β-抑制蛋白2水平与2型糖尿病患者代谢指标变化及胰岛素信号通路相关性的研究进展

β-抑制蛋白2作为支架蛋白在胰岛素信号通路中起关键作用.在葡萄糖转运、抗脂解、抑制细胞凋亡等过程中调控糖原、蛋白及脂肪酸合成,引起代谢指标水平的变化.主要阐述了β-抑制蛋白2与2型糖尿病患者胰岛素抵抗、脂肪甘油三酯酯酶、游离脂肪酸及胰岛素信号通路之间的关系,为T2DM及治疗的深入研究提供重要线索.

SUMO-β-抑制蛋白2融合基因的克隆、表达与蛋白纯化

2型糖尿病是一种常见的慢性疾病,其发生与胰岛素的耐受相关。β-抑制蛋白2(β-arrestin2)的缺失或功能紊乱,会导致胰岛素抵抗和2型糖尿病的发生。而使用β-arrestin2进行治疗可明显缓解葡萄糖不耐受及胰岛素抵抗。本研究通过重组PCR方法,将小分子泛素相关修饰物(small ubiquitin-related modifier,SUMO)与β-arrestin2基因融合,再将融合基因插入原核表达载体p ET22b中,成功构建了p ET22b-SUMO-β-arrestin2表达载体,将重组表达载体转入大肠杆菌Rosetta Blue(DE3)宿主细胞,使用IPTG在温度为20℃诱导表达,再将诱导表达后的蛋白经Ni-NTA进行纯化,成功获得SUMO-β-arrestin2蛋白,为后续β-arrestin2药效学的研究奠定基础。

不同BMI的2型糖尿病患者血清β-抑制蛋白2水平变化及其与代谢指标的相关性

目的：探讨不同体重指数（BMI）的2型糖尿病患者血清β-抑制蛋白2水平变化及其与代谢指标的相关性。方法：选取2型糖尿病患者150例作为研究对象,根据患者的BMI水平,将其分为体重正常组（BMI为18.5~22.9kg/m2,n=45）,超重组（BMI为23.0~24.9kg/m2,n=52）和肥胖组（BMI超过25.0kg/m2,n=53）。比较3组患者的血清β抑制蛋白2水平和代谢指标水平[收缩压（SBP）,舒张压（DBP）,空腹血糖（FPG）,空腹血胰岛素（FINS）,胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）,胰岛β细胞功能指数（HOMA-β）,总胆固醇（TC）,甘油三酯（TG）,低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）,高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）],以血清β-抑制蛋白2水平与代谢性指标水平进行相关性分析,再进行多元逐步回归分析。结果：肥胖组患者的血清β-抑制蛋白2的水平显著低于超重组患者和体重正常组患者（P〈0.05）,超重组患者的血清β-抑制蛋白2的水平显著低于体重正常组患者（P〈0.05）。相关性分析显示,患者血清β-抑制蛋白2的水平与BMI、TG、HOMA-IR、HOMA-β呈负相关关系（r=-0.041,-0.329,-0.310,-0.214,均P〈0.05）。多元逐步回归分析显示,患者的BMI水平是血清β-抑制蛋白2水平的独立危险因素（P〈0.05）。结论：BMI有可能是2型糖尿病患者血清β-抑制蛋白2水平的独立危险因素。

