β-巯基乙醇与肝基质对日本血吸虫培养细胞的影响

目的研究β鄄巯基乙醇与肝基质对日本血吸虫培养细胞的影响。方法将18d虫龄的日本血吸虫童虫细胞联合法接种于小盖玻片上。实验被随机分为4个组,分别为对照组、β鄄巯基乙醇组、肝基质组、β鄄巯基乙醇+肝基质联合处理组。培养第7天,对各组细胞进行核仁组织区相关嗜银蛋白(AgNORs)与乳酸脱氢酶(LDH)细胞化学染色,并结合图像分析比较4个组培养细胞的AgNORs水平及LDH活性。结果与对照组比较,肝基质组、β鄄巯基乙醇组、β鄄巯基乙醇+肝基质联合处理组培养细胞的AgNORs颗粒数目、颗粒面积与核面积百分比、平均光密度以及LDH的平均光密度等4个参数均有不同程度升高(P<0.01)。其中,以β鄄巯基乙醇组培养细胞的4个参数升高最显著,β鄄巯基乙醇+肝基质联合处理组次之,肝基质组升高幅度最小。统计学分析显示,除β鄄巯基乙醇+肝基质联合处理组与β鄄巯基乙醇组之间的AgNORs及LDH平均光密度两两比较差异无显著意义(P>0.05),其余组间3个参数两两比较差异均有显著意义(P<0.01或P<0.05)。结论β鄄巯基乙醇与肝基质均能促进日本血吸虫培养细胞的增殖、代谢,但β鄄巯基乙醇的作用比肝基质显著;二者联合使用对培养细胞的增殖无协同作用。

邻苯二甲醛-β-巯基乙醇组合试剂可视化荧光检测多巴胺

研究发现，在碱性条件下，邻苯二甲醛和β-巯基乙醇组合试剂可与多巴胺发生化学反应生成异吲哚类化合物。当用340nm光激发时产生462nm的荧光，且荧光强度与多巴胺含量呈良好的线性关系，从而建立了一种可视化荧光检测多巴胺的新方法。在pH9．8的H3BO3-NaOH缓冲条件下，检测的线性范围为5．2×10^-8～1．7×10^-5mol／L，相关系数为0．9993，检出限（3σ）为4．1×10～mol／L。对7．0×10^-6mol／L的多巴胺进行11次平行测定，其相对标准偏差为1．4％。方法用于盐酸多巴胺注射液含量的分析，平均加标回收率为97．7％。以波长为365nm紫外灯激发多巴胺样品，可实现多巴胺可视化半定量检测。

β-巯基乙醇对牛孤雌胚胎发育的影响

【目的】研究β-巯基乙醇（β-ME）对牛卵母细胞核成熟和孤雌胚胎发育的影响。【方法】向OMM和SOF中添加0，0．05，0．10和0．15mmol／L β-ME，并在牛卵母细胞激活后，分别于1-细胞期、8～16细胞期、桑葚胚期向SOF中添加0．1mmol／L β-ME，通过比较胚胎体外发育水平确定添加β-ME的最佳时期。【结果】β-ME对牛卵母细胞核成熟无显著影响（P〉0．05）；0．05和0．10mmol／L β-ME均可显著提高牛孤雌胚胎的卵裂率及囊胚发育水平，但以0．10mmol／Lβ-ME添加组的效果较佳；牛孤雌胚胎发育到1-细胞期和8～16细胞期前，添加0．10mmol／L的β-ME，均可显著提高囊胚的发育水平（P〈0．05），但1-细胞期添加β-ME时的囊胚率、囊胚细胞数显著高于8～16细胞期组（P〈0．05），故1-细胞期是添加β-ME的最佳时机。【结论】β-ME对牛卵母细胞核成熟无促进作用，但可提高牛孤雌胚胎的卵裂率并促使囊胚发育，且在8～16细胞期前添加β-ME均可提高囊胚发育水平，但以1-细胞添加0．10mmol／Lβ-ME的促进效果最佳。

