薄膜-超声分散法制备β-榄香烯固体脂质纳米粒

目的制备β-榄香烯固体脂质纳米粒,并对其粒径和包封率进行考察。方法采用薄膜-超声分散法制备,并以包封率为指标采用正交设计法优化β-榄香烯固体脂质纳米粒的制备工艺。结果所得β-榄香烯固体脂质纳米粒的最佳制备条件是β-榄香烯20μL,卵磷脂90mg,硬脂酸90mg,2.5%聚山梨酯805mL,2.5%泊洛沙姆1885mL。结论该处方可用于β-榄香烯固体脂质纳米粒的制备,工艺可行。

工艺因素对超声-挤压过滤法制备β-榄香烯固体脂质纳米粒平均粒径的影响

目的研究工艺因素对β-榄香烯固体脂质纳米粒(SLN)平均粒径的影响。方法以超声-挤压过滤法制备β-榄香烯SLN,研究超声强度、超声时间以及制备温度等因素对其平均粒径的影响。结果绝大多数β-榄香烯SLN的平均粒径小于150 nm。其平均粒径随超声时间的延长和制备温度的提高而有所下降,但是受持续超声时间的影响较小。考察的制剂中,在超声强度为400W、超声温度为80℃、超声时间为6 min条件下制备的β-榄香烯SLN的平均粒径最小。结论采用超声-挤压过滤法可制备β-榄香烯SLN,超声强度、总体超声时间以及温度等是影响其平均粒径的主要工艺因素。

β-榄香烯固体脂质纳米粒zeta电位影响因素检测

目的:探讨稀释介质及处方组成对β-榄香烯固体脂质纳米粒(SLN)制剂zeta电位测量的影响,确定适宜的稀释条件。方法:将β-榄香烯SLN制剂用不同介质稀释,用Nicomp-380/ZLS动电电位粒径测定仪测定其zeta电位,并将筛选出的稀释条件用于不同处方β-榄香烯SLN制剂的zeta电位测量。结果:在考查范围内,β-榄香烯SLN制剂的zeta电位绝对值随稀释介质中泊洛沙姆188浓度的增加而降低,以重蒸馏水为稀释介质时,其绝对值随稀释度的增加而升高。β-榄香烯SLN的zeta电位绝对值随处方中泊洛沙姆188的增加而降低,当处方中单硬脂酸甘油酯的比例增加时其zeta电位绝对值升高。结论:稀释介质对于β-榄香烯SLN制剂的zeta电位测定有较大影响,β-榄香烯SLN制剂用重蒸馏水稀释8倍后,可以得到较为合理的测量结果。

聚结过滤法测定β-榄香烯固体脂质纳米粒的包封率

目的建立聚结过滤法测定β-榄香烯固体脂质纳米粒(SLN)的包封率。方法先以体积分数为36%的乙醇水溶液溶解SLN制剂中的游离药物,然后用氯化钠水溶液聚结SLN并过微孔滤膜,以HPLC法测定滤液中β-榄香烯含量,计算包封率。结果该方法可将游离药物与SLN分开,平均回收率为97.4%,测得的β-榄香烯SLN的包封率为96.0%。结论使用聚结过滤法可准确、快速地分离出游离β-榄香烯,可用于该制剂包封率的测定。

叶酸受体靶向β-榄香烯固体脂质纳米粒的制备及其大鼠体内分布

目的研究叶酸复合物修饰β-榄香烯固体脂质纳米粒(SLN)制剂在大鼠体内的药动学与组织分布情况。方法脂质中加入聚乙二醇单甲醚胆固醇琥珀酸酯(CHS-PEG)和N-硬脂酰基-N′-蝶酰谷氨酰基-聚乙二醇二胺(FA-PEG-S),采用超声-挤压过滤法制备叶酸受体靶向β-榄香烯SLN制剂(FA-PEG-SLN)并加以表征。大鼠尾静脉给药,HPLC测定该制剂的药动学特征及组织分布情况,与普通β-榄香烯SLN(SLN-1)及榄香烯注射乳剂的相比较。结果静脉给药后,FA-PEG-SLN在血浆中的消除半衰期为44.0min,显著长于SLN-1和乳剂的15.6和15.4min。与SLN-1相比,FA-PEG-SLN5min时在肝肾中的药物浓度较高,在脾中稍低。30和60min时,FA-PEG-SLN组在除肺外的各组织中的β-榄香烯浓度皆显著高于SLN-1组和乳剂组。结论FA-PEG-SLN能够在血浆中较长时间循环,在主要器官中的浓度较高且消除速度较慢,有进一步研究的价值。