不同血糖水平冠心病病人β-抑制蛋白2与冠状动脉病变的相关性分析

目的探讨不同血糖水平冠心病病人β-抑制蛋白2水平与冠状动脉狭窄程度的相关性。方法选取2018年1月—2019年6月于我院住院治疗的167例冠心病病人作为研究对象,按血糖水平分为3组,其中单纯冠心病组(A组)50例,冠心病合并糖耐量受损(IGT)组(B组)57例,冠心病合并2型糖尿病(T2DM)组(C组)60例。另选取同期于我院体检健康者43名作为对照组。所有研究对象均采用酶联免疫吸附法测定β-抑制蛋白2,进行口服葡萄糖耐量试验(OGTT),检测血糖、胰岛素、C肽,计算胰岛素、C肽、血糖、β-抑制蛋白2曲线下面积,根据住院期间冠状动脉造影(CAG)结果,采用冠状动脉狭窄程度积分统计冠状动脉狭窄程度。采用相关分析和多元线性逐步回归分析法分析β-抑制蛋白2水平与冠状动脉狭窄程度的关系。结果C组OGTT各时间点血糖及血糖曲线下面积均较B组明显升高(P<0.05),胰岛素、C肽释放水平及胰岛素曲线下面积、C肽曲线下面积均较B组明显降低(P<0.05)。B组OGTT 30 min、60 min、120 min后血糖、胰岛素、C肽水平及血糖曲线下面积、胰岛素曲线下面积、C肽曲线下面积均较对照组、A组明显升高(P<0.05)。与A组及B组比较,C组β-抑制蛋白2水平明显降低(P<0.05),冠状动脉狭窄程度Gensini评分升高(P<0.05);B组β-抑制蛋白2水平较A组明显降低(P<0.05),冠状动脉狭窄程度Gensini评分较A组升高(P<0.05)。Pearson相关分析显示,β-抑制蛋白2水平与Gensini评分呈负相关(P<0.05),多元线性相关分析显示,收缩压、高密度脂蛋白胆固醇、C肽和β-抑制蛋白2对冠心病病人冠状动脉狭窄程度有预测作用。结论β-抑制蛋白2水平与冠心病病人的冠状动脉病变程度密切相关,尤其在合并血糖升高病人中更为明显。

β-抑制蛋白2、钙中性蛋白酶2表达与乙型肝炎患者肝纤维化的相关性分析

目的探讨β-抑制蛋白2(β-arrestin 2)、钙中性蛋白酶2(calpain 2)表达与乙型肝炎(CHB)患者肝纤维化的相关性。方法选取2016年1月—2018年4月当阳市人民医院肝病感染科收治的接受肝穿刺组织病理活检的102例CHB患者作为CHB组,根据肝纤维化程度,分为轻度肝纤维化46例,重度肝纤维化30例,肝硬化26例。选取同期30例肝破裂患者作为对照组。比较各组间肝组织β-arrestin 2和calpain 2 mRNA和蛋白表达水平,血清透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、层粘连蛋白(LN)水平,并进行相关性分析。结果CHB组肝组织β-arrestin 2和calpain 2 mRNA和蛋白表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。CHB组血清HA、PCⅢ、Ⅳ-C、LN水平均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。肝硬化患者肝组织β-arrestin 2、calpain 2 mRNA表达及血清HA、PCⅢ、Ⅳ-C、LN水平高于轻度肝纤维化和重度肝纤维化患者,差异有统计学意义(P<0.05);重度肝纤维化患者肝组织β-arrestin 2、calpain 2 mRNA表达及血清HA、PCⅢ、Ⅳ-C、LN水平高于轻度肝纤维化患者,差异有统计学意义(P<0.05)。经过Pearson相关性分析,β-arrestin 2、calpain 2 mRNA表达与CHB患者肝纤维化指标均呈正相关(P<0.05)。结论β-arrestin 2、calpain 2与CHB患者肝纤维化程度密切相关,可为肝纤维化的病变过程提供参考依据,并且可能是潜在的辅助检测指标。

β-抑制蛋白2调节炎症性疾病作用机制的研究进展

β-抑制蛋白2是抑制蛋白家族成员,主要通过G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptor,GPCR)信号通路传导以及参与多种炎症信号通路在炎症性疾病中发挥重要作用。本文回顾了β-抑制蛋白2的结构功能,并就β-抑制蛋白2在炎症性疾病中的作用机制进行综述。

