β淀粉样蛋白25-35对BV2细胞TREM2/NF-κB信号通路的影响

目的:探讨不同浓度β-淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)对小胶质细胞髓样细胞触发受体2(TREM2)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的影响。方法:将BV2细胞随机分为5组,分别加入0、5、10、20、40μmol/L的Aβ25-35,作用24、48 h,镜下观察细胞形态,CCK-8法测定细胞活性,酶联免疫吸附实验(ELISA)测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达,实时荧光反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定NF-κBp65、TREM2 mRNA表达。结果:显微镜下观察干预48 h后Aβ25-35≥10μmol/L细胞成片死亡,干预24 h后,CCK-8检测显示,不同浓度Aβ25-35干预BV2细胞的存活率均>70%,ELISA和RT-PCR检测显示,Aβ25-3520μmol/L和40μmol/L组促炎因子TNF-α和TREM2 mRNA的表达均明显升高,Aβ25-3520μmol/L的NF-κB p65 mRNA表达明显升高,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:Aβ25-35浓度20μmol/L作用24 h,能够激活小胶质细胞发生炎症反应,可能与TREM2/NF-κB信号通路的激活有关。

七氟烷对β淀粉样蛋白_(1-40)诱导的大鼠认知功能障碍影响及机制

目的 探讨七氟烷吸入对β淀粉样蛋白(Aβ)_(1-40)诱发的大鼠认知功能障碍影响及其可能的机制。方法 于2021年8月至2022年8月,将32只成年雄性Sprague-Dawley大鼠以随机数字表法分为生理盐水(NS)+氧气组、NS+七氟烷组、Aβ+氧气组和Aβ+七氟烷组,每组8只,分别给予双侧海马内注射NS或Aβ_(1-40)。吸入30%氧气或2.5%七氟烷过程中监测生命体征,采用Morris水迷宫实验检测大鼠认知功能;酶联免疫吸附测定检测海马Aβ_(1-40)水平;免疫组织化学法检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和离子钙接头蛋白分子1(IBA1)的表达;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测白细胞介素-1β(IL-1β)、核因子-κB(NF-κB)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的mRNA表达;蛋白质印迹法检测B淋巴细胞瘤-xL(Bcl-xL)、胱天蛋白酶-9(caspase-9)、脑源性神经营养因子(BDNF)和晚期糖基化终末产物受体(RAGE)的蛋白表达。结果 维持吸入2.5%七氟烷在4个不同时间点(1、2、3和4 h)对大鼠生命体征无影响。与NS+氧气组比较,Aβ+氧气组大鼠原始平台探索时间减少,逃逸潜伏期增加;与Aβ+氧气组相比,Aβ+七氟烷组大鼠原始平台探索时间减少,逃逸潜伏期增加(P<0.05)。Aβ+七氟烷组大鼠海马区Aβ_(1-40)水平[(42.18±5.72)ng/L],GFAP和IBA1阳性细胞数[(24.33±1.21)个和(37.82±3.23)个],caspase-9和RAGE蛋白表达(0.74±0.11和0.81±0.07),IL-1β、NF-κB和iNOS mRNA表达(28.98±12.32、25.91±12.31和43.92±17.21)均高于NS+七氟烷组[(18.13±2.89)ng/L、(10.51±0.96)个、(17.17±1.77)个、0.23±0.02、0.29±0.03、1.35±0.04、1.37±0.05、1.42±0.06]和Aβ+氧气组[(32.61±4.82)ng/L、(15.76±1.25)个、(24.76±2.31)个、0.45±0.08、0.68±0.08、10.23±6.56、6.51±2.34、13.23±4.81];Bcl-xL和BDNF蛋白表达(0.13±0.04和0.18±0.04)低于NS+七氟烷组(1.07±0.31和0.58±0.07)和Aβ+氧气组(0.46±0.11和0.33±0.04)(P<0.05)。而NS+氧气组和NS+七氟烷组之间各指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论 七氟烷通过启动大鼠海马的神经毒性、神经炎症和神经元凋亡,加剧了Aβ_(1-40)诱发的大鼠认知功能障碍。