RP-HPLC法测定固体脂质纳米粒中β-榄香烯的含量

目的建立固体脂质纳米粒注射液中β榄香烯的反相高效液相色谱法。方法色谱柱:HypersilBDSC18(4.6mm×200mm,5μm);流动相:乙腈水(体积比为88∶12);检测波长:210nm;柱温:30℃。结果β榄香烯与其他组分分离良好,线性范围10.6～53.0mg·L-1(r=0.9999),平均回收率为99.6%,RSD为0.93%(n=5)。结论方法简便、准确,可作为该制剂的质量控制方法。

固体脂质纳米粒中β-榄香烯含量的气相色谱法测定

目的：建立β-榄香烯固体脂质纳米粒中β-榄香烯的气相色谱测定方法。方法：以质量分数10％PEG-20M（2m×2．6mm）为固定相，60～80目的Shimalite W（NAW）为担体，注射部位温度为200℃；FID检测温度为200℃，柱温150℃，N2为载气，流速50mL／min，内标为萘。结果：β-榄香烯的检测不受自身杂质及辅料的影响，在3．75～75．0mg／L范围内，线性关系良好（r=0．9992），回收率大于99％。结论：本法简单、准确，可用于β-榄香烯固体脂质纳米粒中β-榄香烯的含量测定。

钩藤碱固体脂质纳米粒抑制哮喘模型小鼠气道平滑肌细胞增殖的作用机制

目的研究钩藤碱固体脂质纳米粒(Rhy-SLN)抑制哮喘模型小鼠气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖的作用机制。方法采用卵清蛋白+氢氧化铝过敏法制备哮喘模型小鼠,然后原代分离培养ASMCs并进行形态观察和鉴定[当ASMCs内α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)呈红色,结蛋白(Desmin)呈绿色,表明ASMCs培养成功];将细胞分为空白组(正常小鼠ASMCs)、模型组(哮喘模型小鼠ASMCs)、Rhy-SLN组(哮喘模型小鼠ASMCs)、细胞因子信号转导抑制蛋白1(SOCS1)过表达组(转染SOCS1过表达载体的哮喘模型小鼠ASMCs)、SOCS1-RNAi组(转染SOCS1-RNAi载体的哮喘模型小鼠ASMCs)、SB203580组[p38丝裂原激活的蛋白激酶(p38 MAPK)抑制剂,哮喘模型小鼠ASMCs]。各组加入相应含药(均为10μmol/L)或不含药培养基培养24 h。采用MTT法检测ASMCs增殖,采用Western blot法检测ASMCs中α-SMA、白细胞介素1β(IL-1β)、SOCS1、p38 MAPK、磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)蛋白表达水平。结果小鼠原代ASMCs形态大小不一,呈不规则形、梭形、三角形;细胞内α-SMA呈红色,Desmin呈绿色,表明ASMCs培养成功。与模型组比较,Rhy-SLN组、SOCS1过表达组和SB203580组ASMCs吸光度值及α-SMA、p38 MAPK和p-p38 MAPK蛋白表达水平均显著降低,SOCS1蛋白表达水平(SB203580组除外)显著升高(P<0.05);Rhy-SLN组ASMCs中IL-1β蛋白表达水平显著降低(P<0.05);SOCS1-RNAi组ASMCs吸光度值及α-SMA、SOCS1、p38 MAPK和p-p38 MAPK蛋白表达水平均显著升高(P<0.05)。结论Rhy-SLN可抑制AMSCs增殖,其作用机制可能与促进SOCS1过表达,抑制IL-1β、p38 MAPK蛋白表达有关。