添加β-巯基乙醇对牛体外受精胚胎体外发育的影响

在牛基础培养液中,添加50μmol/Lβ-巯基乙醇(β-ME)可显著提高牛体外受精(IVF)后胚胎的桑椹胚、囊胚率以及囊胚内细胞团数;并且以受精卵发育至4～8-细胞时期的添加效果为最佳。

EGF和β-巯基乙醇对羔羊卵母细胞体外受精和体外发育的影响

[目的]为优化幼畜卵母细胞体外培养体系提供理论基础。[方法]研究在成熟液中添加EGF和β-巯基乙醇对绵羔羊卵母细胞受精和卵裂、囊胚情况的影响,并与成年绵羊卵母细胞进行比较。[结果]在成熟液中添加不同浓度的EGF对羔羊卵母细胞卵裂率和囊胚率无显著影响(P>0.05)。添加不同浓度的β-巯基乙醇可以提高羔羊卵母细胞囊胚率,其中添加100μmol/Lβ-巯基乙醇有显著影响(P<0.05),但对卵裂率影响不显著(P>0.05)。羔羊卵母细胞卵裂率和囊胚率均显著低于成年羊(P<0.05)。添加100μmol/L的β-巯基乙醇能显著提高羔羊卵母细胞正常受精率(P<0.05),且与成年羊卵母细胞受精率差异不显著(P>0.05)。未添加β-巯基乙醇多精入卵率显著高于成年羊(P<0.05),而添加100μmol/L的β-巯基乙醇多精入卵率与成年羊差异不显著(P>0.05)。成熟液中不添加β-巯基乙醇时未受精率(20.0%)高于成年羊组(12.3%)和β-巯基乙醇(13.5%),但差异不显著(P>0.05)。[结论]添加100μmol/L的β-巯基乙醇能显著提高羔羊卵母细胞发育能力,提高正常受精的比例并减少多精子受精的发生,但羔羊卵母细胞发育能力仍显著低于成年羊。

β-巯基乙醇和发情羊血清对牛颗粒细胞体外培养的影响

为满足实验室卵母细胞体外成熟共培养和胚胎共培养的需要以及进行卵巢颗粒细胞生物学功能等研究的需要,进行牛卵巢颗粒细胞的体外培养研究。在基础培养液TCM199中分别添加12.5、25、50、100、200μmol/L的β-巯基乙醇(BME),观察颗粒细胞生长状况;在基础培养液中分别添加体积分数为10%的发情山羊第1天血清、体积分数为10%的发情山羊第11天血清和体积分数为10%的胎牛血清,观察颗粒细胞生长和增殖情况。体外培养颗粒细胞的活细胞率随着添加BME浓度的增大而增加,在25μmol/L时达到最高,此后随浓度的增大而降低;发情山羊第1天的血清组中,颗粒细胞生长和增殖情况最好。BME可以提高颗粒细胞体外培养的活率,最佳添加浓度为25μmol/L;发情山羊第1天的血清可有效促进颗粒细胞体外培养生长和增殖。

非必需氨基酸和β-巯基乙醇对神经干细胞增殖的影响

目的观察非必需氨基酸（NEAA）和β-巯基乙醇对神经干细胞（NSCs）增殖的影响。方法取孕龄为14.5 d的雌鼠,处死后提取NSCs并培养,取5~7代的NSCs用于实验,将NSCs细胞使用传代培养基培养,并分为四组,对照组：加入磷酸盐缓冲液（PBS）12μL;NEAA组：加入NEAA 10μL,PBS 2μL;β-巯基乙醇组：加入β-巯基乙醇2μL,PBS 10μL;NEAA＋β-巯基乙醇组：加入NEAA 10μL,β-巯基乙醇2μL。通过细胞计数法计算NSCs的增殖速度,噻唑蓝（MTT）法测定NSCs增殖率,RT-PCR法测定NSCs中凋亡相关基因含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3（Caspase-3）的表达,免疫组化法对NSCs进行鉴定并测定NSCs向神经元和星形胶质细胞的分化潜能。结果与对照组比较,NEAA组NSCs增殖速度、增殖率升高,Caspase-3 mRNA降低（P〈0.05或〈0.01）;β-巯基乙醇组及NEAA＋β-巯基乙醇组NSCs增殖速度、增殖率升高,Caspase-3 mRNA、TUJ-1阳性细胞百分比、GFAP阳性细胞百分比降低,Nestin升高（P〈0.05或〈0.01）。与NEAA组比较,NEAA＋β-巯基乙醇组各项指标差异均有统计学意义（P〈0.05或〈0.01）;与β-巯基乙醇组比较,NEAA＋β-巯基乙醇组NSCs增殖速度、增殖率升高,Caspase-3mRNA降低（P〈0.05或〈0.01）。结论 NEAA和β-巯基乙醇均能促进NSCs增殖,联合使用起协同作用。

