HPLC-DAD法同时检测抗炎类中药制剂中非法掺入的6种四环素类抗生素

目的建立同时检测抗炎类中成药中非法掺入四环素类抗生素的专属性方法。方法采用HPLC-DAD法。色谱柱为AgilentC18柱（250mm×4．6mm，5μm），醋酸盐缓冲液[取醋酸铵17．36g，乙二胺四醋酸二钠3．35g，加水适量溶解后，加三乙胺9mL，加水至1000mL，用醋酸调节pH至8．8]-乙腈（88：12），流速1．2mL／min；柱温35℃。检测波长280nm。通过液相色谱保留时间和紫外光谱信息，对消炎类中成药的提取液进行定性鉴别和定量测定。结果土霉素、美他环素、β-多西环素、多西环素、盐酸四环素、盐酸金霉素的线性范围分别为11．6-232．4pg／mL（r=0．9998），12．7-190．9μg／mL（r=0．9995），105．0-862．0μg／mL（r=O．9997），20．50-410．0pg／mL（r=0．9987），23．28-598．4μg／mL（r=0．9990），48．60-971．6μg／mL（r=0．9989）。平均加样回收率（n=6）分别为98．3％，97．5％，96．2％，98．4％，101．1％，96．1％；RSD分别为1．2％，0．5％，0．9％，1．5％，0．8％和1．9％。结论该方法操作简单，重复性好，可作为分析中药抗炎制剂中非法掺入土霉素、美他环素、β-多西环素、多西环素、盐酸四环素、盐酸金霉素的有效检测方法。

盐酸多西环素主要有关物质体外抗菌活性及毒性的研究

目的:比较盐酸多西环素与其主要有关物质体外抗菌活性及毒性,为制定该品种有关物质控制限度提供参考依据。方法:采用纸片扩散法和常量肉汤二倍稀释法考察盐酸多西环素主要有关物质的抗菌活性;采用中国仓鼠肺细胞(CHL)和斑马鱼动物模型评价其毒性。结果:多西环素主要有关物质的抗菌活性由强至弱顺序为美他环素、4-表多西环素(杂质C)、β-多西环素、2-乙酰-2脱氨甲酰多西环素(杂质F);细胞毒性由大至小的顺序为杂质F、β-多西环素、杂质C、美他环素;致斑马鱼胚胎死亡和发育畸形由强至弱的顺序为杂质C、美他环素、杂质F、β-多西环素。结论:盐酸多西环素中毒性较强且抗菌作用较弱的杂质C及杂质F应单独的控制。