9-硝基喜树碱半固体脂质纳米粒的制备及大鼠的药动学研究

采用高温乳化蒸发-低温固化法制备9-硝基喜树碱(1)半固体脂质纳米粒,并考察其形态、粒径、包封率、z电位及大鼠静脉给药后体内药物动力学行为。结果表明,1半固体脂质纳米粒为圆形,具有明显可见的亲水性聚乙二醇“外壳”,粒径为223.3～249.1nm,包封率为77.9%～83.5%,z电位为-28.4～-22.2mV。分别用1半固体脂质纳米粒和溶液对大鼠静脉给药,体内药物动力学参数分别为:t1/2 (14.9±0.3)h和(1.2±0.6)h,AUC0～t(486±37)mg·h·L-1和(117±64)mg·h·L-1,MRT (19.3±0.7)h和(1.7±1.0)h。表明1半固体脂质纳米粒可延长体循环时间,提高生物利用度。

薄膜-超声法制备姜黄素固体脂质纳米粒的工艺研究

目的:优选薄膜-超声法制备姜黄素固体脂质纳米粒的工艺。方法:以包封率和载样量为指标,考察各影响因素如姜黄素用量,硬脂酸和卵磷脂的用量及吐温-80用量对包封率和载样量的影响,并通过均匀实验设计优化处方及制备工艺。结果:最佳工艺为姜黄素30 mg,硬脂酸60 mg,卵磷脂117 mg,吐温-80(1.0%)10 mL,所得姜黄素固体脂质纳米粒粒径分布均匀,包封率达95.98%,载样量为15.87%,平均粒径为58.0 nm。结论:用均匀设计优化后的制备处方制得的姜黄素固体脂质纳米粒,有较高的载样率和包封率,说明该工艺适合姜黄素固体脂质纳米粒制备。

星点设计-效应面法优化穿心莲总内酯固体脂质纳米粒处方

目的优选穿心莲总内酯固体脂质纳米粒(TLA-SLN)的处方。方法以穿心莲中4种内酯类成分包封率的满意度函数作为评价指标,采用冷却高压均质法制备穿心莲总内酯固体脂质纳米粒,考察药脂比、磷脂脂质比、Tween-80在水中质量分数对评价指标的影响,并运用星点设计-效应面法对结果进行多元线性和二项式拟合,优选最佳的工艺条件。结果从相关系数及各指标二项式拟合方程均优于多元线性回归方程,冷却压均质工艺能有效制备固体脂质纳米粒,优化的最佳处方为药脂比为10%、磷脂脂质比1.25、Tween-80在水中的质量分数为4%,实测值与理论预测值偏差小于7%。结论星点设计-效应面法能有效优选穿心莲总内酯固体脂质纳米粒处方。

10-羟基喜树碱半固体脂质纳米粒的研制与稳定性考察

目的:制备10-羟基喜树碱的半固体脂质纳米粒(HCPT-SSLN)并考察其稳定性。方法:采用高温乳化蒸发-低温固体法制备了HCPT-SSLN;用透射电镜考察了纳米粒的形态;用激光粒度仪测定了粒径和ξ电位;考察了其混悬液和冻干粉的物理稳定性。结果:HCPT-SSLN纳米粒平均粒径为130.5 nm,载药量为2.51%,包封率为79.19%,ξ电位为-33.1mV;室温(25℃)和4℃下放置6个月,纳米粒外观、粒径及包封率无明显变化,冻干粉比混悬液的物理稳定性更高。结论:本实验制备的HCPT-SSLN包封率和载药量较高,粒径分布均匀,稳定性良好。初步表明HCPT适合进行SSLN包裹。