肝基质与/或β-巯基乙醇对日本血吸虫细胞影响

目的研究肝基质与β-巯基乙醇分别及联合作用对日本血吸虫培养细胞的影响.方法冷消化法将虫龄为18 d的日本血吸虫童虫制成细胞悬液,联合法接种于普通小盖玻片和预先铺敷肝基质的小盖玻片上.前者被随机分为对照组与β-巯基乙醇组,后者被分为肝基质组与β-巯基乙醇+肝基质联合处理组(简称联合组).培养第1～4周,分别对各组细胞进行乳酸脱氢酶(LDH)染色,光镜下观察分析.结果培养第1周细胞的LDH活性最强;随着培养时间的延长,LDH活性逐渐降低.培养前2周,β-巯基乙醇组与联合组细胞的LDH活性相近,肝基质组与对照组的相近,前者强于后者,差异有统计学意义(P＜0.05).培养第3周始,肝基质组培养细胞的LDH活性最强,与其余组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);其余组之间两两比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论肝基质对日本血吸虫培养细胞LDH活性的促进作用比β-巯基乙醇稳定、长效;两者联合无协同作用.

添加β-巯基乙醇对水牛胚胎体外发育的影响

本文主要研究低分子量的硫醇类化合物———β 巯基乙醇 (β ME)对水牛胚胎体外发育的影响。通过在水牛的体外成熟、受精后胚胎的体外发育过程中分别添加 5 0和 10 0 μM的 β ME ,来检测 β ME的添加对水牛受精卵的分裂率和植入前胚胎体外发育的影响。结果表明 ,对照组 (0 μM )与实验组 (5 0和 10 0 μM)相比 ,4 8h受精分裂率 (分别为 4 5 .88%、4 6.38%和 5 0 .67% )差异不显著(P >0 .0 5 ) ,但囊胚率 (分别为 8.97%、2 6.61%和 2 6.5 5 % )差异极显著 (P <0 .0 0 1) ,而孵化囊胚率(分别为 80 .0 %、90 .4 8%和 83.33% )差异不显著 (P >0 .0 5 ) ,在两个实验组 (5 0和 10 0 μM )之间分裂率、囊胚率以及孵化囊胚率均为差异不显著 (P >0 .0 5 )。结果表明在体外培养条件下添加一定浓度的 β ME可以显著促进更多的分裂后水牛早期胚胎发育至囊胚阶段 。

不同浓度β-巯基乙醇对6周龄杜泊羊卵母细胞发育能力的影响

为了探讨成熟液里不同浓度β-巯基乙醇对6周龄杜泊羊卵母细胞发育能力的影响,试验选择6只6周龄杜泊羊,采用促性腺激素诱导活体采集卵母细胞,将获得的A、B级卵丘-卵母细胞复合体(COCs)在不同浓度(0、50、70、100μmol/L)β-巯基乙醇成熟液中成熟,再经成熟卵母细胞与获能精子共同孵育、受精卵发育培养后,统计卵裂率和囊胚率。结果表明:与对照组卵裂率(59.13%)和囊胚率(12.17%)相比,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组的卵裂率(60.87%、63.48%、65.22%)和囊胚率(14.78%、17.39%、21.74%)均较高(P>0.05),其大小顺序为试验Ⅲ组>试验Ⅱ组>试验Ⅰ组>对照组,100μmol/Lβ-巯基乙醇组的卵裂率、囊胚率分别增加6.09个百分点和9.57个百分点。说明成熟液里添加一定量β-巯基乙醇能够提高6周龄杜泊羊卵母细胞的发育能力和受精卵质量,β-巯基乙醇浓度在100μmol/L以内,卵母细胞的卵裂率和囊胚率呈上升趋势;关于成熟液里β-巯基乙醇最佳浓度,有待进一步研究。