2型糖尿病患者血清β-抑制蛋白2与代谢指标的相关性分析

目的探讨不同BMI的T2DM患者血清β-抑制蛋白2水平变化及与代谢指标的相关性。方法 170例T2DM患者分为体重正常(Con)组55例、超重(Ow)组57例及肥胖(Ob)组58例,测定各组相关指标并行统计学分析。结果血清β-抑制蛋白2水平在Con、Ow及Ob组分别为(331.31±11.59)vs(321.18±17.47)vs(303.95±13.63)ng/L,组间两两比较,差异有统计学意义(P<0.05)。相关分析结果显示,β-抑制蛋白2水平与BMI、TG、FIns、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)呈负相关(r分别为-0.404、-0.328、-0.353、-0.308、-0.260,P<0.01);多元逐步回归分析显示,BMI与β-抑制蛋白2水平独立相关,但未发现β-抑制蛋白2与TG、FIns、HOMA-IR及HOMA-β的相关性。结论 T2DM患者中,BMI是影响血清β-抑制蛋白2水平降低的独立危险因素。

β-抑制蛋白2及Toll样受体2在子宫内膜癌中的表达及关系研究

目的探讨β-抑制蛋白2与Toll样受体2(TLR2)在子宫内膜癌中的表达水平及临床意义和二者的关系。方法以滨州市人民医院2010年1月-2015年2月收集的60例组织标本为研究对象,其中30例为子宫内膜癌(包括复发转移癌15例),15例为子宫内膜非典型增生,15例为正常子宫内膜。采用免疫组化染色法检测β-抑制蛋白2及TLR2的表达水平。结果β-抑制蛋白2及TLR2在子宫内膜癌组织中的表达水平均显著高于非典型增生组织及正常内膜组织(P<0.01);β-抑制蛋白2与TLR2的表达水平呈正相关性(r=0.866,P<0.01)。TLR2、核转录因子kappa B(NF-κB)及髓样分化因子88(MYD88)的表达水平在β-抑制蛋白2-RNAi干扰组显著下降(P<0.05),在全长质粒过表达组中的表达水平显著增高(P<0.05)。结论β-抑制蛋白2及TLR2的高表达作用于子宫内膜癌的发生、发展及转移,且二者关系密切,互相作用。β-抑制蛋白2可成为TLR2的激动剂,激活相关途径的MYD88依赖型信号转导通路,进而实现NF-κB活化。

阿片受体信号调节相关蛋白RGS4及β-arrestin2在泻剂结肠大鼠结肠中的表达变化

目的探讨泻剂结肠大鼠结肠中阿片受体信号调节相关蛋白RGS-4和β-arrestin2的表达变化及意义。方法 7~8周龄Wistar大鼠16只,体质量（200±20）g,雌雄各半,按随机数字表法分为对照组（n=8）及泻剂结肠组（n=8）,饲养环境温度18~28℃,相对湿度40%~80%。对照组饲以普通软饲料,泻剂结肠组饲以混有酚酞的饲料,建立泻剂结肠大鼠模型。通过RT-PCR及Western blot方法对RGS-4和β-arrestin2在结肠中的表达进行相对定量分析。结果两种阿片受体信号调节蛋白在泻剂结肠组及对照组大鼠结肠内均有不同程度的表达。RT-PCR结果显示泻剂结肠组RGS-4和β-arrestin2 mRNA相对表达水平均明显高于对照组[（3.418 3±0.247 4）vs（0.987 6±0.034 1）,（2.974 4±0.214 2）vs（0.921 1±0.040 1）,P〈0.01]。Western blot检测结果显示RGS-4和β-arrestin2的表达在泻剂结肠组较对照组明显升高[（0.403 4±0.049 9）vs（0.115 3±0.010 2）,（0.913 9±0.061 1）vs（0.467 6±0.043 7）,P〈0.01]。结论RGS-4和β-arrestin2在泻剂结肠大鼠结肠中表达均明显增强,提示其可能增强泻剂结肠大鼠结肠MOR信号传导调节功能。