葛根素固体脂质纳米粒保护长爪沙鼠脑缺血-再灌注损伤的分子机制初探

目的:探讨葛根素固体脂质纳米粒灌服给药对长爪沙鼠脑缺血-再灌注损伤的保护作用及其分子机制,为葛根素固体脂质纳米粒口服新剂型应用提供初步实验依据。方法:将长爪沙鼠随机分成假手术组、脑缺血-再灌注损伤模型组、葛根素固体脂质纳米粒组和葛根素注射液对照组,采用夹闭双侧颈总动脉的方法制作长爪沙鼠前脑缺血-再灌注损伤模型,应用HE染色及免疫组织化学法观察脑组织形态学变化及Bcl-2、Caspase-3和HSP70的蛋白表达变化。结果:脑缺血-再灌注24 h后,与模型组比较,葛根素固体脂质纳米粒组脑组织病理变化改善,在海马区和皮质区Bcl-2及HSP70阳性细胞表达显著升高(P<0.01),而Caspase-3阳性细胞表达比模型组显著降低(P<0.01);葛根素注射剂对照组脑保护作用结果及机制与葛根素固体脂质纳米粒组结果一致。结论:葛根素固体脂质纳米粒口服给药可通过诱导HSP70及Bcl-2蛋白水平高表达并同时降低Caspase-3蛋白表达对脑缺血-再灌注损伤起保护作用。

薄膜-超声法制备芦丁固体脂质纳米粒的研究

目的优化薄膜-超声法制备芦丁固体脂质纳米粒的处方。方法以包封率为指标,采用正交设计优化法考察硬脂酸和大豆卵磷脂的用量、吐温-80和聚乙二醇-400的体积分数对包封率的影响,优选最佳处方。用透射电镜观察外观形态,用电位/纳米粒度分析仪分析纳米粒的粒径及Zeta电位,用透析法评价体外释药特征。结果以最佳处方制备的芦丁固体脂质纳米粒呈类球形,平均粒径为195.8±11nm,Zeta电位为-20.65±0.6mV,平均包封率为86.31%,72h体外累积释放87.32%。结论按最佳处方工艺制备的芦丁固体脂质纳米粒具有较高的包封率和较好的缓释效果。

星点设计-效应面法优化淫羊藿苷固体脂质纳米粒制备工艺

目的采用星点设计-效应面法优化淫羊藿苷固体脂质纳米粒制备工艺。方法采用高压乳匀法制备淫羊藿苷固体脂质纳米粒,考察卵磷脂,F68,投药量对包封率,载药量以及药物利用率的影响,应用星点设计-效应面法优化处方工艺。结果采用二项式方程拟合实验结果,相关性较好(r>0.9),采用优化后处方条件对预测值进行验证,包封率为(93.09±0.13)%,载药量为(6.34±0.18)%,药物利用率为(84.53±2.45)%,与预测值偏差较小。结论采用星点设计-效应面法优化淫羊藿苷固体脂质纳米粒处方工艺,快速简单,预测准确度高,是较为理想的处方设计及优化方法。

薄膜-超声法制备黄芩苷固体脂质纳米粒的工艺研究

目的优选薄膜-超声法制备黄芩苷固体脂质纳米粒的工艺。方法以包封率为指标,考察各影响因素如黄芩苷用量,硬脂酸和卵磷脂的用量及吐温80用量对包封率的影响,并通过正交实验设计优化处方及制备工艺。结果最佳工艺为黄芩苷20mg,硬脂酸90mg,卵磷脂90mg,吐温-80(2.5%)10ml,所得黄芩苷固体脂质纳米粒粒径分布均匀,平均粒径为289.3nm,包封率达66.8%。结论确定的处方较好,工艺可行。

5-氟尿嘧啶磁性固体脂质纳米粒制备工艺优化研究

为提高5-氟尿嘧啶(5-FU)制剂的疗效,降低毒副作用,以单硬脂酸甘油酯为载体,氢化大豆卵磷脂、泊洛沙姆为乳化剂,磁性纳米四氧化三铁为磁体,采用复乳-溶剂挥发法制备5-氟尿嘧啶磁性固体脂质纳米粒(5-FU-MSLN).以包封率为考察指标,通过单因素实验和正交设计对制备工艺进行优化,所制备的5-FU-MSLN包封率为58.35%.用透射电镜观察,磁性固体脂质纳米粒外观形态圆整,粒径分布均匀;在倒置的显微镜下观察,磁性固体脂质纳米粒体外磁响应性良好,实验结果表明,5-FU-MSLN是有希望的静脉给药靶向制剂.