胱抑素C、淀粉样蛋白A与β_(2)-微球蛋白联合检验对早期糖尿病肾病的诊断价值分析

目的分析胱抑素C(CysC)、淀粉样蛋白A(SAA)与β_(2)-微球蛋白(β_(2)-MG)联合检验对早期糖尿病肾病(DN)的诊断价值。方法选取48例早期DN患者作为观察组,另选取46例单纯2型糖尿病患者作为对照组。两组患者均接受CysC、SAA、β_(2)-MG、尿微量白蛋白(mAlb)水平检测。比较两组患者CysC、SAA、β_(2)-MG、mAlb水平;比较CysC、SAA、β_(2)-MG单独检验与三项指标联合检验对早期DN的诊断灵敏度与特异度;分析早期DN患者CysC、SAA、β_(2)-MG与mAlb的相关性。结果观察组CysC(1.83±0.25)mg/L、SAA(15.85±1.23)mg/L、β_(2)-MG(0.65±0.12)mg/L、mAlb(75.50±8.48)均高于对照组的(0.38±0.18)、(5.73±0.56)、(0.15±0.08)、(20.05±2.00)mg/L,差异有统计学意义(P<0.05)。CysC单独检验对早期DN的诊断灵敏度与特异度分别为68.75%与67.39%,SAA单独检验对早期DN的诊断灵敏度与特异度分别为75.00%与76.09%,β_(2)-MG单独检验对早期DN的诊断灵敏度与特异度分别为60.42%、60.87%,三项指标联合检验对早期DN的诊断灵敏度与特异度分别为95.83%与95.65%;三项指标联合检验对早期DN的诊断灵敏度与特异度均高于CysC、SAA、β_(2)-MG单独检验(P<0.05)。Pearson相关性分析发现,CysC、SAA、β_(2)-MG与早期DN患者mAlb呈正相关性(r=0.615、0.895、0.590,P<0.05)。结论CysC、SAA与β_(2)-MG联合检验在早期DN诊断中具有较高临床应用价值,灵敏度与特异度更高,适于临床推广。

血清25-羟维生素D_(3)、白细胞介素-6及血清淀粉样蛋白A在儿童肺炎中的应用研究

目的 探讨血清25-羟维生素D_(3)[25-(OH)D_(3)]、白细胞介素-6(IL-6)与血清淀粉样蛋白A(SAA)水平在不同类型儿童肺炎中的变化及相关性。方法 选取该院儿科2021年2月至2022年4月收治确诊的肺炎患儿90例为观察组,根据标准分为普通肺炎组(60例)和重症肺炎组(30例);另依据感染类型分为细菌感染组(39例)、病毒感染组(35例)、肺炎支原体感染组(16例)。再选取同期近期无感染史的健康儿童30例为对照组。对比各组25-(OH)D_(3)、IL-6与SAA水平;绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析评价25-(OH)D_(3)、IL-6及SAA对儿童肺炎的诊断价值。结果 (1)普通肺炎组、重症肺炎组血清IL-6、SAA水平均明显高于对照组,25-(OH)D_(3)水平低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);重症肺炎组血清25-(OH)D_(3)、IL-6、SAA水平与普通肺炎组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)25-(OH)D_(3)在细菌感染组、病毒感染组、肺炎支原体感染组间比较,差异无统计学意义(P>0.05);细菌感染组血清IL-6、SAA水平均高于病毒感染组和肺炎支原体感染组(P<0.05);肺炎支原体感染组SAA水平高于病毒感染组(P<0.05)。(3)SAA、IL-6、25-(OH)D_(3)单项检测诊断肺炎的曲线下面积(AUC)分别为0.770、0.697、0.561;SAA、IL-6、25-(OH)D_(3)联合检测诊断肺炎的AUC可提升至0.841,诊断效能优于各指标单项检测。结论 血清25-(OH)D_(3)、IL-6及SAA可作为儿童肺炎的监测指标,对评估肺炎病情变化有指导意义,三者联合检测可提高对肺炎的诊断效能。