血清β-arrestin 2、HIF-1a及CA125联合预测慢性乙型肝炎肝纤维化的价值

目的探讨血清β-抑制蛋白2(β-arrestin2)、缺氧诱导因子1a(hypoxia inducible factor1α,HIF-1a)及糖类抗原125(carbohydrate antigen 125,CA125)联合预测慢性乙型肝炎(chronic Hepatitis B,CHB)肝纤维化的价值。方法选择宿迁市第一人民医院于2019年5月—2022年5月收治的110例CHB患者为研究对象,设为观察组,另选同期于我院体检中心体检的110名健康者为对照组。比较两组血清β-arrestin2、HIF-1a、CA125水平、观察肝纤维化不同病理分期患者以上指标水平,另通过ROC明确以上指标联合预测CHB处于S4的价值,采用多因素logistic回归分析CHB处于S4的危险因素,采用Pearson相关性分析以上指标与肝硬化病理分期的相关性。结果与对照组相比,观察组血清β-arrestin2、HIF-1a、CA125水平均有显著升高(t=21.376、21.548、71.752,P<0.05);肝纤维化S1、S2、S3、S4患者的血清β-arrestin2、HIF-1a、CA125水平逐渐升高(F=140.309、63.837、82.963,P<0.05);经ROC分析证实血清β-arrestin2、HIF-1a、CA125水平均可用于CHB处于S4的预测中,曲线下面积分别为0.984、0.926、0.956,且联合诊断能够获得更高的曲线下面积0.999,均有P<0.05;多因素logistic回归分析显示,β-arrestin2≥96.37 pg/mL(OR=2.011,95%CI:1.211~3.339)、HIF-1a≥74.345μg/L(OR=1.696,95%CI:1.026~2.804)、CA125≥173.27 U/mL(OR=2.117,95%CI:1.974~3.987)是CHB处于S4的危险因素;血清β-arrestin2、HIF-1a、CA125水平与CHB肝纤维化分期呈正相关(r=0.458、0.651、0.531,均有P<0.05)。结论血清β-arrestin2、HIF-1a、CA125水平均能用于预测CHB肝纤维化,当以上指标水平越高肝纤维化程度越重,且联合应用时的敏感度更高,多个参数联合诊断可进一步提高诊断结果的客观性以及准确率,减少漏诊、误诊情况的发生,值得临床推广。

溃疡性结肠炎大鼠β2AR-β-arrestin2-NF-κB信号转导通路及氧化苦参碱的干预作用

目的:探讨溃疡性结肠炎大鼠β2AR-β-arrestin2-NF-κB信号转导通路及氧化苦参碱的干预作用.方法:SD♂大鼠40只随机分为正常对照组、模型组、美沙拉嗪组和氧化苦参碱组4组,每组10只.正常对照组未造模,其余3组大鼠均采用TNBS造模诱导实验性大鼠结肠炎.其中氧化苦参碱组大鼠予苦参素(氧化苦参碱)注射液肌肉注射,美沙拉嗪组大鼠予美沙拉嗪混悬液灌胃,模型组和正常组大鼠均以3mL蒸馏水灌胃.注意观察实验大鼠腹泻、便血症状.第7天,每组随机处死2只大鼠,比较各组结肠组织大体组织病理变化,取病变明显的结肠组织石蜡包埋切片并HE染色,镜下观察各组结肠病理组织学改变.第16天禁食24h后处死大鼠,用免疫组织化学技术和Western blot检测实验大鼠结肠组织和脾脏淋巴细胞β2肾上腺素受体(β2AR)、β-arrestin2和NF-κBp65表达的变化.结果:与正常对照组比较,模型组大鼠结肠黏膜组织及脾脏淋巴细胞NF-κBp65表达均显著上升(均P<0.01),β2AR和β-arrestin2表达均显著下降(均P<0.01).与模型组比较,美沙拉嗪组和氧化苦参碱组大鼠结肠黏膜组织NF-κBp65表达均显著下降(16.26±5.51,18.34±3.34vs61.90±17.75,均P<0.01),β2AR表达均显著上升(47.27±12.40,61.75±10.40vs12.20±2.70,均P<0.01),β-arrestin2表达均显著上升(70.71±12.84,76.14±8.77vs16.80±7.17,均P<0.01).与模型组比较,美沙拉嗪组和氧化苦参碱组大鼠脾脏淋巴细胞NF-κBp65表达均显著下降(114.23±11.56,145.62±13.05vs249.70±18.94,均P<0.01),β2AR表达均显著上升(1006.50±226.89,1102.11±297.72vs594.97±209.59均P<0.01),β-arrestin2表达均显著上升(189.97±21.12,162.04±15.69vs111.77±19.43,均P<0.01).但美沙拉嗪组和氧化苦参碱组之间比较β2AR、β-arrestin2、NF-κBp65表达无显著差异.结论:β2AR-β-arrestin2-NF-κB信号转导通路参与溃疡性结肠炎的病理过程,氧化苦参碱可以通过调节β2AR-β-arrestin2-NF-κB信号转导通路减轻溃疡性结肠炎.