β-巯基乙醇或牛磺酸对牛体外受精后早期胚胎的影响

对屠宰黄牛的卵母细胞经体外成熟（IVM）、体外受精（IVF）后的早期胚胎,在β-巯基乙醇（β-ME）或牛磺酸等添加物的胚胎培养液中的后续发育进行了研究,并探讨了其影响因素,以期筛选出最佳的体外培养条件。试验结果表明：4-8细胞期添加β-ME可显著提高胚胎桑椹胚、囊胚发育率和囊胚细胞数,但不能改善孵化囊胚的质量。在体外发育培养液中添加7mM牛磺酸可显著提高桑椹胚率和囊胚率（P〈0.05）,并且在4-8细胞期添加牛磺酸最为合适。

β-巯基乙醇与PVP在红干椒DNA提取中的比较研究

红干椒叶片中富含的酚类物质较多,为提取适于红干椒RAPD分析的高质量DNA,通过在CTAB提取缓冲液中分别添加β-巯基乙醇和PVP抗氧化剂,研究β-巯基乙醇和PVP对红干椒叶片DNA提取质量的影响.结果证明,在CTAB提取液中添加适量的β-巯基乙醇所获DNA纯度较高,A260/A280比值在1.800附近,电泳谱带清晰,无明显拖尾现象,辣椒叶片DNA平均产量为505.83ng·μl-1,DNA的质量和纯度满足于RAPD技术的要求.

β-巯基乙醇诱导成年鼠骨髓基质细胞向神经细胞分化的研究

目的 :探讨β 巯基乙醇诱导成年大鼠骨髓基质细胞成神经细胞的可能性。为神经再生和诱导剂的筛选提供一种新的参考方法。方法 :从大鼠骨髓中分离出骨髓基质细胞并培养传至 3- 5代 ,诱导前 2 4h用含 1mmol /l的β 巯基乙醇及含 2 0 %的DMEM培养液培养 ,再以含 5mmol /lβ 巯基乙醇的无血清DMEM培养液作诱导 ,用免疫细胞化学方法鉴定神经细胞特异性标志物NF、NSE及GFAP的表达。结果 :诱导后 1h ,部分细胞发生形态学上的改变 ,6h后大部分细胞不仅在形态上表现为神经元样特征 ,而且NF、NSE等特异性抗体呈阳性表达 ,而GFAP抗体表达呈阴性。结论 :β

β-巯基乙醇对培养胎儿卵巢组织异种移植效果的研究

目的探讨β-巯基乙醇(β-ME)对体外培养的卵巢组织的保护作用,寻找提高胎儿卵巢组织异种移植存活率的有效方法。方法取中晚期引产的死亡女胎,分别进行新鲜移植(对照组)或将卵巢组织在不含β-ME(培养对照组,β-ME0)、含100μMβ-ME(培养组,β-ME100)的培养液中新鲜培养3d后移植到裸鼠体内,从动情周期的恢复情况、组织学变化等方面比较各组移植物的活力。结果(1)β-ME0、β-ME100及对照组裸鼠动情周期的恢复率分别是62.5%、87.5%和33.3%,β-ME100组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。β-ME0、β-ME100组和对照组移植后动情周期开始天数为(25.20±4.49)d、(23.5±5.79)d和(12.75±1.5)d,两培养组均明显长于对照组(P<0.05);(2)异种移植后的组织学观察可见到存活移植物内有不同发育阶段的卵泡;卵泡计数β-ME100组(16.4±3.7815个/高倍视野)与对照组(4.0±2.8000个/高倍视野)比较差异有统计学意义,P<0.05。结论胎儿卵巢组织异种移植后卵泡可继续发育,经培养可提高移植物的活力,β-ME有利于提高移植物的存活率,促进卵泡的发育。