人参皂苷Rb1抑制β淀粉样蛋白_(25-35)诱导的皮层神经元tau蛋白过度磷酸化

目的 探讨人参皂苷Rb1对凝聚态β AP25 35诱导的胎鼠皮层神经元tau蛋白过度磷酸化的影响及其可能的作用机制。方法 通过蛋白免疫印迹法和免疫细胞化学染色法检测神经元tau蛋白磷酸化水平、总tau蛋白水平和糖原合成酶3β(GSK 3β)的蛋白表达水平。结果 凝聚态β AP25 35(20μmol·L-1)作用于皮层神经元12h,tau蛋白磷酸化水平和总tau蛋白水平均增高,同时GSK 3β蛋白表达也增多。用人参皂苷Rb1或GSK 3β特异性抑制剂氯 化锂预处理后,凝聚态β AP25 35诱导的tau蛋白的过度磷酸化受到明显抑制,同时GSK 3β的表达也降低。结论 人 参皂苷Rb1可通过抑制GSK 3β的表达来抑制凝聚态β AP25 35诱导的皮层神经元tau蛋白的过度磷酸化。

人参总皂苷对β-淀粉样蛋白_(25～35)诱导的海马神经细胞毒性的保护作用

目的探讨人参总皂苷对β-淀粉样蛋白(Aβ_(25~35))诱导的海马神经细胞毒性的保护作用。方法建立大鼠海马神经细胞Aβ_(25~35)损伤模型。通过Neurofilament染色,测定细胞毒性以及乳酸脱氢酶(LDH)活性考察人参总皂苷对Aβ_(25~35)诱导的海马神经细胞毒性的保护作用;利用Hoechst33258进行免疫荧光染色实验,观察细胞形态,检测细胞凋亡情况;通过Fluo-3AM荧光探针技术在共聚焦显微镜下测定细胞内钙离子浓度(〔Ca^(2+)〕i)的变化情况。结果 1.5μmol/L Aβ_(25~35)为造成神经细胞毒性的最佳浓度。人参总皂苷50 mg/L,100 mg/L以及200 mg/L对Aβ_(25~35)诱导的海马神经细胞具有良好保护作用,呈现出一定的剂量依赖性。人参总皂苷100 mg/L可显著降低Aβ_(25~35)诱导的神经细胞凋亡,可明显抑制Aβ_(25~35)诱导的海马神经细胞〔Ca^(2+)〕i的升高。结论人参总皂苷可有效保护海马神经细胞免受Aβ_(25~35)毒性损伤,其作用机制与降低〔Ca^(2+)〕i有关。

阿魏酸钠对β淀粉样蛋白_(25-35)诱导的体外培养神经细胞损伤的保护作用

目的 研究阿魏酸钠 (SF)对 β淀粉样蛋白2 5-3 5(Aβ2 5-3 5)诱导的原代培养神经细胞损伤的保护作用。方法 以原代培养孕 17～ 18d的SD大鼠胎鼠的大脑皮层神经细胞为观察对象。倒置显微镜下观察给药前后神经细胞的形态学变化 ,用MTT比色实验检测神经细胞活性 ,依据LDH漏出率检测神经细胞膜的损伤程度 ,以MDA生成量推测生物膜不饱和脂肪酸过氧化程度。结果 与正常对照组相比 ,Aβ2 5-3 5(2 0 μmol/L)处理 2 4h ,可使神经细胞活性显著下降 (P <0 0 1) ,SF (10 μmol/L ,5 0 μmol/L ,10 0 μmol/L ,5 0 0 μmol/L ,1mmol/L)能剂量依赖地减轻Aβ2 5-3 5的细胞毒性。结论 SF能够对抗Aβ2 5-3 5诱导的培养皮层神经细胞的损伤。

人参皂苷Rg_1对β-淀粉样肽(25-35)侧脑室注射所致小鼠学习记忆障碍的改善作用及其机制

目的 观察人参皂苷Rg1对 β 淀粉样肽 [β AP ,(2 5 - 35 ) ]所致小鼠拟阿尔茨海默 (AD)学习记忆功能障碍的改善作用及其作用机制。方法 小鼠侧脑室注射凝聚态 β AP 4nmol,次日 ,ipRg15和 10mg·kg-1,10d后 ,测试各组被动回避、空间学习记忆能力 ,及皮层、海马组织胆碱乙酰转移酶 (ChAT)和乙酰胆碱酯酶 (AchE)活性变化。结果人参皂苷Rg1可明显改善 β AP所致小鼠被动回避、空间学习记忆能力及皮层海马组织ChAT活性的下降。β AP对小鼠AchE活性无显著性影响 ,但与对照、模型组相比 ,Rg1明显抑制AchE活性。结论 Rg1对 β AP(2 5 - 35 )所致的小鼠学习记忆障碍有显著改善作用 ,其对胆碱能系统的影响是Rg1重要作用机制之一。