大鼠β-arrestin2基因过表达慢病毒载体的构建与鉴定

目的:构建大鼠β-抑制蛋白2(β-arrestin 2)基因过表达慢病毒载体并鉴定。方法:取Pubmed数据库中大鼠β-arrestin 2的cDNA序列合成引物,采用聚合酶链式反应(PCR)扩增获取大鼠β-arrestin 2基因;采用琼脂糖凝胶电泳鉴定,回收PCR产物并对其进行纯化;取限制性内切酶BamHI/AgeI酶切载体质粒和纯化后的PCR产物,将二者实施连接后转化感受态细胞,挑取菌落进行PCR鉴定,并对PCR鉴定阳性的克隆进行测序和比对抽提质粒;将β-arrestin2重组质粒与慢病毒辅助包装质粒共转染至293T细胞,获取病毒粗提液并进行扩增、纯化,稀释法测定病毒滴度、荧光显微镜下观察慢病毒感染效率。结果:PCR扩增所得产物大小为1274 bp,与Pubmed数据库中该基因片段大小一致;阳性转化子的PCR产物大小为728 bp,对比Pubmed数据库中大鼠Arrb 2基因序列,上下游引物基因序列大小与转化子PCR产物结果一致;慢病毒包装完成后病毒滴度为5×1011 TU/L,病毒感染效率较高。结论:成功构建了携带大鼠β-arrestin2基因的慢病毒载体,目的基因在转染细胞内能稳定高表达。

参苓白术散治疗慢性复发型溃疡性结肠炎的疗效及基于β_(2)AR/β-arrestin2/NF-κB信号转导通路的作用机制

目的:探讨参苓白术散治疗慢性复发型溃疡性结肠炎(UC)的疗效并基于β_(2)AR/β-arrestin2/NF-κB信号转导通路探讨其作用机制。方法:选取2016年1月至2019年1月收治的慢性复发型UC患者106例,按随机数字表法分为观察组与对照组各53例。对照组予柳氮磺胺吡啶治疗,观察组在此基础上加用参苓白术散治疗,疗程3个月。比较两组的临床疗效、不良反应及复发情况,分别于治疗前后测定肠黏膜中β_(2)AR、β-arrestin2、NF-κB p65表达及血清炎症细胞因子(IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、INF-γ、IGF-1、HIF-α、MMP-9),评价中医证候评分、肠组织病理学评分及内镜活动指数(EAI)。结果:治疗后观察组的总有效率显著高于对照组,中医证候评分、肠组织病理学评分及EAI显著低于对照组,6个月复发率显著低于对照组(P<0.05)。同时观察组肠黏膜中β_(2)AR、β-arrestin2表达显著高于对照组,肠黏膜NF-κB p65表达及血清IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、INF-γ、HIF-α、IGF-1、MMP-9水平显著低于对照组(P<0.05)。结论:参苓白术散治疗慢性复发型UC能提高临床疗效,促进肠黏膜损伤修复,降低复发率,其机制可能与调节β_(2)AR/β-arrestin2/NF-κB信号通路及下游炎症细胞因子表达有关。