星点设计-效应面法优化马钱子碱-士的宁(B-S)双载药固体脂质纳米粒的制备工艺研究

目的:采用星点设计-效应面法优化马钱子碱-士的宁双载药脂质体制备工艺。方法:采用乳化溶剂蒸发法制备脂质体,用高效液相法(HPLC)测定药物的含量,以总包封率及总载药量为指标。结果:单硬脂酸甘油酯与大豆卵磷脂比例为2:3,单硬脂酸甘油酯用量选择60 mg,B:S选择2.62,F-68用量0.31%。在此优化条件下,制备的脂质体平均粒径为105 nm,平均总包封率为(48.57±1.21)%,平均总载药量(1.02±0.32)%。结论:该工艺方法简便、稳定可行,适用于马钱子碱-士的宁纳米粒的制备。

钩藤碱固体脂质纳米粒对小鼠气道平滑肌细胞增殖及TGF-β_(1)/Smad通路的影响

目的:观察钩藤碱固体脂质纳米粒(Rhy-SLN)对小鼠气道平滑肌细胞(ASMC)的增殖细胞核抗原(PCNA)表达以及TGF-β_(1)/Smad信号通路的影响。方法:将小鼠ASMC体外分离培养,用Rhy-SLN干预ASMC,用免疫荧光法测定小鼠ASMC的PCNA的表达;Western Blotting法检测小鼠ASMC中Smad2、p-Smad2、Smad3、p-Smad3、Smad4、Smad7蛋白表达。结果:Rhy-SLN在一定程度上可以降低小鼠气道平滑肌细胞中PCNA的表达1.80±0.12比1.50±0.15(P<0.05),显著下调Smad2蛋白1.09±0.20、p-Smad2蛋白1.97±0.70、p-Smad3蛋白4.47±0.35、p-Smad4蛋白1.42±0.20相对表达(P<0.05),显著上调Smad7蛋白0.65±0.15相对表达(P<0.05),效果与通路阻滞剂SB431542组相似。结论:Rhy-SLN可以抑制小鼠ASMC的增殖,其机制可能与调节TGF-β1诱导的Smad信号通路有关。

桔皮素固体脂质纳米粒制备及其体内药动学研究

目的制备桔皮素固体脂质纳米粒,并考察其体内药动学。方法熔融-高压均质法制备固体脂质纳米粒。以脂(单硬脂酸甘油酯)药比、泊洛沙姆188用量、Labrasol用量、均质压力、均质次数为影响因素,包封率、载药量为评价指标,单因素试验优化处方。在透射电镜下观察形态,测定溶解度、体外释药、稳定性,进行晶型分析。30只大鼠随机分为5组,分别灌胃给予桔皮素、物理混合物、桔皮素固体脂质纳米粒(不含Labrasol)、Labrasol+桔皮素固体脂质纳米粒、桔皮素固体脂质纳米粒(含Labrasol)的0.5%CMC-Na混悬液(50 mg/kg),于0.5、1、2、3、4、5、6、8、12 h采血,HPLC法测定桔皮素血药浓度,计算主要药动学参数。结果最佳处方为桔皮素用量30 mg,脂药比15∶1,泊洛沙姆188用量1.0%,Labrasol用量0.16%,均质压力80 MPa,均质次数6次,平均包封率为(90.16±1.67)%,载药量为(5.66±0.24)%,粒径为(189.76±8.92)nm,Zeta电位为-(36.08±1.72)mV。固体脂质纳米粒增加了桔皮素在模拟胃液、模拟肠液中的溶解度,120 min、12 h内累积释放度分别为39.79%、74.56%。桔皮素以无定形状态存在于固体脂质纳米粒中,冻干粉在6个月内稳定性良好。与原料药比较,固体脂质纳米粒(不含Labrasol)、Labrasol+固体脂质纳米粒、固体脂质纳米粒(含Labrasol)t_(max)、t_(1/2)延长(P<0.05),C_(max)、AUC_(0~t)、AUC_(0~∞)升高(P<0.05,P<0.01),其中AUC_(0~t)、AUC_(0~∞)以固体脂质纳米粒(含Labrasol)更明显(P<0.05),相对生物利用度分别增加至3.13、3.41、4.10倍。结论固体脂质纳米粒可改善桔皮素口服生物利用度,引入Labrasol后更明显。