β-淀粉样蛋白25～35和人参皂苷Rb1对神经干细胞分化过程中tau蛋白磷酸化水平的影响

背景:通过调节神经干细胞分化过程中的tau蛋白磷酸化水平可提高神经干细胞移植治疗阿尔茨海默病的效果。目的:观察β-淀粉样蛋白25～35和人参皂苷Rb1对神经干细胞分化过程中tau蛋白磷酸化水平的影响。方法:分离、培养新生大鼠海马神经干细胞,诱导第3代神经干细胞分化1周后,分别采用免疫荧光细胞化学和Western-blot检测Tau[pS396]、Tau[pS262]及GSK-3β[pTyr279,216]表达情况。结果与结论:正常神经干细胞分化过程中有Tau[pS396]和Tau[pS262]的表达,β-淀粉样蛋白25～35可以使Tau[pS396]、Tau[pS262]和GSK-3β[pT279/216]表达上调,而人参皂苷Rb1可以逆转β-淀粉样蛋白25～35的作用。提示β-淀粉样蛋白25～35和人参皂苷Rb1通过调节GSK-3β的活性对tau蛋白的磷酸化水平产生调控作用。

左旋黄皮酰胺对冈田酸和β淀粉样肽_(25-35)神经毒性的保护作用

探讨左旋黄皮酰胺对冈田酸(okadaic acid,OA)诱导的人神经瘤细胞(SH-SY5Y)和去卵巢(ovariectomy,OVX)及单侧侧脑室注射Aβ25-35所致神经元损伤的保护作用。通过MTT试验、LDH释放测定试验、Hoechst 33258荧光染色试验以及SH-SY5Y细胞检测,考察左旋黄皮酰胺拮抗冈田酸诱导的细胞毒作用。通过避暗试验、电镜检测、Nissl体染色及HE染色,考察左旋黄皮酰胺对去卵巢及侧脑室注射Aβ25-35大鼠神经元的保护作用。左旋黄皮酰胺可明显拮抗冈田酸诱导的细胞毒作用,提高去卵巢及侧脑室注射Aβ25-35大鼠的学习记忆能力,保护海马及皮层神经元。左旋黄皮酰胺可拮抗冈田酸及Aβ25-35诱导的神经毒性,具有神经保护作用。

三七总皂甙对淀粉样β_(25～35)肽诱导的NG108-15细胞老年性痴呆模型的保护作用(英文)

背景:阿尔茨海默病(Alzheimerdisease,AD)的病理病因虽然还没有完全清楚,但目前认为β-淀粉样肽(amyloidβ-peptide,Aβ)是引起AD的胆碱能神经功能紊乱的主要成分。因此,Aβ的产生及其对神经细胞的影响,以及寻找该病的发病机制、治疗方法及其有效的治疗药物成了医药界的研究热点。目的:观察三七总皂甙(PNS)对NG108-15细胞老年性痴呆模型的影响,为寻找该病的发病机制提供佐证,为研究和开发中药的新成分提供理论依据。设计:体外平行对照实验。单位:广西中医学院新药开发中心,广西中医学院生物化学教研室。对象:实验在广西中医学院新药开发中心完成。NG108-15细胞:中国科学院上海细胞研究所提供。PNS:云南玉溪维和制药厂生产。Aβ25～35片段:德国Sigma公司产品,批号:042K49501。MTT(四甲基噻唑蓝),德国Sigma公司产品,批号:020609。cAMP(环一磷酸腺苷)日本ャマサ酱油株式会社产品,批号:00207。胚胎牛血清(FBS):由美国Hy-clone公司提供,批号:0405。DMEM培养基:美国GIBCO公司产品,批号:0311。干预:NG108-15细胞培养法:含50mL/L胚牛血清、10g/LHAT、10g/L青霉素和链霉素(1:1)的DMEM培养液,置100mL/LCO2、37℃用的培养箱内培养殖,每隔一天换一次液,4d传代一次。主要观察指标:利用MTT法、细胞计数法和细胞形态学?