吡格列酮治疗糖尿病的疗效及对患者血清PAI-1、FFA、β-arrestin2的影响

目的研究吡格列酮治疗糖尿病的疗效及对患者血清纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)、游离脂肪酸(FFA)、β-抑制蛋白2(β-arrestin2)的影响。方法选取2013年6月至2017年5月该院收治的60例糖尿病患者,根据治疗方式分为观察组(33例)和对照组(27例)。对照组使用盐酸二甲双胍片完成治疗,观察组在此基础上加吡格列酮完成治疗。比较两组临床疗效,血糖指标,胰岛素指标,血清PAI-1、FFA、β-arrestin2水平及不良反应。结果治疗后,观察组临床总有效率明显高于对照组(P<0.05)。治疗前,两组患者糖化血红蛋白(HbA1c)、餐后2h血糖、空腹血糖水平比较差异均无统计学意义(P>0.05);治疗后,观察组的HbA1c、餐后2h血糖、空腹血糖水平明显低于对照组(P<0.05)。治疗前,两组稳态胰岛素评价指数(HOMA-IR)、餐后2h胰岛素(P2hINS)、空腹胰岛素(FINS)水平比较差异均无统计学意义(P>0.05);治疗后,观察组的HOMAIR、P2hINS、FINS水平明显低于对照组(P<0.05)。治疗前,两组血清PAI-1、FFA、β-arrestin2水平比较差异均无统计学意义(P>0.05);治疗后,观察组的PAI-1、FFA水平低于对照组(P<0.05),β-arrestin2水平高于对照组(P<0.05)。观察组和对照组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论吡格列酮联合二甲双胍治疗糖尿病,能降低患者血清PAI-1、FFA水平,升高β-arrestin2水平,有助于改善患者血糖指标和胰岛素指标,临床疗效良好,安全性高。

β-arrestin2通过调控自噬水平在结肠炎中的作用

目的研究β-抑制蛋白2(β-arrestin2)是否通过调控自噬水平在结肠炎中发挥作用。方法β-arrestin2野生型(WT)小鼠和β-arrestin2基因敲除(KO)小鼠各20只,随机分为4组,每组各10只,分别为β-arrestin2 WT对照组和实验组,β-arrestin2 KO对照组和实验组。实验组小鼠自由饮用3%葡聚糖硫酸钠7 d诱导急性溃疡性结肠炎,对照组给予无菌ddH2O。观察并记录各组小鼠的疾病活动指数。收集小鼠结肠组织,免疫组织化学和蛋白免疫印迹法检测自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3β(LC3B)、Beclin1的表达水平。在HCoEpiC细胞中,通过siRNA沉默β-arrestin2的表达,Earle’s平衡盐溶液(EBSS)处理细胞以诱导细胞自噬的发生,检测LC3B表达水平。结果β-arrestin2 WT实验组小鼠的结肠黏膜自噬相关蛋白表达水平上调,而β-arrestin2 KO实验组小鼠的结肠炎症程度明显改善,自噬相关蛋白LC3B-Ⅱ/Ⅰ表达水平下降(P<0.05),但Beclin1表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。在HCoEpiC细胞中沉默β-arrestin2的表达,EBSS处理后,LC3B-Ⅱ/Ⅰ表达水平下调。结论在结肠炎中,β-arrestin2调控自噬水平,当β-arrestin2缺失时,可以通过抑制自噬改善结肠炎。