β-巯基乙醇釜残液的分离

对工业生产β-巯基乙醇的釜残液进行了分析评价,提出了利用苯萃取法、冷凝结晶法、减压蒸馏法对其进行分离。结果表明:减压蒸馏法是一种行之有效的分离方法,利用减压蒸馏可得到含量高达99.77%的硫代二甘醇。从而减少了环境污染,对提高产品的经济效益也十分有益。

重组人角质细胞生长因子冻干粉针剂中β-巯基乙醇残留量的考察

目的考察重组人角质细胞生长因子(rh-KGF)冻干粉针剂中β-巯基乙醇的残留量,确定其临床应用安全性。方法采用气相色谱法,考察β-巯基乙醇对照品的检测限、标准曲线、加样回收率及稳定性,并对不同批号的rh-KGF冻干针剂中β-巯基乙醇残留量进行考察。结果β-巯基乙醇的检测限为0.235μg/ml,在0～52.08μg/ml浓度范围内,β-巯基乙醇与其浓度有良好线性关系(r=0.9999)。加样回收率及稳定性均符合要求;且不同批号的rh-KGF冻干粉针剂中β-巯基乙醇基本无残留。结论 rh-KGF冻干粉针剂安全,无β-巯基乙醇残留,可应用于临床。

β-巯基乙醇对胎儿卵巢组织体外培养的影响

目的探讨低分子量的硫醇类化合物-β-巯基乙醇(β-ME)对胎儿卵巢组织体外培养效果的影响。方法取中期引产的20～22周死亡女胎的卵巢,分别在含β-ME50μM、100μMβ-ME(实验组)和不含β-ME(对照组)的培养液内培养3～9d,观察培养后各组卵巢卵泡的形态学变化。结果胎儿卵巢组织经体外培养后可进一步发育,培养后各期卵泡构成比实验组与未培养组、对照组比较差异均有统计学意义(P<005),而在添加β-巯基乙醇的两个实验组(50μM和100μMβ-ME)之间在卵泡构成比上差异则无统计学意义(P>005)。结论在培养液中添加β-巯基乙醇后,可以更好地维持卵泡的形态,促进卵泡发育。

β-巯基乙醇对猪卵母细胞体外受精及胚胎发育的影响

实验探讨了成熟液中添加β-巯基乙醇对猪卵母细胞体外受精和孤雌激活后早期发育的影响,以优化猪早期胚胎体外生产体系。结果发现:成熟液中添加低浓度β-巯基乙醇对猪卵母细胞体外受精和孤雌激活后胚胎的早期发育无明显促进作用,添加浓度过高(≥250μmol/L)反而不利于猪胚胎的早期发育。

β-巯基乙醇对延边黄牛卵母细胞体外成熟及发育的影响

在成熟培养液中添加不同浓度的β-巯基乙醇(β-Mercaptoethanol,β-ME),研究其对延边黄牛卵母细胞体外成熟及发育的影响。结果表明,将卵母细胞置于100μmol/L的β-巯基乙醇的成熟培养液中进行体外培养,其成熟率、卵裂率和囊胚发育率均好于对照和其他处理,说明β-巯基乙醇的最佳浓度适合进行延边黄牛体细胞克隆中卵母细胞的体外成熟培养。

过氧化氢氧化β-巯基乙醇合成羟乙基磺酸的连续流工艺

以β-巯基乙醇为底物,过氧化氢为氧化剂,研究了在微通道反应器液相氧化合成羟乙基磺酸的连续流工艺。实验考察了物料配比、过氧化氢浓度、反应温度、停留时间对氧化反应的影响,在具有特殊微结构的毫米通道微反应器中,物料摩尔比n(H2O2)∶n(β-巯基乙醇)=3.6∶1,H2O2质量分数为40%,反应温度40℃,停留时间120 s,β-巯基乙醇转化率达96.5%,羟乙基磺酸收率达88.1%。此工艺充分利用微通道连续流反应器优良的传质传热特点,大大缩短了反应时间,提高了反应速率,实现对氧化反应过程的有效控制,增加了安全系数。