血清淀粉样蛋白A和25-羟维生素D水平与反复呼吸道感染患儿预后的相关性

目的 探讨血清淀粉样蛋白A(SAA)、25-羟维生素D[25(OH)D]水平与反复呼吸道感染(RRTI)患儿预后的相关性。方法 选择2019年6月至2020年6月南阳市中心医院收治的58例RRTI患儿为研究对象(观察组),另选择同期来院体检的健康儿童40例作为对照组。采集所有受试者空腹外周静脉血3~5 mL,采用免疫散射比浊法检测受试者血清中SAA水平,化学发光法检测受试者血清25(OH)D水平。观察组患儿随访1 a,根据治疗效果将患儿分为预后良好组(n=36)和预后不良组(n=22)。收集2组患儿的临床资料,采用单因素和多因素logistic回归分析影响RRTI患儿预后的因素。采用Spearman相关分析SAA、25(OH)D水平与RRTI患儿预后的相关性,并绘制受试者操作特征(ROC)曲线评估血清SAA、25(OH)D水平对RRTI患儿预后的预测价值。结果 观察组患儿血清SAA水平显著高于对照组,25(OH)D水平显著低于对照组(P<0.05)。单因素分析结果显示,患儿的家族呼吸系统疾病史、父母职业接触化工物品、患儿是否吸二手烟、家庭养宠物占比及SAA、25(OH)D水平与RRTI患儿预后有关(P<0.05);患儿的性别、年龄、体质量指数、父母文化程度、出生时是否发生窒息、是否早产与RRTI患儿预后无关(P>0.05)。Logistic回归分析结果显示,家族呼吸系统疾病史、患儿吸二手烟、家庭养宠物及SAA高水平、25(OH)D低水平是影响RRTI患儿预后的因素(P<0.05)。Spearman相关分析结果显示,SAA水平与RRTI患儿预后呈负相关(r=-0.737,P<0.05),25(OH)D水平与RRTI患儿预后呈正相关(r=0.491,P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,SAA水平预测RRTI患儿预后的最佳截断值、曲线下面积、灵敏度、特异度分别为4.37 mg·L^(-1)、0.798(95%可信区间0.742~0.865)、79.20%、62.10%,25(OH)D水平预测RRTI患儿预后的最佳截断值、曲线下面积、灵敏度、特异度分别为15.74μg·L^(-1)、0.836(95%可信区间0.794~0.921)、86.80%、61.20%。结论 SAA在RRTI患儿中呈高表达,25(OH)D在RRTI患儿中呈低表达,SAA、25(OH)D水平是影响患儿预后的因素,对患者预后有较高的预测价值。

水溶性β-淀粉样蛋白25-35片段诱致大鼠嗜铬细胞瘤细胞凋亡

目的 探讨β-淀粉样蛋白 ( Aβ)在形成淀粉样沉积前对体外培养的 PC1 2细胞的毒性作用。方法 应用流式细胞仪检测 Aβ的剂量依赖性毒性 ;应用 DNA琼脂糖凝胶电泳、DNA末端标记和电镜判断 Aβ损伤细胞的途径。结果 流式细胞仪检测发现随着 Aβ2 5 -35浓度的增加 ,PC1 2细胞的死亡率增加 ;加入 1 0 μmol/L Aβ2 5 -35 2 4 h后 ,经 TUNEL发现细胞核着色 ,并可见细胞核碎片 ;DNA琼脂糖凝胶电泳可见间隔 1 80～ 2 0 0 bp左右的梯度条带 ;电镜显示细胞核浓缩 ,胞浆内有空泡形成 ,胞浆内细胞器完好。结论 Aβ在形成纤维状沉积前即对神经细胞有毒性作用 ,可促进神经细胞的凋亡。