肿瘤抑制因子DACT2在神经胶质瘤细胞上皮间质转化中的作用机制

目的探讨肿瘤抑制因子β-连环蛋白抑制基因2(DACT2)对神经胶质瘤细胞上皮间质转化的影响及潜在机制。方法以神经胶质瘤细胞U87、U251、A172和SHG44为研究对象,5-Aza处理后RT-PCR检测细胞中DACT2基因表达,甲基化特异PCR法(MSP)检测细胞中DACT2启动子甲基化状态,Western blot检测细胞中DACT2蛋白表达;构建过表达DACT2的U87细胞株,并用Western blot进行验证。Transwell实验检测细胞迁移侵袭能力,Western blot检测细胞中上皮间质标记物E-cadherin、Vimentin、MMP2及Wnt/β-cadherin通路蛋白active-β-cadherin、p-β-cadherin和totalβ-cadherin的表达变化。结果 5-Aza处理后4株细胞中均观察到DACT2基因表达,而未处理的U87和U251细胞中无DACT2基因表达,A172和SHG44细胞中DACT2有微弱表达。U87和U251细胞中DACT2启动子区完全甲基化,而A172和SHG44细胞中部分甲基化。U87和U251细胞中DACT2蛋白和mRNA表达低于A172和SHG44细胞(P<0.05)。转染pcDNA3.1-DACT2载体后,U87细胞中DACT2表达显著增加(P<0.05),过表达DACT2的U87细胞构建成功。过表达DACT2能抑制U87细胞上皮间质转化、侵袭迁移并阻断Wnt/β-catenin通路激活(P<0.05)。结论神经胶质瘤细胞中DACT2启动子呈高度甲基化状态,外源过表达DACT2能够促进胶质瘤细胞U87上皮间质转化和侵袭迁移,其机制可能与DACT2调控Wnt/β-catenin信号通路有关。

宫颈癌组织中DACT2启动子甲基化与宫颈癌细胞侵袭和转移的关联

目的:探究宫颈癌组织中β-环连蛋白抑制基因2(DACT2)启动子甲基化与宫颈癌细胞侵袭和转移的相关性。方法:选择2020年1月—2022年3月在南阳市第一人民医院就诊的60例宫颈癌患者作为观察组,再选择同期60例健康体检者作为对照组,采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和实时荧光定量RT-PCR检测DACT2 mRNA的表达,并对DACT2进行免疫组化观察;通过甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)和亚硫酸氢盐基因组测序(BGS)分析DACT甲基化水平。采用Pearson检验法,分析DACT2启动子甲基化与宫颈癌细胞侵袭和转移的关联性。结果:对比宫颈癌患者的病理特征中分期、有无细胞转移以及宫颈浸润深度患者所占百分比,差异有统计学意义(t=4.747、5.368、0.834,P<0.05),而年龄和肿瘤大小比较,差异无统计学意义(t=1.004、0.895,P>0.05);宫颈癌组织、癌旁组织和正常组织中DACT2去甲基化发生率分别为45.00%、6.67%和5.00%,差异有统计学意义(χ^(2)=26.454,P<0.05);宫颈癌甲基化组DACT2 mRNA和蛋白表达水平显著低于宫颈癌非甲基化组,差异有统计学意义(t=11.332、8.543,P<0.05);相关性分析结果表明,DACT2启动子甲基化是引发宫颈癌细胞侵袭和转移的因素,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:宫颈癌细胞侵袭和转移主要影响因素就是DACT2启动子甲基化,且DACT2启动子甲基化率越高,细胞侵袭和转移程度就越高。因此临床应密切监测患者DACT2启动子甲基化情况,有助于优化宫颈癌患者的治疗方案。

恩格列净对新确诊的超重或肥胖的2型糖尿病患者代谢指标的影响

目的探讨恩格列净治疗新确诊的超重或肥胖的2型糖尿病患者的疗效,并研究其对内脏脂肪面积(VFA)、β-抑制蛋白2水平及其他相关代谢指标的影响。方法选取2018年10月—2020年3月于成都市第一人民医院内分泌代谢科门诊就诊并新确诊的90例超重或肥胖的2型糖尿病患者,分为恩格列净组和对照组,每组各45例。对照组给予二甲双胍单药治疗,恩格列净组给予二甲双胍与恩格列净联合治疗。治疗12周后,比较两组患者的BMI、腰围(WC)、血压、血糖、血脂、血尿酸、空腹胰岛素(FINS)、VFA、β-抑制蛋白2水平,以及估算的肾小球滤过率(eGFR)、稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和稳态模型β细胞功能指数(HOMA-β)。分析β-抑制蛋白2水平的影响因素。结果治疗12周后,两组患者的FBG、FINS和餐后2 h血糖(2 h-PPG)水平、HbA_(1C)、HOMA-IR、TG、WC、BMI均较同组治疗前显著降低或减少(P值均<0.05),HOMA-β均同组较治疗前显著增加(P<0.05)。恩格列净组收缩压、舒张压、血尿酸水平和VFA均较治疗前显著降低或减少,eGFR和β-抑制蛋白2水平均较治疗前显著增高(P值均<0.05),且上述指标治疗前后的变化差值显著均大于对照组(P值均<0.01)。Pearson相关分析结果显示,血清β-抑制蛋白2水平与BMI、VFA、FINS、TG、HOMA-IR、HOMA-β均呈负相关(r=-1.061、-3.136、-2.944、-2.014、-2.113、-3.042,P<0.05或0.01)。多元逐步回归分析结果显示,VFA是β-抑制蛋白2水平的独立影响因素(OR为1.078,95%CI为1.022~1.134)。结论恩格列净治疗可减少超重或肥胖的2型糖尿病患者的VFA,升高β-抑制蛋白2水平,改善患者胰岛素抵抗,临床疗效显著。

