绿假单胞菌的金属β-内酰胺酶检测

目的了解金属β-内酰胺酶在广州地区铜绿假单胞菌中的流行状况及其流行亚型,完善广州地区金属β-内酰胺酶的分子流行病学资料。方法采用双纸片协同法和双纸片增效法对164株亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌筛选金属β-内酰胺酶表型阳性的菌株,采用PCR检测5类金属β-内酰胺酶的编码基因(IMP家族、VIM家族、GIM-1、SPM-1和SIM-1),利用生物信息学的方法对检测到的金属β-内酰胺酶亚型进行比对分析并制作分子进化树。结果 164株亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌中筛选出22株金属β-内酰胺酶表型阳性的菌株,IMP阳性15株(9.1%),其中11株为IMP-9亚型,另外4株携带一个新的亚型,命名为IMP-25,VIM阳性5株(3.0%),均为VIM-2亚型,未检测到GIM-1、SPM-1和SIM-1型金属β-内酰胺酶。结论广州地区铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶的基因型已经出现多型化的特征,同时存在IMP型和VIM型金属β-内酰胺酶的流行,本次研究发现了一个新的金属β-内酰胺酶亚型(IMP-25),为IMP家族金属β-内酰胺酶的多样性及其分子流行病学资料提供了新的信息。