β-淀粉样蛋白25-35片段诱导PC12细胞凋亡

目的 探讨 β -淀粉样蛋白 2 5 - 35片段 (Aβ2 5-3 5)对体外培养的PC12细胞的毒性作用机制。方法 用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)代谢率检测 ,光镜吖啶橙荧光染色术 ,透射电镜以及流式细胞仪技术研究Aβ2 5-3 5损伤PC12细胞的途径。结果 用Aβ2 5-3 5处理PC12细胞 2 4h ,Aβ2 5-3 5剂量依赖性地引起PC12细胞的MTT代谢率减少 ,荧光染色及电镜观察发现经Aβ2 5-3 5处理的PC12细胞表现出凋亡细胞的特征 ,流式细胞仪检测发现 ,对照组 2 0 μmol/L及 5 0 μmol/L的Aβ2 5-3 5组PC12细胞的凋亡率分别为 0 .0 8%± 0 .0 1% ,14 .8%± 1.13% ,2 5 .9%± 2 .34%。

雌激素减轻β-淀粉样蛋白25-35所致的PC12细胞毒活性

目的:观察17-β雌激素对β-淀粉样蛋白25—35(Aβ25-35)所致大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12细胞)毒活性的影响。方法:PC12细胞暴露于不同浓度的Aβ25-35或Aβ25-35加17-β雌激素,观察PC12细胞的细胞计数,四甲基偶氮唑蓝(MTT)代谢率与乳酸脱氢酶(LDH)释放率。结果:Aβ25-35引起PC12细胞计数及MTT代谢率减少,LDH释放率升高,且有剂量依赖性;而17-β雌激素可提高相应的细胞计数及MTT代谢率,降低相应的LDH释放率。结论:17-β雌激素具有拮抗Aβ25-35所致PC12细胞毒性的作用。

慢性孵育β淀粉样肽_(25-35)对培养大鼠海马神经元电压依赖性外向钾通道亚型mRNA表达的影响

目的 研究慢性孵育 β淀粉样肽2 5- 35(β AP2 5- 35)对海马神经元电压依赖性外向钾通道亚型mRNA表达的影响。方法 用RT PCR方法检测mRNA的表达 ,用光密度扫描法半定量测定表达变化。结果 在正常培养的海马神经元上延迟整流 (Kv2 1,Kv1 5 ) ,瞬间外向 (A型 ) (Kv4 2 ,Kv1 4 ) ,钙激活的大电导 (rSlo)钾通道亚型均有表达。β AP2 5- 353μmol·L- 1 孵育细胞 2 4h后 ,Kv2 1mRNA的表达明显上调 ,其它亚型则无显著性变化 ;β AP2 5- 35上调Kv2 1mRNA的作用主要发生在 β AP2 5- 35应用后 4 8h内 ;6 0h后Kv2 1mRNA表达水平显著下调。结论 Kv2 1转录水平的上调可能参与 β AP2 5- 35选择性地增加海马神经元上延迟整流钾电流 (IK)的作用。

蛇床子素降低磷酸二酯酶含量改善β淀粉样蛋白25-35片段诱导的大鼠神经毒性

目的观察蛇床子素(Ost)抗β淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ)25-35片段诱导的大鼠神经毒性作用并探讨其可能机制。方法雄性SD大鼠30只随机分为假手术组、模型组、Ost(40 mg/kg)治疗组(n=10)。双侧海马注射Aβ25-35建立大鼠神经毒性模型,连续Ost(40 mg/kg)灌胃15 d。每组大鼠随机选取3只进行尼氏染色观察其海马尼氏小体的变化。其余大鼠采用酶联免疫吸附实验(ELISA)测定海马磷酸二酯酶(PDE)及PDE2、PDE4、PDE5、PDE7、PDE9的含量变化。结果模型组大鼠海马的尼氏小体较假手术组皱缩,排列不整齐,甚至消失;而Ost治疗组海马神经元排列较整齐,变性神经元减少。同时,ELISA结果表明,模型组中大鼠海马PDE、PDE4及PDE5的含量较假手术组显著增高(P<0.01);但经Ost治疗后,其水平均有所降低(P<0.01,P<0.05),而对PDE2、PDE7和PDE9的含量没有影响。结论 Ost可抗Aβ25-35所致的大鼠神经毒性,其机制可能与抑制PDE4和PDE5的蛋白表达有关。