2型糖尿病合并腹型肥胖男性患者胰岛素抵抗与内脏脂肪面积相关性研究

目的:探讨2型糖尿病合并腹型肥胖男性患者,内脏脂肪面积(VFA)与胰岛素抵抗的相关性,为控制血糖和慢性病、代谢性疾病早期预防、早期治疗提供有力措施。方法:收集2型糖尿病合并腹型肥胖男性患者120例,采用生物电阻抗方法测定内脏脂肪面积,根据不同的内脏脂肪面积分三组:A组小于75 cm^2,B组75~100 cm^2,C组大于100 cm^2。分别监测三组β-抑制蛋白2、血甘油三酯、空腹血糖、糖化血红蛋白等生化指标,对所得数据进行对比分析,观察内脏脂肪面积、血甘油三酯、血清β-抑制蛋白2之间的相关性。结果:研究数据显示,三组β-抑制蛋白2比较均有统计学差异(均P<0.05)。内脏脂肪面积水平是血清β-抑制蛋白2水平的独立相关因素,甘油三酯水平不是血清β-抑制蛋白2水平的影响因素。结论:不同内脏脂肪面积的胰岛素生长因子不同,内脏脂肪面积越大,血清β-抑制蛋白2水平越低,胰岛素抵抗越严重。故在2型糖尿病合并腹型肥胖尤其是内脏脂肪面积超标的男性患者中,早期测量内脏脂肪面积,尽早评价其糖尿病等代谢指标,对胰岛素功能早期评价有一定指导意义。

β-环连蛋白抑制基因2甲基化状态对贲门腺癌发生发展的影响及机制

[目的]检测贲门腺癌(gastric cardia adenocarcinoma,GCA)及相应癌旁组织中β-环连蛋白抑制基因2(dishevelled-binding antagonist of beta-catenin 2,DACT2)的表达情况及其临床意义,探讨引起基因表达异常的可能机制及对Wnt通路活化的影响。[方法]应用甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)、RT-PCR分别检测河北省上消化道肿瘤高发区104例贲门腺癌及相应癌旁非肿瘤组织中DACT2基因的甲基化状态及m RNA的表达情况。应用免疫组织化学(IHC)检测β-catenin蛋白的表达。[结果]在104例贲门腺癌组织标本中,DACT2基因的甲基化发生率为60.6%(63/104),明显高于癌旁非肿瘤组织(P<0.01);且在发生该基因的甲基化的贲门腺癌标本中其m RNA表达及Wnt通路中心因子β-catenin的异常表达率均明显高于未发生该基因甲基化的贲门癌组织(P<0.01);且该基因的甲基化状态与肿瘤患者的病理分级、临床分期、淋巴结转移和上消化道肿瘤家族史相关(P<0.05),而与肿瘤患者的年龄、性别无关(P>0.05)。[结论]基因启动子区的高甲基化状态是DACT2基因表达下调的机制之一,其低表达可引起Wnt/β-catenin信号传导通路的异常活化并在贲门腺癌的发生发展中发挥一定的作用。