人参皂苷Rb1对β-淀粉样蛋白25-35诱导神经干细胞分化过程中Tau蛋白过度磷酸化的影响

背景:前期研究发现,人参皂苷Rb1和β-淀粉样蛋白25-35可调节神经干细胞分化过程中Tau蛋白的磷酸化水平。蛋白磷酸酯酶2A与Tau蛋白过度磷酸化密切相关。目的:观察β-淀粉样蛋白25-35和人参皂苷Rb1对神经干细胞分化过程中Tau蛋白磷酸化水平和蛋白磷酸酯酶2A活性的影响。方法:分离、培养新生大鼠海马神经干细胞,诱导第3代神经干细胞分化1周后分组:①空白组:不加其他处理因素继续培养36h。②β-淀粉样蛋白组:培养24h后,加入β-淀粉样蛋白25-35继续培养12h。③预处理组:先加入人参皂苷Rb1预处理24h,再加入β-淀粉样蛋白25-35继续培养12h。分别采用免疫荧光细胞化学法和western-blot法检测各组细胞Tau[pS396]、Tau[pS262]表达以及蛋白磷酸酯酶2A活性。结果与结论:正常神经干细胞分化过程中有Tau[pS396]和Tau[pS262]的表达;β-淀粉样蛋白组细胞的Tau[pS396]和Tau[pS262]表达上调,蛋白磷酸酯酶2A活性无明显变化;预处理组Tau[pS396]和Tau[pS262]表达下调且蛋白磷酸酯酶2A活性显著增强。提示正常神经干细胞分化过程中Tau蛋白表达一定程度的磷酸化水平,人参皂苷Rb1可通过提高蛋白磷酸酯酶2A活性来减轻β-淀粉样蛋白25-35诱导的神经干细胞分化过程中Tau蛋白过度磷酸化。

β淀粉样肽_(25-35)对PC细胞p53和bcl-2基因表达的影响

目的:观察β淀粉样肽2 5- 35(βamyloid peptide2 5- 35,Aβ2 5- 35)诱导PC12细胞凋亡和对p5 3及bcl- 2基因表达的影响。方法:采用终浓度分别为0、5、10、2 0 μmol/ L Aβ2 5- 35处理PC12细胞2 4 h,用MTT比色法分析细胞存活率,Hoechst332 5 8- PI荧光染色观察细胞核凋亡的形态学改变,DNA电泳观察梯状条带(DNA- L adder) ,RT- PCR和Westernblot检测p5 3和bcl- 2基因表达变化。结果:随着Aβ2 5- 35剂量的增加,PC12细胞存活率降低,凋亡明显增加,p5 3基因表达增加,bcl- 2基因表达降低。结论:Aβ2 5- 35诱导PC12细胞凋亡可能与上调p5 3基因,下调bcl- 2基因有关。

2型糖尿病患者血清淀粉样蛋白A,25(OH)D_(3)的表达及其临床价值分析

目的探讨2型糖尿病患者血清淀粉样蛋白A(serum amyloid A,SAA),25-二羟维生素D_(3)[25-dihy-droxyvitamin D_(3),25(OH)D_(3)]的表达及其临床价值。方法选取2022年8月—2023年5月北京市宣武中医医院诊治的240例2型糖尿病患者作为观察组,另选同期来本院体检的健康者240例作为对照组。检测两组受试者SAA、25(OH)D_(3)及各项血糖、血脂指标水平,并采用Pearson相关分析血清SAA、25(OH)D_(3)水平与各项血糖、血脂指标水平的关系。结果观察组血清SAA、总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇、空腹血糖、空腹胰岛素水平高于对照组,血清25(OH)D_(3)、高密度脂蛋白胆固醇水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清SAA水平与总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇、空腹血糖、空腹胰岛素水平呈正相关,与高密度脂蛋白胆固醇水平呈负相关(P<0.05)。血清25(OH)D_(3)水平与高密度脂蛋白胆固醇水平呈正相关,与总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇、空腹血糖、空腹胰岛素水平呈负相关(P<0.05)。结论2型糖尿病患者血清SAA高表达、25(OH)D_(3)低表达与其血脂代谢紊乱及血糖有较强关联性,可作为患者病情监测评估的参考指标。